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辐射诱导表达载体pEgr-p16的构建及其体外蛋白表达的研究
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作者 刘建香 苏旭 《中华放射医学与防护杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期416-419,共4页
目的构建辐射诱导表达载体pEgrp16并研究其体外稳定转染联合60Coγ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr1和p16的pEgrp16的质粒载体,以脂质... 目的构建辐射诱导表达载体pEgrp16并研究其体外稳定转染联合60Coγ射线照射对人宫颈癌HeLa细胞p16蛋白表达变化的影响。方法利用双酶切、粘端连接的方法构建了含有辐射诱导特性的早期生长反应因子Egr1和p16的pEgrp16的质粒载体,以脂质体介导的方法,将重组载体导入人HeLa细胞,采用免疫细胞化学和流式细胞术的方法检测照射转染后的HeLa细胞p16蛋白表达的变化。结果经全自动测序证明辐射诱导表达载体pEgrp16构建正确;稳定转染可见有明显的p16表达增强;5Gy以内p16蛋白表达呈剂量依赖性的增加,在2Gy照射后2hp16蛋白表达水平即开始增高,4h达到最高,12h趋于正常水平。结论本研究成功构建了辐射诱导表达载体pEgrp16,在HeLa细胞中蛋白表达明显增强。 展开更多
关键词 辐射诱导 表达载体 pEgr-p16 体外表达 蛋白表达 基因治疗 放射治疗 肿瘤 Γ射线
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