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核酸扩增检测在血液筛查的初步应用 被引量:47
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作者 黄呈辉 陈汝光 +3 位作者 黄建国 黎淦平 张健 赵文明 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期141-143,共3页
目的 为提高血站供血安全性 ,探讨核酸扩增检测在血站血液筛查中的可行性。方法 在酶联免疫吸附试验 (ELISA)常规筛查血液的基础上 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)方法 ,检测乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、丙型肝炎抗体 (抗 HCV)和人... 目的 为提高血站供血安全性 ,探讨核酸扩增检测在血站血液筛查中的可行性。方法 在酶联免疫吸附试验 (ELISA)常规筛查血液的基础上 ,采用荧光定量聚合酶链反应 (PCR)方法 ,检测乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)、丙型肝炎抗体 (抗 HCV)和人免疫缺陷病毒抗体 (抗 HIV) 1/ 2呈阴性的献血者微量血浆汇集池标本 (2 0人份× 5 0 μl汇集 )中的丙肝病毒 (HCV)和乙肝病毒 (HBV)核酸 ,再对阳性汇集池中的标本进行单份检测。结果  880 5份 (分 44 2个汇集池 )血液被检测HCVRNA ,结果有1例 (0 .0 1% )为阳性 ;144 1份血液被检测HBVDNA ,结果 6例 (0 .4% )为阳性。从标本汇集到筛查出单份阳性献血者大约需要 3d。结论 ELISA结合荧光定量PCR检测微量血浆汇集池标本的方法筛查血液HBV和HCV感染是可行的 。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 C型肝炎样病毒属 供血者 基因扩增 血液筛查 ELISA PCR
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187例非小细胞肺癌中EGFR基因突变和扩增的检测及其临床意义 被引量:40
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作者 刘红雨 李颖 +10 位作者 陈钢 王竞 李永文 王玉丽 韦森 朱大兴 邱小明 王伟强 宋作庆 陈军 周清华 《中国肺癌杂志》 CAS 2009年第12期1219-1228,共10页
背景与目的现有的研究表明表皮生长因子受体(EGFR)相关信号通路在肺癌的发生和发展中起重要作用。EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)是目前针对EGFR治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的重要分子靶向药物。EGFR的不同存在状态(基因突变和基因扩增)... 背景与目的现有的研究表明表皮生长因子受体(EGFR)相关信号通路在肺癌的发生和发展中起重要作用。EGFR酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKIs)是目前针对EGFR治疗非小细胞肺癌(NSCLC)的重要分子靶向药物。EGFR的不同存在状态(基因突变和基因扩增)与TKIs的疗效相关。本研究旨在探讨非小细胞肺癌患者中EGFR的存在状态及其临床意义,从而为肺癌病人"个体化分子治疗"提供依据。方法研究对象为187例NSCLC病例。用Real-timePCR技术检测EGFR基因19、21外显子的突变状态;用荧光原位杂交(FISH)技术检测EGFR基因的扩增情况,并进一步分析EGFR基因的突变和扩增与患者临床病理生理特征的关系。结果FISH结果显示,47.6%(98/187)的肺癌患者存在EGFR基因的扩增,而EGFR基因的扩增与患者的年龄、性别、组织学类型、吸烟状态及是否存在转移无关(P>0.05);Real-timePCR结果显示:20.3%(38/187)的肺癌患者存在EGFR外显子19、21的突变。EGFR基因突变率在女性(32.3%vs14.4%男性)、腺癌(35.5%vs9.9%非腺癌)、不吸烟(38.2%vs10.1%吸烟)患者中明显高(P<0.05)。EGFR基因扩增与基因突变之间具有一定的相关性,在早期肺癌、腺癌及非吸烟的女性患者中,EGFR基因外显子突变常同时伴有EGFR基因的扩增。有EGFR基因突变或/和基因扩增的患者生存期均高于无EGFR基因异常者,但是没有统计学差异(P>0.05)。有EGFR基因突变的患者易对TKIs治疗有效。结论EGFR基因突变率在不同的NSCLC患者中不同,其中,在女性、腺癌和不吸烟患者中突变率高;EGFR基因扩增与患者的性别、组织类型、吸烟状态等临床特征无明显关系,与患者预后的相关性有待进一步研究。 展开更多
关键词 肺肿瘤 表皮生长因子受体 基因突变 基因扩增
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Correlation of human epidermal growth factor receptor 2 expression with clinicopathological characteristics and prognosis in gastric cancer 被引量:29
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作者 Chao He Xue-Yi Bian +5 位作者 Xing-Zhi Ni Dan-Ping Shen Yan-Ying Shen Hua Liu Zhi-Yong Shen Qiang Liu 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS 2013年第14期2171-2178,共8页
AIM:To investigate human epidermal growth factor receptor 2(HER2) gene amplification and protein expression in Chinese patients with resectable gastric cancer and the association with clinicopathological characteristi... AIM:To investigate human epidermal growth factor receptor 2(HER2) gene amplification and protein expression in Chinese patients with resectable gastric cancer and the association with clinicopathological characteristics and survival.METHODS:One hundred and ninety-seven gastric cancer patients who underwent curative surgery procedures were enrolled into this study.HER2 gene amplification and protein expression were examined using fluorescence in-situ hybridization(FISH) and immunohistochemistry(IHC) analysis on formalin-fixed paraffinembedded gastric cancer samples from all patients.For scoring,Hofmann's HER2 gastric cancer scoring system was adopted.All cases showing IHC3+ or FISH positiv-ity were defined as HER2 positive.Patient clinicopathological data and survival information were collected.Finally,χ 2 statistical analysis was performed to analyze the HER2 positivity rate amongst the subgroups with different clinicopathological characteristics including;gender,age,tumor location,Lauren classification,differentiation,TNM staging,depth of invasion,lymph node metastases and distant metastasis.The probability of survival for different subgroups with different clinicopathological characteristics was calculated using the Kaplan-Meier method and survival curves plotted using log rank inspection.RESULTS:According to Hofmann's HER2 gastric cancer scoring criteria,31 cases(15.74%) were identified as HER2 gene amplified and 19 cases(9.64%) were scored as strongly positive for HER2 membrane staining(3+),25 cases(12.69%) were moderately positive(2+) and 153 cases(77.66%) were HER2 negative(0/1+).The concordance rate between IHC and FISH analyses was 88.83%(175/197).Thirty-six cases were defined as positive for HER2 gene amplification and/or protein expression,with 24 of these cases being eligible for Herceptin treatment according to United States recommendations,and 29 of these cases eligible according to EU recommendations.Highly consistent results were detected between IHC3+,IHC0/1 and FISH(73.68% and 95.42%),but low co 展开更多
关键词 GASTRIC cancer Human EPIDERMAL growth factor receptor 2 gene amplification Protein EXPRESSION CLINICOPATHOLOGICAL characteristics
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弥漫性大B细胞淋巴瘤t(14;18)易位及bcl-2基因扩增的检测 被引量:28
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作者 蒋会勇 李慧灵 +2 位作者 胡海 何滢 赵彤 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期84-89,共6页
目的探讨弥漫性大 B 细胞淋巴瘤(DLBCL)t(14;18)染色体异位及 bcl-2基因扩增在其分类及临床分期、疗效评估中的作用。方法先对60例 DLBCL 的标本进行显微切割,获取相对比较纯的肿瘤组织,再使用细胞核芯片荧光原位杂交(FISH)对标本进行 t... 目的探讨弥漫性大 B 细胞淋巴瘤(DLBCL)t(14;18)染色体异位及 bcl-2基因扩增在其分类及临床分期、疗效评估中的作用。方法先对60例 DLBCL 的标本进行显微切割,获取相对比较纯的肿瘤组织,再使用细胞核芯片荧光原位杂交(FISH)对标本进行 t(14;18)易位及 bcl-2基因扩增检测,采用免疫组织化学 SP 法在组织微阵列上同步观测 CD20、CD10、bcl-6、MUM1的表达,进行生发中心样(GCB)和非生发中心样(non-GCB)分类;通过病例分析得出治疗效果及临床分期的信息,并统计分析以上各因素之间的关系。结果在60例 DLBCL 中,10例 bcl-2/IgH 阳性,18例 bcl-2基因扩增;GCB 29例(48.3%),non-GCB 31例(51.7%)。经 FISH 检测 t(14;18)阳性10例中,GCB 8例,non-GCB 2例,差异有统计学意义(P=0.031)。t(14;18)阳性及 bcl-2基因扩增的病例 bcl-2表达均增高。在36例正规 CHOP 治疗的病例中,bcl-2扩增13例,无扩增23例,bcl-2扩增的13例之治疗结果显效、部分有效、无效率分别为3例(23.1%)、4例(30.8%)和6例(46.2%);临床分期情况为Ⅰ~Ⅱ期1例(7.7%),Ⅲ~Ⅳ期12例(92.3%),这两项指标与 bcl-2不扩增的相比差异均有统计学意义(P=0.019、0.046)。结论 t(14;18)易位及 bcl-2基因扩增均是引起 DLBCL 之 bcl-2蛋白表达的原因,bcl-2阳性者与预后有关的原因难以确定,可能是由于引起其阳性表达的原因不同所致;bcl-2基因扩增与治疗效果较差及临床分期较晚有关;FISH 检测 t(14;18)染色体易位可用于 DLBCL 的分类。 展开更多
关键词 淋巴瘤 大细胞 弥漫性 基因 BCL-2 基因扩增 易位 遗传 微阵列分析 显微切割
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人血管内皮细胞生长因子的cDNA克隆及其在兔成骨细胞中的表达 被引量:14
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作者 杨述华 杨操 +3 位作者 许伟华 李进 张银钢 屈伸 《中华骨科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期99-102,共4页
目的 获得人VEGF1 65cDNA并构建其真核表达载体 ,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因治疗骨科各种疾患的可行性。 方法 采用巢式 (poly merasechainreaction ,PCR )技术。从HL60细胞中扩增出人... 目的 获得人VEGF1 65cDNA并构建其真核表达载体 ,探讨应用血管内皮细胞生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)基因治疗骨科各种疾患的可行性。 方法 采用巢式 (poly merasechainreaction ,PCR )技术。从HL60细胞中扩增出人血管内皮生长因子 (hVEGF1 65)cDNA ,并将这一cDNA克隆至 pcDNA3 真核表达载体上 ,构建成为 pCD -hVEGF1 65重组质粒。并对cDNA片段进行了限制性酶切分析及DNA测序分析。应用脂质体介导的基因转移技术将这一表达载体导入兔成骨细胞后 ,用链酶亲合素 -生物素 -酶复合物法 (streptavidin -biotin -enzymecomplex ,SABC)进行瞬时表达的检测。结果 经酶切鉴定及基因测序证实 ,克隆的基因片段为人VEGF1 65cDNA ,重组质粒pCD -hVEGF1 65转染成骨细胞后 ,免疫组化检测有VEGF表达。结论 我们成功地克隆了人VEGF1 65基因 ,为进一步研究VEGF基因治疗骨缺血性坏死、骨缺损及骨折的修复打下了基础。 展开更多
关键词 血管 基因扩增 基因表达 CDNA VEGF 成骨细胞
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对β-地中海贫血携带者进行胚胎植入前遗传学诊断 被引量:19
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作者 焦泽旭 庄广伦 +5 位作者 周灿权 舒益民 梁晓燕 李洁 张敏芳 邓明芬 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期298-301,共4页
目的 探讨对β-地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断的方法。方法 对4例β-地中海贫血携带者进行超排卵和体外受精-胚胎移植治疗。胚胎活检后应用全基因组扩增技术、巢式-PCR及反向点杂交进行胚胎植入前遗传学诊断,根据诊断结果选择健... 目的 探讨对β-地中海贫血进行胚胎植入前遗传学诊断的方法。方法 对4例β-地中海贫血携带者进行超排卵和体外受精-胚胎移植治疗。胚胎活检后应用全基因组扩增技术、巢式-PCR及反向点杂交进行胚胎植入前遗传学诊断,根据诊断结果选择健康的胚胎移植入子宫。结果4例患者共获卵97个,受精率为83%,可供活检的胚胎47个,总扩增效率为84.8%,平均等位基因脱扣发生率为14.9%。共移植10个健康胚胎,获得1例三胎妊娠(其中1个为空囊),现已分娩健康双胎。结论 对β-地中海贫血进行植入前遗传学诊断可使β-地中海贫血患者实现生育健康后代的愿望,达到优生的目的。 展开更多
关键词 Β-地中海贫血 胚胎植入 遗传学诊断
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不同分子遗传学方法用于自然流产绒毛细胞遗传分析的效果 被引量:21
7
作者 雷琼 王琼 +4 位作者 周灿权 陈宝江 陈争 徐艳文 曾艳红 《中华妇产科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期253-256,共4页
目的探讨多重连接探针扩增法(MLPA)+荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)+FISH的分子遗传学方法用于自然流产绒毛细胞遗传分析的效果。方法收集29例自然流产绒毛组织以及6例选择性终止早期妊娠妇女的绒毛组织,采用CGH+F... 目的探讨多重连接探针扩增法(MLPA)+荧光原位杂交(FISH)和比较基因组杂交(CGH)+FISH的分子遗传学方法用于自然流产绒毛细胞遗传分析的效果。方法收集29例自然流产绒毛组织以及6例选择性终止早期妊娠妇女的绒毛组织,采用CGH+FISH、MLPA+FISH方法进行遗传学分析,并与传统的绒毛细胞培养染色体核型分析结果进行比较。结果MLPA+FISH检测时间为40h,CGH+FISH检测时间为120h,绒毛细胞培养染色体核型分析时间为(240±72)h,3者分别比较,差异有统计学意义(P〈0.01)。CGH、MLPA、FISH和绒毛细胞培养染色体核型分析的标本成功获检率分别为97%(34/35)、100%(35/35)、100%(35/35)和91%(32/35),4者比较,差异无统计学意义(P〉0.01)。除去CGH获检失败的1份样本外,MLPA+FISH与CGH+FISH的分析结果一致,CGH获检失败的1例标本经MLPA+FISH检测获得了结果。CGH+FISH或MLPA+FISH检测结果与绒毛细胞培养染色体核型分析结果的不一致率分别为13%(4/31)、12%(4/32),两者比较,差异无统计学意义(P〉0.05)。结论MLPA+FISH检测耗时短,检测成功率高;MLPA+FISH检测用于自然流产绒毛细胞遗传分析是对绒毛细胞培养染色体核型分析方法的重要补充。 展开更多
关键词 流产 自然 绒毛膜绒毛 核酸探针 基因扩增 核酸杂交 原位杂交 荧光
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八倍体小黑麦耐盐细胞系产生的遗传机制 被引量:16
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作者 王小军 鲍文奎 《Acta Botanica Sinica》 CSCD 1998年第4期330-336,共7页
实验选用来源于八倍体小黑麦(×TriticosecaleWitmack)杂种一代B、C和原种F三个品系的成对单倍体和双倍体细胞系,在1%、1.5%和2%NaCl水平进行耐盐变异体筛选及其发生机制研究。实验和分析结... 实验选用来源于八倍体小黑麦(×TriticosecaleWitmack)杂种一代B、C和原种F三个品系的成对单倍体和双倍体细胞系,在1%、1.5%和2%NaCl水平进行耐盐变异体筛选及其发生机制研究。实验和分析结果表明,未经筛选的细胞系由三类细胞组成,第一类是占大多数没有任何适盐性的细胞,第二类是具有一定适盐性的非变异体细胞,可在继代筛选中被淘汰,第三类细胞是变异体细胞;第二类细胞在杂种材料细胞系中所占比例少于原种细胞系,故杂种细胞较易筛选到耐盐变异体;比较三个级别筛选的变异体频率发现,后一级筛选的变异必须以前一级筛选的变异为基础,即耐盐变异体发生的遗传机制是基因扩增;双倍体细胞中正常同源染色体对基因扩增变异的表达有干扰作用,这种干扰因材料不同在各级筛选中呈现不稳定状态。 展开更多
关键词 八倍体 黑麦 耐盐变异体 遗传机制
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肝细胞癌中p53基因的缺失与HER-2基因的扩增及其意义 被引量:15
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作者 黄必军 朱振宇 +1 位作者 梁启万 方嬿 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期20-24,共5页
目的 检测原发性肝细胞癌中 17号染色体上p5 3基因的缺失与HER 2基因的扩增并探讨其临床意义。方法 分别以不同颜色荧光标记的p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体着丝粒为双色探针组 ,应用间期双色荧光原位杂交 (FISH)技术检测 42例肝... 目的 检测原发性肝细胞癌中 17号染色体上p5 3基因的缺失与HER 2基因的扩增并探讨其临床意义。方法 分别以不同颜色荧光标记的p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体着丝粒为双色探针组 ,应用间期双色荧光原位杂交 (FISH)技术检测 42例肝细胞癌间期细胞核中p5 3基因、HER 2基因和 17号染色体的拷贝数及其相对比例 ,以确定其缺失或扩增 ,结合临床分期、血清甲胎蛋白 (AFP)、肿瘤大小等资料进行统计分析其临床意义。结果  42例肝细胞癌中p5 3基因缺失 2 7例( 64 3 % ) ;HER 2基因扩增 9例 ( 2 1 4% ) ,其中高拷贝扩增 (HC) 4例 ( 9 5 % ) ,低拷贝扩增 (LC) 5例( 11 9% ) ,同时具有缺失与扩增的 6例 ( 14 3 % ) ;另外 ,17号染色体多倍体有 2 6例 ( 61 9% )。p5 3基因缺失与 17号染色体多倍性呈正相关 ( χ2 =12 2 86,P <0 0 0 1) ,但与HER 2基因的扩增无关 ( χ2 =0 0 0 ,P =1 0 0 )。p5 3基因缺失与肝细胞癌患者AFP水平、肿瘤大小有关 (P <0 0 5 ) ;术后 2年存活率p5 3基因缺失患者 ( 18 5 % )显著低于无缺失患者 ( 60 0 % ,χ2 =7 467,P =0 0 0 6)。结论 原发性肝细胞癌的17号染色体上存在p5 3基因高频缺失和HER 2基因的扩增 。 展开更多
关键词 肝细胞癌 P53基因 基因缺失 HER-2基因 基因扩增 临床分期 甲胎蛋白
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应用荧光原位杂交技术在组织标本中检测宫颈上皮病变的端粒酶RNA基因扩增 被引量:19
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作者 袁艳龙 何春年 +4 位作者 徐明堂 徐翠清 孙玉宁 赵焕芬 陈琛 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期182-186,共5页
目的 用荧光原位杂交(FISH)技术检测端粒酶RNA基因(TERC)在宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞状细胞癌(scc)组织中的扩增,探讨其用于SCC筛查及CIN诊断的可行性及实际意义。方法选取手术切除及活检的子宫颈组织标本196例,有效样本15... 目的 用荧光原位杂交(FISH)技术检测端粒酶RNA基因(TERC)在宫颈上皮内瘤变(CIN)和宫颈鳞状细胞癌(scc)组织中的扩增,探讨其用于SCC筛查及CIN诊断的可行性及实际意义。方法选取手术切除及活检的子宫颈组织标本196例,有效样本150例,采用FISH技术在石蜡包埋组织芯片上检测TERC基因的扩增情况。结果150例组织芯片样本中,正常宫颈鳞状上皮24例,CIN78例(CINI级25例,Ⅱ级21例,Ⅲ级32例),SCC48例。正常宫颈鳞状上皮组织中TERC基因无扩增,从CINI级到SCC组织中,TERC基因的扩增率依次为8.0%(2/25)、47.6%(10/21)、71.9%(23/32)和87.5%(42/48),差异有统计学意义(P〈0.05)。组问两两比较:正常宫颈鳞状上皮与CINⅡ级、Ⅲ级、SCC组,组间比较差异均有统计学意义(P〈0.05);CINⅠ级与C1NⅡ级、Ⅲ级及SCC组组问比较,差异有统计学意义(P〈0.05);CINⅡ级组与SCC组相比,差异有统计学意义(P〈0.05)。正常宫颈鳞状上皮与CINⅠ级组、CINⅡ级与Ⅲ级组、CINⅢ级与SCC组,组问差异均无统计学意义(P〉0.05)。高度癌前病变(CINⅡ~Ⅲ级)与低度癌前病变(CINⅠ级)的TERC基因扩增结果:25例CINⅠ级病变中,2例扩增,23例不扩增;53例CINⅡ—Ⅲ级病变中,33例扩增,20例不扩增。经公式计算,敏感性为62.3%、特异性为92.0%、准确度为71.8%、阳性预测值为94.3%、阴性预测值为53.5%。结论在石蜡包埋CIN及SCC组织切片上应用FISH技术进行TERC基因检测,方法可行,结果可靠;可作为辅助CINⅡ级的诊断;TERC基因扩增可以预测CIN发展为癌的风险,具有一定的实用价值。 展开更多
关键词 宫颈上皮内瘤样病变 肿瘤 鳞状细胞 原位杂交 荧光 基因扩增 端粒 末端转移酶
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桃蚜研究新进展 被引量:17
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作者 张建亮 赵景玮 吴国星 《武夷科学》 2000年第0期167-176,共10页
本文从桃蚜的生物生态学、抗药性的酶学机理和分子生物学机理三个方面对桃蚜的最近的研究进展作了综述。不同体色的桃蚜对环境的适应能力不同。桃蚜的抗药性主要是由羧酸酯酶 E4扩增引起的。但是乙酰胆碱酯酶的不敏感性也增加了桃蚜对... 本文从桃蚜的生物生态学、抗药性的酶学机理和分子生物学机理三个方面对桃蚜的最近的研究进展作了综述。不同体色的桃蚜对环境的适应能力不同。桃蚜的抗药性主要是由羧酸酯酶 E4扩增引起的。但是乙酰胆碱酯酶的不敏感性也增加了桃蚜对氨基甲酸酯类农药的抗性。在分子水平上 ,桃蚜的抗性机制主要是酯酶基因的扩增。同时对这些扩增的酯酶基因的遗传方式也有一些研究。 展开更多
关键词 桃蚜 色型 抗药性 酯酶 基因扩增
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胃癌下调全长基因GDDR的克隆及与胃癌关系的研究 被引量:15
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作者 杜建军 窦科峰 +6 位作者 彭淑牖 王为忠 王中华 肖华胜 管文贤 刘颖斌 高志清 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第13期1166-1168,共3页
目的 从成功建立的用于筛选胃癌下调新基因的抑制消减杂交cDNA文库中克隆全长新基因 ;检测其在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达 ,分析其在胃癌发生发展中的作用。方法 随机挑选阳性克隆测序筛选基因片段 ,cDNA末端快速扩增得到其全长。... 目的 从成功建立的用于筛选胃癌下调新基因的抑制消减杂交cDNA文库中克隆全长新基因 ;检测其在胃癌及正常胃黏膜组织中的表达 ,分析其在胃癌发生发展中的作用。方法 随机挑选阳性克隆测序筛选基因片段 ,cDNA末端快速扩增得到其全长。在 2 5例胃癌与正常胃黏膜RNA进行半定量RT PCR。生物信息分析基因结构、染色体定位 ,并行其推导蛋白性质与功能的研究。结果 筛选到一 331bp的基因片段 ,经cDNA末端快速扩增 ,得到了长度 75 0bp的全长新基因。命名为GDDR ,被国际GenBank收录 ,收录号 :AF4 94 5 0 9。RT PCR表明它在胃癌中明显下调 (GDDR/ β 肌动蛋白 13 5± 5 1与 1 0 4± 0 2 0 ,P <0 0 1)。染色体定位 2 p13,由 5个外显子组成。与CA11在染色体上的距离仅差 2 2kbp ,即均位于 2 p13。其编码蛋白前有一跨膜肽区 ,与胃癌候选抑癌基因CA11编码蛋白为同源蛋白 ,均为新的BRICHO家族成员。结论 得到一胃癌下调全长新基因GDDR ,它可能为BRICHO家族中又一胃癌相关基因。 展开更多
关键词 胃癌 基因 GDDR 克隆 全长新基因 胃黏膜组织
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有机磷抗性致倦库蚊种群中酯酶基因扩增的定量分析 被引量:12
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作者 乔传令 J.Hemingway 李瑄 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期11-17,共7页
致倦库蚊Culexqinquefasciatus是丝虫病的主要传染媒介。通过生物测定、单个蚊虫酯酶α2和 β2基因拷贝数分析和酯酶 β基因序列比较 ,分析了抗性水平、抗性相关基因在种群中的分布及其基因拷贝数等的抗性分子特征。应用快速PCR仪(real ... 致倦库蚊Culexqinquefasciatus是丝虫病的主要传染媒介。通过生物测定、单个蚊虫酯酶α2和 β2基因拷贝数分析和酯酶 β基因序列比较 ,分析了抗性水平、抗性相关基因在种群中的分布及其基因拷贝数等的抗性分子特征。应用快速PCR仪(real timequantitativePCRs)直接检测库蚊中酯酶基因和mRNA拷贝数。结果显示 :上海致倦库蚊对对硫磷的抗性LC50 为8 12 ,酯酶活性升高是上海致倦库蚊种群对有机磷杀虫药剂产生抗性的主要机理。编码致倦库蚊酯酶 β的氨基酸序列同编码尖音库蚊酯酶B1的氨基酸序列相比同源性为 98% ;同致倦库蚊酯酶B2氨基酸序列相比同源性为 10 0 % ,同环蹶库蚊酯酶B3氨基酸序列相比同源性为 90 % ,上海致倦库蚊中酯酶α和 β基因均扩增。有机磷抗性的上海和PellRR蚊虫种群中单个蚊虫酯酶α2和β2定量基因拷贝数均不同 ,其同一蚊虫个体的酯酶α2比酯酶 β2基因的拷贝数高 ,但没有明显的规律性 ,酯酶结构基因的扩增是上海致倦库蚊种群对有机磷杀虫药剂抗性的主要机理 ,估计在野外种群的杂合个体中存在多种调控机制。 展开更多
关键词 致倦库蚊 有机磷抗性 基因扩增 基因拷贝数 定量PCR
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c-erbB-2基因生物学特性研究进展 被引量:14
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作者 仇丽红 赵梅香 +3 位作者 黄洁 高峰 洪义欢 陈建民 《现代肿瘤医学》 CAS 2007年第1期102-105,共4页
c-erbB-2是一种细胞来源的原癌基因,编码具有蛋白激酶活性的细胞膜糖蛋白。本文从c-erbB-2基因的生物学活性,激活作用机制以及对该基因扩增引起各种肿瘤的发生做了综述,并探讨了该基因在肿瘤诊断预测中的重要作用和应用前景。
关键词 C-ERBB-2 基因扩增 肿瘤
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致倦库蚊有机磷抗性相关扩增酯酶B基因的多样性 被引量:11
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作者 徐建农 瞿逢伊 刘维德 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1994年第2期101-105,共5页
本实验从佛山和成都两地的致倦库蚊群体中筛选出3个酯酶类型不同的有机磷(OP)抗性品系,FS-1、FS-2和CD-1品系。各品系的酯酶基因B扩增水平、酯酶活性和OP抗性水平三者一致。各品系酯酶B基因限制性酶切片段比较分... 本实验从佛山和成都两地的致倦库蚊群体中筛选出3个酯酶类型不同的有机磷(OP)抗性品系,FS-1、FS-2和CD-1品系。各品系的酯酶基因B扩增水平、酯酶活性和OP抗性水平三者一致。各品系酯酶B基因限制性酶切片段比较分析表明,我国的OP抗性库蚊群体中不仅有世界性分布的酯酶B1和B2,而且在佛山和成都地区各有一个新的独立扩增的酯酶B,分别命名为B6和B7。 展开更多
关键词 致倦库蚊 杀虫剂 基因扩增
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不同地区尖音库蚊复合组抗药性的分子特征 被引量:12
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作者 刘俊娥 乔传令 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期290-296,共7页
通过生物测定、蛋白质电泳和单个蚊虫基因组Southern杂交三种方法对三个不同地区的尖音库蚊复合组蚊虫Culexpipienscomplex的抗性水平、抗性相关基因在种群中的分布及抗性分子特征进行了研究。采自山东高密、北京和云南昆明的尖音库蚊... 通过生物测定、蛋白质电泳和单个蚊虫基因组Southern杂交三种方法对三个不同地区的尖音库蚊复合组蚊虫Culexpipienscomplex的抗性水平、抗性相关基因在种群中的分布及抗性分子特征进行了研究。采自山东高密、北京和云南昆明的尖音库蚊复合组蚊虫 4龄幼虫对敌敌畏、对硫磷 (有机磷类 )和仲丁威 (氨基甲酸酯类 )的抗性水平的测定结果表明 :与北京敏感系相比 ,高密种群对敌敌畏、对硫磷的抗性水平很高 ,北京种群对敌敌畏的抗性水平也很高 (约 30倍 ) ,三个种群对仲丁威的抗性与北京敏感系没有明显的区别。淀粉电泳的结果表明 :高密和北京种群中存在过量产生的非特异性酯酶Estβ11,昆明种群中存在过量产生的非特异性酯酶Estα2和Estβ2 ,单个蚊虫基因组Southern杂交的结果表明 :酯酶Estβ11。 展开更多
关键词 尖音库蚊复合组 有机磷杀虫剂 酯酶 抗药性机理 基因扩增
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银染mRNA差异显示方法的建立 被引量:8
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作者 陈晓梨 陈鑫基 +2 位作者 郑静 张昭秀 胡建达 《福建医科大学学报》 2002年第3期247-249,共3页
目的 建立银染 m RNA差异显示方法 ,为差异表达基因片断的分离克隆奠定基础。 方法 采用随机引物和锚定引物各 1条 ,建立差异显示反转录聚合酶链式反应 (DDRT- PCR)和银染方法 ,对 DDRT- PCR过程中各实验影响因素进行优化 ,割取差异... 目的 建立银染 m RNA差异显示方法 ,为差异表达基因片断的分离克隆奠定基础。 方法 采用随机引物和锚定引物各 1条 ,建立差异显示反转录聚合酶链式反应 (DDRT- PCR)和银染方法 ,对 DDRT- PCR过程中各实验影响因素进行优化 ,割取差异条带进行二次扩增。 结果 当总 RNA用量为 0 .2μg,引物浓度为 0 .6~ 1.0μm ol/ L ,d NTP浓度为 2 0 0μmol/ L ,Mg Cl2 浓度为 1.6~ 2 .0 mm ol/ L时 ,同时起始 5个循环的退火温度为 5 0℃ ,扩增效率最佳 ,特异性好 ,背景干净。 结论  DDRT- PCR方法简便、快捷、灵敏、高效 ,可用于分离差异表达基因。 展开更多
关键词 银染mRNA差异显示方法 基因扩增 差异表达基因 克隆 DDRT-PCR
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2013版《医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明》改版解读 被引量:14
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作者 刘维薇 关明 《中华临床实验室管理电子杂志》 2013年第1期36-40,共5页
中国合格评定国家认可委员会2013版《医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明》,与既往版本有较大更新和改动,尤其在设备维修后的性能验证、新开项目方法学性能评估和室内质量控制方面,要求更为细化严格,新增内容较... 中国合格评定国家认可委员会2013版《医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明》,与既往版本有较大更新和改动,尤其在设备维修后的性能验证、新开项目方法学性能评估和室内质量控制方面,要求更为细化严格,新增内容较多,这对提高基因扩增检验的医学实验室质量和能力具有重要的指导意义。本文对此变化解读如下。 展开更多
关键词 基因扩增 医学实验室
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晚期肺腺癌EGFR基因突变及临床特征分析 被引量:14
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作者 张萍 武晓楠 +3 位作者 聂鑫 艾斌 李琳 程刚 《实用肿瘤杂志》 CAS 2018年第2期150-153,共4页
目的分析晚期肺腺癌患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变特点及其与临床特征的关系。方法收集经组织病理学证实的406例初诊为晚期肺腺癌的患者的临床资料。患者均采用扩增阻滞突变系统(amplification ... 目的分析晚期肺腺癌患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变特点及其与临床特征的关系。方法收集经组织病理学证实的406例初诊为晚期肺腺癌的患者的临床资料。患者均采用扩增阻滞突变系统(amplification refractory mutation system,ARMS)法检测EGFR基因突变情况。分析EGFR基因突变特点与患者性别、年龄、吸烟情况和初诊时转移部位等临床特征的关系,寻找预测EGFR基因突变的临床特征。结果本组患者中,EGFR突变率为50.5%(205/406)。所有突变患者中,EGFR 19号外显子缺失突变占50.7%,21号外显子L858R点突变占43.4%,其他少见突变占5.9%。女性与男性患者的突变率分别为57.9%和43.5%(P=0.004)。不吸烟患者突变率为59.0%,有吸烟史患者为36.8%(P<0.01)。≤60岁与>60岁患者突变率分别为46.6%和53.1%(P=0.336)。初诊时,有脑转移患者突变率为61.9%,无脑转移患者为48.4%(P=0.049);有恶性胸腔积液和无恶性胸腔积液的患者突变率分别为57.1%和47.3%(P=0.041);有骨转移和无骨转移患者突变率分别为53.1%和49.0%(P=0.435)。多因素回归分析发现,吸烟、有脑转移和有恶性胸腔积液是肺腺癌患者EGFR突变的独立预测因素(均P<0.05)。结论晚期肺腺癌患者EGFR基因突变率较高。吸烟、有脑转移和有恶性胸腔积液是肺腺癌患者EGFR突变的独立预测因素。 展开更多
关键词 肺肿瘤/诊断 肺肿瘤/病理学 基因扩增 突变 受体 表皮生长因子/遗传学 胸腔积液 腺癌/诊断 腺癌/病理学 回顾性研究
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广东菲牛蛭水蛭素基因的克隆和序列测定 被引量:12
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作者 谭恩光 刘秀平 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第2期84-86,共3页
【目的】研究地理因素对水蛭素基因结构变异的影响。【方法】抽提广东菲牛蛭基因组DNA ,根据已发表的水蛭素基因设计一对引物 ,从基因组DNA扩增出一特异性的大约 70 0bp片段 ,再回收、克隆和测序。【结果】广东菲牛蛭水蛭素基因全长为 6... 【目的】研究地理因素对水蛭素基因结构变异的影响。【方法】抽提广东菲牛蛭基因组DNA ,根据已发表的水蛭素基因设计一对引物 ,从基因组DNA扩增出一特异性的大约 70 0bp片段 ,再回收、克隆和测序。【结果】广东菲牛蛭水蛭素基因全长为 6 42bp ,基因有 4个外显子 ,被三个内含子隔开。与马尼拉菲牛蛭水蛭素基因Hm1、Hm2 的同源性分别为 90 %与和 88 6 %。【结论】地理因素会影响菲牛蛭水蛭素基因结构的变异。 展开更多
关键词 水蛭素基因 基因扩增 序列分析 菲牛蛭 克隆 广东菲牛蛭
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