化学发光免疫分析与酶联免疫分析法检测水产品药物残留的比较研究 被引量：11

1

作者 萨仁托雅 张峰 +1 位作者 郑有虎 卢亚楠 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第5期486-491,共6页

对检测水产品中呋喃唑酮代谢物（AOZ）和氯霉素（CAP）药物残留的两种方法——化学发光免疫分析（CLEIA）和酶联免疫分析（ELISA）法进行了比较研究。结果表明：两种药物残留检测中,CLEIA分析方法的线性范围和检出限均优于ELISA法,且两... 对检测水产品中呋喃唑酮代谢物（AOZ）和氯霉素（CAP）药物残留的两种方法——化学发光免疫分析（CLEIA）和酶联免疫分析（ELISA）法进行了比较研究。结果表明：两种药物残留检测中,CLEIA分析方法的线性范围和检出限均优于ELISA法,且两种免疫分析法的添加回收率均具有很好的相关性;用CLEIA法检测AOZ的检出限为0.01μg/kg,线性范围为0.01~2.56μg/kg,检测CAP的检出限为0.016μg/kg,线性范围为0.025~6.400μg/kg;用ELISA法检测AOZ的检出限为0.1μg/kg,线性范围为0.10~1.62μg/kg,检测CAP的检出限为0.05μg/kg,线性范围为0.05~4.05μg/kg;用CLEIA法检测CAP的批内变异系数（RSD）为5.5%~11.3%,批间RSD为12.3%~20.9%,检测AOZ的批内RSD为6.6%~11.1%,批间RSD为15.6%~18.3%。研究表明,用CLEIA法检测水产品药物残留较ELISA法检出限低、线性范围宽,虽然检出CAP和AOZ的变异系数均高于ELISA法,但仍符合《兽药残留酶联免疫试剂（盒）备案参考评判标准》的规定。 展开更多

关键词 化学发光免疫分析 酶联免疫分析 氯霉素 呋喃唑酮代谢物

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呋喃唑酮代谢物人工抗原的制备及鉴定 被引量：3

2

作者 李静宇 何小维 +2 位作者 李敏 刘晓云 李文美 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2014年第10期182-186,273,共6页

在催化剂条件下,以碳酸二甲酯和乙醇肼为原料,四氢呋喃为溶剂,合成了高收率的呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)。实验结果表明,得到的AOZ收率可达到82.7%,此时的最佳反应条件如下:催化剂用量12%,反应温度75℃,反应时间3h。随后对AO... 在催化剂条件下,以碳酸二甲酯和乙醇肼为原料,四氢呋喃为溶剂,合成了高收率的呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)。实验结果表明,得到的AOZ收率可达到82.7%,此时的最佳反应条件如下:催化剂用量12%,反应温度75℃,反应时间3h。随后对AOZ进行结构改造,得到AOZ半抗原衍生物,同时采用戊二醛法将AOZ及其半抗原衍生物与活化的卵血清蛋白(cOVA)和牛血清白蛋白(cBSA)交联,成功制备了免疫原和包被原;通过气相质谱联用仪(GC-MS)、元素分析、紫外分光光度计等手段对半抗原和完全抗原进行鉴定。GC-MS结果证明了AOZ的成功合成;元素分析数据表明,半抗原顺利合成;紫外扫描数据显示,半抗原与cOVA、cBSA偶联成功,免疫原I、免疫原Ⅱ的偶联比分别为16.74和24.05。 展开更多

关键词 呋喃唑酮 呋喃唑酮代谢物 半抗原 人工抗原

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酶联免疫(ELISA)法测定水产品中呋喃唑酮代谢物AOZ的残留 被引量：2

3

作者 林情员 《福建水产》 2008年第4期69-72,共4页

采用MaxsignalTM AOZ快速检测试剂盒检测水产品中呋喃唑酮代谢物。通过对精密度、回收率和检测限等项目的测定,验证了方法的可行性。呋喃唑酮代谢物标准液在0.05ng/mL^4.5ng/mL范围内具有良好的线性,微孔板孔间变异系数为3.2%~7.7%。样... 采用MaxsignalTM AOZ快速检测试剂盒检测水产品中呋喃唑酮代谢物。通过对精密度、回收率和检测限等项目的测定,验证了方法的可行性。呋喃唑酮代谢物标准液在0.05ng/mL^4.5ng/mL范围内具有良好的线性,微孔板孔间变异系数为3.2%~7.7%。样品批内变异系数为5.2%~8.4%,批间变异系数为6.3%~8.9%,平均回收率为94.5%~98.4%。试剂盒的理论检测下限为0.05μg/Kg。该方法灵敏度高,重复性好,适用于水产品中呋喃唑酮代谢物残留的检测。 展开更多

关键词 水产品 呋喃唑酮代谢物 酶联免疫法 测定 AOZ

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呋喃唑酮代谢物人工抗原的合成及半抗原偶联比的测定 被引量：3

4

作者 曾磊 周常义 苏国成 《安徽农业科学》 CAS 2013年第3期961-962,1022,共3页

[目的]合成呋喃唑酮代谢物人工抗原,并测定该半抗原偶联比。[方法]通过混合酸酐法将羧基化改造的小分子抗原AOZ与HSA偶联后,运用紫外光谱分析判断合成的结果,并计算小分子抗原与蛋白的偶联比率。[结果]该试验成功合成了呋喃唑酮代谢物A... [目的]合成呋喃唑酮代谢物人工抗原,并测定该半抗原偶联比。[方法]通过混合酸酐法将羧基化改造的小分子抗原AOZ与HSA偶联后,运用紫外光谱分析判断合成的结果,并计算小分子抗原与蛋白的偶联比率。[结果]该试验成功合成了呋喃唑酮代谢物AOZ,对其进行羧基化改造后与载体蛋白HSA成功偶联,偶联比经测定为4∶1。[结论]利用紫外光谱分析测定小分子抗原偶联比率的方法简便,可靠性强。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 AOZ 抗原合成 偶联比

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鸡蛋中呋喃唑酮代谢物金标试纸条快速分析 被引量：2

5

作者 董雪 王丽雯 +2 位作者 袁建 伦丽丽 张勋 《生物加工过程》 CAS 2018年第2期69-73,共5页

基于呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)的小鼠单克隆抗体和小分子抗原抗体竞争法检测的原理,建立了鸡蛋中AOZ的胶体金试纸条检测方法。AOZ经过邻硝基苯甲醛衍生后,能够被抗体识别,进而通过试纸条的方法进行检测。结果表明:该检测方... 基于呋喃唑酮代谢物3-氨基-2-恶唑烷酮(AOZ)的小鼠单克隆抗体和小分子抗原抗体竞争法检测的原理,建立了鸡蛋中AOZ的胶体金试纸条检测方法。AOZ经过邻硝基苯甲醛衍生后,能够被抗体识别,进而通过试纸条的方法进行检测。结果表明:该检测方法灵敏度高,通过肉眼判断最低检测限为0.02μg/kg,消线含量为0.5μg/kg。该方法能够实现鸡蛋中AOZ的快速检测和高灵敏度分析。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 单克隆抗体 鸡蛋 胶体金试纸条 快速检测

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呋喃唑酮代谢物抗体的制备与筛查 被引量：2

6

作者 杨悦熙 李敏 +1 位作者 李文美 何小维 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2013年第2期362-366,共5页

利用呋喃唑酮的4种代谢物合成免疫原以及包被原,用4种免疫原各免疫两只新西兰大白兔,得到8份抗血清,再纯化抗血清。采用间接ELISA方法,筛选出OD值明显高于阴性样本的血清用于以后的实验,同时对抗体的效价进行测定。实验检测结果表明,当... 利用呋喃唑酮的4种代谢物合成免疫原以及包被原,用4种免疫原各免疫两只新西兰大白兔,得到8份抗血清,再纯化抗血清。采用间接ELISA方法,筛选出OD值明显高于阴性样本的血清用于以后的实验,同时对抗体的效价进行测定。实验检测结果表明,当用包被原A和包被原B包被酶标板时,7号和8号抗血清对该包被抗原有很好的亲和性,呋喃唑酮代谢物衍生物对抗体有很好的抑制。通过效价检测,7号和8号抗血清均具有高效价、高特异性的特点,其中8号抗血清的效价更高,亲和力更强。再通过进一步对两种包被原和两份抗血清进行筛查,选择B包被原和8号兔子的抗体清用于ELISA法的建立。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 抗体 间接ELISA

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呋喃唑酮代谢物单克隆抗体和胶体金免疫层析试纸条的研制 被引量：17

7

作者 李春生 刘静静 +4 位作者 杜顺丰 武孝丽 曹秀梅 吴萌 张娜 《现代食品科技》 EI CAS 北大核心 2017年第6期326-331,共6页

本研究旨在建立一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物(CPAOZ)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物免疫小鼠,利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株... 本研究旨在建立一种快速检测呋喃唑酮代谢物残留的方法。试验用呋喃唑酮代谢物的衍生物(CPAOZ)与牛血清白蛋白(BSA)的偶联物免疫小鼠,利用单克隆抗体技术制备杂交瘤细胞,用间接ELISA和间接竞争ELISA法对阳性克隆进行筛选。单克隆细胞株诱生腹水后,经纯化即为单克隆抗体,用于胶体金标记,制备呋喃唑酮代谢物胶体金免疫层析试纸条。融合后得到2株稳定分泌抗体的杂交瘤细胞株,其中4G3纯化后的抗体效价达到1:100万,对CPAOZ的50%抑制质量浓度(IC50)为1.7μg/L,亲和常数Ka=1.6×109 L/mol。该抗体制备的胶体金试纸条的检测限为4μg/L,与其他3种硝基呋喃代谢物的衍生物CPAHD、CPSEM和CPAMOZ均不存在交叉反应,对样品的检测与高效液相色谱结果一致。本研究制备了抗呋喃唑酮代谢物特异性单克隆抗体,并研制了以单抗为基础的胶体金免疫层析试纸条,能够实现呋喃唑酮代谢物残留的快速、灵敏的检测。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 单克隆抗体 胶体金免疫层析试纸条

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水解衍生-酶联免疫分析在动物肌肉中呋喃唑酮代谢物残留量检测中的应用 被引量：8

8

作者 秦燕 朱柳明 +2 位作者 庄逸林 林峰 相大鹏 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期685-688,共4页

目的:优化并评估了水解衍生-酶联免疫方法在测定动物肌肉中抗生素呋喃唑酮代谢后结合残留物中的应用。方法:样品中的呋喃唑酮代谢物3-氨基-唑烷酮(3-amino-2-oxazolidone,AOZ)的蛋白结合残留物经酸水解释放 AOZ,经2-硝基苯甲醛(2-nitrob... 目的:优化并评估了水解衍生-酶联免疫方法在测定动物肌肉中抗生素呋喃唑酮代谢后结合残留物中的应用。方法:样品中的呋喃唑酮代谢物3-氨基-唑烷酮(3-amino-2-oxazolidone,AOZ)的蛋白结合残留物经酸水解释放 AOZ,经2-硝基苯甲醛(2-nitrobenzaldehyde,NBA)衍生生成3{[(2-nitrophenyl)methylene]-amino}-2-oxazolidinone(NPAOZ)后,调 pH 至7.2-7.4,经乙酸乙酯萃取后,10min/4000r·min^(-1)离心取上层氮气流于30℃吹干并用缓冲液溶解,正己烷脱脂后取下层水相进行 NPAOZ 的竞争性酶联免疫吸附分析(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)。结果:方法定量检测限为200ng·kg^(-1),样本加标水平为1.0μg·kg^(-1)时,回收率在85%以上。实际样本对照实验显示 AOZ 质量浓度>1.0μg·kg^(-1)时,方法与 LC-MS-MS 结果的相对误差<25%。结论:此方法可实现动物肌肉中呋喃唑酮代谢物残留量的高通量筛选。 展开更多

关键词 呋喃唑酮 动物肌肉 代谢物 酶联免疫分析 残留量 衍生 酶联免疫吸附分析 酶联免疫方法 乙酸乙酯萃取 高通量筛选 蛋白结合 质量浓度 对照实验 相对误差 残留物 抗生素 唑烷酮 酸水解 苯甲醛 缓冲液 竞争性 正己烷 检测限

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呋喃唑酮代谢物时间分辨荧光免疫快速检测试剂卡的研制及应用 被引量：9

9

作者 赵义良 李云 +4 位作者 桑丽雅 王振国 肖妙 王伟萍 陈笑笑 《食品安全质量检测学报》 CAS 2018年第19期5187-5194,共8页

目的应用时间分辨免疫荧光检测技术,研制出一种快速检测呋喃唑酮代谢物的试剂卡。方法采用EDC介导法偶联抗体,由于铕荧光微球的荧光持续稳定性好,强度大,不易受干扰等优点,将其作为荧光标记物。通过优化铕荧光微球与单抗之间的用量,改... 目的应用时间分辨免疫荧光检测技术,研制出一种快速检测呋喃唑酮代谢物的试剂卡。方法采用EDC介导法偶联抗体,由于铕荧光微球的荧光持续稳定性好,强度大,不易受干扰等优点,将其作为荧光标记物。通过优化铕荧光微球与单抗之间的用量,改善试剂卡的显色梯度,提高试剂卡的灵敏度。结果结果显示本试剂卡对呋喃唑酮代谢物的检出限为0.5μg/kg,与呋喃唑酮代谢物类似物的交叉反应率低,可在室温条件下保存一年;此方法下的检测结果与液相色谱-串联质谱法的检测结果符合程度为100%。结论呋喃唑酮代谢物时间分辨荧光免疫快速检测试剂卡具有检测快速、准确、灵敏度高的特点,操作简单,能满足大规模现场快速检测的需求,为食品安全每个环节提供保障和便利。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 时间分辨荧光免疫 快速检测

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荧光免疫层析试纸在水产品中呋喃唑酮代谢物快速检测中的应用 被引量：6

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作者 王立博 邓莉 +6 位作者 张永辉 孙婉玲 罗丹 刘婧玮 宋杰 晏梦溪 周欣睿 《食品安全质量检测学报》 CAS 北大核心 2021年第20期7952-7959,共8页

目的建立一种快速检测水产品中呋喃唑酮代谢物的荧光免疫层析试纸。方法以紫外灯下呈鲜亮红色的铕荧光微球为抗体标记物,通过调试荧光微球-抗体复合物的工作液配方,优化检测线和控制线,改善试纸反应性能和荧光显色梯度,提高试纸灵敏度... 目的建立一种快速检测水产品中呋喃唑酮代谢物的荧光免疫层析试纸。方法以紫外灯下呈鲜亮红色的铕荧光微球为抗体标记物,通过调试荧光微球-抗体复合物的工作液配方,优化检测线和控制线,改善试纸反应性能和荧光显色梯度,提高试纸灵敏度。结果结果显示,通过肉眼判断本试纸对呋喃唑酮代谢物的最低检出限为0.25mg/kg,特异性良好,在冷藏条件下其稳定性可达1年。在40批次不同品种水产品的检测中,试纸检测结果与液相色谱-串联质谱法的检测结果符合程度为100%。结论呋喃唑酮代谢物荧光免疫层析试纸具有快速简单、准确灵敏、成本低的优势,其结果易于判定,无需专门的检测仪器,适用于大规模筛查、多环节质控和风险评估,具有广阔的应用前景。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 荧光免疫层析试纸 快速检测 水产品

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胶体金免疫层析法检测水产品中呋喃唑酮代谢物的处理工艺优化 被引量：4

11

作者 谢昀 李聪 +2 位作者 李鑫月 高锦彪 邵娟娟 《食品科技》 CAS 北大核心 2020年第5期334-340,共7页

为消除鱼类等水产品的基质干扰并保证检测结果的准确性,在单因素试验的基础上,运用Box–Beheken设计3因素3水平试验,建立响应面分析模型并筛选出最佳工艺。结果显示在50%甲醇溶液和78℃水浴13 min的处理条件下效果最佳,提高了检测卡的... 为消除鱼类等水产品的基质干扰并保证检测结果的准确性,在单因素试验的基础上,运用Box–Beheken设计3因素3水平试验,建立响应面分析模型并筛选出最佳工艺。结果显示在50%甲醇溶液和78℃水浴13 min的处理条件下效果最佳,提高了检测卡的灵敏度并得到了1.0μg/kg的检出限。该工艺为胶体金检测卡检测水产品中呋喃唑酮代谢物残留提供了参数和依据。 展开更多

关键词 响应面分析法 胶体金免疫层析 呋喃唑酮代谢物 工艺优化

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草鱼肌肉中呋喃唑酮代谢物AOZ检测能力验证样品的制备研究 被引量：4

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作者 田娟娟 甘金华 +2 位作者 彭婕 李晋成 刘欢 《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2018年第5期3-10,共8页

为解决现行水产品药物残留检测能力验证样品制备方式单一,现用能力验证样品实际检测分析难度与真实样品之间存在差距的现实问题,实验采用药浴给药的方式,研究了水温、药浴时间等因素对草鱼肌肉中AOZ残留浓度的影响。结果显示:在水温25... 为解决现行水产品药物残留检测能力验证样品制备方式单一,现用能力验证样品实际检测分析难度与真实样品之间存在差距的现实问题,实验采用药浴给药的方式,研究了水温、药浴时间等因素对草鱼肌肉中AOZ残留浓度的影响。结果显示:在水温25℃、鱼体规格900~1 100 g、药浴10 h的条件下,草鱼肌肉中AOZ含量变化相对平稳,确立的药浴初始浓度x(μg/L)与草鱼肌肉中残留的AOZ浓度y(μg/kg)之间简单关式为y=0.22x。在此条件下制备了AOZ残留浓度为10.0μg/kg的能力验证样品,采用液相色谱-串联质谱法对样品的均匀性和稳定性进行了评价。样品检测结果均匀性和稳定性良好,符合能力验证样品的要求。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 检测 能力验证 样品制备 草鱼

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呋喃唑酮代谢物直接竞争化学发光检测方法的建立 被引量：2

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作者 安静 古丽斯坦 +3 位作者 宋斌 姜娜 富昕纯 周晓龙 《分析仪器》 CAS 2019年第5期65-70,共6页

目的:建立呋喃唑酮代谢物(AOZ)直接竞争化学发光检测方法,用于新疆水产品呋喃唑酮残留检测。方法:采用碳二亚胺法将AOZ与对醛基苯甲酸反应生成物CPAOZ与HRP偶联成酶标物CPAOZ-HRP,加之CPAOZ单克隆抗体,建立AOZ直接竞争化学发光检测方法(... 目的:建立呋喃唑酮代谢物(AOZ)直接竞争化学发光检测方法,用于新疆水产品呋喃唑酮残留检测。方法:采用碳二亚胺法将AOZ与对醛基苯甲酸反应生成物CPAOZ与HRP偶联成酶标物CPAOZ-HRP,加之CPAOZ单克隆抗体,建立AOZ直接竞争化学发光检测方法(CLIA);运用高效液相色谱法(HPLC)和AOZ-CLIA检测新疆罗非鱼样品中AOZ的残留情况。结果:以1∶6000CPZOA单克隆抗体稀释度为最佳包被浓度,1∶64000CPAOZ-HRP稀释浓度为最佳检测浓度,建立AOZ-CLIA方法,其标准曲线呈线性,线性范围0.0527~8.5ng/mL,IC50为0.235ng/mL;该方法能特异性检测AOZ,与其他药物无交叉反应;样品最低检出限为0.0509μg/kg,样品添加回收率为87.2%~95.0%;新疆罗非鱼AOZ-CLIA检测结果与HPLC结果完全一致,均未检测出超标样本。结论:建立的AOZ-CLIA检测方法能满足新疆水产品呋喃唑酮残留检测。 展开更多

关键词 呋喃唑酮代谢物 直接竞争化学发光法 水产品

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水产品中呋喃唑酮及其代谢物检测技术的研究进展 被引量：1

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作者 谢昀 陈依淼 +1 位作者 李鑫月 邵娟娟 《现代食品》 2020年第4期190-194,共5页

呋喃唑酮是一种有抗菌消炎作用的药物,曾作为兽药用于水产养殖。但会导致水产品中残留呋喃唑酮及其代谢物(AOZ),通过食物链作用在人体富集,危害人体健康。以水产品中残留的呋喃唑酮及AOZ为研究对象,对其检测方法进行分类概括,总结了国... 呋喃唑酮是一种有抗菌消炎作用的药物,曾作为兽药用于水产养殖。但会导致水产品中残留呋喃唑酮及其代谢物(AOZ),通过食物链作用在人体富集,危害人体健康。以水产品中残留的呋喃唑酮及AOZ为研究对象,对其检测方法进行分类概括,总结了国内外对水产品中的呋喃唑酮及AOZ检测方法的应用和进展,联系实际对方法的可行性进行分析,旨在通过分析检测方法为监测残留提供新思路,以期保证水产品的食用安全性。 展开更多

关键词 呋喃唑酮及其代谢物 水产品 检测技术

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