Fluoro-Jade B法显示神经毒物红藻氨酸和MPTP致小鼠基底神经核损伤引起神经元的变性死亡 被引量：4

1

作者 曹荣 扈慧静 +2 位作者 王艳芹 张金萍 陈良为 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期452-455,共4页

目的探讨应用Fluoro-JadeB(FJB)染色法检测基底神经核神经元变性死亡的方法。方法制备纹状体定位注射红藻氨酸(KA)损伤大鼠模型、腹腔注射MPTP损伤小鼠模型、以及培养纹状体神经元KA损伤细胞模型,用FJB荧光染色显示和分析变性死亡的神... 目的探讨应用Fluoro-JadeB(FJB)染色法检测基底神经核神经元变性死亡的方法。方法制备纹状体定位注射红藻氨酸(KA)损伤大鼠模型、腹腔注射MPTP损伤小鼠模型、以及培养纹状体神经元KA损伤细胞模型,用FJB荧光染色显示和分析变性死亡的神经元。结果FJB染色可清晰地显示KA和MPTP致大、小鼠损伤引起的变性神经元胞体和部分突起。在脑组织切片上,KA模型纹状体内、MPTP模型黑质致密部内分布许多FJB染色阳性的变性神经元,而对照组动物未见变性神经元。在培养纹状体神经元体系内,FJB也能清楚地显示KA损伤后变性的神经元。单位面积内计数FJB阳性神经元占培养纹状体神经元总数的比率(均值±标准差),KA损伤组为(8·42±1·09)%,较对照组(3·42±0·45)%明显增多(P<0·01)。结论FJB方法快速、简便、经济、可靠。可以用于脑组织切片和培养细胞显示变性神经元,能成功检测出KA和MPTP损伤后基底神经核的变性神经元。 展开更多

关键词 fluoro-jade b 红藻氨酸 1-甲基-4-苯基-四氢吡啶(MPTP) 基底神经核 神经元变性 大鼠 小鼠 MPTP损伤 细胞显示

下载PDF 职称材料

当归补血汤对大鼠永久性局灶性脑缺血后脑源性促红细胞生成素的影响 被引量：4

2

作者 刘乔飞 冯超 +2 位作者 隆艳艳 冯林 车永哲 《亚太传统医药》 2008年第3期45-47,共3页

目的:观察当归补血汤对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用及对脑源性促红细胞生成素(erythropoie-tin,EPO)表达的影响。方法:将动物随机分为假手术组、模型组和给药组,采用改良线栓法建立大鼠永久性局灶性脑缺血模型,按缺血时间每组分... 目的:观察当归补血汤对大鼠永久性局灶性脑缺血的保护作用及对脑源性促红细胞生成素(erythropoie-tin,EPO)表达的影响。方法:将动物随机分为假手术组、模型组和给药组,采用改良线栓法建立大鼠永久性局灶性脑缺血模型,按缺血时间每组分为4h、1d和7d亚组,给药组灌胃当归补血汤。在缺血相应时间后取材,行甲苯胺蓝染色,观察组织病理变化;行TTC染色,计算脑梗死体积百分比;行Fluoro-Jade B(FJB)染色,计算半暗带阳性细胞数;行EPO免疫荧光染色,计算半暗带阳性细胞数。结果:与模型组相比,当归补血汤可以减轻缺血脑组织的病理改变,降低缺血7d亚组脑梗死体积百分比(P<0.05),减少缺血1d、7d亚组半暗带FJB阳性细胞数(P<0.05,P<0.01);给药组缺血1d、7d亚组半暗带EPO阳性细胞数明显多于模型组(P<0.01)。结论:当归补血汤对永久性局灶性脑缺血大鼠具有一定的保护作用,可能与增强脑缺血后脑源性EPO表达有关。 展开更多

关键词 当归补血汤 局灶性脑缺血 促红细胞生成素 fluoro-jade b

下载PDF 职称材料

不同时程吗啡依赖对大鼠中脑黑质多巴胺神经细胞的影响

3

作者 史为博 刘伟兵 +3 位作者 贾景娜 王洁 李英敏 丛斌 《中国法医学杂志》 CSCD 2013年第5期367-370,共4页

目的观察不同时程吗啡依赖对大鼠中脑黑质(Substantia nigra,SN)多巴胺能神经细胞的影响。方法按逐日递增原则背部皮下注射盐酸吗啡,建立吗啡依赖大鼠模型,取脑组织经10%福尔马林液固定后石蜡包埋,组织连续切片,免疫组织化学和免疫荧光... 目的观察不同时程吗啡依赖对大鼠中脑黑质(Substantia nigra,SN)多巴胺能神经细胞的影响。方法按逐日递增原则背部皮下注射盐酸吗啡,建立吗啡依赖大鼠模型,取脑组织经10%福尔马林液固定后石蜡包埋,组织连续切片,免疫组织化学和免疫荧光染色,观察多巴胺能神经细胞特异性标记物酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)蛋白表达变化;Fluoro-Jade B染色观察吗啡依赖不同时程黑质多巴胺能神经细胞变性坏死情况。结果 TH免疫组化结果显示随着吗啡依赖时间的延长黑质阳性细胞逐渐减少,吗啡依赖6周组阳性细胞减少明显。Fluoro-Jade B染色结果证实多巴胺能神经细胞发生了变性坏死。结论较长时程吗啡依赖大鼠黑质多巴胺能神经细胞损伤明显。 展开更多

关键词 法医毒理学 吗啡依赖 黑质 TH阳性细胞 fluoro—jade b

原文传递

喹硫平对小鼠脑缺血致神经元损伤及其机制的实验研究

4

作者 房绍宽 吴江 周春奎 《中风与神经疾病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期705-708,共4页

目的研究喹硫平对小鼠脑缺血致神经元损伤的保护作用及机制。方法雄性ICR小鼠给予喹硫平10mg/kg腹腔注射14d预处理,然后闭塞双侧的颈总动脉。实验共分为4个组:假手术组、缺血组、药物对照组及药物保护组。采用Fluoro-Jade B染色观察脑... 目的研究喹硫平对小鼠脑缺血致神经元损伤的保护作用及机制。方法雄性ICR小鼠给予喹硫平10mg/kg腹腔注射14d预处理,然后闭塞双侧的颈总动脉。实验共分为4个组:假手术组、缺血组、药物对照组及药物保护组。采用Fluoro-Jade B染色观察脑缺血后海马齿状回区神经元损伤情况;采用Western blot方法检测MDA、BDNF和Bcl-xL/Bax蛋白的表达。结果缺血组与假手术组比较Fluoro-Jade B染色阳性细胞数量明显增加(P<0.01);药物保护组与缺血组比较Fluoro-Jade B染色阳性细胞数量明显减少(P<0.01)。缺血组与假手术组比较Bcl-xL/Bax比值减少(P<0.05);药物保护组与缺血组比较Bcl-xL/Bax比值增加(P<0.05)。缺血组与假手术组比较BDNF蛋白表达量减少(P<0.05);药物保护组与缺血组比较BDNF蛋白表达量增加(P<0.05)。缺血组与假手术组比较MDA蛋白表达量增加(P<0.05);药物保护组与缺血组比较MDA蛋白表达量减少(P<0.05)。结论喹硫平能够减轻小鼠脑缺血所致的神经元损伤,其机制可能与减少MDA的表达、增加Bcl-xL/Bax的比值、增加BDNF的表达有关。 展开更多

关键词 喹硫平 神经元损伤 fluoro-jade b

下载PDF 职称材料

Fluoro-Jade B染色与蛋白免疫荧光多标的染色方法

5

作者 左夏林 金吉子 +2 位作者 刘丹丹 孙卫文 徐恩 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期671-674,共4页

目的寻找一种Fluoro-Jade B(FJB)染色结合目的蛋白免疫荧光多标的合适方法。方法通过电凝法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),诱导皮层缺血半暗带神经元变性。实验分为FJB染色结合蛋白免疫荧光组以及目的蛋白免疫荧光结合FJB染色组。大... 目的寻找一种Fluoro-Jade B(FJB)染色结合目的蛋白免疫荧光多标的合适方法。方法通过电凝法制作大鼠大脑中动脉闭塞模型(MCAO),诱导皮层缺血半暗带神经元变性。实验分为FJB染色结合蛋白免疫荧光组以及目的蛋白免疫荧光结合FJB染色组。大鼠MCAO后5d断头取脑,脑组织冰冻切片后,按上述两种染色顺序染色,观察两组实验双标的效果。结果 FJB染色结合目的蛋白免疫荧光组中,FJB和蛋白免疫荧光阳性细胞形态清楚,免疫双标效果良好;而蛋白免疫荧光结合FJB染色组,虽然FJB阳性细胞较为清晰,但与之免疫双标的蛋白免疫荧光阳性细胞不清楚,背景模糊,效果不佳。结论在两种免疫双标的方法中,先行FJB染色后再做目的蛋白免疫荧光染色,不会影响蛋白免疫荧光的染色效果,有利于后续实验的进行和观察。 展开更多

关键词 fluoro-jade b 神经元变性 免疫荧光

下载PDF 职称材料

新生大鼠缺氧缺血后不同脑区神经元变性的动态观察 被引量：9

6

作者 辛颖 GEORGE A.WERTHER VINCENZO C.RUSSO 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期1-2,F0002,共3页

目的:观察新生大鼠缺氧缺血(H I)后不同脑区神经元变性的动态变化,探讨其与星形胶质细胞反应的关系。方法:采用F luoro-Jade B(FJB)染色法及免疫组化法分别观察变性神经元荧光染色强度及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的动态变化。结果:正... 目的:观察新生大鼠缺氧缺血(H I)后不同脑区神经元变性的动态变化,探讨其与星形胶质细胞反应的关系。方法:采用F luoro-Jade B(FJB)染色法及免疫组化法分别观察变性神经元荧光染色强度及胶质纤维酸性蛋白(GFAP)表达的动态变化。结果:正常新生大鼠各脑区内均未见FJB阳性细胞,GFAP呈弱表达。H I后1 d即可见FJB阳性细胞,3 d阳性细胞增多,5 d达高峰,以纹状体受累最重,皮质次之,海马各区易损顺序为CA1、CA4、CA2、CA3、齿状回。GFAP表达的强度与FJB阳性细胞数密切相关。结论:新生大鼠H I后脑易损部位为纹状体、皮质、海马,FJB染色是一种标记变性神经元的有效方法,反应性胶质细胞增生是应答神经元损伤的结果。 展开更多

关键词 脑缺氧 脑缺血 nuom-jade b染色 胶质纤维酸性蛋白 神经元

下载PDF 职称材料

西洛他唑对脑缺血后神经元损伤的保护作用 被引量：7

7

作者 陈丽萍 叶夷露 +3 位作者 史文珍 王梦令 张纬萍 魏尔清 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第5期535-539,共5页

目的:观察西洛他唑对小鼠持续性局灶性脑缺血后神经元损伤的剂量依赖性保护作用。方法:以大脑中动脉阻塞诱导小鼠持续性局灶性脑缺血。缺血前30min腹腔注射西洛他唑(3～30mg/kg)和普鲁司特(0.1mg/kg)。观察药物对缺血后神经元形态、密... 目的:观察西洛他唑对小鼠持续性局灶性脑缺血后神经元损伤的剂量依赖性保护作用。方法:以大脑中动脉阻塞诱导小鼠持续性局灶性脑缺血。缺血前30min腹腔注射西洛他唑(3～30mg/kg)和普鲁司特(0.1mg/kg)。观察药物对缺血后神经元形态、密度的影响。结果:脑缺血损伤后,神经元密度降低,变性神经元密度增加。西洛他唑(3～10mg/kg)和普鲁司特能明显增加缺血侧存活神经元密度,减少变性神经元密度。结论:西洛他唑对小鼠持续性局灶性脑缺血后神经元损伤有保护作用。 展开更多

关键词 西洛他唑 脑缺血 神经元 fluoro-jade b染色

下载PDF 职称材料

针刺对大鼠脑出血神经细胞凋亡变性的影响及机制探究 被引量：3

8

作者 李丹 万思琦 +3 位作者 殷岳杉 朱曦 李龙 赵永厚 《针灸临床杂志》 2021年第11期56-62,共7页

目的:通过针刺干预观察大鼠脑出血后神经细胞形态结构、凋亡变性的动态变化,探讨针刺治疗大鼠脑出血后对miR-34a-5p的影响及作用机制。方法:自体血脑内注射建立大鼠脑出血模型,随机分为假手术组、模型组、模型+针刺治疗组、模型+针刺治... 目的:通过针刺干预观察大鼠脑出血后神经细胞形态结构、凋亡变性的动态变化,探讨针刺治疗大鼠脑出血后对miR-34a-5p的影响及作用机制。方法:自体血脑内注射建立大鼠脑出血模型,随机分为假手术组、模型组、模型+针刺治疗组、模型+针刺治疗+阴性对照组和模型+针刺治疗+miR-34a-5p激动剂干预组,每组12只。每组再随机分为1 d、7 d两个亚组。建模12 h后针刺治疗,于1 d、7 d时间点对处死大鼠收集脑组织,HE染色观察脑组织病理学变化,TUNEL和NeuN荧光双染,Fluoro-Jade B染色观察神经元细胞凋亡变性情况。结果:模型组大鼠在脑出血损伤后出现不同程度的炎性反应和神经细胞凋亡坏死。针刺后炎性反应减轻,神经细胞凋亡和变性坏死的数目明显减少(P<0.05),在给予针刺治疗7 d后,TUNEL和NeuN荧光双染实验和Fluoro-Jade B染色实验中阳性细胞数进一步减少。与模型+针刺治疗组比较,激动剂干预组的神经细胞凋亡和变性坏死数目明显增多(P<0.05)。结论:针刺可能通过下调miR-34a-5p减轻神经炎症,促进ICH大鼠神经功能恢复,发挥神经保护作用。 展开更多

关键词 针刺 脑出血 神经细胞凋亡 fluoro-jade b染色

下载PDF 职称材料

乙醇对体外培养大鼠大脑皮层神经细胞分化的影响 被引量：1

9

作者 贾景娜 史为博 +5 位作者 易善勇 王冉 张国忠 马春玲 左敏 李英敏 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期345-351,共7页

目的:观察神经细胞微管相关蛋白2(microtubeasso ciated protein-2,MAP2)、孤儿核受体1(nuclear receptor-related factor 1,NURR1)、拓扑异构酶Ⅱβ(DNA topoisomereⅡβ,TopoⅡβ)在乙醇毒性作用下的表达变化,探讨MAP2、NURR1、Topo... 目的:观察神经细胞微管相关蛋白2(microtubeasso ciated protein-2,MAP2)、孤儿核受体1(nuclear receptor-related factor 1,NURR1)、拓扑异构酶Ⅱβ(DNA topoisomereⅡβ,TopoⅡβ)在乙醇毒性作用下的表达变化,探讨MAP2、NURR1、TopoⅡβ与乙醇导致的神经细胞分化异常的相关关系。方法:取新生鼠(出生24 h内),75%酒精消毒,断头取脑,分离皮层神经细胞接种于培养板,给予剂量75 mmol/L的乙醇培养3 d、5 d、7 d后,采用免疫荧光观察MAP2、NURR1、TopoⅡβ的表达变化;Fluoro-Jade B荧光染色观察神经细胞变性坏死情况。结果:随乙醇染毒时间的延长,原代培养的神经细胞分布较正常对照组稀疏,MAP2的表达发生了变化,以7 d组变化最明显,突起变细变短,阳性表达减弱;NURR1及TopoⅡβ的表达也随乙醇染毒时间的延长,阳性细胞数目及阳性信号表达的强度均呈下降趋势,以7 d最为显著。NURR1阳性细胞计数为(9.6±3.5)与正常对照组的(45.2±3.96)有显著差异(P<0.05)。TopoⅡβ(55.8±3.77)与正常对照组的(86.2±4.82)有明显差异(P<0.05);Fluoro-Jade B荧光标记显示在乙醇染毒5 d组及7 d组均可见阳性细胞。结论:MAP2、NURR1、TopoⅡβ可能参与了乙醇导致的神经细胞分化异常,改变了细胞骨架稳定,最终导致了部分神经细胞的变性坏死。 展开更多

关键词 原代培养 乙醇 神经细胞分化 fluoro-jade b荧光标记 大鼠

下载PDF 职称材料

新生鼠反复低血糖引起神经元变性的动态观察 被引量：1

10

作者 周冬 钱静 +2 位作者 常红 李福海 孙若鹏 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2010年第11期84-89,97,共7页

目的建立新生鼠低血糖脑损伤模型,并观察损伤后不同脑区神经元变性的动态变化。方法 160只新生Wistar大鼠随机分为胰岛素诱导短时间低血糖组(INS-S组,n=40)、胰岛素诱导长时间低血糖组(INS-P组,n=40)、饥饿组(FAS组,n=40)和对照组(CON组... 目的建立新生鼠低血糖脑损伤模型,并观察损伤后不同脑区神经元变性的动态变化。方法 160只新生Wistar大鼠随机分为胰岛素诱导短时间低血糖组(INS-S组,n=40)、胰岛素诱导长时间低血糖组(INS-P组,n=40)、饥饿组(FAS组,n=40)和对照组(CON组,n=40)。在大鼠出生后第2、4、6天分别采用皮下注射胰岛素(15U/kg)和饥饿的手段,诱导新生鼠低血糖;在生后第6天诱导低血糖后2h、6h、1d、3d、7d和14d采用Fluoro-JadeB(FJB)染色法观察7个脑区变性神经元的动态变化,并应用特异性神经核抗原(NeuN)荧光免疫双标对FJB阳性细胞进行细胞类型鉴定。结果 INS-S组、FAS组和CON组新生大鼠各脑区各时间点均未见FJB阳性细胞,而INS-P组在旁矢状面、梨状皮层、海马齿状回、丘脑和下丘脑可见大量的FJB阳性细胞,并同时显示NeuN免疫源性。结论胰岛素(15U/kg)皮下注射可建立稳定可靠的新生鼠低血糖脑损伤模型。新生鼠反复严重低血糖可引起广泛的神经元变性,皮层、丘脑、下丘脑和海马齿状回对低血糖损害更为敏感。 展开更多

关键词 低血糖 模型 动物 fluoro-jade b染色 神经元 大鼠 Wistar 新生

原文传递

X线照射致胚胎大鼠皮质内结构异常

11

作者 李洪鹏 孙永新 +2 位作者 川野仁 吕永利 佟晓杰 《解剖科学进展》 CAS 2008年第4期365-368,共4页

目的探讨胚胎期X线照射引起大鼠皮质内异常结构的形成机理。方法选取妊娠14日(E14)大鼠接受X线(剂量为1.0Gy)照射。采用HE染色、Fluoro Jade B染色及增殖细胞核抗原(PCNA)抗体免疫组化染色观察胚脑的皮质构筑。结果HE染色观察到E14大鼠... 目的探讨胚胎期X线照射引起大鼠皮质内异常结构的形成机理。方法选取妊娠14日(E14)大鼠接受X线(剂量为1.0Gy)照射。采用HE染色、Fluoro Jade B染色及增殖细胞核抗原(PCNA)抗体免疫组化染色观察胚脑的皮质构筑。结果HE染色观察到E14大鼠接受X线照射后大量细胞脱落入侧脑室并在2日后完全清除,Fluoro Jade B染色显示此脱落细胞为阳性。E16及E18的皮质内出现玫瑰环样结构及脑室区的凹陷,且PCNA阳性细胞表达于玫瑰环样结构及脑室区凹陷的细胞株。结论E14大鼠受X线照射可引起广泛的大脑皮质细胞构筑异常和细胞增殖。 展开更多

关键词 X线照射 fluoro jade b 皮质内玫瑰环 凹陷 增殖细胞核抗原

下载PDF 职称材料

胚胎期X线照射致大鼠皮质-纹状体区异常的研究

12

作者 李洪鹏 白旭东 +1 位作者 川野仁 佟晓杰 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期41-46,共6页

为探讨胚胎期X线照射致大鼠皮质-纹状体区的异常,本研究选取妊娠14d(E14)大鼠接受X线(剂量为1.0Gy)照射。照射前2h经尾静脉注入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU),用以标识E14的神经细胞的发生。取不同时期(E14-E18)胚脑用于HE染色、BrdU免疫组... 为探讨胚胎期X线照射致大鼠皮质-纹状体区的异常,本研究选取妊娠14d(E14)大鼠接受X线(剂量为1.0Gy)照射。照射前2h经尾静脉注入5-溴-2-脱氧尿嘧啶(BrdU),用以标识E14的神经细胞的发生。取不同时期(E14-E18)胚脑用于HE染色、BrdU免疫组化染色及Fluoro Jade B(FJB)染色观察。结果显示:HE染色观察到E14大鼠受X线照射后背侧端脑有大量细胞脱落入侧脑室并在2d后被完全清除,而腹侧的皮质-纹状体区在照射后2d形成空洞并于4d后修复。BrdU标识显示腹侧端脑的外侧节隆起的神经细胞移动类似于正常对照组,2d后阳性细胞分布在皮质-纹状体区形成的空洞周围,4d后移动到腹侧皮质板。Fluoro Jade B染色显示照射后1d在皮质-纹状体区有大量阳性细胞,2d后显著减少。本实验结果提示:E14大鼠受X线照射引起外侧节隆起的神经细胞在移动过程中死亡并导致皮质-纹状体区形成空洞,从而引起内囊发生异常。 展开更多

关键词 X线照射 外侧节隆起 皮质-纹状体区 5-溴-2-脱氧尿嘧啶 fluoro jade b 大鼠

下载PDF 职称材料