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乙肝HBV DNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性分析 被引量:19
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作者 朱子犁 古丽巴哈尔 +4 位作者 刘建军 阳帆 汪洪富 张海龙 何建凡 《中国热带医学》 CAS 2006年第7期1138-1139,共2页
目的研究乙肝血清学标志物(HBV-M)结果与HBV-DNA水平的关系,分析HBV DNA阳性率在各年龄组的分布情况。方法对深圳市部分服务行业人员血清应用荧光定量PCR检测和ELISA法检测并对结果进行分析。结果1 781例乙肝血清学标志物阳性血清中有1 ... 目的研究乙肝血清学标志物(HBV-M)结果与HBV-DNA水平的关系,分析HBV DNA阳性率在各年龄组的分布情况。方法对深圳市部分服务行业人员血清应用荧光定量PCR检测和ELISA法检测并对结果进行分析。结果1 781例乙肝血清学标志物阳性血清中有1 102例HBV-DNA阳性。其中883例1.3.5阳性(俗称“大三阳”)血清中HBV-DNA的阳性率为96.15%;722例1.4.5阳性(俗称“小三阳”)血清中HBV-DNA的阳性率为24.38%;138例1.5阳性血清中HBV-DNA的阳性率为38.41%;22例1.3阳性血清中HBV-DNA的阳性率为90.91%;11例HBsAg阳性血清中HBV-DNA阳性率为36.36%。结论两种方法检测乙肝标志物有密切的相关性。荧光定量PCR是检测HBV-DNA含量较精确的方法,能正确反映乙肝病毒的复制水平和活跃程度;HBsAg和HBeAg与HBV-DNA含量有着明显的相关关系。 展开更多
关键词 乙肝病毒 HBV-DNA ELISA 荧光定量pcr 相关性
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FQ-PCR法分析葛根芩连汤对抗生素相关性腹泻模型肠道肠球菌数量的改变 被引量:6
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作者 刘茜明 杨光勇 +6 位作者 何光志 田维毅 蔡琨 王平 黄高 梁建东 王文佳 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2016年第9期19-22,28,287,共6页
为了检测葛根芩连汤在治疗抗生素相关性腹泻(AAD)时对模型肠道肠球菌的影响,试验采用氨苄西林灌胃巴马小型猪复制AAD模型,通过制备标准品DNA、构建标准曲线以建立检测肠球菌的FQ-PCR法,利用建立的FQ-PCR法检测对照组(3头)、模型组(3头)... 为了检测葛根芩连汤在治疗抗生素相关性腹泻(AAD)时对模型肠道肠球菌的影响,试验采用氨苄西林灌胃巴马小型猪复制AAD模型,通过制备标准品DNA、构建标准曲线以建立检测肠球菌的FQ-PCR法,利用建立的FQ-PCR法检测对照组(3头)、模型组(3头)、葛根芩连汤7 d治疗组(3头)和葛根芩连汤14 d治疗组(3头)的十二指肠、空肠、回肠、盲肠和结肠内容物中肠球菌的数量。结果表明:通过标准曲线的构建得到肠球菌的标准曲线方程;与对照组相比,模型组肠道内肠球菌含量显著降低(P<0.05);与模型组相比,葛根芩连汤治疗组肠球菌在各个肠段中数量明显上升(P<0.05)。说明FQ-PCR法可以用于AAD模型治疗前后肠道肠球菌的数量检测。 展开更多
关键词 fq-pcr 氨苄西林 葛根芩连汤 抗生素相关性腹泻(AAD) 巴马小型猪 肠球菌
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黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的荧光定量PCR检测 被引量:5
3
作者 张莉 曹春兰 +1 位作者 王树杰 张丽 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2006年第24期3430-3431,共2页
目的:调查黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的情况。方法:采用荧光定量PCR方法对203例黄疸婴儿尿液标本进行HCMV-DNA定量检测。结果:在所检测的203例婴儿中,HCMV-DNA阳性的有52例,感染率为25.62%。HCMV-DNA拷贝数与黄疸持续时间无相关性。结... 目的:调查黄疸婴儿人类巨细胞病毒感染的情况。方法:采用荧光定量PCR方法对203例黄疸婴儿尿液标本进行HCMV-DNA定量检测。结果:在所检测的203例婴儿中,HCMV-DNA阳性的有52例,感染率为25.62%。HCMV-DNA拷贝数与黄疸持续时间无相关性。结论:HCMV是引起婴儿黄疸的主要原因之一,荧光定量PCR检测婴儿尿液中的HCMV-DNA快速、方便,检出率高,可及时诊断出巨细胞病毒的感染,以便及时治疗,降低畸形儿发生率。 展开更多
关键词 人类巨细胞病毒 黄疸CMV-DNA 荧光定量pcr
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乙肝HBV DNA荧光定量检测与血清标志物结果相关性 被引量:5
4
作者 钱东林 《临床合理用药杂志》 2009年第24期13-14,共2页
目的研究乙肝血清学标志物(HBV-M)与HBV-DNA水平的关系,分析HBV-DNA与乙肝5项的相关性。方法随机抽取的门诊和住院患者血清502份,应用荧光定量PCR检测HBV-DNA和免疫化学发光法检测乙肝血清学标志物并对结果进行分析。结果259份HBV-DNA... 目的研究乙肝血清学标志物(HBV-M)与HBV-DNA水平的关系,分析HBV-DNA与乙肝5项的相关性。方法随机抽取的门诊和住院患者血清502份,应用荧光定量PCR检测HBV-DNA和免疫化学发光法检测乙肝血清学标志物并对结果进行分析。结果259份HBV-DNA阳性。其中123份1.3.5阳性(大三阳)血清中HBV-DNA的阳性率为92.48%;113份1.4.5阳性(小三阳)血清中HBV-DNA的阳性率为48.09%;12份1.5阳性血清中HBV-DNA的阳性率为40.00%;11份1.3.4.5阳性血清中HBV-DNA的阳性率为78.57%,大三阳的阳性率与PCR-DNA的阳性率差异有统计学意义(P<0.01)。结论HBV-M与HBV-DNA两者之间互有联系但又有不同。对乙型肝炎患者进行多项指标的联合检测,对于临床判断其传染性及治疗效果非常必要。 展开更多
关键词 乙肝病毒血清标志物 HBV—DNA 免疫化学发光法 荧光定量pcr 相关性
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猪瘟病毒荧光定量PCR标准阳性模板的构建 被引量:4
5
作者 陆永干 戴贤君 +1 位作者 姚建红 黄利权 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期35-38,共4页
设计扩增猪瘟病毒(swine fever virus,SFV)核酸5′端非翻译区的引物,采用RT-PCR方法克隆目的片段并插入PMD-18 simple T质粒,重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒经PCR和序列测定证实为阳性重组质粒,命名为pSF。将构建... 设计扩增猪瘟病毒(swine fever virus,SFV)核酸5′端非翻译区的引物,采用RT-PCR方法克隆目的片段并插入PMD-18 simple T质粒,重组质粒转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,提取质粒经PCR和序列测定证实为阳性重组质粒,命名为pSF。将构建的pSF作为标准阳性模板进行荧光定量PCR(FQ-PCR)检测表明,此模板在-20℃保存6个月对结果无显著影响;对于1×10^9,1×10^7,1×10^5拷贝/2μl的pSF用FQ-PCR方法测定的Ct值最大变异系数分别为1.55%;使用该模板建立的定量范围为1×10^2—1×10^11拷贝/2μl;构建的阳性重组质粒pSF具有良好的稳定性和特异性。该方法可以用于临床诊断。 展开更多
关键词 猪瘟病毒 荧光定量pcr 重组质粒
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荧光定量PCR用于按蚊体内疟原虫子孢子检测的研究 被引量:3
6
作者 刘耀宝 周华云 +7 位作者 汪圣强 李菊林 朱韩武 朱国鼎 顾亚萍 王伟明 曹俊 高琪 《中国血吸虫病防治杂志》 CAS CSCD 2012年第4期445-449,共5页
目的建立一种用于按蚊体内疟原虫子孢子定量检测和虫种鉴别的荧光定量PCR方法。方法采用针对4种人体疟原虫18S rRNA基因属特异性保守区的1对引物,以疟原虫18S rRNA基因重组质粒与按蚊DNA的混合物为模板,进行反应体系和反应条件优化,验... 目的建立一种用于按蚊体内疟原虫子孢子定量检测和虫种鉴别的荧光定量PCR方法。方法采用针对4种人体疟原虫18S rRNA基因属特异性保守区的1对引物,以疟原虫18S rRNA基因重组质粒与按蚊DNA的混合物为模板,进行反应体系和反应条件优化,验证方法的特异性,并通过熔解曲线分析进行虫种鉴别。应用阴性按蚊DNA稀释的间日疟原虫18S rRNA基因重组质粒为模板制作标准曲线,并分别以质粒DNA和实验室子孢子感染阳性的按蚊DNA为模板分析建立的荧光定量PCR方法的敏感性。在反应体系中加入不同部位、不同用量按蚊DNA,以探讨按蚊DNA对检测效果的影响。结果该方法对按蚊、人血DNA均无扩增,对4种疟原虫DNA均有特异性扩增且扩增产物的熔解温度(Tm)易于区分,三日疟原虫、恶性疟原虫、卵形疟原虫和间日疟原虫的Tm值分别为71.0、72.7、73.9℃和75.9℃。标准曲线中循环阈值(Ct值)与模板浓度具有良好的相关性(相关系数r=-0.99)。最低可以检出含50拷贝的质粒DNA或32倍稀释的子孢子阳性按蚊DNA样本。按蚊DNA对荧光定量PCR反应具有抑制作用。荧光定量PCR的Ct值在实验内和实验间均具有良好的重现性。结论新建立的SYBR Green I染料荧光定量PCR方法具有较高的敏感性和特异性,可用于按蚊体内疟原虫子孢子的检测,并可同时对4种人体疟原虫进行鉴别。 展开更多
关键词 荧光定量pcr 按蚊 疟原虫子孢子 虫种鉴别
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HIV/AIDS患者外周血EBV-DNA检测结果分析 被引量:3
7
作者 吴驰 赖文杰 +4 位作者 陈建波 刘厚明 肖颜玉 叶飞娣 单万水 《中国热带医学》 CAS 2012年第5期609-611,共3页
目的了解深圳地区人免疫缺陷病毒(HIV)阳性患者和艾滋病(AIDS)患者外周血中EB病毒DNA的检出情况。方法收集257例HIV/AIDS患者外周血标本,采用实时荧光定量PCR技术检测EB病毒DNA水平。比较不同年龄、性别、门诊及住院HIV/AIDS患者的EBV-... 目的了解深圳地区人免疫缺陷病毒(HIV)阳性患者和艾滋病(AIDS)患者外周血中EB病毒DNA的检出情况。方法收集257例HIV/AIDS患者外周血标本,采用实时荧光定量PCR技术检测EB病毒DNA水平。比较不同年龄、性别、门诊及住院HIV/AIDS患者的EBV-DNA阳性率并进行统计学分析。结果 HIV/AIDS患者EBV-DNA总检出率为32.30%(83/257),住院AIDS患者检出率为43.96%(40/91)明显高于门诊HIV/AIDS患者检出率(25.90%,43/166)。结论 HIV/AIDS患者外周血中EBV-DNA检出率较高,EBV-DNA阳性检出率随着HIV/AIDS患者病情的加重而增加。 展开更多
关键词 HIV/AIDS EB病毒 荧光定量pcr 外周血
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FQ-PCR技术结合支原体培养及药敏对诊治阴道解脲脲原体感染的回顾性分析 被引量:2
8
作者 胡淑芬 曹小云 +1 位作者 郭仲辉 高慧 《中国优生与遗传杂志》 2008年第5期25-26,共2页
目的通过阴道解脲脲原体感染的病例进行回顾性分析,为诊治阴道解脲脲原体感染提供科学依据。方法对妇科门诊就诊的怀疑阴道解脲脲原体感染的病例首先采用荧光定量PCR测定解脲脲原体,根据UU-DNA拷贝数给予经验用药,用药两周停药1周后复... 目的通过阴道解脲脲原体感染的病例进行回顾性分析,为诊治阴道解脲脲原体感染提供科学依据。方法对妇科门诊就诊的怀疑阴道解脲脲原体感染的病例首先采用荧光定量PCR测定解脲脲原体,根据UU-DNA拷贝数给予经验用药,用药两周停药1周后复查支原体培养及药敏,培养阳性者按药敏结果给药2周,停药2周后再复查UU-DNA。结果经验用药1疗程后52.6%的患者支原体培养转阴性,47.4%的阳性患者按药敏结果给药1疗程再复查UU-DNA,78.2%转阴性。 展开更多
关键词 解脲脲原体 荧光定量pcr 培养及药敏试验
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胃癌及其转移淋巴结组织中胰岛素样生长因子-I的表达及其临床意义
9
作者 李鹏胜 彭俊生 肖方联 《实用癌症杂志》 2006年第6期579-581,共3页
目的探讨IGF-I在胃癌发生发展中的作用及其临床意义。方法应用荧光定量RT-PCR法,检测40例胃癌及其转移淋巴结组织中的IGF-I表达情况,以40例消化道溃疡胃组织标本作对照,将其表达结果和患者临床病理指标进行综合分析。结果胃癌中IGF-I的... 目的探讨IGF-I在胃癌发生发展中的作用及其临床意义。方法应用荧光定量RT-PCR法,检测40例胃癌及其转移淋巴结组织中的IGF-I表达情况,以40例消化道溃疡胃组织标本作对照,将其表达结果和患者临床病理指标进行综合分析。结果胃癌中IGF-I的表达[(9.24±3.16)×104拷贝/μgRNA]明显高于正常胃黏膜组织[(2.09±1.05)×103拷贝/μgRNA](P<0.05);TNM分期中Ⅰ+Ⅱ期IGF-I表达[(7.35±1.24)×104拷贝/μgRNA]低于Ⅲ+Ⅳ期[(1.05±3.44)×105拷贝/μgRNA](P<0.05);癌转移淋巴结组织IGF-I表达[(1.03±0.36)×105拷贝/μgRNA]明显高于无癌转移淋巴结[(7.62±1.17)×104拷贝/μgRNA](P<0.05)。结论IGF-I在胃癌组织中的高表达可能与胃癌的发生、发展有关;癌转移淋巴结组织中IGF-I表达量明显增高,提示IGF-I有可能参与了胃癌的侵袭和转移。 展开更多
关键词 胃癌 胰岛素样生长因子-Ⅰ 荧光定量RT—pcr
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乙肝病毒DNA水平与表面抗原滴度水平比较
10
作者 赵锦 潘建军 +3 位作者 何建凡 谢远辉 吴平芳 张倩 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期592-593,共2页
目的 比较荧光定量PCR检测乙肝病毒与表面抗原滴度检测的结果符合率,探讨PCR检测HBVDNA方法的应用前景。方法 抽取服务行业从业人员体检血清10 2 5份,进行HBV荧光定量PCR和ELISA结果以及表面抗原滴度检测结果的比对分析,以确认标准方... 目的 比较荧光定量PCR检测乙肝病毒与表面抗原滴度检测的结果符合率,探讨PCR检测HBVDNA方法的应用前景。方法 抽取服务行业从业人员体检血清10 2 5份,进行HBV荧光定量PCR和ELISA结果以及表面抗原滴度检测结果的比对分析,以确认标准方法。结果 荧光PCR与乙肝两对半ELISA结果相比符合一般规律,而PCR检测结果与表面抗原滴度结果无明显相关性。结论 HBVDNA定量对治疗及确认是否具传染性起指导作用,可以取代表面抗原滴度检测方法对E抗原阴性而表面抗原阳性的服务行业从业人员进行传染性判定。 展开更多
关键词 荧光定量pcr(fq-pcr) HBV DNA 表面抗原滴度
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FQ-PCR联合Sanger测序法检测结直肠癌患者表皮生长因子受体、KRAS及BRAF基因突变
11
作者 程鹏飞 林佳 唐景峰 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2014年第8期1086-1091,共6页
目的建立实时荧光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)联合Sanger测序法快速检测结直肠癌患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、KRAS和BRAF基因突变的方法。方法根据结直肠癌中EGFR、KRAS和BRAF基... 目的建立实时荧光定量PCR(fluorescent quantitative PCR,FQ-PCR)联合Sanger测序法快速检测结直肠癌患者表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)、KRAS和BRAF基因突变的方法。方法根据结直肠癌中EGFR、KRAS和BRAF基因常见突变类型设计引物及其TaqMan探针序列,以提取的86份结直肠癌患者肿瘤组织DNA为模板,进行FQ-PCR扩增,PCR产物经SAP酶和EXOⅠ酶作用后,收集酶切产物,进行测序PCR扩增,扩增产物经乙醇/醋酸钠法纯化后进行测序,测序结果采用Bioedit软件进行分析;检测EGFR、KRAS及BRAF基因突变,并与FQ-PCR法检测KRAS12/13密码子突变进行比较。结果成功建立了FQ-PCR联合Sanger测序法检测结直肠癌患者样本中EGFR、KRAS和BRAF基因突变的方法,各基因PCR扩增曲线均为标准的"S"型荧光扩增曲线,测序峰图清晰、稳定。86份结直肠癌样本中,EGFR基因突变概率2.3%(2/86),均为第21号外显子点突变,突变类型为L858R和L861Q;KRAS基因突变概率33.7%(29/86),其中第12位密码子突变占79.3%(23/29),突变类型为G12D和G12V,第13位密码子突变占10.3%(3/29),突变类型为G13D,第12和13位密码子同时突变1例(3.4%),第61位密码子未检测到突变,第146位密码子仅检测到2例突变,占6.9%(2/29),突变类型均为A146V;BRAF基因未检测到突变。FQ-PCR法检测KRAS12/13密码子突变概率高于FQ-PCR联合Sanger测序法,但差异无统计学意义(P>0.05),两种检测方法的总体符合率为97.7%(84/86)。结论实时FQ-PCR联合Sanger测序法可快速检测结直肠癌患者中EGFR、KRAS和BRAF基因突变,检测方法稳定、可靠。 展开更多
关键词 荧光定量pcr 结直肠癌 基因突变 测序
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荧光定量PCR技术在植物研究中的应用 被引量:29
12
作者 马月萍 戴思兰 马艳蓉 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期37-45,共9页
荧光定量PCR技术是近年发展起来的一种用于基因定量分析的PCR方法,自问世以来在基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等领域应用较为广泛。在植物研究方面应用起步较晚,现已开始用于植物基因表达分析、外源基因基因鉴定等方面的... 荧光定量PCR技术是近年发展起来的一种用于基因定量分析的PCR方法,自问世以来在基础科学研究、临床诊断、疾病研究及药物研发等领域应用较为广泛。在植物研究方面应用起步较晚,现已开始用于植物基因表达分析、外源基因基因鉴定等方面的研究。介绍了实时荧光定量PCR技术的原理、优缺点和试验中潜在问题和条件的优化,并对其在植物研究中的应用及前景作了探讨。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr技术 植物 基因表达
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实时荧光定量PCR技术及其在昆虫学研究中的应用 被引量:10
13
作者 王光华 赵伟春 程家安 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1293-1303,共11页
实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)是一种利用荧光信号实时监测体外DNA分子PCR复制过程中每个循环的扩增产物,从而实现对DNA模板进行定量分析的技术,具有准确、快速、灵敏、特异... 实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,FQ-PCR)是一种利用荧光信号实时监测体外DNA分子PCR复制过程中每个循环的扩增产物,从而实现对DNA模板进行定量分析的技术,具有准确、快速、灵敏、特异等优点,在动植物基因工程、动植物检疫、微生物鉴定与分类、食品安全检测和医学等领域中得到广泛应用。本文对实时荧光定量PCR技术的原理、优缺点及近年来新的荧光探针的原理、类型进行了评述,并对实时荧光定量PCR技术在昆虫学研究中的应用进行了综述。 展开更多
关键词 DNA 实时荧光定量pcr 荧光共振能量转移 探针 昆虫学
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实时荧光定量PCR技术及其在几类病原体检测中的应用 被引量:7
14
作者 李海红 侯锡苗 《职业与健康》 CAS 2015年第18期2586-2589,共4页
实时荧光定量PCR是传统PCR技术与光谱技术相结合而发展起来的核酸定量技术,它具有特异性强、重复性好和PCR污染少等优点。作者对实时荧光定量PCR技术的原理、影响因素以及在临床病原体的快速检测和诊断应用方面进行了综述。
关键词 实时荧光定量pcr 水解探针 影响因素 病原体 应用
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Application of Real-time Fluorescent Quantitative PCR in Studies on Plants 被引量:3
15
作者 Yueping MA Silan DAI Yanrong MA 《Agricultural Biotechnology》 CAS 2012年第1期1-7,共7页
Real-Lime fluorescent quantitative PCR is a method for quantitative analysis of gene expression developed in recent years, which has been widely used in various fields such as basic scientific research, clinical diagn... Real-Lime fluorescent quantitative PCR is a method for quantitative analysis of gene expression developed in recent years, which has been widely used in various fields such as basic scientific research, clinical diagnosis, disease study, drug research and development since its appearance. It starts relatively late in study on plants, but has already been used for analysis of gene expression in plants and gene identification of exogenous genes. The principles or advantages and dis- advantages of real-time fluorescent quantitative PCR, or its potential problems and condition optimizations in tests were introduced in this study, and then the appli- cation and prospect of real-time fluorescent quantitative PCR in study on plants were also been discussed. 展开更多
关键词 Real-time fluorescent quantitative pcr fq-pcr PLANT C ene expression
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实时荧光定量PCR反应体系的优化研究 被引量:3
16
作者 袁坤 张丹 +1 位作者 刘新琼 张向明 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期134-136,共3页
为了降低实时荧光定量PCR(Real-Time Fluorescent Quantitative PCR,FQ-PCR)技术的实验成本,提高利用效率,对影响FQ-PCR较敏感的因素二甲基亚砜(DMSO)、甘油和Mg2+等进行了优化试验。结果表明,10μL反应体系的最优组分为:1×rTaqBuf... 为了降低实时荧光定量PCR(Real-Time Fluorescent Quantitative PCR,FQ-PCR)技术的实验成本,提高利用效率,对影响FQ-PCR较敏感的因素二甲基亚砜(DMSO)、甘油和Mg2+等进行了优化试验。结果表明,10μL反应体系的最优组分为:1×rTaqBuffer,0.16 mmol/L dNTPs,0.24μmol/L Primer,2.5 mmol/L Mg2+,5%甘油,5%DMSO,1×SYBR Green I,0.8 U rTaq酶,100 ng模板。该反应体系为经济型FQ-PCR的广泛应用奠定了基础。 展开更多
关键词 实时荧光定量pcr 实验技术 优化
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水稻白叶枯病抗性基因Xa7候选基因的实时荧光定量表达分析 被引量:3
17
作者 韦靖鸾 陈深 +3 位作者 曾列先 杨健源 刘新琼 朱小源 《分子植物育种》 CAS CSCD 2011年第1期9-16,共8页
水稻白叶枯病抗性基因Xa7精细定位的区域包括三个与抗性相关的候选基因。为研究这三个候选基因在水稻抗性反应中的作用,本研究利用水稻白叶枯黄单胞菌SCB4-1(Ⅳ型菌)接种分别在20℃、26℃和32℃条件下栽培的感病品种IR24及其含有Xa7基... 水稻白叶枯病抗性基因Xa7精细定位的区域包括三个与抗性相关的候选基因。为研究这三个候选基因在水稻抗性反应中的作用,本研究利用水稻白叶枯黄单胞菌SCB4-1(Ⅳ型菌)接种分别在20℃、26℃和32℃条件下栽培的感病品种IR24及其含有Xa7基因的近等基因系IRBB7,采集接种前0d(对照),及接种后0.5d、1d、2d、3d、4d、5d和6d的叶片,通过实时荧光定量PCR技术,研究在不同温度条件下Xa7三个候选基因(CG-XA7-1、CG-XA7-2、CG-XA7-3)在IRBB7和IR24中的表达情况。研究结果表明,在20℃条件下,CG-XA7-1和CG-XA7-2在IRBB7的表达量比IR24的低,CG-XA7-3的个别时间点在IRBB7的表达量比IR24的高,但并不显著;在26℃和32℃条件下,三个候选基因在IRBB7的表达量比IR24的高。对于抗病品种IRBB7,三个候选基因在26℃时的相对表达量比在20℃和32℃的高;对于感病品种IR24,三个候选基因在20℃时的相对表达量比在26℃和32℃的高。根据白叶枯病的发生适宜气温为25~30℃,而20℃以下和33℃以上该病发生受抑制的特点,测试的三个候选基因的表达量与水稻白叶枯病抗性有较高的相关性,可能在白叶枯病抗性反应中发挥一定的作用。 展开更多
关键词 白叶枯病 抗性基因Xa7 实时荧光定量pcr 表达分析
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急性呼吸道感染患儿人冠状病毒NL63检测与分析
18
作者 陈云欢 伍严安 《中国实用儿科杂志》 CSCD 北大核心 2010年第12期916-919,共4页
目的建立人冠状病毒NL63(human coronavirus NL63)的实时荧光定量PCR(real-time fluorescentquantitative PCR,FQ-PCR)方法,了解呼吸道疾病患儿感染人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)的情况。方法收集2008年10月至2009年4月因急性呼吸道感染(AR... 目的建立人冠状病毒NL63(human coronavirus NL63)的实时荧光定量PCR(real-time fluorescentquantitative PCR,FQ-PCR)方法,了解呼吸道疾病患儿感染人冠状病毒NL63(HCoV-NL63)的情况。方法收集2008年10月至2009年4月因急性呼吸道感染(ARTI)而就诊于福建医科大学省立临床医学院患儿的咽拭子、鼻咽抽吸物、痰标本共151份,设计多聚酶蛋白1a基因的引物和Taqman探针,扩增1a基因片段,并将其克隆到PMD18-T载体上,构建质粒标准品,建立FQ-PCR检测方法,进行敏感性、特异性试验。扩增核衣壳蛋白N基因,对其序列进行初步分析。结果所建立的FQ-PCR方法特异性好,线性范围为101~1010copies/μL,变异系数小于5%。151份临床标本中共检测到2份HCoV-NL63阳性,阳性率为1.3%(2/151)。结论采用FQ-PCR方法可以检测急性呼吸道疾病患儿感染HCoV-NL63的情况。 展开更多
关键词 人冠状病毒NL63(HCoV-NL63) 急性呼吸道感染(ARTI) 实时荧光定量pcr N基因
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糖皮质激素受体-α mRNA在健康鼻腔不同区域黏膜中定量表达的研究 被引量:4
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作者 李鹏 李源 +5 位作者 张革化 王振霖 叶进 王涛 杨钦泰 胡斌 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2006年第3期161-163,167,共4页
目的检测糖皮质激素受体-α(GR-α)mRNA在健康鼻腔下鼻甲、中鼻甲、钩突黏膜中的定量表达,并探讨其在鼻息肉发生发展中的意义。方法采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)检测健康鼻腔下鼻甲、中鼻甲、钩突黏膜中GR-αmRNA的定量表达。结果... 目的检测糖皮质激素受体-α(GR-α)mRNA在健康鼻腔下鼻甲、中鼻甲、钩突黏膜中的定量表达,并探讨其在鼻息肉发生发展中的意义。方法采用荧光定量逆转录PCR(FQ-RT-PCR)检测健康鼻腔下鼻甲、中鼻甲、钩突黏膜中GR-αmRNA的定量表达。结果GR-αmRNA表达在鼻腔正常下鼻甲黏膜为(135.4±5.2)×104拷贝/μg,高于中鼻甲、钩突黏膜(115.9±5.5)×104拷贝/μg,(113.4±6.7)×104拷贝/μg,前者与后两组之间有统计学意义(P<0.01)。结论中鼻甲、钩突黏膜中GR-αmRNA低表达,可能是窦口-鼻道复合体区易发生鼻息肉的机制之一。 展开更多
关键词 鼻息肉/遗传学 糖皮质激素类 糖皮质激素受体-Α 荧光定量pcr
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异常妊娠史孕妇弓形虫感染情况调查 被引量:3
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作者 刘长生 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第9期718-718,660,共2页
采用实时荧光定量PCR调查了419例有异常妊娠史孕妇和178例无异常妊娠史孕妇(对照组)弓形虫感染情况,结果两组孕妇弓形虫感染率分别为22.20%(93/419)和4.49%(8/178),差异有统计学意义(χ2=23.44,P<0.05)。419例孕妇中怀孕早期、中期... 采用实时荧光定量PCR调查了419例有异常妊娠史孕妇和178例无异常妊娠史孕妇(对照组)弓形虫感染情况,结果两组孕妇弓形虫感染率分别为22.20%(93/419)和4.49%(8/178),差异有统计学意义(χ2=23.44,P<0.05)。419例孕妇中怀孕早期、中期和晚期孕妇弓形虫感染率分别为22.84%(53/232)、21.56%(22/102)和21.18%(18/85),各期感染率差异无统计学意义(P均>0.05)。101例弓形虫感染者经药物治疗后转阴率为85.14%(86/101)。 展开更多
关键词 弓形虫 感染 实时定量pcr 孕妇
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