目的:建立荧光微量 DNA 含量测定方法,用于重组细胞因子的质量控制。方法:应用 PicoGreen 荧光试剂与 DNA 结合能产生可激发荧光的复合物、再用荧光酶标仪对复合物进行检测并用 SOFTmaxPRO 分析软件进行分析。结果:该荧光法 DNA检测灵...目的:建立荧光微量 DNA 含量测定方法,用于重组细胞因子的质量控制。方法:应用 PicoGreen 荧光试剂与 DNA 结合能产生可激发荧光的复合物、再用荧光酶标仪对复合物进行检测并用 SOFTmaxPRO 分析软件进行分析。结果:该荧光法 DNA检测灵敏度达到312 pg·mL^(-1),DNA 含量在0.31～80n·mL^(-1)范围内线性良好,r≥0.996。应用该法对7种重组细胞因子共13批制品的外源 DNA 含量进行测定,结果表明:除重组人 BMP 和 IL-11以外,其它重组细胞因子 DNA 含量均小于10ng·剂量^(-1),与地高辛标记的 DNA 杂交试验结果基本一致。结论:该方法具有简便、快速、自动化程度高等特点,可用于重组细胞因子残余外源 DNA 含量的常规检定。展开更多
文摘目的:建立荧光微量 DNA 含量测定方法,用于重组细胞因子的质量控制。方法:应用 PicoGreen 荧光试剂与 DNA 结合能产生可激发荧光的复合物、再用荧光酶标仪对复合物进行检测并用 SOFTmaxPRO 分析软件进行分析。结果:该荧光法 DNA检测灵敏度达到312 pg·mL^(-1),DNA 含量在0.31～80n·mL^(-1)范围内线性良好,r≥0.996。应用该法对7种重组细胞因子共13批制品的外源 DNA 含量进行测定,结果表明:除重组人 BMP 和 IL-11以外,其它重组细胞因子 DNA 含量均小于10ng·剂量^(-1),与地高辛标记的 DNA 杂交试验结果基本一致。结论:该方法具有简便、快速、自动化程度高等特点,可用于重组细胞因子残余外源 DNA 含量的常规检定。
