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乙肝病毒外膜大蛋白临床应用价值研究 被引量：7
1
作者 谭太昌 王智斌 《临床和实验医学杂志》 2008年第10期27-28,共2页
目的检测乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(LHBs),并与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)和乙肝病毒前S1抗原(PreS1Ag)相比较,探讨LHBs的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测140例乙肝患者血清中LHBs,乙肝病毒标志物(HBV-M... 目的检测乙肝患者血清中乙肝病毒外膜大蛋白(LHBs),并与乙肝病毒脱氧核糖核酸(HBV DNA)和乙肝病毒前S1抗原(PreS1Ag)相比较,探讨LHBs的临床应用价值。方法采用酶联免疫吸附实验(ELISA)检测140例乙肝患者血清中LHBs,乙肝病毒标志物(HBV-M)、HBV PreS1Ag,同时采用荧光定量聚合酶链式反应(PCR)方法对血清HBVDNA进行检测,并进行统计分析。结果在所研究的各种模式中,LHBs与HBV DNA的检出率差异均无统计学意义(P均>0.05)并且LHBs的总阳性率(76.43%)高于PreS1Ag阳性率(44.29%)和乙肝e抗原(HBeAg)的阳性率(29.29%),差异有统计学意义(P均<0.05)。结论乙肝病毒外膜大蛋白在一定程度可以反映HBV感染者体内病毒复制情况。其作为HBV复制指标,灵敏度高于PreS1Ag和HBeAg,可作为判断HBV感染者体内乙肝病毒复制情况新的血清学指标,尤其是针对HBeAg阴性患者。 展开更多
关键词 乙肝病毒外膜大蛋白 前S1抗原 HBV—DNA ELISA PCR
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超级化激活环核苷酸调控通道基因家族-2在风湿性心脏病二尖瓣狭窄伴心房颤动患者右心耳组织中的表达 被引量：6
2
作者 刘文洲 周华富 +3 位作者 孙宇 王俊龙 赵春鹤 冯旭 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期649-651,共3页
目的 观察超级化激活环核苷酸调控通道基因家族-2（HCN2）在风湿性心脏病二尖瓣狭窄伴心房颤动患者右心房组织中的表达,探讨伴发心房颤动的发生机制.方法 收集43例风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者右心耳组织,实验组为并发心房颤动患者（AF组... 目的 观察超级化激活环核苷酸调控通道基因家族-2（HCN2）在风湿性心脏病二尖瓣狭窄伴心房颤动患者右心房组织中的表达,探讨伴发心房颤动的发生机制.方法 收集43例风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者右心耳组织,实验组为并发心房颤动患者（AF组）,对照组为窦性心律患者（SR组）,采用荧光定量聚合酶链反应法（FQ-PCR）、Western blot法和免疫组织化学法,检测风湿性心脏病二尖瓣狭窄患者右心耳组织中HCN2 mRNA及蛋白的表达.结果 FQ-PCR结果显示AF组和SR组HCN2 mRNA表达量分别为0.70±0.14和0.39±0.08;而Western blot结果显示AF组和SR组HCN2蛋白表达量分别为0.52±0.19和0.21 ±0.12,AF组均明显高于SR组（P＜0.01）;免疫组织化学结果显示AF组右心耳心肌细胞溶解、肥厚并广泛间质纤维化,且HCN2蛋白表达量明显高于SR组（P＜0.01）.结论 HCN2在风湿性心脏病二尖瓣狭窄伴心房颤动患者右心耳组织中表达明显上调,并参与其心房颤动的发生发展过程. 展开更多
关键词 风湿性心脏病二尖瓣狭窄 心房颤动 超级化激活环核苷酸调控通道基因家族-2 荧光定量聚合酶链反应
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应用竞争性荧光定量聚合酶链反应检测乙型肝炎病毒DNA 被引量：2
3
作者 刘蓉 李明远 +8 位作者 张发强 夏增亮 闫乃红 王玲 卢亦路 夏庆杰 陈清英 卢军 夏军 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2007年第12期1421-1424,共4页
目的:建立竞争性荧光定量聚合酶链反应(CFQ-PCR),并探讨CFQ-PCR在乙型肝炎病毒(HBV)临床检测中的意义.方法:根据HBV病毒adr亚型基因组序列合成一对HBV特异的引物,和一条特异的TaqMan探针;根据上述引物序列,采用分子克隆技术制备内对照D... 目的:建立竞争性荧光定量聚合酶链反应(CFQ-PCR),并探讨CFQ-PCR在乙型肝炎病毒(HBV)临床检测中的意义.方法:根据HBV病毒adr亚型基因组序列合成一对HBV特异的引物,和一条特异的TaqMan探针;根据上述引物序列,采用分子克隆技术制备内对照DNA;再根据内对照序列合成一条内对照DNA特异的与上述TaqMan探针不同标记的TaqMan探针;将适量的内对照DNA加入到PCR反应体系中,使其与HBV靶序列共扩增.结果:在30μL CFQ-PCR反应体系中,加入约20拷贝内对照DNA能够稳定地获得共扩增曲线;经琼脂糖凝胶电泳分析,加入约100-500拷贝内对照DNA能够有效地获得共扩增产物条带信号;在210个临床HBsAg阳性血清标本的CFQ-PCR扩增中识别出8个未能有效扩增的标本,60份HBsAg阴性血清标本中识别出2个内对照未能有效扩增的标本,后经DNA纯化处理,上述全部标本的内对照均获得阳性扩增结果,其中有7个HBsAg阳性血清标本获得HBV DNA扩增阳性结果.结论:CFQ-PCR能够有效地提示临床标本HBV DNA体外扩增时由于扩增失败导致的假阴性,适合临床推广应用. 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 竞争性荧光定量聚合酶链反应 假阴性
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转移抑制因子1基因在结直肠腺瘤和结直肠癌组织中的表达及意义
4
作者 孟晓明 王爱民 +2 位作者 樊丽伟 李洵 张东娇 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期45-47,共3页
目的观察转移抑制因子1（MTSS1）基因在结直肠腺瘤和结直肠癌的表达，探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学及荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测MTSS1在20例正常结直肠黏膜、30例结直肠癌以及80例结直肠腺瘤组织中的表达。结果MTSS... 目的观察转移抑制因子1（MTSS1）基因在结直肠腺瘤和结直肠癌的表达，探讨其临床意义。方法采用免疫组织化学及荧光定量聚合酶链反应（PCR）方法检测MTSS1在20例正常结直肠黏膜、30例结直肠癌以及80例结直肠腺瘤组织中的表达。结果MTSS1在正常结直肠黏膜组、结直肠腺瘤组及结直肠癌组织中表达差异有统计学意义（P＝0.005），阳性表达率分别为100.0%、63.8%、6.7%。在管状腺瘤、混合性腺瘤、绒毛状腺瘤组织中阳性表达率分别为82.5%、56.7%、35.0%，差异有统计学意义（P＝0.005）。荧光定量PCR检测显示在正常对照组、管状腺瘤组、混合性腺瘤组、绒毛状腺瘤组及结直肠癌组MTSS1表达量分别为36.58±9.06、16.34±1.34、10.47±3.20、3.40±1.28、0.80±0.40。结论MTSS1在结直肠腺瘤的恶变及结直肠癌的发生发展过程中起作用；MTSS1表达下调是结直肠腺瘤的癌变及结直肠癌发生的诱因。 展开更多
关键词 结直肠腺瘤 结直肠癌 免疫组织化学 荧光定量聚合酶链反应 转移抑制因子1基因
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FQ-PCR溶解曲线技术分析白血病患者PBMC中T细胞TCRα/βCDR3谱系特征 被引量：3
5
作者 孙永苹 石彬 +3 位作者 朱红倩 汤贤英 马锐 姚新生 《遵义医学院学报》 2014年第1期39-47,共9页
目的采用FQ-PCR溶解曲线技术分析临床白血病患者外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞TRAV和TRBV基因各家族的CDR3谱系特征。方法提取4例健康志愿者和15例临床白血病患者PBMC中mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因家族的C... 目的采用FQ-PCR溶解曲线技术分析临床白血病患者外周血单个核细胞(PBMC)中T细胞TRAV和TRBV基因各家族的CDR3谱系特征。方法提取4例健康志愿者和15例临床白血病患者PBMC中mRNA,逆转录成cDNA,FQ-PCR扩增32个TRAV基因和24个TRBV基因家族的CDR3区,FQ-PCR溶解曲线技术分析CDR3谱系特征,并测序分析单克隆家族CDR3区氨基酸序列的组成。结果 4例健康志愿者PBMC中α/βT细胞的CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,均表现为多峰图;而15例白血病患者PBMC中α/βT细胞CDR3谱系FQ-PCR溶解曲线峰型图,多数患者出现寡或偏峰型图、低或无峰型图、典型的单峰型图;不同白血病患者异常峰的频率不一致;单峰型图TRAV和TRBV PCR产物基因测序,未发现不同患者存在完全相同的CDR3区。结论FQ-PCR溶解曲线技术能很好的分析白血病患者PBMC中TCRα/βCDR3谱系的单、寡、多克隆性增殖;非T细胞白血病患者PBMC中TCRα/βCDR3的单峰(或寡峰)家族T细胞,可能来源于机体对肿瘤应答的T细胞,而在T细胞白血病患者,可能为肿瘤T细胞或机体抗肿瘤T细胞。本实验可为进一步研究白血病的免疫应答机制和个体化治疗提供基础。 展开更多
关键词 白血病 TCR CDR3 FQ-PCR 溶解曲线
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