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热带假丝酵母菌ERG11基因突变与氟康唑耐药性的关系 被引量：2
1
作者 甘雪华 罗永慧 +1 位作者 汤翔群 段颖卿 《实验与检验医学》 CAS 2008年第6期585-586,共2页
目的探讨热带假丝酵母菌氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与耐药性的关系。方法根据ERG11序列设计引物,对氟康唑靶酶基因ERG11进行PCR扩增,DNA测序后对比分析耐药株与敏感株及标准株的碱基差异,确定耐药株基因一级结构上的突变点,... 目的探讨热带假丝酵母菌氟康唑作用的靶酶编码基因(ERG11)突变与耐药性的关系。方法根据ERG11序列设计引物,对氟康唑靶酶基因ERG11进行PCR扩增,DNA测序后对比分析耐药株与敏感株及标准株的碱基差异,确定耐药株基因一级结构上的突变点,并推测分析靶酶蛋白的氨基酸改变及与氟康唑耐药的关系。结果氟康唑敏感株的ERG11基因DNA序列与氟康唑敏感标准株ATCC750完全一致,耐药株出现+395、+513、+783处点突变,导致132位氨基酸改变。结论ERG11基因突变所编码的氨基酸改变与氟康唑耐药有关。 展开更多
关键词 热带假丝酵母菌 ERG11基因 氟康唑耐药 基因突变
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念珠菌耐药相关基因研究 被引量：2
2
作者 李劲松 宋诗铎 +1 位作者 魏殿军 苏东 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2006年第1期12-15,共4页
目的研究耐氟康唑热带念珠菌临床株Fc 30的基因突变耐药机制。方法对氟康唑靶酶基因erg 11进行PCR扩增,DNA测序,对比分析临床耐药株与敏感株及标准株的靶酶基因DNA序列,确定耐药株基因一级结构上的突变点,并推测分析靶酶蛋白的氨基酸改... 目的研究耐氟康唑热带念珠菌临床株Fc 30的基因突变耐药机制。方法对氟康唑靶酶基因erg 11进行PCR扩增,DNA测序,对比分析临床耐药株与敏感株及标准株的靶酶基因DNA序列,确定耐药株基因一级结构上的突变点,并推测分析靶酶蛋白的氨基酸改变及与氟康唑耐药的相关性。结果氟康唑敏感株Fc 17的erg 11基因DNA序列与氟康唑敏感标准菌ATCC750完全一致,耐药株Fc 30出现+225、+264、+395、+461、+513处点突变,导致132、154位氨基酸突变。结论与敏感株相比,耐氟康唑热带念珠菌Fc30 erg11基因出现Y132F耐药相关突变。 展开更多
关键词 热带念珠菌 氟康唑耐药 ERG 11基因
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热带念珠菌外排泵耐药的研究
3
作者 李劲松 宋诗铎 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期565-567,共3页
目的研究耐氟康唑热带念珠菌临床株F c30的外排泵耐药机制。方法运用半定量RT-PCR技术研究外排泵基因m d r1 mRNA水平与耐药的相关性。结果耐药株F c30的m d r1基因mRNA灰度比值约为敏感株F c17的2.3倍。结论与敏感株相比,耐氟康唑热带... 目的研究耐氟康唑热带念珠菌临床株F c30的外排泵耐药机制。方法运用半定量RT-PCR技术研究外排泵基因m d r1 mRNA水平与耐药的相关性。结果耐药株F c30的m d r1基因mRNA灰度比值约为敏感株F c17的2.3倍。结论与敏感株相比,耐氟康唑热带念珠菌F c30外排泵基因m d r1过度表达与耐药相关。 展开更多
关键词 热带念珠菌 氟康唑耐药 MDR1基因
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穿心莲内酯联合氟康唑抗耐药白假丝酵母菌作用机制研究 被引量：1
4
作者 施高翔 严园园 +4 位作者 邵菁 陆克乔 张梦翔 汪天明 汪长中 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2014年第3期258-264,共7页
目的探讨穿心莲内酯联合氟康唑抗耐药白假丝酵母菌作用及其机制。方法采用微量稀释法检测穿心莲内酯(AG)及联合氟康唑(FLC)对耐药白假丝酵母菌的MIC;采用罗丹明6G(Rh 6G)检测AG对耐药白假丝酵母菌CDR外排功能的影响;利用罗丹明123评估A... 目的探讨穿心莲内酯联合氟康唑抗耐药白假丝酵母菌作用及其机制。方法采用微量稀释法检测穿心莲内酯(AG)及联合氟康唑(FLC)对耐药白假丝酵母菌的MIC;采用罗丹明6G(Rh 6G)检测AG对耐药白假丝酵母菌CDR外排功能的影响;利用罗丹明123评估AG对耐药白假丝酵母菌MDR外排功能的影响;采用二氢罗丹明检测AG单用及联合FLC对耐药白假丝酵母菌活性氧(ROS)的影响;采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测AG联合FLC对耐药白假丝酵母菌外排泵相关基因CDR1、CDR2和MDR1表达的影响。结果 AG联合FLC抗耐药白假丝酵母菌呈相加作用;AG对CDR外排功能无影响;AG可抑制MDR外排功能;AG联合FLC能显著提高耐药白假丝酵母菌细胞ROS水平;AG与FLC联合作用于耐药白假丝酵母菌可下调CDR1和MDR1的表达量,上调CDR2的表达量。结论 AG联合FLC抗耐药白假丝酵母菌具有相加作用,其机制可能与抑制外排泵及相关基因表达,提高胞内ROS水平有关。 展开更多
关键词 穿心莲内酯 氟康唑 耐药白假丝酵母菌 ROS 外排泵
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盐酸小檗碱与氟康唑联用对耐药白色念珠菌钙稳态的影响 被引量：4
5
作者 雍江堰 王海 +1 位作者 黄筱雪 李燕 《中国病原生物学杂志》 CSCD 北大核心 2020年第8期903-909,共7页
目的探讨盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BBH)与氟康唑(fluconazole,FLC)联用对氟康唑耐药白色念珠菌(Candida albicans,CA)的协同抑菌作用及其对细胞内Ca2+稳态的影响。方法棋盘稀释法筛选对白色念珠菌耐药株具有协同抑制作用的... 目的探讨盐酸小檗碱(berberine hydrochloride,BBH)与氟康唑(fluconazole,FLC)联用对氟康唑耐药白色念珠菌(Candida albicans,CA)的协同抑菌作用及其对细胞内Ca2+稳态的影响。方法棋盘稀释法筛选对白色念珠菌耐药株具有协同抑制作用的最低浓度盐酸小檗碱与氟康唑组合,XTT减低法测定动态抑菌效果。采用倒置荧光显微镜和流式细胞术检测细胞内Ca2+内流情况,RT-qPCR技术检测Ca2+稳态关键基因的表达量,评价两药联用对耐药白色念珠菌Ca2+稳态的影响。试验设两组单用组及不加药(空白)组作对照。结果联合用药的部分抑菌浓度指数最小的药物浓度组合为盐酸小檗碱2μg/ml+氟康唑1μg/ml。两药联用组在0~48h内动态抑菌效果显著优于两药单用组和空白对照组(P<0.05),两药联用具有协同作用(FICI<0.5)。联用组、盐酸小檗碱单用组处理后白色念珠菌细胞内Ca2+内流现象明显,且联用组细胞内Ca2+浓度均比盐酸小檗碱单用组和氟康唑单用组分别高1.07-2、1.17-8.39倍(P<0.05),但氟康唑单用组与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。联用组和盐酸小檗碱单用组液泡钙通道YVC1基因上调,氟康唑单用组YVC1基因下调,联用组YVC1基因表达量比盐酸小檗碱单用组和氟康唑单用组分别高1.62、6.47倍(P<0.05)。联用组和盐酸小檗碱单用组液泡钙泵PMC1基因下调,氟康唑单用组PMC1基因上调,联用组和盐酸小檗碱单用组PMC1基因的表达量比氟康唑单用组分别低80.86%和80.59%(P<0.05)。结论盐酸小檗碱与氟康唑联用对氟康唑耐药白色念珠菌具有协同抑菌作用,盐酸小檗碱可能通过影响白色念珠菌液泡膜上的钙离子调节器Pmc1p和Yvc1p促进质膜内Ca2+内流,破坏钙离子稳态,从而增加耐药株对氟康唑药物的敏感性。 展开更多
关键词 白色念珠菌 氟康唑耐药 盐酸小檗碱 联合用药 Ca^2+稳态
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热带念珠菌对氟康唑耐药机制的初步研究 被引量：2
6
作者 江雨璐 王中新 沈继录 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2014年第4期536-539,共4页
25株临床分离的热带念珠菌通过ATB FUNGUS 3试条分类为对氟康唑(FCA)敏感的菌株和耐药的菌株,使用ABI 7300荧光定量分析仪扩增外排基因CDR1、MDR1和靶酶基因ERG11,用2-ΔΔCT法计算相对表达量,应用Fisher确切概率法统计分析敏感菌株和... 25株临床分离的热带念珠菌通过ATB FUNGUS 3试条分类为对氟康唑(FCA)敏感的菌株和耐药的菌株,使用ABI 7300荧光定量分析仪扩增外排基因CDR1、MDR1和靶酶基因ERG11,用2-ΔΔCT法计算相对表达量,应用Fisher确切概率法统计分析敏感菌株和耐药菌株的高表达率。结果显示MDR1和ERG11基因的高表达率差异有统计学意义(P<0.05),CDR1基因的高表达率差异无统计学意义(P>0.05)。热带念珠菌对FCA耐药与外排基因MDR1和靶酶基因ERG11的高表达相关。 展开更多
关键词 热带念珠菌 氟康唑耐药 CDR1 MDR1 ERG11
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热带念珠菌靶位酶基因变异与氟康唑耐药的关系 被引量：2
7
作者 吴金燕 易国辉 +3 位作者 周利民 吴至成 黄宪希 郭虹 《中国热带医学》 CAS 2014年第12期1426-1428,共3页
目的探讨热带念珠菌靶位酶(ERG11)基因的改变与氟康唑耐药的相关性。方法根据热带念珠菌ERG11基因序列设计引物,以标准株为对照,对临床分离的耐药株、剂量依赖株(S-DD)和敏感株进行靶位酶ERG11基因PCR扩增,测序之后比对分析标准株,耐药... 目的探讨热带念珠菌靶位酶(ERG11)基因的改变与氟康唑耐药的相关性。方法根据热带念珠菌ERG11基因序列设计引物,以标准株为对照,对临床分离的耐药株、剂量依赖株(S-DD)和敏感株进行靶位酶ERG11基因PCR扩增,测序之后比对分析标准株,耐药株、剂量依赖株和敏感株的序列差异,分析靶位酶基因改变与氟康唑耐药的相关性。结果热带假丝酵母氟康唑敏感株与敏感标准株序列一致;而S-DD株中出现T783C和G1362A沉默突变;耐药株中出现碱基序列T225C、C461T、G1362A等3种突变点,并导致丝氨酸(S)154苯丙氨酸(F)氨基酸突变。结论热带念珠菌靶位酶ERG11基因氨基酸序列的突变与氟康唑耐药有一定的相关性。 展开更多
关键词 热带念珠菌 氟康唑耐药 靶位酶基因 基因突变
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白念珠菌CDR1基因上游调控序列与氟康唑耐药的关系初探
8
作者 贺志彬 廖万清 +1 位作者 姚志荣 王志东 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期691-693,共3页
目的探讨白念珠菌耐药基因CDR1基因上游调控序列对氟康唑耐药的影响。方法分别抽提氟康唑耐药/敏感配对菌株DNA,通过特异性合成CDR1基因上游调控序列引物,分析该序列在氟康唑耐药/敏感配对菌株中是否存在基因突变。结果白念珠菌氟康唑耐... 目的探讨白念珠菌耐药基因CDR1基因上游调控序列对氟康唑耐药的影响。方法分别抽提氟康唑耐药/敏感配对菌株DNA,通过特异性合成CDR1基因上游调控序列引物,分析该序列在氟康唑耐药/敏感配对菌株中是否存在基因突变。结果白念珠菌氟康唑耐药/敏感配对菌株中的CDR1基因上游调控序列未出现任何碱基突变和缺失。结论白念珠菌氟康唑耐药与CDR1基因上游调控序列是否突变无关。 展开更多
关键词 白念珠菌 氟康唑耐药 调控序列 基因突变 上游调控序列 CDR1基因 耐药基因 氟康唑 碱基突变 DNA
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微量法检测念珠菌对三唑类药物敏感性与交叉耐药性 被引量：27
9
作者 张晓冬 李若瑜 +1 位作者 王文莉 王端礼 《中华医学检验杂志》 CSCD 1998年第2期76-78,共3页
目的应用美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐微量法测定酵母菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并检验其重复性和准确性，观察氟康唑耐药株对伊曲康唑是否存在交叉耐药性。方法参照ＮＣＣＬＳ推荐的药敏试验方案微量稀释法（１９９... 目的应用美国临床实验室标准化委员会（ＮＣＣＬＳ）推荐微量法测定酵母菌最低抑菌浓度（ＭＩＣ），并检验其重复性和准确性，观察氟康唑耐药株对伊曲康唑是否存在交叉耐药性。方法参照ＮＣＣＬＳ推荐的药敏试验方案微量稀释法（１９９５年版），检测２５株氟康唑耐药性白念珠菌及４８株临床分离株对氟康唑及伊曲康唑的敏感性。结果２５株氟康唑耐药白念珠菌中只有３株菌对伊曲康唑耐药（ＭＩＣ值≥４μｇ／ｍｌ），占１３．０４％，只有少数菌对伊曲康唑存在交叉耐药。４８株临床分离白念珠菌对氟康唑和伊曲康唑的ＭＩＣ值呈正态分布，有４６株对伊曲康唑的ＭＩＣ值介于０．００７５～４μｇ／ｍｌ，其半数抑菌浓度（ＩＣ５０）为０．１２５μｇ／ｍｌ，有４３株对氟康唑的ＭＩＣ值介于０．２５～１６μｇ／ｍｌ，其ＩＣ５０为２μｇ／ｍｌ。结论ＮＣＣＬＳ微量稀释法有较好的可重复性和稳定性，少数氟康唑耐药株对伊曲康唑有交叉耐药性。 展开更多
关键词 念珠菌 抗真菌药物 三唑类 药敏试验 耐药性
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阿萨希毛孢子菌氟康唑体外诱导耐药的方法优化 被引量：1
10
作者 张德全 夏志宽 +5 位作者 田艳丽 廖勇 吕雪莲 陈卫 王聪敏 杨蓉娅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第24期2441-2444,共4页
目的观察氟康唑联合甲强龙体外诱导阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)获得氟康唑体外诱导耐药株的成功率及稳定性,为T.asahii唑类耐药机制研究奠定基础。方法对16株T.asahii进行氟康唑的真菌体外药敏试验,分别通过氟康唑、... 目的观察氟康唑联合甲强龙体外诱导阿萨希毛孢子菌(Trichosporon asahii,T.asahii)获得氟康唑体外诱导耐药株的成功率及稳定性,为T.asahii唑类耐药机制研究奠定基础。方法对16株T.asahii进行氟康唑的真菌体外药敏试验,分别通过氟康唑、氟康唑联合甲强龙和单纯甲强龙对其进行体外诱导耐药,并与空白对照组进行比较。所有诱导获得的耐药菌株进行30次无药传代,每株菌在每次传代后均重新进行最小抑菌浓度(MIC)检测。结果空白对照组及单纯甲强龙组各菌株MIC值无明显变化;单纯氟康唑诱导获得耐药株12株(75%),氟康唑联合甲强龙诱导获得耐药株16株(100%);两组经30代传代后,单纯氟康唑组耐药株6株(37.5%),氟康唑联合甲强龙诱导获得耐药株9株(56.25%)。结论甲强龙可以提高氟康唑诱导T.asahii耐药株的成功率和稳定性,氟康唑联合甲强龙优于单纯氟康唑,更适用于T.asahii氟康唑体外耐药株的诱导。 展开更多
关键词 阿萨希毛孢子菌 氟康唑 耐药性 最小抑菌浓度
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