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流式细胞术在植物学研究中的应用——检测植物核DNA含量和倍性水平 被引量：110
1
作者 弓娜 田新民 +1 位作者 周香艳 刘建全 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第9期21-27,共7页
流式细胞仪作为高效的检测工具,在植物学研究的多个领域都发挥了重要作用。兰州大学干旱与草地生态教育部重点实验室分子生态所通过大量的植物流式细胞术实验,针对检测植物核DNA含量和倍性水平,总结出一套详细通用的实验方法。同时着重... 流式细胞仪作为高效的检测工具,在植物学研究的多个领域都发挥了重要作用。兰州大学干旱与草地生态教育部重点实验室分子生态所通过大量的植物流式细胞术实验,针对检测植物核DNA含量和倍性水平,总结出一套详细通用的实验方法。同时着重阐述了各个实验环节的关键点,分析因碎片过多而导致实验失败的原因,并提供了切实可行的解决方法。对今后检测各种植物具有重大指导意义,同时也促进了流式细胞术在植物学研究中的应用。 展开更多
关键词 流式细胞术 植物核DNA含量 倍性水平 C值
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丹参素对CD11b、P-selectin、ICAM-1、VCAM-1、E-selectin表达的影响 被引量：72
2
作者 姜开余 顾振纶 阮长耿 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第6期682-685,共4页
目的　考察丹参素对血小板、白细胞和血管内皮细胞表达细胞粘附分子CD11b、P selectin、ICAM 1、VCAM 1、E selectin的影响 ,以期探明其抗血栓形成作用的机制。方法　用流式细胞仪测定由TNFα、fMLP和凝血酶诱导细胞表面细胞粘附分子的... 目的　考察丹参素对血小板、白细胞和血管内皮细胞表达细胞粘附分子CD11b、P selectin、ICAM 1、VCAM 1、E selectin的影响 ,以期探明其抗血栓形成作用的机制。方法　用流式细胞仪测定由TNFα、fMLP和凝血酶诱导细胞表面细胞粘附分子的表达。结果　人粒细胞受到fMLP刺激后 ,细胞表面CD11b表达明显增加。丹参素与粒细胞预孵30min后 ,则剂量依赖性地抑制CD11b的表达。血小板与凝血酶 (1× 10 3U·L-1)共孵 2 0min ,可明显增加血小板表面P selectin的表达。丹参素 (10 0～ 30 0mg·L-1)与血小板预孵 30min ,对凝血酶诱导的血小板表面P selectin的表达未见明显抑制作用。人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)经TNFα处理后 ,明显增加细胞表面ICAM 1、VCAM 1和E selectin的表达 ,不同浓度的丹参素与HUVEC预孵 2h ,对TNFα诱导HUVEC表面ICAM 1的表达未见明显抑制作用 ,对TNFα诱导的VCAM 1、E selectin表达则可产生明显的抑制作用。结论　丹参素可抑制血管内皮细胞和粒细胞表达细胞粘附分子。这可能是丹参素发挥抗血栓形成作用的机制之一。 展开更多
关键词 丹参素 细胞粘附分子 CD116 抗血栓形成 ICAM-1
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人骨髓间充质干细胞分离与培养方法的建立 被引量：40
3
作者 刘晓丹 郭子宽 +2 位作者 李秀森 张双喜 毛宁 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2000年第4期282-284,共3页
目的 :建立并优化骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)分离纯化及培养扩增的方法。方法 :利用Percoll( 1.0 73g/ml)及Ficoll Hypaque( 1.0 77g/ml)两种分离介质分离骨髓单个核细胞 ,筛选体外培养MSCs适宜的血清及浓度 ,通过... 目的 :建立并优化骨髓间充质干细胞 (mesenchymalstemcells ,MSCs)分离纯化及培养扩增的方法。方法 :利用Percoll( 1.0 73g/ml)及Ficoll Hypaque( 1.0 77g/ml)两种分离介质分离骨髓单个核细胞 ,筛选体外培养MSCs适宜的血清及浓度 ,通过流式细胞术分析鉴定MSCs的纯度。结果 :经Percoll分离 ,应用 10 %筛选出的血清培养与扩增的MSCs ,细胞纯度可达 95%左右 ;相反 ,应用常规Ficoll Hypaque分离骨髓单个核细胞或增加血清浓度 ,MSCs纯度显著下降。结论 :建立了一种稳定而实用的体外分离与培养MSCs的方法。 展开更多
关键词 骨髓 间充质干细胞 分离 培养 流式细胞学
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支原体肺炎患儿辅助性T淋巴细胞亚群T_H1、T_H2细胞状况 被引量：82
4
作者 侯安存 卢炎 +3 位作者 沙莉 刘力戈 沈静 徐雍 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第9期652-656,共5页
目的　探讨肺炎支原体肺炎急性期患儿外周血淋巴细胞亚群以及辅助性T淋巴细胞亚群TH1、TH2细胞的改变 ,为免疫治疗的可能性提供依据。方法　采用流式细胞仪技术 (FACS)检测了3 5例支原体肺炎急性期患儿外周血T淋巴细胞亚群以及NK细胞和... 目的　探讨肺炎支原体肺炎急性期患儿外周血淋巴细胞亚群以及辅助性T淋巴细胞亚群TH1、TH2细胞的改变 ,为免疫治疗的可能性提供依据。方法　采用流式细胞仪技术 (FACS)检测了3 5例支原体肺炎急性期患儿外周血T淋巴细胞亚群以及NK细胞和B细胞 ,同时通过检测分泌细胞因子γ干扰素 (IFN γ)、白细胞介素 4(IL 4)的CD+ 4细胞方法 ,测出相应TH1、TH2细胞的百分比 ,并与2 8例正常儿童进行比较。同时对 3 5例支原体肺炎患儿中的 3 0例进行了血清免疫球蛋白及精制结核菌素 (PPD)皮肤试验。全部患儿均系在我院住院的患儿 ,男 15例 ,女 2 0例 ,年龄 3～ 13岁 ,平均 9岁。对照组男 14例 ,女 14例 ,年龄 3～ 12岁 ,平均 7岁。结果　支原体肺炎患儿急性期外周血CD+ 3 、CD+ 4T细胞百分率为 68 0 0± 6 66及 3 7 86± 5 84,较对照组 63 71± 7 92及 3 4 54± 6 2 3高 ,(P <0 0 5) ;患儿外周血TH1细胞百分率为 14 13± 8 46,对照组为 2 0 77± 6 89,两者差异有非常显著意义 (P =0 0 0 1)。NK细胞及TH1/TH2比值在患儿组降低 (P分别为 <0 0 1和 <0 0 5)。两组间CD8、TH2、B细胞百分率及CD4/CD8比值差异无显著意义。 3 0例患儿之血清免疫球蛋白与同龄正常儿童比较 ,IgG全部正常 ;IgA升高 7例 ;IgM升高 4例。 展开更多
关键词 支原体肺炎 小儿 T淋巴细胞亚群 TH1细胞 TH2细胞 免疫治疗 急性期
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过敏性鼻炎患儿淋巴细胞亚群、血清IgE水平的变化及其相关性 被引量：83
5
作者 徐文中 刘春艳 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期550-552,共3页
目的:探讨过敏性鼻炎患儿外周血淋巴细胞亚群水平、血清中IFN-γ、IL-4、IL-5浓度水平及血清中IgE水平的变化,并分析其相关性。方法:选取过敏性鼻炎的患儿86例,同期体检的健康儿童76例作为对照组,采用流式细胞技术检测其CD3^+、CD4^+、C... 目的:探讨过敏性鼻炎患儿外周血淋巴细胞亚群水平、血清中IFN-γ、IL-4、IL-5浓度水平及血清中IgE水平的变化,并分析其相关性。方法:选取过敏性鼻炎的患儿86例,同期体检的健康儿童76例作为对照组,采用流式细胞技术检测其CD3^+、CD4^+、CD8^+CD19^+、CD4^+CD25^+、CD16^+56^+淋巴细胞亚群的表达情况,采用双抗体夹心(ELISA)法检测者血清中IFN-γ、IL-4、IL-5浓度水平,采用免疫比浊法检测血清中Ig E水平。结果:过敏性鼻炎患儿CD19^+、CD4^+/CD8^+、血清IL-4、IL-5和Ig E水平较正常对照组增高,差异有统计学意义(P<0.05),CD3^+、CD4^+、CD8^+、CD4^+CD25^+、CD16^+56^+、IFN-γ较正常对照组降低(P<0.05),过敏性鼻炎患儿CD19^+B淋巴细胞和血清Ig E水平之间具有相关性。结论:淋巴细胞的功能异常、Th1/Th2比例失衡可能与过敏性鼻炎发病机制有关,血清IgE、IFN-γ、IL-4和IL-5在过敏性鼻炎患儿中起着重要作用。 展开更多
关键词 淋巴细胞亚群 IL-4 IL-5 干扰素-Γ IgE 过敏性鼻炎 流式细胞技术
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24味中药对人肺腺癌细胞核酸和蛋白质及细胞周期的影响观察 被引量：66
6
作者 韩明权 刘嘉湘 +2 位作者 高虹 朱晏伟 陈善香 《中国中西医结合杂志》 CSCD 北大核心 1995年第3期147-149,共3页
运用流式细胞仪，对临床治疗原发性肺癌的有效复方进行了拆方研究，通过观察太子参等２４味药物作用后人肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－１细胞增殖指数、脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）指数、蛋白质指数和细胞周期各时相比例的变化等指标，部分揭示了临床... 运用流式细胞仪，对临床治疗原发性肺癌的有效复方进行了拆方研究，通过观察太子参等２４味药物作用后人肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－１细胞增殖指数、脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）指数、蛋白质指数和细胞周期各时相比例的变化等指标，部分揭示了临床有效复方治疗肺癌的作用机理。同时发现其中对增殖指数抑制率在２０％以上的４味药中，有３味是扶正药（绞股蓝、北沙参、人参），提示我们用扶正法治疗肿瘤并不一定意味着传统意义上的“补”，一些补益药亦能直接抑制肿瘤细胞增殖，即“祛邪”。并发现２４味单味药中对人肺腺癌ＳＰＣ－Ａ－１细胞周期作用点各不相同的一些药物，进而可以根据实验结果重组有效复方运用于临床，或根据中西药物各自特点，与化疗药物有机结合，可望能更有效地阻滞癌细胞增殖。 展开更多
关键词 中药 扶正中药 细胞周期 核酸 肺肿瘤 腺癌
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健脾理气方药物血清对肝癌细胞端粒酶活性及凋亡的影响 被引量：68
7
作者 孟志强 郭伟剑 +2 位作者 于尔辛 宋明志 黄雯霞 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第8期879-882,共4页
目的观察健脾理气方药物血清对肝癌细胞 SMMC-7721端粒酶活性的影响以及诱导肿瘤细胞凋亡的作用,探讨其抗肿瘤治疗的作用机制。方法采用端粒重复序列扩增(TRAP)结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,利用健脾理气方中药灌服新西兰兔后制... 目的观察健脾理气方药物血清对肝癌细胞 SMMC-7721端粒酶活性的影响以及诱导肿瘤细胞凋亡的作用,探讨其抗肿瘤治疗的作用机制。方法采用端粒重复序列扩增(TRAP)结合非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法,利用健脾理气方中药灌服新西兰兔后制备含药血清,观察健脾理气方药物血清对体外培养的人肝癌细胞株SMMC-7721端粒酶活性的影响,同时利用流式细胞仪检测和荧光显微镜观察对细胞凋亡的影响。结果健脾理气药物血清在 d4开始对肿瘤细胞的端粒酶活性有抑制作用,电泳条带光密度明显降低;并能诱导肿瘤细胞的凋亡,凋亡的比例随作用时间的延长而升高,流式细胞术检测d2,d4,d6的凋亡比例分别为0.81%,5.16%,8.45%。结论对肿瘤细胞端粒酶活性的抑制和诱导肿瘤细胞凋亡是键脾理气中药抗肿瘤治疗作用机制的一部分。 展开更多
关键词 肝肿瘤 肝细胞瘤 端粒酶活性 细胞凋亡
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利用流式细胞光度术鉴定苹果倍性的研究 被引量：53
8
作者 李贇 石荫坪 +1 位作者 束怀瑞 王强生 《西北植物学报》 CAS CSCD 1998年第4期499-503,共5页
利用流式细胞光度术测定了苹果１２个二倍体，５个三倍体细胞核ＤＮＡ含量。结果表明：二倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为２．２７ｐｇ，三倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为３．１３ｐｇ。不同倍性品种间细胞核ＤＮＡ含量差异显著；对６个苹果实... 利用流式细胞光度术测定了苹果１２个二倍体，５个三倍体细胞核ＤＮＡ含量。结果表明：二倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为２．２７ｐｇ，三倍体细胞核ＤＮＡ含量平均为３．１３ｐｇ。不同倍性品种间细胞核ＤＮＡ含量差异显著；对６个苹果实生苗诱变植株细胞核ＤＮＡ含量测定的结果表明，这些诱变植株均存在两群细胞核ＤＮＡ含量相差１倍的细胞，这说明这些诱变植株均为倍性嵌合体。研究表明，利用流式细胞光度术可以进行倍性鉴定。利用流式细胞光度术测定细胞核ＤＮＡ含量，试样制备简单，测量快速，精度高，因此是进行倍性鉴定的理想方法之一。 展开更多
关键词 苹果 流式细胞光度术 倍性鉴定
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上海地区成人不同年龄组间CD4、CD8淋巴细胞计数正常值调查 被引量：65
9
作者 蒋卫民 潘孝彰 +4 位作者 康来仪 潘启超 林庆能 薛以乐 翁心华 《中华传染病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期203-205,共3页
目的　了解上海地区成人CD4、CD8计数及CD4/CD8比值正常参考值范围。方法　选取 6 14例成年人不同年龄组的血标本 ,根据不同性别、不同年龄组分别进行比较 ,用流式细胞仪进行CD4、CD8计数检测 ,得出不同性别及不同年龄组的CD4、CD8计数... 目的　了解上海地区成人CD4、CD8计数及CD4/CD8比值正常参考值范围。方法　选取 6 14例成年人不同年龄组的血标本 ,根据不同性别、不同年龄组分别进行比较 ,用流式细胞仪进行CD4、CD8计数检测 ,得出不同性别及不同年龄组的CD4、CD8计数及CD4/CD8比值 ,并进行分析。结果　CD4正常值在不同性别及年龄组之间差异无显著性 ,其正常平均值为 72 6 .99± 2 5 5 .2 1。CD8及CD4/CD8在不同性别及其年龄组之间差异有显著性。CD8计数平均值为 5 39.98± 134 .0 7。CD4/CD8平均值为 1.49± 0 .5 7。结论　上海地区成人CD4淋巴细胞计数较国外低 10 0 /mm3 左右。对获得性免疫缺陷综合征CD4平均值的诊断临界值建议可采用 40 0 /mm3 。 展开更多
关键词 艾滋病 CD4 淋巴细胞计数 CD8 流式细胞术
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运动心脏重塑与微损伤发生中的细胞凋亡现象 被引量：49
10
作者 常芸 袁箭峰 +1 位作者 祁永梅 王莱芮 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期344-349,共6页
本研究选用健康成年雄性SD大鼠 70只 ,随机分为四种不同负荷运动训练组 ,建立运动心脏实验动物模型 ,采用电镜技术与流式细胞技术观察和分析在运动性心脏重塑与微损伤过程中 ,是否存在细胞凋亡现象以及细胞凋亡的发生与运动负荷及心肌... 本研究选用健康成年雄性SD大鼠 70只 ,随机分为四种不同负荷运动训练组 ,建立运动心脏实验动物模型 ,采用电镜技术与流式细胞技术观察和分析在运动性心脏重塑与微损伤过程中 ,是否存在细胞凋亡现象以及细胞凋亡的发生与运动负荷及心肌微损伤的关系。结果显示 ,运动性的心脏结构和功能的重塑与心肌微损伤发生中存在心肌细胞凋亡现象 ,其细胞凋亡程度与运动强度有关 ;力竭运动时有、无训练大鼠心肌细胞凋亡的参与作用和程度存有差异 ,提示系统训练在一定程度上可以保护心肌细胞免受严重损伤 。 展开更多
关键词 运动心脏重塑 运动性心肌微损伤 细胞凋亡 运动负荷 电镜 流式细胞术
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人参总皂甙对小鼠造血细胞增殖的影响 被引量：52
11
作者 王勇 王亚平 祝彼得 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1995年第2期153-156,共4页
应用MTT比色分析法证实,人参总皂甙在一定浓度内(3～50μg/ml)能促进小鼠骨髓造血细胞的增殖.应用流式细胞术的研究提示,人参总皂甙能促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期.造血祖细胞体外培养的研究表明,人参总皂甙能促进小鼠多种造血祖... 应用MTT比色分析法证实,人参总皂甙在一定浓度内(3～50μg/ml)能促进小鼠骨髓造血细胞的增殖.应用流式细胞术的研究提示,人参总皂甙能促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期.造血祖细胞体外培养的研究表明,人参总皂甙能促进小鼠多种造血祖细胞的集落形成.综上研究结果提示,人参总皂甙可能通过促进骨髓造血细胞进入细胞增殖周期以及促进造血祖细胞增殖等途径,刺激血细胞的生成,进而发挥其临床“补气生血”作用. 展开更多
关键词 人参总皂甙 造血细胞 流式细胞术 小鼠
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“肺与大肠相表里”的组织细胞学基础研究 被引量：63
12
作者 刘声 刘晓燕 +4 位作者 李立华 王轩 崔轶凡 孙桂芝 郭霞珍 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期1167-1170,共4页
目的:研究并比较人胚胎发育不同时期肺与肠上皮形态特征、上皮细胞增殖与凋亡及上皮功能蛋白的变化情况。方法:观察人胚胎发育不同时期肺与肠上皮形态;流式细胞术检测胚胎不同时期肺与肠上皮细胞的增殖与凋亡,免疫组化测定不同时期上皮... 目的:研究并比较人胚胎发育不同时期肺与肠上皮形态特征、上皮细胞增殖与凋亡及上皮功能蛋白的变化情况。方法:观察人胚胎发育不同时期肺与肠上皮形态;流式细胞术检测胚胎不同时期肺与肠上皮细胞的增殖与凋亡,免疫组化测定不同时期上皮细胞功能蛋白。结果:胚胎早期,肺与肠上皮形态一致,上皮细胞增殖、凋亡的无显著差异;胚胎中期、胚胎晚期肺与肠在上皮形态不一致,上皮细胞增殖、凋亡有显著差异(P<0.05)。胚胎各期肺与回肠、结肠上皮细胞功能蛋白无显著差异,而与空肠、直肠、膀胱存在显著性差异(P<0.05)。结论:肺与回肠、结肠在胚胎组织发生上存在时相上的同步性;"肺与大肠相表里"中的"大肠"大致可定位于"回肠、结肠";在胚胎早期可以为"肺"与"回肠、结肠"同源发生提供一定的依据;"肺与大肠相表里"肺肠相关虽主要是功能之间的相互联属,但可能与其原始的同源性相关。 展开更多
关键词 肺与大肠相表里 上皮细胞 胎肺 胎肠 细胞增殖与凋亡 流式细胞术 免疫组织化学
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2型糖尿病血瘀证患者血小板CD_(62p)、CD_(63)测定意义探讨 被引量：41
13
作者 姜兆顺 张胜兰 +3 位作者 寇天芹 邢万佳 晏辉 尹格平 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 1999年第9期527-528,共2页
内容提要　目的 :研究 2型糖尿病患者的血小板活化与血瘀证的关系及其影响因素。方法 :用单克隆抗体作分子探针 ,经流式细胞术测定了 30例 2型糖尿病血瘀证患者、2 7例 2型糖尿病非血瘀证患者及 2 0名健康者的血小板膜糖蛋白CD62p、CD6... 内容提要　目的 :研究 2型糖尿病患者的血小板活化与血瘀证的关系及其影响因素。方法 :用单克隆抗体作分子探针 ,经流式细胞术测定了 30例 2型糖尿病血瘀证患者、2 7例 2型糖尿病非血瘀证患者及 2 0名健康者的血小板膜糖蛋白CD62p、CD63表达。结果 :2型糖尿病血瘀证组CD62p、CD63显著高于非血瘀证组及对照组 (P <0 0 0 1) ,血瘀证组CD62 p与CD63呈正相关 (r =0 73,P <0 0 1)、CD62 p与糖化血红蛋白 (HbA1c)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL -C)呈正相关 (r =0 43,r=0 45 ;P <0 0 5 )。结论 :2型糖尿病血瘀证患者血小板活化水平升高 ,它是血瘀证的重要分子学基础。说明了对 展开更多
关键词 Ⅱ型 糖尿病 血小板活化 血瘀证 流式细胞术
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细胞凋亡的检测技术与方法 被引量：37
14
作者 王嘉宁 郭宁 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期466-470,共5页
细胞凋亡在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键的角色。根据死亡细胞的形态学、生物化学和分子生物学特征,可以将凋亡细胞与坏死细胞区别开来。本文综述了常用的细胞凋亡检测技术与方法的基本原理,如形态学观察、荧光素染色、DN... 细胞凋亡在保证多细胞生物的健康生存过程中扮演着关键的角色。根据死亡细胞的形态学、生物化学和分子生物学特征,可以将凋亡细胞与坏死细胞区别开来。本文综述了常用的细胞凋亡检测技术与方法的基本原理,如形态学观察、荧光素染色、DNA阶梯、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶活性的检测等,并对各种方法的优点及局限性做一简要比较。用透射电镜进行超微结构观察仍是鉴定细胞凋亡的金标准。在选择细胞凋亡检测方法时,要充分了解各种方法的原理和应用范围,进行综合考虑。多种检测方法的联合应用常可获得准确的结果。 展开更多
关键词 细胞凋亡 线粒体膜电位 荧光染料 流式细胞术 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶
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四倍体不结球白菜的诱导及染色体倍性鉴定 被引量：54
15
作者 张振超 张蜀宁 +1 位作者 张伟 张红亮 《西北植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期28-32,共5页
用不同浓度秋水仙素处理子叶期不结球白菜生长点对其进行染色体倍性操作,根据形态解剖学、细胞学特征和流式细胞仪进行倍性鉴定.结果表明,浓度为0.2%的秋水仙素处理4次的效果最好,四倍体诱变率为8.42%.与二倍体相比,四倍体植株叶片、花... 用不同浓度秋水仙素处理子叶期不结球白菜生长点对其进行染色体倍性操作,根据形态解剖学、细胞学特征和流式细胞仪进行倍性鉴定.结果表明,浓度为0.2%的秋水仙素处理4次的效果最好,四倍体诱变率为8.42%.与二倍体相比,四倍体植株叶片、花器官、气孔等均表现巨大性;气孔密度和结实率降低;抽薹较晚.用流式细胞仪进行倍性鉴定,对照DNA相对含量为100,疑似株为200,表明是四倍体;疑似株有2个值与对照的比值约为1和2,表明是嵌合体(2x+4x).流式细胞仪鉴定结果与染色体计数法鉴定结果一致,表明流式细胞仪可以较准确地检测不结球白菜突变株倍性. 展开更多
关键词 不结球白菜 四倍体 秋水仙素 流式细胞仪
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BrdU体外标记大鼠骨髓间充质干细胞的研究 被引量：40
16
作者 冯善伟 姚晓黎 +3 位作者 李中 柳太云 黄文 张成 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2005年第2期184-186,共3页
目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)最佳标记时间、剂量。方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测最佳标记剂... 目的探讨连续培养的骨髓间充质干细胞(MSCs)的5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)最佳标记时间、剂量。方法差速贴壁法对SD鼠MSCs进行体外传代培养;第6代细胞行流式细胞仪鉴定细胞的表面抗原;以终浓度分别为5、10、15μmol/L的BrdU检测最佳标记剂量;在细胞生长融合前72、48、36、24、12、3h加入BrdU,使终浓度为10μmol/L,并分别孵育至细胞融合,测定BrdU的标记率,找出最佳标记时间;免疫组化分析BrdU标记率。结果流式细胞仪检测所标记的细胞表达CD29和CD44,不表达CD11b和CD45;终浓度为10μmol/L和孵育48hBrdU标记率均>98%,并且连续传5代均可检测到。结论传代后贴壁生长的梭形细胞为MSCs,终浓度为10μmol/L和孵育48hBrdU标记率均>98%,且可以连续检测到,提示BrdU标记可用于MSCs移植入体内后存活、生长和分化的动态观察。 展开更多
关键词 尿嘧啶核苷酸类 流式细胞术 细胞 培养的 细胞分离 造血干细胞 骨髓细胞
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三氧化二砷抑制人肝癌细胞株增殖和诱导凋亡作用 被引量：40
17
作者 徐洪雨 高媛媛 +4 位作者 武俏丽 高光强 杨幼林 陈淑香 刘铁夫 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第11期1233-1237,共5页
目的体外培养人肝癌细胞株 HepG-2,BEL-7402,观察测定应用不同浓度三氧化二砷后多种指标的变化,从多个角度探讨三氧化二砷的抗肿瘤作用及其机制.方法应用倒置相差显微镜、电子显微镜、透射电镜、扫描电镜、流式细胞仪、细胞免疫组化法,... 目的体外培养人肝癌细胞株 HepG-2,BEL-7402,观察测定应用不同浓度三氧化二砷后多种指标的变化,从多个角度探讨三氧化二砷的抗肿瘤作用及其机制.方法应用倒置相差显微镜、电子显微镜、透射电镜、扫描电镜、流式细胞仪、细胞免疫组化法,分别对不同浓度加药组及对照组 HepG-2,BEL-7402细胞的存活,形态学改变,细胞 DNA含量的分布以及 Bcl-2,Bax 蛋白的表达进行了观察和测定.结果 0.5,1,2μmol/L As_2O_3均能抑制人肝癌细胞株细胞的生长增殖.流式细胞仪分析显示,加药组在 G_1期细胞前均出现亚二倍体峰,且 G_0/G_1期细胞减少,S 期细胞增多,电镜下,对照组细胞核质比大、核大、核膜有明显切迹,0.5μmol/L As_2O_3组细胞核质比减小、核变圆、胞质内出现分化良好的细胞器,0.5,1,2μmol/L As_2O_3组均可见细胞膜完整、核固缩、凋亡小体形成.细胞免疫组化法测定 Bcl-2,Bax 蛋白的表达以及两者之间的比率均有变化.结论三氧化二砷不仅抑制人肝癌细胞增殖,而且诱导细胞凋亡.诱导肝癌细胞凋亡与 Bcl-2,Bax 蛋白的表达改变有关. 展开更多
关键词 肝细胞癌 三氧化二砷 细胞凋亡 流式细胞术 抗肿瘤药
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Annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的比较 被引量：49
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作者 张伟 梁智辉 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期1209-1212,共4页
目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡... 目的比较annexin V-FITC/PI双标记与Hoechst33342/PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡的优缺点。方法用DEX诱导胸腺细胞凋亡和H2O2诱导K562细胞系细胞凋亡,应用Hoechst33342/PI和annexin V-FITC/PI双色标记流式细胞术检测体系检测细胞凋亡情况。结果 Annexin V-FITC/PI双标记法能准确地反映2种模型中的细胞凋亡情况,与其检测原理一致;而Hoechst33342/PI双标记法虽能准确反映DEX诱导胸腺细胞的凋亡情况,但在检测H2O2诱导的K562细胞凋亡时,其早期凋亡细胞的分布与其检测原理明显不符。结论与annexin-V-FITC/PI双标记法相比,Hoechst33342/PI双标记法有一定的局限性。 展开更多
关键词 凋亡 ANNEXIN V-FITC/PI Hoechst33342/PI 流式细胞术
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淫羊藿苷调节成骨细胞骨形成和破骨细胞骨吸收的机制 被引量：49
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作者 马小妮 葛宝丰 +7 位作者 陈克明 周建 石文贵 谢艳芳 郭晓宇 吕享 成魁 高玉海 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期432-438,共7页
目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、... 目的探讨淫羊藿苷(ICA)调节骨形成和骨吸收的机制。方法原代培养大鼠颅骨成骨细胞,茜素红钙化结节染色,加入10-5mol/LICA12、24、36、48h后,用real-time RT-PCR检测骨源性分化的调节基因OSX、Runt相关基因2(Runx-2)、碱性磷酸酶(ALP)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、骨保护素(OPG)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)基因表达,Westernblotting检测OPG、RANKL和Ⅰ型胶原蛋白表达。加入10-5mol/LICA作用10～90min,流式细胞仪测定细胞内钙离子浓度。结果与对照组相比,ICA能明显促进骨形成,表现为OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达量及Collagen Ⅰ蛋白表达量明显增加(P均<0.01),同时提高细胞内钙离子浓度。ICA也能明显抑制骨吸收,表现为提高OPG及OPG/RANKL基因和蛋白水平的表达量。结论 ICA可能是通过促进OSX、Runx-2、ALP和Collagen Ⅰ基因表达,提高CollagenⅠ蛋白表达量及细胞内钙离子浓度来促进成骨细胞骨形成;并通过促进OPG及OPG、RANKL基因和蛋白水平的表达量来抑制破骨细胞骨吸收。 展开更多
关键词 成骨细胞 核因子ΚB受体活化因子配体 骨保护素 淫羊藿苷 流式细胞仪
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Effects of tanshinone Ⅱ-A sullfonate on adhesion molecule expression of endothelial cells and platelets in vitro 被引量：43
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作者 姜开余 阮长耿 +2 位作者 顾振纶 周文轩 郭次仪 《中国药理学报》 CSCD 1998年第1期47-50,共4页
探讨丹参酮ⅡＡ磺酸钠（Ｔａｎ）对培养人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）和人血小板表达粘附分子的影响．方法：用流动血细胞计数仪测定肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）诱导人脐静脉内皮细胞ＩＣＡＭ１和凝血酶诱导人血小板Ｐ选择素的... 探讨丹参酮ⅡＡ磺酸钠（Ｔａｎ）对培养人脐静脉内皮细胞（ＨＵＶＥＣ）和人血小板表达粘附分子的影响．方法：用流动血细胞计数仪测定肿瘤坏死因子（ＴＮＦα）诱导人脐静脉内皮细胞ＩＣＡＭ１和凝血酶诱导人血小板Ｐ选择素的表达．结果：ＨＵＶＥＣ经ＴＮＦα处理后，明显增加细胞表面ＩＣＡＭ１的表达，增加ＨＬ６０细胞粘附到内皮细胞表面达加入细胞总数的３０％±６％（对照组为４６％±０７％）．在ＴＮＦα处理前，用Ｔａｎ（２５－２００μｍｏｌ·Ｌ－１）与ＨＵＶＥＣ共孵育，则Ｔａｎ剂量依赖性地抑制ＴＮＦα的作用．Ｔａｎ（２５－２００μｍｏｌ·Ｌ－１）与人血小板孵育后，可剂量依赖性地抑制凝血酶诱导人血小板表面Ｐｓｅｌｅｃｔｉｎ的表达．结论：Ｔａｎ可抑制内皮细胞和血小板表达粘附分子． 展开更多
关键词 血管内皮 丹参酮Ⅱ-A 血小板 细胞粘附
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