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牙龈卟啉单胞菌菌毛质粒构建和蛋白纯化
1
作者 陈江曼 李永刚 李新 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期168-171,共4页
目的:构建牙龈卟啉单胞菌菌毛基因原核表达质粒,纯化菌毛融合蛋白。方法:提取牙龈卟啉单胞菌DNA,通过PCR法克隆菌毛基因,构建质粒并转化至感受态细胞中,选取最佳条件诱导融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶亲和层析法,纯化融合蛋白;免疫... 目的:构建牙龈卟啉单胞菌菌毛基因原核表达质粒,纯化菌毛融合蛋白。方法:提取牙龈卟啉单胞菌DNA,通过PCR法克隆菌毛基因,构建质粒并转化至感受态细胞中,选取最佳条件诱导融合蛋白,通过谷胱甘肽巯基转移酶亲和层析法,纯化融合蛋白;免疫印迹法验证蛋白的准确性。结果:实验显示低温高浓度诱导12 h时构建的质粒融合蛋白表达量最多;免疫印迹法检测在预期大小处显示特异性印迹条带。结论:成功的获得了纯度较高的牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白。 展开更多
关键词 牙龈卟啉单胞菌 菌毛 融合蛋白
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牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白fimA基因克隆和序列分析
2
作者 梁平 谢红帼 +4 位作者 苟建重 石剑锋 饶国洲 李昂 司薇杭 《陕西医学杂志》 CAS 2009年第2期134-135,164,共3页
目的:扩增牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白fimA的基因片段并作鉴定。方法:采用PCR方法克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白的fimA基因,且将基因片段插入pMD18-T Vector,通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果:克隆基因测序结果与Gene Bank核酸数据... 目的:扩增牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白fimA的基因片段并作鉴定。方法:采用PCR方法克隆牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白的fimA基因,且将基因片段插入pMD18-T Vector,通过限制性酶切和核苷酸序列分析鉴定。结果:克隆基因测序结果与Gene Bank核酸数据库中收录的Pg 381fimA的序列完全一致。结论:成功克隆了牙龈卟啉单胞菌菌毛蛋白fimA基因,为体外表达其活性蛋白提供了基础。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 牙龈卟啉单胞菌 菌毛 @fima基因
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