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华支睾吸虫F_0-ATP合酶b亚基基因的克隆表达和重组蛋白的免疫原性分析
被引量：
5
1
作者
周红娟
胡旭初
+5 位作者
胡凤玉
徐劲
马长玲
郑小凌
陈晓湘
余新炳
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期390-393,共4页
目的对华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基(CsF0-ATP-synt_B)基因进行克隆、表达及重组蛋白的免疫原性分析。方法以华支睾吸虫成虫cDNA文库中含有F0-ATP合酶b亚基基因的质粒为模板,扩增该基因(去除线粒体靶向序列的成熟肽基因),将其克隆到原核...
目的对华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基(CsF0-ATP-synt_B)基因进行克隆、表达及重组蛋白的免疫原性分析。方法以华支睾吸虫成虫cDNA文库中含有F0-ATP合酶b亚基基因的质粒为模板,扩增该基因(去除线粒体靶向序列的成熟肽基因),将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基硫代-!-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经亲和层析获得的纯化表达产物免疫SD大鼠,制备抗血清。蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫原性。结果华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基成熟肽基因的编码区含813个碱基,编码271个氨基酸,相对分子质量(Mr)为31171.9。经亲和层析获得的重组蛋白可被其免疫的大鼠血清识别。结论华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基基因可在原核表达系统中获得具有免疫原性的高效表达。
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关键词
华支睾吸虫
f
0-
atp
合酶
b
亚基
基因克隆
原核表达
免疫原性
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职称材料
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) F_0-ATP合酶b链全长cDNA的克隆及组织分布
2
作者
何晓东
刘庆慧
+3 位作者
关广阔
李倩
李晨
黄倢
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2015年第2期87-93,共7页
采用RACE方法克隆得到了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的F0-ATP合酶b链基因的全长c DNA序列。生物信息学分析显示,该基因开放阅读框744 bp,编码248个氨基酸,分子量为28.2 k Da。Blast比对结果显示,克隆得到的c DNA序列所编码的氨基...
采用RACE方法克隆得到了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的F0-ATP合酶b链基因的全长c DNA序列。生物信息学分析显示,该基因开放阅读框744 bp,编码248个氨基酸,分子量为28.2 k Da。Blast比对结果显示,克隆得到的c DNA序列所编码的氨基酸序列与海虱(Caligus clemensi)F0-ATP合酶β亚基的同源性为50%,与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)F0-ATP合酶β亚基的同源性为60%。免疫组化实验及流式细胞分析表明,F0-ATP合酶b链广泛分布于对虾鳃组织中,并且在对虾血细胞表面有分布。
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关键词
凡纳滨对虾
f
0-
atp
合酶
b
链
克隆
分布
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职称材料
题名
华支睾吸虫F_0-ATP合酶b亚基基因的克隆表达和重组蛋白的免疫原性分析
被引量：
5
1
作者
周红娟
胡旭初
胡凤玉
徐劲
马长玲
郑小凌
陈晓湘
余新炳
机构
中山大学中山医学院寄生虫教研室
出处
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第5期390-393,共4页
基金
国家高技术研究发展计划(863计划)(No.2006AA02Z422)
广东省重大科技专项(No.2004A30801004)
广州市科技计划项目(No.2006Z3-E4011)~~
文摘
目的对华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基(CsF0-ATP-synt_B)基因进行克隆、表达及重组蛋白的免疫原性分析。方法以华支睾吸虫成虫cDNA文库中含有F0-ATP合酶b亚基基因的质粒为模板,扩增该基因(去除线粒体靶向序列的成熟肽基因),将其克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,转化大肠埃希菌BL21(DE3),异丙基硫代-!-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,经亲和层析获得的纯化表达产物免疫SD大鼠,制备抗血清。蛋白质印迹(Western blotting)分析重组蛋白的免疫原性。结果华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基成熟肽基因的编码区含813个碱基,编码271个氨基酸,相对分子质量(Mr)为31171.9。经亲和层析获得的重组蛋白可被其免疫的大鼠血清识别。结论华支睾吸虫F0-ATP合酶b亚基基因可在原核表达系统中获得具有免疫原性的高效表达。
关键词
华支睾吸虫
f
0-
atp
合酶
b
亚基
基因克隆
原核表达
免疫原性
Keywords
Clonorchis
sinensis
f
0-
atp synthase
b
chain
Molecular
cloning
Prokaryotic
expression
Immunogenicity
分类号
R383.22 [医药卫生—医学寄生虫学]
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职称材料
题名
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) F_0-ATP合酶b链全长cDNA的克隆及组织分布
2
作者
何晓东
刘庆慧
关广阔
李倩
李晨
黄倢
机构
农业部海洋渔业可持续发展重点实验室中国水产科学研究院黄海水产研究所
上海海洋大学
青岛国家海洋科学重点实验室
出处
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2015年第2期87-93,共7页
基金
国家重点基础研究发展计划(2012CB114401)
国家自然科学基金(30871942)
+1 种基金
山东省"泰山学者"建设工程专项经费
农业部科研杰出人才和创新团队专项经费共同资助
文摘
采用RACE方法克隆得到了凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)的F0-ATP合酶b链基因的全长c DNA序列。生物信息学分析显示,该基因开放阅读框744 bp,编码248个氨基酸,分子量为28.2 k Da。Blast比对结果显示,克隆得到的c DNA序列所编码的氨基酸序列与海虱(Caligus clemensi)F0-ATP合酶β亚基的同源性为50%,与黑腹果蝇(Drosophila melanogaster)F0-ATP合酶β亚基的同源性为60%。免疫组化实验及流式细胞分析表明,F0-ATP合酶b链广泛分布于对虾鳃组织中,并且在对虾血细胞表面有分布。
关键词
凡纳滨对虾
f
0-
atp
合酶
b
链
克隆
分布
Keywords
Litopenaeus
vannamei
f
0-
atp synthase
b
-
chain
Clone
Distri
b
ution
分类号
S945 [农业科学—水产养殖]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
华支睾吸虫F_0-ATP合酶b亚基基因的克隆表达和重组蛋白的免疫原性分析
周红娟
胡旭初
胡凤玉
徐劲
马长玲
郑小凌
陈晓湘
余新炳
《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2007
5
下载PDF
职称材料
2
凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei) F_0-ATP合酶b链全长cDNA的克隆及组织分布
何晓东
刘庆慧
关广阔
李倩
李晨
黄倢
《渔业科学进展》
CSCD
北大核心
2015
0
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