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五个中国荞麦(Fagopyrum)种的核型分析 被引量：120
1
作者 陈庆富 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2001年第2期107-110,T001-T002,共6页
用去壁低渗法对甜荞 ( Fagopyrum esculentum)、苦荞 ( F.tataricum)、左贡野荞 ( F.zuogongense Q.F.Chen) ,大野荞 ( F.megaspartanium Q.F.Chen)及毛野荞 ( F.pilus Q.F.Chen)等大粒组荞麦种的根尖和茎尖有丝分裂染色体进行了观察 ,... 用去壁低渗法对甜荞 ( Fagopyrum esculentum)、苦荞 ( F.tataricum)、左贡野荞 ( F.zuogongense Q.F.Chen) ,大野荞 ( F.megaspartanium Q.F.Chen)及毛野荞 ( F.pilus Q.F.Chen)等大粒组荞麦种的根尖和茎尖有丝分裂染色体进行了观察 ,并对其茎尖有丝分裂染色体的核型进行了比较分析。结果表明 :这 5种荞麦在核型上类似 ,都有 2对随体染色体 ,而且都为对称核型。但它们彼此有一定的差异。甜荞、苦荞、大野荞、毛野荞及左贡野荞的核型公式分别为 1 2 m+4m( SAT)、1 2 m+4sm( SAT)、8m+4sm+4m( SAT)、1 2 m+2 m( SAT) +2 sm( SAT)及 2 4 m+4sm+4m( SAT)。 展开更多
关键词 荞麦 甜荞 苦荞 大时荞 毛野荞 左贡时荞 核型分析
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F菌毛的研究进展 被引量：1
2
作者 高荣凯 《微生物学杂志》 CAS CSCD 2012年第4期69-71,共3页
F菌毛是雄性大肠埃希菌表面的一种特殊结构,具有许多生物功能,就其分子生物学、结构和功能等方面的进展进行综述,并展望其应用于库-库筛选的可行性。
关键词 f菌毛 丝状噬菌体 接合 受体 库-库筛选
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3种多年生荞麦植株顶端茎段的可溶性糖含量
3
作者 王传蔚 闫玉莹 +2 位作者 顾亮亮 石桃雄 陈庆富 《贵州农业科学》 CAS 2015年第5期50-53,共4页
为了对3种多年生荞麦植物中的23个居群的菜用品质进行评价,采用蒽酮法测定各植株顶端不同季节及不同茎段的可溶性糖含量。结果表明：1）多年生荞麦顶端幼叶的可溶性糖含量最高,并随节位数降低而减少;2）春季含量最高,与夏秋两季的差异... 为了对3种多年生荞麦植物中的23个居群的菜用品质进行评价,采用蒽酮法测定各植株顶端不同季节及不同茎段的可溶性糖含量。结果表明：1）多年生荞麦顶端幼叶的可溶性糖含量最高,并随节位数降低而减少;2）春季含量最高,与夏秋两季的差异水平达极显著,夏秋两季之间差异不显著;3）3种荞麦中,大野荞、毛野荞的可溶性糖含量较高,差异不显著,硬枝万年荞可溶性糖含量最少,与大野荞的差异显著,与毛野荞的差异不显著。结论：筛选出可溶性糖含量较高的8个多年生荞麦居群,其顶端3个茎节的可溶性糖含量为10.23%-15.37%,春季适宜采摘顶端3-4节食用,夏秋季采摘顶端1-2节食用。 展开更多
关键词 多年生荞麦 大野荞 毛野荞 硬枝万年荞 尖菜蔬菜 可溶性糖含量
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产肠毒素性大肠杆菌致病因子F_(41)、K_(99)菌毛基因的克隆与表达 被引量：7
4
作者 闻晓波 崔玉东 +3 位作者 冉旭华 朱战波 朴范泽 潘兴广 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期797-800,共4页
目的为了分析原核表达的ETECF41和K99菌毛亚单位的抗原性和作为基因工程亚单位疫苗的可能性。方法针对黏附素F41和K99的编码序列,设计两对特异性引物,扩增F41和K99菌毛蛋白的编码基因,经序列测定后,克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化... 目的为了分析原核表达的ETECF41和K99菌毛亚单位的抗原性和作为基因工程亚单位疫苗的可能性。方法针对黏附素F41和K99的编码序列,设计两对特异性引物,扩增F41和K99菌毛蛋白的编码基因,经序列测定后,克隆到原核表达载体pET-28a(+)上,转化E.coliBL21(DE3),筛选到可以表达F41和K99菌毛亚单位的菌株。经IPTG诱导表达后,进行SDS-PAGE和Western blot试验分析原核表达的F41和K99重组蛋白的抗原性。结果表达的F41和K99菌毛亚单位蛋白可以与抗F41和K99菌毛蛋白的单因子血清反应。结论原核表达的F41和K99重组蛋白具有良好的抗原性。 展开更多
关键词 产肠毒素性大肠杆菌 f41菌毛 K99菌毛 原核表达
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ETEC F4-F5融合基因表达及间接ELISA方法建立 被引量：5
5
作者 张强 张雪寒 +1 位作者 何孔旺 王春凤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第8期1312-1317,共6页
表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入... 表达产肠毒素性大肠杆菌(enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)黏附素F4和F5融合蛋白,建立间接ELISA方法,旨在监测猪场ETEC感染以及疫苗免疫情况。根据GenBank中登录F4和F5基因序列,分析保守区,优化密码子,合成F4-F5串联基因,克隆入原核表达载体,表达重组蛋白His-F4-F5。以纯化的His-F4-F5蛋白作为检测抗原,建立检测ETEC抗体的间接EIISA方法。经酶切和DNA序列分析,成功构建重组菌BL21(pCold I-F4-F5),SDS-PAGE和Western blot分析,融合表达F4-F5相对分子质量为29 000,与ETEC高免血清发生特异性反应,条带单一。经优化筛选的间接ELISA最佳反应条件:抗原包被浓度6ng/孔,待检血清稀释比例1∶200,HRP-羊抗猪二抗的工作浓度1∶15 000,5%脱脂奶封闭l h,底物作用时间15min。本研究建立F4-F5间接ELISA方法具有特异性好、敏感性高、重复性好、稳定性强的特点,是猪场ETEC感染和疫苗免疫效果检测的有效工具,进而指导疫苗使用和新型疫苗研发。 展开更多
关键词 产肠毒索性大肠杆菌 f4菌毛 f5菌毛 间接酶联免疫吸附试验
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产肠毒素大肠杆菌F4菌毛抗体间接ELISA检测方法的建立 被引量：1
6
作者 杨绪秋 方一臻 +1 位作者 张艳艳 范红结 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第8期655-658,共4页
为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛抗体的方法,本研究以纯化的重组F4菌毛蛋白作为检测抗原建立了间接ELISA方法,并对该方法的反应条件进行了优化。确定ELISA最佳条件为:包被抗原浓度为3.5 ng/孔;5%脱脂奶封闭液封闭2 h;血清最佳... 为建立检测产肠毒素大肠杆菌(ETEC)F4菌毛抗体的方法,本研究以纯化的重组F4菌毛蛋白作为检测抗原建立了间接ELISA方法,并对该方法的反应条件进行了优化。确定ELISA最佳条件为:包被抗原浓度为3.5 ng/孔;5%脱脂奶封闭液封闭2 h;血清最佳稀释度为1∶3 200、血清最佳作用时间为1 h;酶标二抗的最佳作用时间为1 h。该方法对F5、F6菌毛阳性血清和猪链球菌阳性血清无交叉反应,具有良好的特异性。其组内和组间的变异系数均小于10%,具有良好的重复性。利用建立的间接ELISA方法检测血清并采用PCR方法检测其肛拭子进行符合性试验,其总符合率为96.2%。临床检测312份未经ETEC免疫的猪血清,阳性率为9.9%。表明该方法可以用于ETEC F4菌毛抗体的临床检测。 展开更多
关键词 产肠毒素大肠杆菌 f4菌毛 间接酶联免疫吸附试验
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牛源大肠杆菌F41菌毛蛋白的原核表达和多克隆抗体的制备 被引量：1
7
作者 倪宏波 郎秀艳 +5 位作者 邵光喜 周玉龙 焉秋龙 刘银冰 宫大庆 王春仁 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第1期48-50,55,共4页
目的原核表达及纯化牛源产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)F41菌毛蛋白,并制备F41菌毛蛋白的多克隆抗体。方法以ETEC基因组为模板,采用PCR法扩增F41菌毛基因,克隆入表达载体pQE-30,转化大肠杆菌XL1-Blue,IPTG... 目的原核表达及纯化牛源产肠毒素性大肠杆菌(Enterotoxigenic Escherichia coli,ETEC)F41菌毛蛋白,并制备F41菌毛蛋白的多克隆抗体。方法以ETEC基因组为模板,采用PCR法扩增F41菌毛基因,克隆入表达载体pQE-30,转化大肠杆菌XL1-Blue,IPTG诱导表达,并进行SDS-PAGE分析,表达产物经切胶纯化,免疫新西兰大白兔,制备多克隆抗体,采用间接ELISA法测定抗血清效价,Western blot分析F41菌毛蛋白与多抗的反应原性。结果重组表达质粒pQE-30-F41经双酶切及测序证实构建正确;F41菌毛重组蛋白以包涵体形式表达,相对分子质量约为32 000;重组蛋白的表达量约占菌体总蛋白的35%,纯化的重组蛋白纯度可达92%;制备的抗血清效价达1∶2.56×106以上,Western blot结果表明F41菌毛蛋白与制备的多抗具有良好的反应原性。结论已成功原核表达并纯化了F41菌毛重组蛋白,且制备了高效价的多克隆抗体,为单克隆抗体制备及其免疫检测方法的建立奠定了基础。 展开更多
关键词 产毒素性大肠杆菌 f41菌毛 原核细胞 基因表达 多克隆抗体
原文传递
海安县猪水肿病的流行病学与病原特性研究
8
作者 洪小花 朱润芝 +4 位作者 庞全海 李宏全 高崧 杨宏伟 丁永龙 《吉林畜牧兽医》 2005年第3期6-10,12,共6页
对江苏省海安县2003年5月-2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查,发现猪水肿病在海安地区呈零星散发性发生,发病率为0.31%-1.84%,死亡率为0.07%-0.56%,病死率为16.0%-35.0%。水肿病主要侵害仔猪,育成猪也偶有发生... 对江苏省海安县2003年5月-2004年5月各乡镇猪水肿病的发病和死亡情况进行了流行病学调查,发现猪水肿病在海安地区呈零星散发性发生,发病率为0.31%-1.84%,死亡率为0.07%-0.56%,病死率为16.0%-35.0%。水肿病主要侵害仔猪,育成猪也偶有发生,一般以气温比较高的季节多发。同时从疑似猪水肿病的病料中分离到12株大肠杆菌,经O血清型鉴定,5株为O139,2株为O45,O55、O93、O9、O101、O119各1株。经多重PCR检测毒素基因(STa、STb、LT、SLT-2e)和大肠杆菌粘附素单抗(F4、F5、F6,F41、F18)检测菌毛,共6个分离株带有SLT-2e基因,其中O139分离株5株,O55分离株1株,其余6株均带STb基因。12个分离株中,单独表达F18菌毛的4株(O1392株,O45、O119各1株),F5+F411株(O93),F41+F181株(O139),F5+F41+F182株(均为O139)。经药敏试验,多数分离株对壮观霉素和新霉素高度敏感。 展开更多
关键词 分离株 SLT 流行病学 多发 E基因 多重PCR检测 发病 猪水肿病 病原特性 病料
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