慢性缺氧应激可能通过EMT增强乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为 被引量：7

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作者 陈坚 何咏竟 +1 位作者 汪思应 胡敏 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第10期1831-1836,共6页

目的:探讨慢性缺氧应激对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:将人乳腺癌MCF-7细胞分为缺氧组(1%O_2、5%CO_2和94%N_2)和正常对照组(常氧)进行培养。利用MTT法、CCK-8实验、细胞直接计数法及细胞侵袭和迁移实验对MC... 目的:探讨慢性缺氧应激对人乳腺癌MCF-7细胞恶性生物学行为的影响及可能机制。方法:将人乳腺癌MCF-7细胞分为缺氧组(1%O_2、5%CO_2和94%N_2)和正常对照组(常氧)进行培养。利用MTT法、CCK-8实验、细胞直接计数法及细胞侵袭和迁移实验对MCF-7细胞活力、增殖及侵袭和迁移能力进行检测;用软琼脂集落形成实验及Matrigel 3D培养技术检测MCF-7细胞非锚定生长能力及极性改变情况;利用MCF-7细胞构建裸鼠皮下种植瘤模型,检测慢性缺氧应激对体内肿瘤生长及肺转移的影响;利用倒置显微镜观察MCF-7细胞形态改变;Western blot检测低氧诱导因子1(hypoxia-inducible factor-1,HIF-1)和磷酸化的糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase-3β,GSK-3β)在缺氧环境下表达水平的改变,以及E-钙黏连蛋白(E-cadherin)、N-钙黏连蛋白(Ncadherin)、波形蛋白(vimentin)、基质金属蛋白酶3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、MMP-9等上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)相关蛋白的表达水平。结果:与正常对照组相比较,慢性缺氧组MCF-7细胞活力、增殖能力及侵袭迁移能力增强,细胞非锚定生长能力提高且在3D培养系统更容易发生极性改变,呈现侵袭样生长,体内生长及转移能力增强;除了HIF-1被缺氧诱导表达升高外,GSK-3β呈现活化趋势,且上皮样标志物E-cadherin蛋白表达水平明显下降,而间充质样标志物N-cadherin、vimentin、MMP-3和MMP-9蛋白表达水平明显升高。结论:慢性缺氧应激促进了乳腺癌细胞恶性生物学行为,且其机制可能与EMT有关。 展开更多

关键词 乳腺癌 缺氧 肿瘤转移 肿瘤微环境 上皮-间充质转化

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E盒结合锌指蛋白2对AsPC-1细胞增殖和EMT的影响

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作者 王璐瑶 周静 +5 位作者 张荣花 于笑涵 熊亚南 王梅梅 章广玲 刘志勇 《医学研究与战创伤救治》 CAS 北大核心 2024年第8期798-805,共8页

目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对AsPC-1胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法按照胰腺癌细胞中转染物不同,将细胞分为4组,分别是si-NC、si-ZEB2、pcDNA3.1、pcDNA3.1-ZEB2。TCGA数据库分析ZEB2在胰腺癌组织... 目的探讨E盒结合锌指蛋白2(ZEB2)对AsPC-1胰腺癌细胞增殖、迁移、侵袭和上皮间充质转化(EMT)的影响。方法按照胰腺癌细胞中转染物不同,将细胞分为4组,分别是si-NC、si-ZEB2、pcDNA3.1、pcDNA3.1-ZEB2。TCGA数据库分析ZEB2在胰腺癌组织与癌旁胰腺组织中的表达差异及其与胰腺癌患者预后的关系,并利用Westernblot检测ZEB2在AsPC-1胰腺癌细胞和正常胰腺上皮细胞HPNE中的表达差异。采用qRT-PCR、Westernblot检测ZEB2小干扰RNA(si-ZEB2)及过表达质粒(pcDNA3.1-ZEB2)的转染效率。CCK-8、克隆形成、划痕和Transwell实验检测ZEB2对AsPC-1细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响。qRT-PCR和免疫荧光实验检测ZEB2对AsPC-1细胞中EMT标志物表达的影响。利用生物信息学网站预测与ZEB2有靶定作用的miRNAs并构建ZEB2的蛋白-蛋白互作网络(PPI)。结果ZEB2在胰腺癌组织和AsPC-1胰腺癌细胞中高表达(P<0.05),且其高表达与胰腺癌患者的较差预后相关。qRT-PCR、Westernblot结果表明si-ZEB2和pcDNA3.1-ZEB2能够有效的转染到AsPC-1胰腺癌细胞中(P<0.05)。与si-NC组相比,si-ZEB2组中AsPC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力受到抑制,EMT上皮标志物E-cadherin表达增加、间质标志物Vimentin表达减少(P<0.05)。pcDNA3.1-ZEB2组中AsPC-1细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭和EMT标志物得到了与上述相反的结果(P<0.05)。共预测到与ZEB2有靶定作用的miRNAs 77个,与ZEB2作用密切的蛋白有10个。结论ZEB2在胰腺癌组织和细胞中高表达且其高表达与胰腺癌患者的较差预后相关,ZEB2作为一种促癌因子,能够促进AsPC-1胰腺癌细胞的增殖、克隆形成、迁移、侵袭和EMT进程。 展开更多

关键词 E盒结合锌指蛋白2 胰腺癌 AsPC-1细胞 增殖 上皮间充质转化

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AEG-1介导上皮-间质转化调控头颈部鳞状细胞癌的侵袭转移 被引量：4

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作者 余长云 刘勇 +6 位作者 谭浩蕾 朱刚才 李果 粟忠武 田勇泉 邱元正 张欣 《中国耳鼻咽喉颅底外科杂志》 CAS 2013年第3期183-187,共5页

目的分析星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)可介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)调控头颈鳞癌侵袭转移的分子机制。方法采用慢病毒介导AEG-1的上调载体上调AEG-1在头颈鳞癌Tu686细胞中... 目的分析星形胶质细胞上调基因-1(astrocyte elevated gene-1,AEG-1)可介导上皮-间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)调控头颈鳞癌侵袭转移的分子机制。方法采用慢病毒介导AEG-1的上调载体上调AEG-1在头颈鳞癌Tu686细胞中的表达,划痕愈合实验、Transwell侵袭小室实验检测其体外迁移侵袭能力的改变,同时Western blot检测EMT分子标志物E-cadherin及Vimentin的表达情况。结果 Tu686细胞中AEG-1表达上调后,细胞划痕愈合率增加,穿过Transwell聚碳酸酯膜的细胞明显增多,且Tu686细胞上皮细胞标志物E-cadherin的表达量显著下调,间质细胞标志物Vimen-tin表达显著上调。结论 AEG-1表达上调可显著提高头颈部鳞癌细胞的体外侵袭能力,且该侵袭能力的增强可能与AEG-1介导的EMT改变密切相关。 展开更多

关键词 头颈部肿瘤 癌 鳞状细胞 星形胶质细胞上调基因-1 上皮-间质转化 转移

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二烯丙基二硫下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌细胞β-catenin表达 被引量：3

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作者 苏波 丁恩 +3 位作者 曾颖 夏红 刘芳 苏琦 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期393-398,共6页

目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。方法实验组分为6组,对照组(Control),DADS处理组,TGF-β1处理组,TGF-β1+SB431542组,TGF-β1+DADS组,TGF-β1+NSC2376... 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)是否通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。方法实验组分为6组,对照组(Control),DADS处理组,TGF-β1处理组,TGF-β1+SB431542组,TGF-β1+DADS组,TGF-β1+NSC23766组。RT-PCR、Western blot分别检测TGF-β1、Rac1、β-catenin、E-cadherin和vimentin mRNA和蛋白水平。结果DADS下调TGF-β1、Rac1、β-catenin和vimentin,上调E-cadherin表达。TGF-β1受体阻断剂SB431542和Rac1抑制剂NSC23766下调β-catenin和vi-mentin,上调E-cadherin表达。结论DADS通过下调TGF-β1/Rac1通路抑制人胃癌MGC803细胞β-catenin表达。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 转化生长因子Β1 RAC1 Β-CATENIN 人胃癌细胞 上皮细胞向间质细胞转化

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转化生长因子β信号通路在肝癌患者中的作用机制 被引量：3

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作者 郑涛 杨甲梅 《中华肝胆外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期425-428,共4页

转化生长因子β（ TGF-β）在调节细胞增殖、分化和凋亡中起着重要作用，也是癌症的关键细胞因子。与其在正常组织中的抑癌作用不同，在炎症微环境及癌组织中TGF-β信号通路的持续活化具有促进肝癌发生和发展的作用。 Smad4的失活和上... 转化生长因子β（ TGF-β）在调节细胞增殖、分化和凋亡中起着重要作用，也是癌症的关键细胞因子。与其在正常组织中的抑癌作用不同，在炎症微环境及癌组织中TGF-β信号通路的持续活化具有促进肝癌发生和发展的作用。 Smad4的失活和上皮间质转化（ EMT）可能是TGF-β由抑癌因子转变为促癌因子的重要机制。因此，进一步深入研究TGF-β信号通路的调控机制，可为肝癌的防治提供新的治疗依据。 展开更多

关键词 转化生长因子Β 信号通路 肝癌 上皮间质转化

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microRNA-1271-5p靶向FOXQ1抑制宫颈鳞状细胞癌细胞的迁移和侵袭

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作者 朱梦月 丁燕 胡明 《医学分子生物学杂志》 CAS 2019年第6期562-568,574,共8页

目的 探究miR-1271-5p对宫颈鳞状细胞癌 ( cervical squamous cell carcinoma, CSCC) 细胞迁移和侵袭能力的影响, 初步阐明miR-1271-5p对癌基因叉头框蛋白Q1 ( forkhead box Q1, FOXQ1) 的靶向调控机制.方法 收集2018年1月至2018年10月... 目的 探究miR-1271-5p对宫颈鳞状细胞癌 ( cervical squamous cell carcinoma, CSCC) 细胞迁移和侵袭能力的影响, 初步阐明miR-1271-5p对癌基因叉头框蛋白Q1 ( forkhead box Q1, FOXQ1) 的靶向调控机制.方法 收集2018年1月至2018年10月在华中科技大学同济医学院附属武汉中心医院行手术切除的41例CSCC患者的癌和癌旁组织标本, 应用RT-qPCR检测组织中miR-1271-5p和FOXQ1 mRNA的表达水平, 分析miR-1271-5p和FOXQ1 mRNA表达的相关性;RT-qPCR检测 miR-1271-5p和 FOXQ1 mRNA在人CSCC细胞株 (SiHa和CaSki) 及人宫颈永生化鳞状细胞株 ( End1/E6E7) 中的表达水平;应用miR-1271-5p模拟物转染SiHa细胞, 分别采用划痕实验和Transwell小室检测miR-1271-5p对细胞迁移和侵袭能力的影响;采用Western印迹检测miR-1271-5p对FOXQ1、 E-cadherin和Vimentin蛋白表达水平的影响;最后, 应用双荧光素酶报告基因验证miR-1271-5p对FOXQ1的靶向调控作用.结果 miR-1271-5p在CSCC组织中的表达水平显著低于癌旁组织 (P<0.001), 在人CSCC细胞株 (SiHa和CaSki) 中的表达水平也均低于人宫颈永生化鳞状细胞株 (End1/E6E7) (P<0.001);与转染阴性对照细胞比较, 转染miR-1271-5p模拟物的SiHa细胞的迁移和侵袭能力明显受到抑制 (P<0.05). FOXQ1 mRNA和蛋白在CSCC组织中的表达水平均显著高于癌旁组织 (P<0.001), 相关性分析显示, FOXQ1 mRNA的表达水平与miR-1271-5p呈负相关 (r = -0.612, P<0.001).在转染miR-1271-5p模拟物后, SiHa中FOXQ1和Vimentin蛋白表达水平均降低, 而E-cadherin蛋白表达增高.双荧光素酶报告基因试验确认miR-1271-5p可通过与FOXQ1 mRNA的3′-非翻译区 (3′-untranslated re-gion, 3′UTR) 直接结合, 靶向调控FOXQ1的表达.结论 miR-1271-5p在CSCC中表达下调, 其可通过靶向抑制FOXQ1的表达调节细胞的上皮间质转化状态, 从而抑制CSCC细胞的迁移和侵袭. 展开更多

关键词 宫颈鳞状细胞癌 miR-1271-5p FOXQ1 上皮间质转化 迁移 侵袭

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lncRNA NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制

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作者 张永涛 唐雪娣 徐枫钞 《山东医药》 CAS 2023年第25期37-41,共5页

目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制。方法体外传代培养鼻咽癌细胞CNE2并构建放射抵抗细胞模型。将放射抵抗CNE2细胞随机分为空白组、NC组、转染组,转染组和NC组分别转染NKILA-mimic... 目的探讨长链非编码RNA(lncRNA)NKILA对鼻咽癌细胞放射抵抗和上皮间质转化的影响及其机制。方法体外传代培养鼻咽癌细胞CNE2并构建放射抵抗细胞模型。将放射抵抗CNE2细胞随机分为空白组、NC组、转染组,转染组和NC组分别转染NKILA-mimic、NKILA-NC质粒,空白组不予转染。收集细胞,采用RT-qPCR法检测lncRNA NKILA、miR-21表达,采用MTT法检测细胞增殖能力,采用Transwell小室实验检测细胞侵袭和迁移能力,采用Western blotting法检测E-cadherin、N-cadherin表达;通过TargetScan预测lncRNA NKILA与miR-21的靶向调控关系,并通过双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA NKILA与miR-21的靶向调控关系。取SD裸鼠10只,随机分为观察组和对照组各5只,分别于右前肢腋下注射转染lncRNA NKILA的放射抵抗CNE2细胞、单纯放射抵抗CNE2细胞,常规饲养4周处死,分离并测量移植瘤体积。结果转染组lncRNA NKILA表达、E-cadherin表达均高于空白组和NC组,miR-21表达及细胞增殖、侵袭、迁移能力和N-cadherin表达均低于空白组和NC组(P均<0.05);而空白组与NC组上述指标比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。TargetScan预测显示,lncRNA NKILA与miR-21存在靶向结合位点;双荧光素酶报告基因实验结果显示,共转染NKILA-mimic质粒与miR-21-3′-UTR-WT的CNE2细胞荧光素酶活性低于共转染NKILA-NC质粒与miR-21-3′-UTR-WT的CNE2细胞(P<0.05),而共转染NKILA-mimic质粒、miR-21-3′-UTR-MUT与共转染NKILA-NC质粒、miR-21-3′-UTR-MUT的CNE2细胞荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05)。观察组移植瘤体积小于对照组(P<0.05)。结论lncRNA NKILA可能通过靶向抑制miR-21表达而抑制鼻咽癌细胞的增殖、侵袭和迁移,继而抑制鼻咽癌细胞的放射抵抗和上皮间质转化。 展开更多

关键词 鼻咽癌 长链非编码RNA NKILA 微小RNA-21 放射抵抗 上皮间质转化

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EZH2对鼻咽癌细胞增殖和侵袭影响的研究 被引量：4

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作者 梁碧君 李湘平 +8 位作者 鲁娟 林少雄 刘雄 李刚 张宝 王路 罗花南 万仁强 田文栋 《中华耳鼻咽喉头颈外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期298-304,共7页

目的探讨果蝇zeste基因增强子人类同源物（enhancer of zeste homolog2，EZH2）对鼻咽癌细胞增殖及侵袭能力的影响及其分子机制。方法构建特异性的短发夹状（short hairpin RNA，shRNA）EZH2慢病毒干扰载体，转染293FT细胞包装成慢病毒... 目的探讨果蝇zeste基因增强子人类同源物（enhancer of zeste homolog2，EZH2）对鼻咽癌细胞增殖及侵袭能力的影响及其分子机制。方法构建特异性的短发夹状（short hairpin RNA，shRNA）EZH2慢病毒干扰载体，转染293FT细胞包装成慢病毒后，感染鼻咽癌细胞株5—8F。采用四甲基偶氮唑蓝法、平板克隆形成实验和流式细胞术检测细胞增殖状态及细胞周期的改变，利用细胞划痕实验及Invasion Chamber侵袭小室测定法检测迁移和侵袭能力变化，荧光定量PCR及蛋白免疫印迹法检测转染EZH2基因后的mRNA和蛋白表达水平改变及上皮间质转化相关标志物的变化。结果成功构建EZH2 shRNA慢病毒干扰载体，包装的慢病毒感染鼻咽癌细胞株5—8F后，EZH2的mRNA和蛋白表达水平显著下凋。四甲基偶氮唑蓝法显示，细胞接种96h后，5-8F／shEZH2组的生长速度较空载组显著下降（P〈0．001），平均（x^-±s，下同）细胞克隆形成率为（31．56±7．49）％明显小于空载组的（84．44±7．12）％，差异有统计学意义（P=0．001）；细胞周期结果表明，沉默EZH2表达的细胞增殖受抑，主要通过诱导G0／G1期阻滞，减少s期细胞的比例；基因转染沉默EZH2后，鼻咽癌细胞的运动迁移能力显著下降，5-8F／shEZH2组细胞划痕48h的相对迁移率为（0．58±0．05）明显低于空载组的（0．81±0．02），差异有统计学意义（P〈0．000）；体外侵袭能力明显降低，5-8F／shEZH2组穿膜细胞数（72．23±4．08）个，与其相对应空载组（150．95±16．27）个比较，明显减少（P〈0．000）；5-8F／shEZH2细胞的上皮标志物上皮性钙黏附蛋白（E—cadherin）、细胞角蛋白18（Keratin18）的mRNA水平分别上调1．77倍、1．58倍，间质标志物β-连环蛋白（β—catenin）、神经性钙黏附蛋白（N-cadherin）分别下调18．04％、41．18％；蛋白免疫印迹证实此四者的蛋白水平 展开更多

关键词 鼻咽肿瘤 DNA结合蛋白质类 转录因子 基因沉默 细胞增殖 肿瘤浸润 上皮间质转化

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豆蔻明对肺纤维化的治疗作用及机制

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作者 张娟 党连生 《中国现代医生》 2024年第8期83-88,共6页

目的观察豆蔻明(Cardamonin,CDN)对肺纤维化小鼠的作用,并探究其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/smad信号通路的影响。方法将小鼠随机分为生理盐水(Sham)组、博莱霉素(Bleomycin,BLM)组、豆蔻明低剂量(low... 目的观察豆蔻明(Cardamonin,CDN)对肺纤维化小鼠的作用,并探究其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)/smad信号通路的影响。方法将小鼠随机分为生理盐水(Sham)组、博莱霉素(Bleomycin,BLM)组、豆蔻明低剂量(low dose of Cardamonin,CDN-L)组、豆蔻明中剂量(medium dose of Cardamonin,CDN-M)组、豆蔻明高剂量(high dose of Cardamonin,CDN-H)组、地塞米松(dexamethasone,DXM)组;单次气管注射BLM诱导肺纤维化,计算肺指数;酶联免疫吸附法测血清肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;试剂盒测肺组织羟脯氨酸(hydroxyproline,HYP)含量,苏木精-伊红、马松染色观察肺炎症程度及纤维化情况,RT-PCR法检测肺组织TGF-β1/smad信号通路相关基因表达情况。结果与Sham组相比,BLM组小鼠肺指数、Szapiel评分、Ashcroft评分明显升高(P<0.05),肺部炎症程度和纤维化程度严重。血清中TNF-α含量升高(P<0.05)、肺组织HYP水平升高(P<0.05),TGF-β1[(1.02±0.21)vs.(3.25±0.14)]、smad2[(1.00±0.05)vs.(1.63±0.09)]、smad3[(1.00±0.06)vs.(1.82±0.07)]、α-平滑肌肌动蛋白(α-smoothmuscleactin,α-SMA)[(1.00±0.10)vs.(2.15±0.10)]mRNA表达升高(P<0.05),上皮-钙黏蛋白(E-Cadherin)[(1.01±0.16)vs.(0.57±0.09)]mRNA水平降低(P<0.05)。CDN-M、CDN-H干预可减低小鼠肺指数,减轻炎性和肺纤维化,降低TNF-α、HYP水平(P<0.05),同时下调肺纤维小鼠肺组织中TGF-β1、smad2、smad3、α-SMA表达,上调E-Cadherin表达。CDN-L无明显治疗效果,CDN-H治疗作用与DXM相似。结论CDN可能通过TGF-β1/Smad通路介导上皮-间充质转化而发挥抗纤维化作用。 展开更多

关键词 豆蔻明 肺纤维化 TGF-Β1/SMAD信号通路 上皮间质转化

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上皮细胞黏附分子、波形蛋白和N-钙黏素在乳腺癌分子亚型中的表达及相关性 被引量：2

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作者 付丽梅 刘敏 +1 位作者 于雪梅 李新军 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1137-1142,共6页

目的:研究上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏素(N-cadherin)在乳腺癌及其分子亚型中的表达及相关性。方法:通过免疫组织化学方法检测835例乳腺癌组织中Ep CAM,vimentin和N-cadhe... 目的:研究上皮细胞黏附分子(epithelial cell adhesion molecule,Ep CAM)、波形蛋白(vimentin)、N-钙黏素(N-cadherin)在乳腺癌及其分子亚型中的表达及相关性。方法:通过免疫组织化学方法检测835例乳腺癌组织中Ep CAM,vimentin和N-cadherin的表达情况,分析其与乳腺癌临床病理特征的相关性。结果:Ep CAM,vimentin及N-cadherin在835例乳腺癌中的表达率分别为53.4%,11.4%和9.7%;其阳性率随着肿瘤体积增大、组织学级别升高、淋巴结阳性、TNM分期增高、雌激素受体和孕激素受体阴性而增高(均P<0.05)。在腺腔A型、腺腔B型(HER2–)、腺腔B型(HER2+)、HER2过表达型及三阴型中,Ep CAM的阳性表达率分别为19.2%,73.0%,48.9%,72.2%和62.1%;vimentin为3.9%,11.4%,14.1%,11.1%和20.5%;N-cadherin为7.0%,5.7%,12.0%,12.2%和17.4%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。在835例乳腺癌及三阴型乳腺癌中Ep CAM表达与vimentin和N-cadherin均呈正相关性。结论:Ep CAM在三阴型乳腺癌中呈高表达,并与上皮间质转化标志物相关,可能参与该型乳腺癌的发展、转移过程。 展开更多

关键词 乳腺癌 上皮细胞黏附分子 上皮间质转化 免疫组织化学

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头颈部鳞状细胞癌组织中Smad7、Smad4蛋白的表达变化及意义 被引量：2

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作者 张峰 《山东医药》 CAS 2014年第31期44-46,共3页

目的观察Smad7及Smad4蛋白在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法分别对头颈部鳞状细胞癌组织、癌旁组织、活检留取的正常头颈部组织中的Smad7蛋白、Smad4蛋白、TGF-β1表达进行检测,分析三者间表达... 目的观察Smad7及Smad4蛋白在头颈部鳞状细胞癌组织中的表达变化,并探讨其意义。方法采用免疫组化SP法分别对头颈部鳞状细胞癌组织、癌旁组织、活检留取的正常头颈部组织中的Smad7蛋白、Smad4蛋白、TGF-β1表达进行检测,分析三者间表达及其与肿瘤临床病理参数的关系。结果 1 TGF-β1和Smad7蛋白在肿瘤组织中的表达水平明显高于癌旁组织和正常组织(F分别为5.71、7.31),而Smad4蛋白在肿瘤组织中的表达明显低于癌旁组织和正常组织(F为14.92),P均<0.05。2随肿瘤分化程度增高,TGF-β1及Smad7蛋白表达呈降低趋势(F分别为11.2、12.8)、Smad4蛋白呈升高趋势(F为7.91),P均<0.05;Smad4蛋白表达与肿瘤直径呈负相关、Smad7蛋白表达与肿瘤直径呈正相关(P均<0.05),TGF-β1表达与肿瘤直径无明显相关(P>0.05);Smad4蛋白表达在淋巴结转移者明显低于无转移者(P<0.05),有无淋巴结转移者Smad7蛋白及TGF-β1表达无显著差异(P>0.05)。3 Smad4蛋白表达与TGF-β1呈负相关(r=-0.32),与Smad7蛋白呈正相关(r=0.39),P均<0.05。结论头颈部鳞状细胞癌组织中Smad7、Smad4蛋白表达异常,且可能通过调控上皮—间质转化参与肿瘤的侵袭、分化;检测两者(尤其是Smad4蛋白)可为临床分期、预后评估提供依据。 展开更多

关键词 头颈部肿瘤 鳞状细胞癌 SMAD7蛋白 SMAD4蛋白 上皮-间质转化

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癌相关成纤维细胞促进胃癌细胞迁移与侵袭

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作者 周畅 陈伟强 +4 位作者 王宇恒 杨晓夏 涂幸 刘靖 罗利 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期501-508,共8页

【目的】本研究旨在探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及作用机制。【方法】采用酶消化法分离培养正常成纤维细胞(NFs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)并进行特征指标鉴定。收集两种细胞的条件培养基(NFs-CM、CAFs-C... 【目的】本研究旨在探讨癌相关成纤维细胞(CAFs)对胃癌细胞迁移与侵袭能力的影响及作用机制。【方法】采用酶消化法分离培养正常成纤维细胞(NFs)及癌相关成纤维细胞(CAFs)并进行特征指标鉴定。收集两种细胞的条件培养基(NFs-CM、CAFs-CM),分别作用于胃癌细胞系AGS及MGC803,利用细胞划痕实验检测胃癌细胞迁移能力;Transwell小室迁移及侵袭实验评价胃癌细胞迁移与侵袭能力;光学显微镜观察胃癌细胞形态变化;荧光定量PCR检测胃癌细胞中“上皮-间质”转化(EMT)相关指标的表达变化。【结果】我们成功分离培养NFs及CAFs;与NFs-CM组相比,CAFs-CM组胃癌细胞的迁移与侵袭能力均增强(P<0.05),胃癌细胞形态由扁圆的上皮细胞形态演变为梭形的间质细胞形态,胃癌细胞中上皮细胞标志E-钙粘蛋白(E-cadherin)表达降低,间质细胞标志波形蛋白(Vimentin)和N-钙粘蛋白(N-cadherin)表达上升(P<0.05)。【结论】CAFs可通过调节EMT进程促进胃癌细胞迁移与侵袭。 展开更多

关键词 癌相关成纤维细胞 胃癌 迁移 侵袭 “上皮-间质”转化

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