伪狂犬病毒流行毒株的抗原性和血清中和特性分析 被引量：26

1

作者 杨文萍 顾真庆 +4 位作者 孙海凤 董静 侯成才 白娟 姜平 《畜牧与兽医》 北大核心 2014年第10期11-14,共4页

2011年以来,我国多个省份伪狂犬病免疫猪群相继暴发伪狂犬病疫情.为了探明伪狂犬病毒（PRV）流行毒株是否存在抗原变异,本研究从3个规模猪场3种PRV商品疫苗免疫的健康猪群中采集30份血清,经检测PRVgBELISA抗体均为阳性,gE ELISA抗体均... 2011年以来,我国多个省份伪狂犬病免疫猪群相继暴发伪狂犬病疫情.为了探明伪狂犬病毒（PRV）流行毒株是否存在抗原变异,本研究从3个规模猪场3种PRV商品疫苗免疫的健康猪群中采集30份血清,经检测PRVgBELISA抗体均为阳性,gE ELISA抗体均为阴性.采用PRV新流行毒株ZJ-01株和传统的LA毒株分别进行血清中和抗体测定,结果显示,3个毒株活疫苗免疫血清与ZJ-01株中和抗体效价明显低于其与LA株中和抗体效价.同时,ZJ-01株抗血清与ZJ-01株和LA株的中和抗体效价相似,其变异系数R值为0.279～0.413,证明PRV分离毒株ZJ-01抗原性发生明显变异.本研究为伪狂犬病的防控提供了重要依据. 展开更多

关键词 交叉中和试验 抗原变异

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禽流感H9亚型流行毒株交叉免疫保护试验 被引量：17

2

作者 姜北宇 章振华 +3 位作者 李林 景小冬 张建伟 郑小兰 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2009年第8期29-33,共5页

采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所1998年-2008年在北京及河北省分离的4株禽流感病毒H9亚型流行毒株,分别制备不同分离毒株灭活疫苗,免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果表明,用4个不同时期的分离毒株所制备出的灭活疫苗免疫鸡后,... 采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所1998年-2008年在北京及河北省分离的4株禽流感病毒H9亚型流行毒株,分别制备不同分离毒株灭活疫苗,免疫SPF鸡,进行交叉免疫保护试验。结果表明,用4个不同时期的分离毒株所制备出的灭活疫苗免疫鸡后,各免疫组鸡禽流感(H9亚型)的HI抗体效价均明显上升,所诱导产生的HI抗体效价基本相同;不同时期分离毒株大多产生了较好的交叉保护力。用1998年、2004年及2006年分离的流行毒株制备出的灭活疫苗能够保护2008年流行毒株的攻击。 展开更多

关键词 H9亚型禽流感 流行毒株 疫苗 交叉免疫

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河南部分地区H9亚型禽流感病毒的分离鉴定及交叉免疫攻毒保护试验 被引量：8

3

作者 张晓娟 刘媛媛 +5 位作者 王俊亚 李新生 高文明 李双亮 李燕 崔保安 《中国农学通报》 CSCD 2012年第26期67-70,共4页

为了分离鉴定河南漯河、郑州H9亚型禽流感病毒及交叉免疫攻毒保护试验。于2011年用SPF鸡胚从河南漯河、郑州疑似感染H9亚型禽流感病毒的病料中分离出2株病毒,通过血凝及血凝抑制试验和RT-PCR方法进行鉴定,确定为AIVH9亚型;用河南省动物... 为了分离鉴定河南漯河、郑州H9亚型禽流感病毒及交叉免疫攻毒保护试验。于2011年用SPF鸡胚从河南漯河、郑州疑似感染H9亚型禽流感病毒的病料中分离出2株病毒,通过血凝及血凝抑制试验和RT-PCR方法进行鉴定,确定为AIVH9亚型;用河南省动物性食品安全重点实验室于2001年分离的2株H9亚型禽流感病毒分别制成油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,然后再用上述4株病毒对免疫鸡群进行交叉攻毒,进行交叉免疫保护试验,测定其交叉免疫保护作用。结果表明:成功分离出2株H9亚型禽流感病毒;用2001年分离毒株所制备出的灭活疫苗免疫鸡后,试验鸡体内抗H9亚型禽流感HI抗体效价均明显上升,平均HI效价均大于11log2,不同毒株所诱导产生的HI抗体效价存在一定的差异;不同时期及地点分离的H9亚型禽流感流行毒株间均产生了较好的交叉保护,且同一地区的保护率更高,2001年的分离株对目前的流行毒株仍有很好的保护作用。 展开更多

关键词 H9亚型禽流感 分离鉴定 毒株 交叉保护

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中国南方地区乙型流感流行株与疫苗株的HA1区氨基酸差异研究 被引量：7

4

作者 张冬艳 冯燕 +3 位作者 茅海燕 邹艳 徐昌平 卢亦愚 《浙江预防医学》 2011年第7期1-4,共4页

目的探讨1991—2007年中国南方地区乙型流感流行株与WHO疫苗推荐株在HA1区的氨基酸差异。方法收集近17年间中国南方地区乙型流感流行株与WHO疫苗推荐株的血凝素重链(HA1)区的氨基酸序列,用BioEdit生物软件进行比较,分析两者之间在HAl及... 目的探讨1991—2007年中国南方地区乙型流感流行株与WHO疫苗推荐株在HA1区的氨基酸差异。方法收集近17年间中国南方地区乙型流感流行株与WHO疫苗推荐株的血凝素重链(HA1)区的氨基酸序列,用BioEdit生物软件进行比较,分析两者之间在HAl及其抗原决定簇位点的氨基酸差异。结果在这17年中,有近1/3的年份,中国南方地区流行株与疫苗株之间的谱系不符;而在谱系相同的状况下,WHO疫苗推荐株与前两年流行株的符合性较与当时流行株的符合性更好(P<0.05)。从系统进化树也可看出这一趋势。结论 WHO推荐的乙型流感疫苗株与中国南方地区乙型流感流行株之间,存在明显的滞后现象,中国应当推出适合于自己的流感疫苗株。 展开更多

关键词 乙型流感 疫苗株 流行株 差异

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海南省1985～1993年脊髓灰质炎流行野毒株的分析 被引量：6

5

作者 周立文 李杰 +3 位作者 侯晓辉 林春燕 孙莲英 张礼壁 《中国计划免疫》 1997年第2期52-57,共6页

海南省１９８５－１９９３年经历了４次较大的脊髓灰质炎（脊灰）流行，年发病数分别为７２５例（１９８５年）１９７例（１９８９年；６４例（１９９０年）和６５例（１９９３）年．历年流行的野毒株均为脊灰Ｉ型病毒．对历年来分离的... 海南省１９８５－１９９３年经历了４次较大的脊髓灰质炎（脊灰）流行，年发病数分别为７２５例（１９８５年）１９７例（１９８９年；６４例（１９９０年）和６５例（１９９３）年．历年流行的野毒株均为脊灰Ｉ型病毒．对历年来分离的病毒株先用ＰＣＲ－ＲＦＬＰ法选出有代表性的毒株，再将这些病毒株ＶＰ１基因的部份片段做核酸序列分析，并与非流物年分离的毒株作相应的比较。结果显示，每次较大流行年的分离毒株与上一次流行的代表株相比较，其核苷酸均有效大的改变，说明当脊灰新的基因型出现时便在本省有一次较大的流行，对新的基因型脊灰病毒的由来，结合全国脊灰病毒的分子流行病学资料进行了讨论。 展开更多

关键词 脊髓灰质炎 Ⅰ型病毒 流行病学 基因型

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5株猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF7全长基因的克隆及序列分析 被引量：4

6

作者 贾怀杰 景志忠 +6 位作者 房永祥 王晓霞 陈国华 李克斌 窦永喜 瞿惠玲 杨孝朴 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2009年第8期561-566,共6页

目的通过测定5株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7基因序列,结合GenBank登录的国内外PRRSV分离株核苷酸序列,分析PRRSV核衣壳蛋白（N蛋白）的遗传变异情况。方法根据GenBank公布的PRRSV ATCCVR-2332株全基因组核苷酸序列,设计合成1... 目的通过测定5株猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）ORF7基因序列,结合GenBank登录的国内外PRRSV分离株核苷酸序列,分析PRRSV核衣壳蛋白（N蛋白）的遗传变异情况。方法根据GenBank公布的PRRSV ATCCVR-2332株全基因组核苷酸序列,设计合成1对特异性引物,用RT-PCR方法扩增出3株PRRSV甘肃流行株（命名为GSZY、GSBY、GSZY株）、1株陕西流行株（命名为Shanxi株）和1株PRRSV江西分离株（命名为Jingxi株）的ORF7全长基因,克隆到pGEM-T Easy载体,然后分别测定插入的核苷酸序列。应用DNAStar序列分析软件对所测ORF7基因核苷酸序列及其推导的氨基酸序列与不同来源的13个PRRSV毒株进行同源性比较。结果5株PRRSV ORF7基因与以ATCC VR-2332为代表的早期引发PRRS的美洲型毒株的核苷酸序列间的同源性为91.9%～94.3%,与国内其他PRRSV分离株的同源性为98.7%～99.7%,与欧洲型代表株LV的同源性为57.7%～58.2%。结论美洲型PRRSV N蛋白氨基酸发生了变异,但国内毒株相对保守。 展开更多

关键词 PRRSV 地方毒株 ORF7 基因克隆 变异分析

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猪伪狂犬病病毒流行毒株gE/gI缺失突变株的构建及生物学特性研究 被引量：4

7

作者 潘慧 李艳华 +4 位作者 向柯宇 唐栋 程珍珠 罗永文 琚春梅 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期9-15,共7页

【目的】为研制针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的疫苗提供候选毒株。【方法】构建针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的gE/gI缺失重组转移质粒pMD-LA-RA及携带EGFP标记基因的重组转移质粒pMD-LA-EGFP-RA,将pMDLA-EGFP-RA与伪狂犬病病毒流行毒株PRV... 【目的】为研制针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的疫苗提供候选毒株。【方法】构建针对猪伪狂犬病病毒流行毒株的gE/gI缺失重组转移质粒pMD-LA-RA及携带EGFP标记基因的重组转移质粒pMD-LA-EGFP-RA,将pMDLA-EGFP-RA与伪狂犬病病毒流行毒株PRV AH进行同源重组,利用EGFP为筛选标记,获得携带EGFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV AH gE~–/gI~–/EGFP^+,以此毒株与pMD-LA-RA进行第2次同源重组,筛选去除EGFP基因的gE/gI基因缺失突变株PRV AH gE~–/gI~–,并通过生长曲线、易感细胞连续传代和动物免疫评价其增殖能力、遗传稳定性及免疫原性。【结果】通过2次同源重组,结合荧光观察、空斑纯化和PCR检测,成功获得了PRV AH gE~–/gI~–,经PCR鉴定、荧光观察及测序鉴定,证实该毒株g E和g I基因被成功缺失,且不携带EGFP标记基因。生物学特性研究结果表明,该毒株增殖能力与亲本毒株相当,遗传稳定性及免疫原性良好。【结论】采用同源重组技术成功构建了免疫原性良好的猪伪狂犬病病毒流行毒株gE/gI基因缺失突变株,为研制针对流行毒株的基因缺失疫苗奠定了一定的基础。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病病毒 流行毒株 基因缺失 同源重组 生物学特性

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猪流行性腹泻病毒云南流行毒株分离与鉴定 被引量：3

8

作者 孙显国 毕峻龙 +4 位作者 赵谦 蓝睿 左庆威 杨贵树 尹革芬 《贵州农业科学》 CAS 2019年第3期78-84,共7页

为有效控制和预防猪流行性腹泻(PED),分离获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)云南地方流行毒株,并选取部分经RT-PCR鉴定为阳性的样品,处理后接种在Vero细胞中进行分离培养,细胞培养物盲传至15代后可观察到典型的细胞病变(CPE),对细胞培养物通过... 为有效控制和预防猪流行性腹泻(PED),分离获得猪流行性腹泻病毒(PEDV)云南地方流行毒株,并选取部分经RT-PCR鉴定为阳性的样品,处理后接种在Vero细胞中进行分离培养,细胞培养物盲传至15代后可观察到典型的细胞病变(CPE),对细胞培养物通过RT-qPCR方法检测和间接免疫荧光(IFA)鉴定,并对分离株S基因全序列进行克隆和遗传进化分析。结果表明:获得的细胞培养物均为PEDV阳性,病毒半数细胞感染量(TCID_(50))为10^(-4.85)/0.1mL,将其命名为YNDH-2017毒株。该分离株S基因与参考毒株的同源性为92.8%～98.2%,和国内近年来PEDV流行毒株亲缘关系较近,存在相同的突变位点,而与经典毒株CV777株在两个大的分支上,亲缘关系较远。试验分离获得的YNDH-2017株属于当前国内流行毒株。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 流行毒株 分离鉴定 S基因 序列分析 遗传变异 云南

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麻疹病毒疫苗株沪_(191)和宁波麻疹病毒流行株血清交叉中和试验结果分析 被引量：3

9

作者 傅燕 许国章 +4 位作者 董红军 胡逢蛟 马瑞 陆圣诞 焦素黎 《中国疫苗和免疫》 CAS 2013年第1期39-42,共4页

目的分析麻疹病毒疫苗株[上海(沪)191,Shanghai191;S191]的免疫保护性,为探讨有效预防控制麻疹的措施提供参考。方法用微量中和试验测定不同人群血清对麻疹病毒疫苗株(S191)和浙江省宁波市麻疹病毒流行株(Ningbo2008-06)的中和抗体(Neut... 目的分析麻疹病毒疫苗株[上海(沪)191,Shanghai191;S191]的免疫保护性,为探讨有效预防控制麻疹的措施提供参考。方法用微量中和试验测定不同人群血清对麻疹病毒疫苗株(S191)和浙江省宁波市麻疹病毒流行株(Ningbo2008-06)的中和抗体(Neutralizing Antibody,NA)水平。结果 S191株麻疹减毒活疫苗(Measles Attenuated Live Vaccine,MV)初次免疫(初免)血清,有MV免疫史麻疹患者急性期血清,麻疹患者恢复期血清,应急接种MV前、后血清,对疫苗株的NA几何平均滴度(Geometric MeanTiter,GMT)分别为1∶35.23、1∶4.16、1∶231.74、1∶37.81、1∶61.03;对麻疹病毒流行株的NAGMT分别1∶19.04、1∶2.21、1∶596.62、1∶32.25和1∶67.54。初免血清及有免疫史麻疹患者急性期血清,对疫苗株的NAGMT分别是流行株的1.85倍(t=2.537,P<0.05)和1.88倍(t=-2.696,P<0.05);麻疹患者恢复期血清对流行株的NAGMT是疫苗株的2.57倍(t=-3.054,P<0.05);而应急接种后血清中和疫苗株和流行株的NAGMT差异无统计学意义。小月龄婴儿血清随着月龄增长对疫苗株和流行株的NAGMT均下降,6月龄和8月龄婴儿对流行株的NAGMT分别为1∶2.60和1∶1.24。结论 S191株MV能中和宁波麻疹病毒流行株,只是中和能力略有下降;应急接种能显著增加麻疹NA水平;母传麻疹抗体6月龄后几乎无保护作用;有必要对现行MV免疫策略进行调整。 展开更多

关键词 麻疹病毒疫苗株(沪191) 流行株 中和抗体

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猪流行性腹泻病毒野毒株及弱毒疫苗株RT-PCR鉴别检测方法的建立及应用 被引量：3

10

作者 卢冰霞 秦毅斌 +10 位作者 段群棚 何颖 李斌 梁家幸 苏乾莲 周英宁 蒋冬福 卢敬专 陈忠伟 闭炳芬 赵武 《畜牧与兽医》 北大核心 2017年第2期83-88,共6页

为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)野毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV野毒株及弱毒疫苗株的ORF3基因序列,在缺失区的两端设计合成1对特异性扩增引物,用以特异性的扩增PEDV ORF3基因片段,根据目的片段大小判断PED... 为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)野毒株及弱毒疫苗株快速鉴别检测方法,根据Gen Bank中公布的PEDV野毒株及弱毒疫苗株的ORF3基因序列,在缺失区的两端设计合成1对特异性扩增引物,用以特异性的扩增PEDV ORF3基因片段,根据目的片段大小判断PEDV的毒株类型;通过退火温度等反应条件优化,建立了区分PEDV野毒株和弱毒疫苗株的RT-PCR鉴别检测方法。结果显示:所建立的RT-PCR鉴别检测方法能特异性区分PEDV野毒株和弱毒疫苗株;PEDV野毒株扩增出234 bp目的片段,PEDV弱毒疫苗株扩增出185 bp目的片段;与猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、A群猪轮状病毒(PRo VA)、猪嵴病毒(PKV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV2)、猪乙型脑炎病毒(JEV)及猪细小病毒(PPV)均无交叉反应;敏感性试验显示,该方法能检测到病毒滴度为1.3×10~3TCID_(50)/mL。利用该方法对采集自广西部分地区93份临床腹泻样品进行检测,临床腹泻样品中PEDV野毒株阳性率为61.29%(57/93),弱毒株阳性率为5.38%(5/93)。结果表明:该RT-PCR鉴别检测方法特异性强、灵敏度高、操作简便,能快速、准确地区分PEDV自然感染野毒株和弱毒疫苗毒株,为猪流行性腹泻的快速诊断及病原分子鉴别检测研究提供了可供借鉴的技术手段。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 野毒株 弱毒株 RT-PCR 鉴别检测

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鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感流行毒株的保护效果 被引量：3

11

作者 章振华 李林 +5 位作者 沈佳 景小冬 张建伟 郑小兰 史爱华 姜北宇 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第9期11-14,共4页

为了检验鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗免疫接种21日龄SPF鸡,免疫接种后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用200... 为了检验鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗对H9亚型禽流感病毒流行毒株的免疫保护效果,将鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗免疫接种21日龄SPF鸡,免疫接种后3周采血测定AI(H9)HI抗体,并用2004年—2012年分离的8株H9亚型禽流感病毒对免疫接种鸡进行攻毒试验。结果显示,试验鸡免疫接种三联灭活苗后21d,其H9 HI抗体效价可达11.88log2,可抵抗8个不同H9亚型禽流感流行毒株的攻击,总攻毒保护率达92.50%(37/40)。鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗中H9亚型禽流感毒株具有良好的免疫原性,能抵抗不同年代不同地区分离的H9亚型禽流感流行毒株的攻击。 展开更多

关键词 鸡新城疫 传染性支气管炎 H9亚型禽流感 三联灭活苗 流行毒株 免疫效力

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不同CA16流行株的相关生物学和VP1基因的分子生物学研究 被引量：3

12

作者 郝春生 杨永娟 +7 位作者 宋衍燕 李懿 张中洋 郭会杰 赵敏 支惠 罗凤基 李秀玲 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期199-204,共6页

目的对柯萨奇病毒A组16型（CA16）病毒株进行生物学特征与基因背景研究，为CA16病原和疫苗的进一步研究奠定基础。方法从咽拭子标本中分离出CA16病毒；通过中和鉴别试验和RT—PCR对病毒进行分子生物学鉴定；病毒的VPl基因序列测定后，... 目的对柯萨奇病毒A组16型（CA16）病毒株进行生物学特征与基因背景研究，为CA16病原和疫苗的进一步研究奠定基础。方法从咽拭子标本中分离出CA16病毒；通过中和鉴别试验和RT—PCR对病毒进行分子生物学鉴定；病毒的VPl基因序列测定后，与其他CA16序列进行比较，绘制种系发育树，确定病毒基因型；测定病毒滴度，观察病毒在Vero细胞上的噬斑形态；攻击乳鼠分析病毒的致病性。结果从手足口病患者咽拭子标本中分离到6株病毒，采用肠道病毒通用引物可以从病毒感染细胞中扩增出约150bp大小的目的产物带；采用CA16特异性引物可以从病毒感染细胞中扩增出210bp大小的目的产物带。而采用EV71特异性引物未见特异性扩增条带。噬斑分析发现，6株病毒在Vero细胞上接种96h后均能出现清晰的噬斑，其中BJ-3噬斑直径为4—5mm，BJ-5噬斑直径约为3mm，BJ-1、BJ-2、BJ4、BJ-6噬斑直径为1．5～2mm；除BJ-3噬斑边缘模糊外，其余5株噬斑边缘整齐。该6株病毒均可被人CA16抗体阳性血清中和。在Vero细胞上连续传5代，滴度均在7．0LgcCID50／ml左右。基于VPI基因序列的种系发育分析结果显示，BJ-2、BJ-4、BJ-5属于C1亚型，BJ-1、BJ-3、BJ-6属于C3亚型，该6株病毒核苷酸同源性达90％以上，氨基酸同源性达99％以上。乳鼠攻击试验结果显示，BJ-3和BJ-5攻击后第4～5天乳鼠开始发病，后肢出现明显的麻痹、瘫痪症状，至第6～7天全部死亡，正常对照组和其他病毒组直至攻击后第14天均无异常。结论不同CA16病毒株的生物学特性有所不同，基因背景相近，致病性明显不同，需进一步了解中国流行的CA16病毒株的致病特点，为疫苗的研发提供直接依据。 展开更多

关键词 柯萨奇病毒A组16型(CA16) 流行株 手足口病

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广东省猪圆环病毒2型基因的克隆与序列分析 被引量：3

13

作者 严妍 宫婷 +6 位作者 张守峰 赵敬慧 刘晔 王颖 张菲 张锦霞 扈荣良 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2016年第2期76-79,共4页

根据Gen Bank已发表的猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）全基因组序列,设计1对特异性引物,对广东省不同地区规模化猪场采集的临床诊断为断奶仔猪多系统消耗综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）... 根据Gen Bank已发表的猪圆环病毒2型（Porcine circovirus type 2,PCV2）全基因组序列,设计1对特异性引物,对广东省不同地区规模化猪场采集的临床诊断为断奶仔猪多系统消耗综合征（Postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS）的组织病料进行了PCV2基因克隆和序列分析。结果表明,采集的PMWS病料均可扩增出PCV2完整基因序列,与Gen Bank已发表的PCV2参考毒株序列核苷酸同源性达93.7%-99.8%,亲缘关系密切。其中10个PCV2基因全长1767 bp,属于PCV2b亚型,1个PCV2基因全长1768 bp,属于PCV2a亚型。 展开更多

关键词 猪圆环病毒2型 基因分析 流行毒株

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五株鸡传染性支气管炎病毒流行株的分离鉴定 被引量：3

14

作者 宋新宇 马爽 +4 位作者 李陆梅 赵鹏 窦小龙 王红 范跟成 《湖北农业科学》 2016年第23期6187-6189,6266,共4页

2012年1月-2014年8月,从全国多地出现传染性支气管炎发病养鸡场(户)中采集病(死)鸡气管、肾脏和腺胃进行流行病学调查。根据各地分离株与YB160株S1基因分子进化树分析,筛选出5个代表性的毒株,在SPF鸡胚中传至第5代,分别进行毒价测定、... 2012年1月-2014年8月,从全国多地出现传染性支气管炎发病养鸡场(户)中采集病(死)鸡气管、肾脏和腺胃进行流行病学调查。根据各地分离株与YB160株S1基因分子进化树分析,筛选出5个代表性的毒株,在SPF鸡胚中传至第5代,分别进行毒价测定、无菌检验及对SPF鸡的致病力研究。结果,所筛选出的5个流行株在SPF鸡胚传至第5代时,毒价均大于或等于106.1EID50/0.1 m L,菌检阴性,人工感染试验接种1日龄SPF鸡,可引起试验鸡出现典型传染性支气管炎症状。 展开更多

关键词 鸡传染性支气管炎 分离鉴定 流行株 QX型

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2019—2021年浙江省水痘流行株基因特性分析 被引量：3

15

作者 史雯 孙逸 +5 位作者 苏凌旋 邓璇 何寒青 茅海燕 张严峻 葛琼 《中国预防医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第11期807-813,共7页

目的 探讨2019—2021年浙江省水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)分子流行病学特征,为水痘免疫策略与疫情防控提供实验室依据。方法 采用R软件分析水痘病例流行病学相关资料;采用实时荧光定量PCR方法筛选阳性样本;Illumin... 目的 探讨2019—2021年浙江省水痘-带状疱疹病毒(varicella-zoster virus, VZV)分子流行病学特征,为水痘免疫策略与疫情防控提供实验室依据。方法 采用R软件分析水痘病例流行病学相关资料;采用实时荧光定量PCR方法筛选阳性样本;Illumina二代测序平台进行开放阅读框(open reading framme, ORF)ORF22和ORF54基因测序;应用生物信息学软件MEGA 11进行序列比对分析,采用单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphism, SNPs)进行基因分型,同时与美国国立生物技术信息中心中已知的国内外水痘基因型株联配比对,构建系统进化树。结果 采集疑似水痘患者的疱疹液或咽拭子样本576份,选取Ct值较低、不同年份、不同来源的样本40份,2020年疱疹液阳性率高于2019年(98.15%vs 79.53%,P<0.01),发病高峰在11月。病例年龄主要集中5~<20岁(占93.06%),尤以10~<15岁青少年最多。SNPs和基因序列比对分析显示,样本感染的病毒均属于Clade2分支。结论 二代测序技术有助于快速准确检测VZV的基因型,Clade2是2019—2021年浙江省流行的VZV主要病原体,有必要对浙江省VZV流行株基因型别持续研究,并加强监测。 展开更多

关键词 水痘 水痘-带状疱疹病毒 流行株 基因型 分子流行病学

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山东省某猪场猪伪狂犬病的诊断鉴定及防治措施 被引量：3

16

作者 刘准 臧传佼 +1 位作者 易新健 陈申秒 《畜牧兽医杂志》 2017年第2期104-107,共4页

为了确诊一起猪伪狂犬病的发生,采集送检病料的肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、脑等组织器官进行实验室诊断和PCR检测。结果显示,病料中扩增出了伪狂犬病病毒的特异性gE基因片段,通过对PCR扩增产物进行序列比对分析,发现此次发生的伪狂犬病与2... 为了确诊一起猪伪狂犬病的发生,采集送检病料的肝脏、肾脏、脾脏、肺脏、脑等组织器官进行实验室诊断和PCR检测。结果显示,病料中扩增出了伪狂犬病病毒的特异性gE基因片段,通过对PCR扩增产物进行序列比对分析,发现此次发生的伪狂犬病与2011年之后流行的伪狂犬流行毒株高度同源。综合流行病学、病理解剖、实验室诊断,确定引起此次疾病的主要病原为猪伪狂犬病毒。 展开更多

关键词 猪伪狂犬 流行毒株 诊断

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猪流行性腹泻病毒变异毒株的分离鉴定及遗传演化分析 被引量：2

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作者 辛忠昊 郭效珍 +6 位作者 逯晓寒 焦安琪 刘丽萍 于江 黄兵 孙淑红 吴家强 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期12-17,35,共7页

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性肠道传染病。为了解山东地区PEDV的遗传进化趋势,对2020—2021年收集的疑似猪流行性腹泻的临床病料进行RT-PCR检测。随后将处理好的病料上清液接种于Vero细胞进... 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起猪的一种急性高度接触性肠道传染病。为了解山东地区PEDV的遗传进化趋势,对2020—2021年收集的疑似猪流行性腹泻的临床病料进行RT-PCR检测。随后将处理好的病料上清液接种于Vero细胞进行PEDV病毒分离,并利用间接免疫荧光(IFA)进行验证,成功分离到一株PEDV毒株,命名为QH-202105。将分离株传代培养至第10代,提取RNA后进行扩增并全基因组测序,结合NCBI下载的参考序列对分离株的全基因组和S基因进行核苷酸同源性比对、系统发育树构建分析,结果显示,分离株与美国分离株USA/Colorado/2013核苷酸同源性最高,为99.1%,与CHM2013株同源性最低,为96.5%。经S基因氨基酸序列分析显示,分离株QH-202105在S基因的N端有60多处突变,两处氨基酸插入(包括第59~62位氨基酸的QGVN 4个氨基酸插入,第145位氨基酸N的插入)和两处氨基酸缺失(第115~118氨基酸的缺失,第167~168氨基酸的缺失)。进化树分析结果显示,分离毒株QH-202105为G2基因群,与CH/HNAY/2015和CH/ZJCX-1/2012亲缘关系最近,属同一进化分支。在此基础上,应用PROVEAN对QH-202105的S蛋白突变氨基酸进行功能预测,结果显示,在1361处(G→C)被判定为“Deleterious”,可以推测此处的突变对病毒的侵袭力可能存在间接影响。研究结果可为我国PEDV变异株的流行情况及防控提供参考。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 流行毒株 分离鉴定 遗传变异

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猪流行性腹泻病毒变异株分离鉴定及攻毒模型建立 被引量：1

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作者 焦安琪 郭效珍 +6 位作者 陈智 于江 于克戬 逯晓寒 辛忠昊 韩先杰 吴家强 《生物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期69-73,共5页

猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种急性高度接触性肠道传染病。研究成功分离到一株PEDV,命名为PEDV-20200946。对该毒株的S基因进行测序分析,遗传进化树结果显示,该分离毒株属于G2亚群。通过Reed-Muench法测定该... 猪流行性腹泻(PED)是由猪流行性腹泻病毒(PEDV)引起的一种急性高度接触性肠道传染病。研究成功分离到一株PEDV,命名为PEDV-20200946。对该毒株的S基因进行测序分析,遗传进化树结果显示,该分离毒株属于G2亚群。通过Reed-Muench法测定该毒株毒价为106.1 TCID 50/mL。通过动物回归试验进一步探究该分离毒株对仔猪的致病情况,将12头20日龄仔猪平均分为3组,分别为口服攻毒组、口服+肌注攻毒组和对照组。攻毒后观察临床症状,72 h后采集各组的粪便及发病猪的肠道进行RT-PCR检测和免疫组化分析。结果显示,口服+肌注组仔猪发病最快,口服攻毒组次之,对照未发病。剖检攻毒组仔猪可见其肠壁变薄、肠道膨胀,内含大量黄色液体。免疫组化试验显示,攻毒组猪小肠内可检测到大量PEDV阳性信号,而对照组未检测到。研究建立了PEDV-20200946毒株仔猪攻毒模型,为深入研究PEDV流行毒株的分子特性以及弱毒疫苗的开发奠定基础。 展开更多

关键词 猪流行性腹泻病毒 流行毒株 分离鉴定 攻毒模型 遗传进化树

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北京流感暴发流行前后流行株的分离和抗原性分析 被引量：2

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作者 段佩若 韩洪彦 +2 位作者 张容惠 林京 彭世勇 《解放军预防医学杂志》 CAS 北大核心 2001年第1期19-22,共4页

目的 :为获得 1998年 12月北京流感暴发前和后的流行株 ,并了解流行株的抗原变异幅度。方法 :应用常规法进行流感病毒分离 ,应用血凝抑制免疫交叉试验 (HI) ,以 6株国际参考株和 2株国家代表株 ,对流行株作抗原性分析。结果 :共获甲 3亚... 目的 :为获得 1998年 12月北京流感暴发前和后的流行株 ,并了解流行株的抗原变异幅度。方法 :应用常规法进行流感病毒分离 ,应用血凝抑制免疫交叉试验 (HI) ,以 6株国际参考株和 2株国家代表株 ,对流行株作抗原性分析。结果 :共获甲 3亚型 (H3N2 )流行株 15株 ,它们的抗原性与A3/南非 / 1147/ 96、A3/悉尼 / 0 5/ 97、A3/日本 / 8/ 98、A3/智利 / 3792 / 98、A3/阿根廷 /4 13/ 98均有明显差异。它们与国家代表株A3/山东 / 9/ 93的抗原性也有差异 ,但与A3/南昌 /933/ 95和A3/汉防 / 359/ 95两株的抗原性无明显差异。结论 :所分离到的 15株均为甲 3亚型流感毒株 (H3N2 ) ,是北京 1998年的流行优势株 ;同时也证实 1998年 12月北京流感暴发流行的病毒主要也是H3N2亚型毒株。它们的抗原性与国际参考株 :南非、悉尼、日本、智利、阿根廷有明显差异。应用国际流感疫苗效果不佳的重要原因在于甲 3亚型流行株与A3/悉尼 / 0 5/ 展开更多

关键词 流感暴发流行 流感流行株 甲3亚型流感毒株 抗原性分析

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猪传染性胃肠炎病毒疫苗株S基因的克隆及其与流行株的比对分析 被引量：2

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作者 侯宏艳 潘孝成 +4 位作者 尹磊 张丹俊 赵瑞宏 胡晓苗 周学利 《畜牧与饲料科学》 2021年第5期12-15,共4页

[目的]分析猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)疫苗株和流行株S基因的遗传变异特征。[方法]利用RT-PCR方法对国内目前广泛使用的TGEV疫苗株A、B、C的S基因进行克隆并测序,将获得的序列与近年来公开... [目的]分析猪传染性胃肠炎病毒(porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)疫苗株和流行株S基因的遗传变异特征。[方法]利用RT-PCR方法对国内目前广泛使用的TGEV疫苗株A、B、C的S基因进行克隆并测序,将获得的序列与近年来公开发表的分离自不同地区的TGEV毒株S基因序列进行比对分析;选取NCBI中登录号为AF104420.1-Britain、AY587882.1-Nanjing、DQ811786.2-America、EU074218.2-Harbin、FJ755618.2-Harbin、JQ700304-fuzhou、KC609371.1-Shanghai、KX900411.1-United States、M94099.1-Spain和MK272773.1-Fushun的TGEV流行株S基因序列,与疫苗株A、B、C的S基因序列一起,利用MegAlign软件进行比对分析。[结果]疫苗株A、B、C的S基因序列两两间的同源性均在96.7%以上;疫苗株A、B、C的S基因序列与NCBI中流行株S基因序列的同源性分别在94.43%~99.82%、95.30%~99.64%、93.48%~98.38%;由遗传进化树可知,疫苗株A、C与国外流行株M94099.1-Spain在同一分支上,疫苗株B与国内流行株JQ700304-fuzhou在另一分支上。[结论]TGEV疫苗株的S基因与流行株同源性较高,变异性不大。 展开更多

关键词 猪传染性胃肠炎病毒 疫苗株 流行株 S基因 遗传变异

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