GnRH Ⅱ与GnRH Ⅰ对子宫内膜异位症患者间质细胞分泌VEGF作用的比较(英文) 被引量：16

1

作者 黄凤英 刘秋红 +1 位作者 王焕萍 邹颖 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期409-418,共10页

目的:测定GnRH Ⅱ与GnRH Ⅰ对子宫内膜异位症(EMs)患者离体培养子宫内膜间质细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨GnRH Ⅱ对EMs患者可能的作用。方法:给予原代培养的EMs患者在位及异位子宫内膜间质细胞不同浓度的GnRH Ⅱ,GnRH Ⅰ... 目的:测定GnRH Ⅱ与GnRH Ⅰ对子宫内膜异位症(EMs)患者离体培养子宫内膜间质细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)的影响,探讨GnRH Ⅱ对EMs患者可能的作用。方法:给予原代培养的EMs患者在位及异位子宫内膜间质细胞不同浓度的GnRH Ⅱ,GnRH Ⅰ类似物(戈舍瑞林,goserelin)处理,同时设对照组(不加GnRH),采用酶联免疫吸附法(ELⅠSA)测定培养液中VEGF浓度,并进行比较。结果:EMs患者离体培养的异位子宫内膜间质细胞经48 h培养,能分泌VEGF,分泌量与在位子宫内膜间质细胞的相近,两者比较差异无统计学意义(P>0.05)。不同浓度的GnRH Ⅱ对EMs患者离体培养的在位和异位子宫内膜间质细胞VEGF的分泌有明显的抑制作用,呈剂量依赖性(P<0.05),且较GnRH Ⅰ类似物(戈舍瑞林)的作用更强(P<0.05)。不同浓度的GnRH Ⅱ对EMs患者离体培养的异位子宫内膜间质细胞VEGF分泌的抑制作用明显强于在位(P<0.05)。结论:EMs患者的异位子宫内膜间质细胞具有分泌VEGF的功能,分泌量与在位子宫内膜的相近,这对EMs的形成和发展可能起重要作用。Gn-RH Ⅱ呈剂量依赖性地抑制异位内膜间质细胞分泌VEGF,其抑制作用明显强于在位,且GnRH Ⅱ明显强于GnRH Ⅰ,为寻找EMs抗血管形成方面的新药治疗提供了新的依据。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 Ⅱ型促性腺激素释放激素 Ⅰ型促性腺激素释放激素激动剂 血管内皮生长因子 内膜间质细胞

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阻断Wnt/β-catenin信号通路对17β-雌二醇作用后子宫内膜异位症患者在位子宫内膜间质细胞活化的影响 被引量：9

2

作者 满奕村 刘义 +5 位作者 谢伟 廉红梅 海娜 镇澜 刘娜 吕立群 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期421-424,429,共5页

目的探讨17β-雌二醇(17β-E2)作用后子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞(endometrialstromal cell,ESC)内是否存在功能性Wnt/β-catenin信号通路的激活,以及阻断该信号通路对ESC活化的影响。方法体外分离培养内异症患者在... 目的探讨17β-雌二醇(17β-E2)作用后子宫内膜异位症(内异症)患者在位子宫内膜间质细胞(endometrialstromal cell,ESC)内是否存在功能性Wnt/β-catenin信号通路的激活,以及阻断该信号通路对ESC活化的影响。方法体外分离培养内异症患者在位ESC,用0.1 nmol/L17β-E2处理ESC48 h。免疫细胞化学染色检测17β-E2作用后β-cate-nin在ESC中的表达。通过转染T细胞因子(T-cell facter,TCF)依赖的荧光素酶报告质粒(PGL3-OT)检测ESC内的Wnt/β-catenin信号,以PGL3-OF为阴性对照。将TCF的显性负性突变体(dominant negative TCF,dnTCF)表达质粒转染ESC,阻断Wnt/β-catenin信号的转导,用Western blot法检测ESC血管内皮生长因子(VEGF)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)表达变化。结果免疫细胞化学染色发现17β-E2能促进β-catenin在ESC核内的表达。17β-E2(0.1 nmol/L)作用后,转染相同量的质粒,PGL3-OT组细胞荧光活性明显高于PGL3-OF组(P<0.01)。Western blot检测结果显示17β-E2能明显促进ESC VEGF和MMP-9的表达;转染dnTCF-3阻断Wnt/β-catenin信号通路,ESC中VEGF和MMP-9的表达较转染空载体(pcDNA3)组均显著下降(均P<0.01)。结论17β-E2能促进内异症患者ESC Wnt/β-catenin信号通路的激活,阻断该信号通路可抑制ESC的活化。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜间质细胞 WNT/Β-CATENIN信号通路 17Β-雌二醇

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山羊子宫内膜基质细胞永生化研究 被引量：9

3

作者 盛宏霞 吴庆侠 +2 位作者 靳亚平 秦新喜 董海龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期818-823,共6页

将真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过DNA转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞（ESCs）,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及E2、P4等性腺激素的反应性测定。结果,传至2代的山羊ESCs经转染pCI-neo-hTERT,G418筛选2~3周后,抗性克... 将真核表达质粒pCI-neo-hTERT通过DNA转染技术导入山羊子宫内膜基质细胞（ESCs）,筛选稳定转染的细胞克隆,进行表型鉴定、生长特性及E2、P4等性腺激素的反应性测定。结果,传至2代的山羊ESCs经转染pCI-neo-hTERT,G418筛选2~3周后,抗性克隆形成,滤纸片法转移,扩增并连续培养,共获得5个细胞克隆,扩大培养后的细胞呈典型的长梭形和三角形,相互平行排列成束,与原代培养形态一致。转染后细胞有较高的端粒酶活性,细胞增殖加速,传代时间缩短,传至50代仍稳定增殖。波形蛋白检测阳性,角蛋白检测阴性,具有转染前山羊子宫内膜基质细胞特性。雌激素（100 nmol.L-1）和少量孕激素（10 nmol.L-1）对转染后基质细胞增殖有促进作用。获得了永生化的ESCs,为子宫内膜细胞体外研究奠定了基础。 展开更多

关键词 山羊 子宫内膜基质细胞 永生化细胞

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温经汤对子宫内膜异位症患者异位内膜间质细胞HIF-1α表达及线粒体功能的调控作用 被引量：9

4

作者 王心茹 果金玉 +5 位作者 高乐 朱欢喜 何彩莹 李清 任艳青 牛丽颖 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第6期17-25,共9页

目的:从调控低氧应激及线粒体功能角度探讨温经汤防治子宫内膜异位症(EMT)的作用机制。方法:采用消化法原代培养EMT患者异位子宫内膜间质细胞(ESCs),实验设正常(Control)组、5%空白血清(5%KBXQ)组、10%空白血清(10%KBXQ)组、5%温经汤血... 目的:从调控低氧应激及线粒体功能角度探讨温经汤防治子宫内膜异位症(EMT)的作用机制。方法:采用消化法原代培养EMT患者异位子宫内膜间质细胞(ESCs),实验设正常(Control)组、5%空白血清(5%KBXQ)组、10%空白血清(10%KBXQ)组、5%温经汤血清(5%WJTXQ)组、10%温经汤血清(10%WJTXQ)组。噻唑蓝(MTT)比色法检测不同组ESCs增殖情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)及蛋白免疫印迹法(Western blot)检测缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)mRNA及蛋白表达,透射电镜观察ESCs线粒体超微结构,高内涵分析(HCS)法多参数同时检测细胞线粒体功能[线粒体膜电位,线粒体膜电位(MMP)和细胞色素C(Cyt C)表达]及细胞凋亡情况(细胞膜通透性、细胞核荧光强度、细胞核大小及细胞数量),流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot检测B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)相关X蛋白(Bax),Bcl-2和剪切的半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果:与Control组比较,5%KBXQ和10%KBXQ组细胞活力显著增加(P<0.01);HIF-1αmRNA及蛋白表达水平无明显变化;透射电镜观察可见线粒体嵴明显,线粒体内外膜清晰;HCS多通道荧光染色显示,MMP及Cyt C表达、细胞膜通透性无显著变化,细胞核呈现均匀淡染;细胞凋亡率、cleaved Caspase-3蛋白表达及Bax/Bcl-2值均无明显变化。与Control组及相应体积分数KBXQ组比较,5%WJTXQ及10%WJTXQ组细胞活力显著下降(P<0.01);HIF-1αmRNA及蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01);线粒体超微结构破坏,部分线粒体肿胀,嵴模糊;MMP显著降低,Cyt C释放量明显增加(P<0.05,P<0.01);细胞膜通透性显著增加(P<0.01),并可观察到核固缩、核内DNA凝集、细胞数量下降等凋亡特征(P<0.05,P<0.01);流式细胞术结果显示,细胞凋亡率显著升高(P<0.01),与HCS分析结果一致;且cleaved Caspase-3蛋白表达水平及Bax/Bcl-2值明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论:温经汤能够下调异位ESCs中HIF- 展开更多

关键词 温经汤 子宫内膜异位症 子宫内膜间质细胞 缺氧诱导因子-1Α 线粒体功能 细胞凋亡

原文传递

胰岛素对子宫内膜间质细胞分泌IGF-1和IGFBP-1的影响 被引量：6

5

作者 李儒芝 林金芳 周剑萍 《现代妇产科进展》 CSCD 2001年第6期411-413,共3页

目的 :了解胰岛素对子宫内膜间质细胞分泌胰岛素样生长因子 1(IGF 1)和胰岛素样生长因子结合蛋白 1(IGFBP 1)的影响。方法 :用含不同浓度雌二醇和胰岛素的培养液培养增生晚期人子宫内膜间质细胞 2 4h后 ,留取培养液测定IGF 1。用含不... 目的 :了解胰岛素对子宫内膜间质细胞分泌胰岛素样生长因子 1(IGF 1)和胰岛素样生长因子结合蛋白 1(IGFBP 1)的影响。方法 :用含不同浓度雌二醇和胰岛素的培养液培养增生晚期人子宫内膜间质细胞 2 4h后 ,留取培养液测定IGF 1。用含不同浓度孕酮和胰岛素的培养液培养分泌晚期人子宫内膜间质细胞 2 4h后 ,留取培养液测定IGFBP 1。结果 :1.增生晚期间质细胞培养液中IGF 1的浓度 :2 0 μU ml胰岛素组为 1.39±0 .33μg L ,低于 10 0 μU ml胰岛素组 (2 .0 3± 0 .5 3μg L) (P <0 .0 1) ;10 0ng L雌二醇 + 2 0 μU ml胰岛素组为 2 .18± 0 .36 μg L ,低于 10 0g L雌二醇 + 10 0 μU ml胰岛素组 (3.4 2± 0 .75 μg L) (P<0 .0 1)。 2 .分泌晚期间质细胞液中IGFBP 1浓度 :2 0 μU ml胰岛素组为 0 .16± 0 .5 8μg L ,低于对照组 (P <0 .0 1) ,高于 10 0 μU ml胰岛素组 (0 .10± 0 .4 8μg L) (P <0 .0 1) ;10 μg L孕酮 + 2 0 μU ml胰岛素组为 2 .10± 1.17μg L ,低于 10 μg L孕酮组 (P <0 .0 1) ,高于 10 μg L孕酮 + 10 0 μU ml胰岛素组 (0 .5 0± 0 .2 8μg L) (P <0 .0 1)。 结论 :1.胰岛素促进增生期子宫内膜间质细胞分泌IGF 1;2 .胰岛素抑制分泌晚期子宫内膜间质细胞分泌IGFBP 1。 展开更多

关键词 子宫内膜间质细胞 胰岛素样生长因子 胰岛素样生长因子结合蛋白-1 胰岛素

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子宫内膜异位症患者腹腔液对子宫内膜间质细胞增殖及侵袭能力的影响 被引量：8

6

作者 朱玲玲 梅洁 施蔚虹 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第18期2958-2960,共3页

目的:探讨子宫内膜异位症(EMs)患者腹腔液对人子宫内膜间质细胞(ESC)增殖及侵袭能力的影响,为EMs发病机制研究提供依据。方法:收集非EMs患者健康内膜、EMs患者在位内膜组织和腹腔液,体外分离内膜组织、培养获得子宫内膜间质细胞;应用非... 目的:探讨子宫内膜异位症(EMs)患者腹腔液对人子宫内膜间质细胞(ESC)增殖及侵袭能力的影响,为EMs发病机制研究提供依据。方法:收集非EMs患者健康内膜、EMs患者在位内膜组织和腹腔液,体外分离内膜组织、培养获得子宫内膜间质细胞;应用非EMs患者及EMs患者腹腔液分别处理健康、在位和异位ESC,采用BrdU标记法检测ESC增殖能力,Transwell细胞侵袭实验检测ESC侵袭能力。结果:EMs患者腹腔液可促进ESC增殖(P<0.05)和促进ESC侵袭能力(P<0.05)。结论:EMs患者腹腔液上调ESC增殖及侵袭能力,为EMs病灶的形成和发展机制研究提供新的依据。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 腹腔液 子宫内膜间质细胞 增殖

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基于微流控芯片评估富血小板血浆促进子宫内膜细胞的增殖

7

作者 闻哲嘉 吕芳 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2025年第10期2091-2096,共6页

背景:富血小板血浆可促进薄型子宫内膜细胞的增殖,但存在剂量难以控制、取样困难等问题。微流控芯片具有高通量、低消耗、操作简便等优点,为模拟子宫内膜细胞在体微环境提供了新途径。目的:利用三通道微流控芯片构建富血小板血浆促进子... 背景:富血小板血浆可促进薄型子宫内膜细胞的增殖,但存在剂量难以控制、取样困难等问题。微流控芯片具有高通量、低消耗、操作简便等优点,为模拟子宫内膜细胞在体微环境提供了新途径。目的:利用三通道微流控芯片构建富血小板血浆促进子宫内膜细胞增殖的研究模型。方法:从1名女性外周静脉血中提取富血小板血浆。采用含不同浓度[0%(对照),0.5%,1%,2%]富血小板血浆的无血清细胞培养基培养人子宫内膜间质细胞,采用划痕实验检测细胞迁移,CCK-8法检测细胞增殖。利用聚二甲基硅氧烷胶制备微流控芯片,该微流控芯片设计有3个通道,中间通道为细胞外基质水凝胶通道,左右两侧分别为人子宫内膜间质细胞及富血小板血浆通道,3个通道之间保存有可以相互沟通以及实现物质交换的面积,实验组两侧通道分别加入人子宫内膜间质细胞(绿色荧光蛋白GFP标记)和含0.5%富血小板血浆的无血清培养基,对照组两侧通道分别加入人子宫内膜间质细胞(绿色荧光蛋白GFP标记)和无血清细胞培养基,共培养48 h后,采用Ki67免疫荧光染色观察细胞增殖与迁移。结果与结论:(1)细胞划痕实验和CCK-8检测结果显示,与对照组相比,0.5%,1%,2%浓度的富血小板血浆可促进人子宫内膜间质细胞的迁移与增殖(P <0.05),并且0.5%浓度富血小板血浆的促进细胞迁移与增殖作用强于其他2个浓度(P <0.05);(2)Ki67免疫荧光染色结果显示,与对照组相比,实验组人子宫内膜间质细胞的增殖和迁移能力更强;(3)实验证实通过三通道微流控芯片可以模拟子宫内膜细胞的微环境,同时利用该系统验证了富血小板血浆可显著促进子宫内膜间质细胞的增殖与迁移。 展开更多

关键词 微流控芯片 富血小板血浆 子宫内膜间质细胞 子宫内膜增殖 迁移 细胞外基质 薄型子宫内膜 子宫内膜相关疾病

慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1沉默调控子宫内膜基质细胞蜕膜化与自噬

8

作者 任健 陈晓燕 《解剖学报》 CAS CSCD 2024年第2期188-195,共8页

目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况... 目的探讨慢病毒载体介导的类固醇生成因子-1(SF-1)沉默对人子宫内膜基质细胞(hESCs)蜕膜化进程的影响及机制。方法收集子宫内膜异位症(EM)患者与正常妊娠者的子宫内膜组织,通过Real-time PCR和免疫组织化学染色检测SF-1的差异表达情况。从正常妊娠者的子宫内膜组织中分离并鉴定hESCs,将hESCs分为对照组、雌二醇(E_(2))+孕酮(P4)组、短发夹RNA(shRNA,sh)-正常对照(NC)+E_(2)+P4组、sh-SF-1+E_(2)+P4组,进行对应处理后,倒置显微镜下观察hESCs形态变化,Real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内人胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)、泌乳素(PRL)的mRNA表达水平和蛋白表达水平,流式细胞术测定细胞周期分布,免疫荧光染色观察细胞内自噬标记物微管相关蛋白轻链3(LC3)表达情况,Western blotting测定细胞内自噬相关蛋白LC3-Ⅱ、LC3-Ⅰ、Beclin-1表达水平。结果EM患者子宫内膜组织中SF-1 mRNA相对表达量和SF-1蛋白阳性率均高于正常妊娠者子宫内膜组织(P<0.05)。与sh-NC+E_(2)+P4组比较,sh-SF-1+E_(2)+P4组细胞多为长梭形,未见明显蜕膜化,IGFBP1、PRL的mRNA相对表达量与蛋白相对表达量均显著下调(P<0.05),G_(0)/G_(1)期细胞比例显著减少而S期细胞比例显著增加(P<0.05),细胞内LC3荧光表达增强,LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值显著升高,Beclin-1蛋白相对表达量也显著上调(P<0.05)。结论EM患者子宫内膜组织内SF-1表达升高,通过慢病毒载体介导的SF-1沉默能够抑制hESCs蜕膜化过程,该作用可能与调控细胞自噬水平相关。 展开更多

关键词 子宫内膜基质细胞 类固醇生成因子-1 蜕膜化 自噬 免疫印迹法 人

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H9胚胎干细胞源细胞外囊泡促进子宫内膜损伤修复的研究

9

作者 陈芷琪 马靖 +5 位作者 姜咏竹 马官荣 杨邦亚 王斓茜 方廖琼 王智彪 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期1497-1504,共8页

目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响。方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定。建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜... 目的:探究H9人胚胎干细胞(H9-hESCs)细胞外囊泡(EVs)对子宫内膜损伤修复的影响。方法:从H9-hESCs培养上清中提取EVs并鉴定。建立小鼠子宫内膜损伤模型,将其双侧子宫分为EVs实验组和PBS对照组,分别进行EVs和PBS注射,HE染色观察子宫内膜组织病理学变化、免疫组化法分析增殖细胞核抗原(PCNA)表达情况。通过EdU法、Western blot法评估EVs对人子宫内膜基质细胞(hEndoSCs)增殖的影响。结果:H9-hESCs-EVs是粒径为(144.7±2.1)nm并且具有膜结构的纳米小体,表达CD63和TSG101特征蛋白。与PBS组相比,EVs实验组子宫内膜组织形态完整、厚度及腺体数量增加,EVs实验组PCNA表达的平均光密度较PBS组显著升高(P<0.05)。EdU、Western blot检测结果显示H9-hESCs-EVs促进hEndoSCs增殖,且与EVs呈现蛋白浓度正相关(P<0.05)。结论:H9-hESCs-EVs通过提高子宫内膜基质细胞增殖促进子宫内膜损伤修复。 展开更多

关键词 胚胎干细胞 细胞外囊泡 子宫内膜 子宫内膜基质细胞 细胞增殖

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GnRH Ⅱ与GnRH Ⅰ a对子宫内膜异位症患者离体间质细胞增殖抑制的影响 被引量：5

10

作者 黄凤英 王焕萍 +1 位作者 伍媚 殷团芳 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期554-558,共5页

目的:探讨Ⅱ型促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormoneⅡ,GnRHⅡ)与Ⅰ型促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin-releasing hormoneⅠagonist,GnRHⅠa)对子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者离体培养的子宫内膜间质细胞... 目的:探讨Ⅱ型促性腺激素释放激素(gonadotropin-releasing hormoneⅡ,GnRHⅡ)与Ⅰ型促性腺激素释放激素激动剂(gonadotropin-releasing hormoneⅠagonist,GnRHⅠa)对子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者离体培养的子宫内膜间质细胞增殖抑制的影响。方法:将不同浓度的GnRHⅡ或GnRHⅠa加入在位及异位离体培养内膜间质细胞培养液中培养24,48及72 h,用MTT法测定间质细胞的存活情况,计算抑制率并进行比较。结果:GnRHⅡ或GnRHⅠa对离体培养的子宫内膜间质细胞的细胞增殖抑制率呈剂量和时间依赖性,差异均有统计学意义(P<0.05);且对异位子宫内膜间质细胞的增殖抑制率高于在位,差异有统计学意义(P<0.05)。GnRHⅡ对离体间质细胞的抑制作用强于GnRHⅠa,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:GnRHⅡ对EMs患者离体培养子宫内膜间质细胞,尤其对异位子宫内膜间质细胞的增殖有明显的抑制作用,呈剂量和时间依赖性;且抑制作用明显强于GnRHⅠa,提示GnRHⅡ有望成为治疗子宫内膜异位症更有效的新药。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 Ⅱ型促性腺激素释放激素 Ⅰ型促性腺激素释放激素激动剂 细胞增殖 内膜间质细胞

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玉米赤霉烯酮对大鼠子宫内膜细胞Caspase-3和Caspase-8表达的影响 被引量：4

11

作者 周宏超 赵煜 +2 位作者 杨鸣琦 刘晓强 李引乾 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期1159-1163,共5页

探讨玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对雌性大鼠子宫内膜细胞凋亡与Caspase-3和Caspase-8蛋白表达的关系,进而揭示其导致子宫损伤的作用机制。应用HE染色观察组织病理变化,免疫组化SP法检测注射玉米赤霉烯酮后6个时间点大鼠子宫内膜细胞C... 探讨玉米赤霉烯酮(Zearalenone,ZEA)对雌性大鼠子宫内膜细胞凋亡与Caspase-3和Caspase-8蛋白表达的关系,进而揭示其导致子宫损伤的作用机制。应用HE染色观察组织病理变化,免疫组化SP法检测注射玉米赤霉烯酮后6个时间点大鼠子宫内膜细胞Caspase-3和Caspase-8蛋白的表达。病理组织学观察发现,试验组子宫组织出现不同程度损伤,子宫内膜细胞发生凋亡。免疫组化结果显示,试验组子宫内膜上皮细胞与间质细胞Caspase-3和Caspase-8蛋白表达量均明显高于对照组(P<0.05)。不同时间点相比,Caspase-3在内膜上皮细胞中12h表达量最高,而在内膜间质细胞中18h表达量最高;Caspase8在内膜上皮细胞中18h表达量达到峰值,而在内膜间质细胞中24h表达量最高,之后缓慢下降。结果表明,ZEA可能通过上调Casepase-3和Caspase-8的表达从而引起子宫内膜细胞凋亡。 展开更多

关键词 玉米赤霉烯酮 内膜上皮细胞 内膜间质细胞 CASPASE-3 Caspase-8

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IL-6和IL-8对子宫异位内膜基质细胞分泌MMP-9的影响 被引量：4

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作者 方敏 何福仙 《中国医师杂志》 CAS 2005年第4期464-466,共3页

目的了解白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)对子宫异位内膜基质细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,以探讨IL-6及IL-8在异位内膜粘附和种植过程中的作用。方法分别用含不同浓度的IL-6和IL-8以及无干扰因素的培养液培养各组人... 目的了解白细胞介素-6(IL-6)和白细胞介素-8(IL-8)对子宫异位内膜基质细胞分泌基质金属蛋白酶-9(MMP-9)的影响,以探讨IL-6及IL-8在异位内膜粘附和种植过程中的作用。方法分别用含不同浓度的IL-6和IL-8以及无干扰因素的培养液培养各组人子宫内膜基质细胞24h后,ELISA方法测定培养液中MMP-9的含量。结果1.正常对照组的MMP-9水平:高浓度IL-6干扰组显著高于无干扰组(P<0.05)。2.在位内膜组和异位内膜组的MMP-9水平:⑴高浓度IL-6干扰组显著高于低浓度IL-6干扰组(P<0.01)。⑵高浓度IL-6干扰组显著高于无干扰组(P<0.01)。结论内异症时IL-6可能是通过产生更多MMP-9的途径来促进异位内膜种植,而IL-8促进异位内膜种植不是通过提高MMP-9水平,而是直接刺激内膜细胞增殖,从而对异位内膜组织的生长和维持起作用。 展开更多

关键词 子宫异位内膜 IL-6 细胞分泌 基质金属蛋白酶-9(MMP-9) 白细胞介素-8(IL-8) ELISA方法 异位内膜组织 人子宫内膜 正常对照组 基质细胞 不同浓度 在位内膜 细胞增殖 直接刺激 培养液 干扰 种植 24h 水平 低浓度 内异症

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Periostin对子宫内膜异位症内膜基质细胞增殖和血管生成的影响 被引量：1

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作者 侯海侠 刘忠杰 +2 位作者 贾卫静 杜素果 李桂芬 《中国计划生育和妇产科》 2023年第12期45-48,53,I0001,I0002,共7页

目的探究Periostin对子宫内膜基质细胞(ESCs)增殖和血管生成的影响及其潜在的分子机制。方法选取2019年1月至2021年1月衡水市人民医院的女性患者为研究对象,收集其子宫内膜组织,采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化检测临床样本子宫内... 目的探究Periostin对子宫内膜基质细胞(ESCs)增殖和血管生成的影响及其潜在的分子机制。方法选取2019年1月至2021年1月衡水市人民医院的女性患者为研究对象,收集其子宫内膜组织,采用qRT-PCR、Western blot和免疫组化检测临床样本子宫内膜组织中Periostin mRNA和蛋白的表达。从子宫内膜组织中分离出子宫内膜基质细胞(ESCs),并通过CCK-8、EdU、Transwell分析、血管形成等实验来分析Periostin异常表达对ESCs和人脐静脉内皮细胞(HUVECs)的作用。Western blot检测PI3K/AKT/mTOR通路相关蛋白和血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGFA)的表达。用PI3K/AKT/mTOR通路抑制剂(LY294002)转染ESCs,确定PI3K/AKT/mTOR通路对子宫内膜异位症内膜基质细胞增殖和血管生成的作用。结果异位子宫内膜组织中Periostin表达上调,Periostin促进了ESCs的增殖、迁移和侵袭,并促进了HUVECs的血管生成。此外,Periostin激活了PI3K/AKT/mTOR通路,经过LY294002处理后,过表达的Periostin对ESCs和HUVECs的促进作用减弱。结论Periostin能通过激活PI3K/AKT/mTOR通路来促进子宫内膜异位症的进展和血管生成,这可能为子宫内膜异位症提供有前景的治疗靶点。 展开更多

关键词 PERIOSTIN 子宫内膜异位症 内膜基质细胞 增殖 血管生成 PI3K/AKT/mTORt通路

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miR-34a-5p靶向AKT1基因对子宫内膜异位症子宫内膜基质细胞侵袭及自噬的调控 被引量：5

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作者 刘敏娟 邓月秀 马颖 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期776-782,共7页

目的研究微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)靶向AKT1基因对子宫内膜异位症(EM)子宫内膜基质细胞(ESCs)侵袭及自噬的调控作用。方法原代分离、培养EM患者ESCs,构建negative control RNA(NC)及mimic细胞模型,采用双荧光肾素酶报告系统验证miR-34... 目的研究微小RNA-34a-5p(miR-34a-5p)靶向AKT1基因对子宫内膜异位症(EM)子宫内膜基质细胞(ESCs)侵袭及自噬的调控作用。方法原代分离、培养EM患者ESCs,构建negative control RNA(NC)及mimic细胞模型,采用双荧光肾素酶报告系统验证miR-34a-5p与AKT1基因存在结合位点,RT-PCR及Western blotting检测并验证2组细胞miR-34a-5p和AKT1基因的表达及调控关系;检测miR-34a-5p对ESCs的增殖、迁移、侵袭、凋亡的影响。结果EM患者ESCs中miR-34a-5p较非EM患者明显降低,而AKT1基因的表达明显升高,且两者变化呈负相关;miR-34a-5p通过特异性结合AKT1基因的3’UTR区对AKT1基因的表达进行调控;转染miR-34a-5p mimic可使ESCs中miR-34a-5p表达升高,AKT1基因表达降低,同时使ESCs的增殖、迁移及侵袭能力增强,而凋亡及自噬能力下降。结论miR-34a-5p靶向AKT1基因促进ESCs的增殖、迁移及侵袭能力,降低其凋亡及自噬能力,可能在EM的发病过程中发挥作用。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 微小RNA-34a-5p AKT1基因 子宫内膜基质细胞

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GnRH-Ⅱ对子宫内膜异位症患者离体培养的子宫内膜间质细胞分泌VEGF的影响 被引量：3

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作者 刘秋红 黄凤英 +1 位作者 王焕萍 邹颖 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期926-932,共7页

目的:检测体外培养的子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者在位和异位内膜间质细胞分泌的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度,并观察不同浓度的II型促性腺激素释放激素(GnRH-Ⅱ)对在位和异位内膜间质... 目的:检测体外培养的子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)患者在位和异位内膜间质细胞分泌的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的浓度,并观察不同浓度的II型促性腺激素释放激素(GnRH-Ⅱ)对在位和异位内膜间质细胞分泌VEGF的影响。方法:分别给予原代培养的EMs患者在位与异位子宫内膜间质细胞不同浓度(1×10-10～1×10-6mol/L)的GnRH-Ⅱ处理,不加GnRH-Ⅱ组作为对照,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定培养液中VEGF浓度并进行比较。结果:体外培养的EMs患者异位子宫内膜间质细胞分泌VEGF,培养48 h后分泌量与在位子宫内膜间质细胞比较差异无统计学意义(P(0.05)。1×10-10～1×10-6mol/L的GnRH-Ⅱ可呈浓度依赖性地抑制体外培养的在位和异位子宫内膜间质细胞分泌VEGF(P<0.01),且对异位子宫内膜间质细胞的抑制作用强于在位(P<0.01)。结论:EMs患者的异位子宫内膜间质细胞分泌VEGF的能力与在位子宫内膜的相近,这对EMs的形成和发展可能起重要作用。GnRH-Ⅱ对EMs患者体外培养的异位子宫内膜间质细胞VEGF的分泌有明显的抑制作用,且作用明显强于对在位内膜间质细胞的。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 Ⅱ型促性腺激素释放激素(GnRH-Ⅱ) 子宫内膜间质细胞 血管内皮生长因子

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维生素D信号通路在反复种植失败患者子宫内膜组织中作用的机制研究 被引量：1

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作者 林芳婷 吴清瑜 +1 位作者 王茹 李波 《生殖医学杂志》 CAS 2023年第5期730-739,共10页

目的 探讨维生素D信号通路对反复种植失败(RIF)患者子宫内膜容受性的影响及可能的作用机制。方法 收集2019年5月至2021年2月于海南省妇女儿童医学中心就诊的30例RIF患者为RIF组,选择同期因输卵管和/或男性因素接受IVF-ET治疗,并在子宫... 目的 探讨维生素D信号通路对反复种植失败(RIF)患者子宫内膜容受性的影响及可能的作用机制。方法 收集2019年5月至2021年2月于海南省妇女儿童医学中心就诊的30例RIF患者为RIF组,选择同期因输卵管和/或男性因素接受IVF-ET治疗,并在子宫内膜活检采集后的移植周期中实现临床妊娠的30例女性作为对照组。分别于自然月经周期黄体生成素高峰后7 d(对照组)或激素替代疗法(HRT)周期服用孕酮后5 d(RIF组)收集两组患者的子宫内膜组织与外周血的血液样本;体外细胞实验选择人子宫内膜间质细胞(hESCs)SCRC-2002细胞系。免疫组织化学染色法检测VD代谢酶CYP27B1和VD受体(VDR)在子宫内膜组织中的表达;利用孕酮(P_(4))与二丁酰环磷酸腺苷(cAMP)联合诱导法使hESCs发生蜕膜化;将携带沉默VDR(sh-VDR)与对照序列(sh-NC)的慢病毒载体转染至hESCs中,并将细胞分为:cAMP+P_(4)+sh-NC组、cAMP+P_(4)+sh-NC+VD组和cAMP+P_(4)+sh-VDR+VD组,RT-PCR检测蜕膜化标志物催乳素(PRL)和胰岛素生长因子结合蛋白(IGFBP1)mRNA表达;P_(4)处理转染后的hESCs,并将细胞分为:sh-NC组、P_(4)+sh-NC组、P_(4)+sh-NC+VD组与P_(4)+sh-VDR+VD组;CCK-8检测细胞的增殖能力;Western blotting检测细胞中上皮细胞标志物β-Catenin、E-cadherin、ZO-1与间质细胞标志物N-cadherin、CLDN5蛋白表达水平。结果 与对照组相比,RIF组子宫内膜组织中CYP27B1和VDR的mRNA和蛋白表达均显著降低(P<0.05)。与cAMP+P_(4)+sh-NC组相比,cAMP+P_(4)+sh-NC+VD组中PRL与IGFBP1的mRNA表达显著升高(P<0.05),cAMP+P_(4)+sh-VDR+VD组中PRL与IGFBP1的mRNA表达显著降低(P<0.05)。与sh-NC组相比,P_(4)+sh-NC组、P_(4)+sh-NC+VD组和P_(4)+sh-VDR+VD组细胞的增殖能力显著增强(P<0.05),细胞中β-Catenin、E-cadherin、ZO-1蛋白表达显著增加(P<0.05),N-cadherin、CLDN5蛋白水平显著降低(P<0.05)。与P_(4)+sh-NC组相比,P_(4)+sh-NC+VD组细胞增殖能力与β-Catenin、E-cadherin、ZO-1蛋白� 展开更多

关键词 维生素D 反复种植失败 基质细胞 细胞增殖

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孕酮对子宫蓄脓犬子宫内膜基质细胞增殖的影响 被引量：1

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作者 郭松扬念 常仁旭 +2 位作者 陈指龙 刘进辉 杨青 《动物医学进展》 北大核心 2023年第4期20-24,共5页

旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P_(4))的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;... 旨在研究子宫蓄脓对犬子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖的影响及孕酮(progesterone,P_(4))的干预作用。收集健康犬和经腹部B超确诊患子宫蓄脓犬的子宫,采用胶原酶消化法分离ESCs,并通过细胞免疫荧光检测进行鉴定;采用CCK-8法检测培养不同时间后两种ESCs的细胞活力及孕酮作用的影响。结果显示,胶原酶消化法可分离获得高纯度的犬ESCs;将分离的ESCs培养24 h和48 h时,子宫蓄脓犬ESCs的细胞活力显著高于健康犬(P<0.01)。用0、5、15、30 ng/mL等不同浓度P_(4)处理两种ESCs,当作用24 h时,两种细胞的活力与相应的对照比均无显著变化(P>0.05);作用48 h时,30 ng/mL的P_(4)可显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),而对子宫蓄脓犬ESCs的增殖具有显著的抑制作用(P<0.05);作用72 h时,3种浓度P_(4)均显著促进健康犬ESCs的增殖(P<0.01),但对子宫蓄脓犬ESCs的增殖均无显著影响(P>0.05)。以上结果表明,子宫蓄脓犬ESCs的快速增殖可能与子宫内膜的囊性增生密切相关,P_(4)可促进健康犬ESCs的增殖,但在一定程度上抑制子宫蓄脓犬ESCs的增殖。 展开更多

关键词 犬子宫蓄脓 子宫内膜基质细胞 孕酮

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沉默miR-6771-3p通过靶向AXIN2/Wnt信号通路调控异位子宫内膜间质细胞增殖和迁移实验研究

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作者 孙利娟 黄香平 +2 位作者 张多多 张小雪 陆晓媛 《陕西医学杂志》 CAS 2023年第11期1468-1472,共5页

目的:探讨微小RNA(miRNA)miR-6771-3p在子宫内膜异位组织中的表达及其通过靶向调控AXIN2对异位子宫内膜间质细胞增殖和迁移的影响。方法:收集因子宫内膜异位症行手术治疗的患者子宫在位内膜组织和异位内膜组织34例,采用实时聚合酶链式反... 目的:探讨微小RNA(miRNA)miR-6771-3p在子宫内膜异位组织中的表达及其通过靶向调控AXIN2对异位子宫内膜间质细胞增殖和迁移的影响。方法:收集因子宫内膜异位症行手术治疗的患者子宫在位内膜组织和异位内膜组织34例,采用实时聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测组织中miR-6771-3p的表达水平。将异位子宫内膜间质细胞分为沉默组(转染靶向沉默miR-6771-3p的短发夹RNA载体)和空载体组(转染对照载体)。噻唑蓝(MTT)法分析转染后各组异位子宫内膜间质细胞的增殖能力,细胞划痕愈合实验分析转染后各组异位子宫内膜间质细胞的迁移能力,生物信息学技术和双荧光素酶报告基因实验验证miR-6771-3p和轴抑制蛋白2(AXIN2)的靶向关系,RT-qPCR检测转染后各组细胞AXIN2 mRNA表达水平。Western blot检测转染后各组细胞AXIN2蛋白和Wnt信号通路蛋白的表达水平。结果:子宫异位内膜组织中miR-6771-3p表达显著高于子宫在位内膜组织(P<0.01)。与空载体组异位子宫内膜间质细胞比较,沉默组异位子宫内膜间质细胞增殖能力显著降低(P<0.01),细胞划痕愈合率显著降低(P<0.01)。双荧光素酶报告基因实验证实miR-6771-3p与AXIN2存在靶向关系(P<0.01),miR-6771-3p能够负调控AXIN2 mRNA表达(P<0.01)。与空载体组相比,沉默组细胞中AXIN2蛋白表达显著升高,Wnt信号通路蛋白表达显著降低(均P<0.01)。结论:在子宫异位内膜组织中miR-6771-3p呈高表达,miR-6771-3p通过靶向AXIN2基因影响Wnt信号通路转导,进而调控异位子宫内膜间质细胞的增殖和迁移。 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 子宫内膜间质细胞 miR-6771-3p 轴抑制蛋白2 细胞增殖 细胞迁移

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lncRNA HAND2-AS1通过调节miR-21表达对子宫内膜异位症患者子宫内膜基质细胞迁移和侵袭的抑制作用

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作者 苗卉 苗聪秀 +1 位作者 李娜 韩晶 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第3期733-741,共9页

目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)患者子宫内膜组织中长链非编码RNAs(lncRNAs)HAND2-AS1对异位子宫内膜(EC)组织中子宫内膜基质细胞(ESCs)增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其可能机制。方法:收集30例EMT患者(EMT组)的EC组织和30例健康育... 目的:探讨子宫内膜异位症(EMT)患者子宫内膜组织中长链非编码RNAs(lncRNAs)HAND2-AS1对异位子宫内膜(EC)组织中子宫内膜基质细胞(ESCs)增殖、迁移和侵袭能力的影响,并阐明其可能机制。方法:收集30例EMT患者(EMT组)的EC组织和30例健康育龄女性(对照组)的子宫内膜组织,分离子宫内膜组织获取ESCs。采用脂质体转染法转染EMT患者EC组织的ESCs,并将ESCs分为pcDNA组(转染pcDNA空质粒)、HAND2-AS1组(转染HAND2-AS1过表达质粒)、mimic NC组(转染mimic NC)、miR-21 mimic组(转染miR-21 mimic)、pcDNA+mimic NC组(联合转染pcDNA和mimic NC)、HAND2-AS1+mimic NC组(联合转染HAND2-AS1过表达质粒和mimic NC)、pcDNA+miR-21 mimic组(联合转染pcDNA空质粒和miR-21 mimic)和HAND2-AS1+miR-21 mimic组(联合转染HAND2-AS1过表达质粒和miR-21 mimic),另设未转染的细胞为空白对照组。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测2组研究对象子宫内膜组织和ESCs中HAND2-AS1 mRNA和miR-21表达水平,采用Pearson相关系数分析其相关性。采用生物信息学软件Starbase预测lncRNA HAND2-AS1与miR-21的靶向作用关系,荧光素酶基因报告实验进行验证。CCK-8法检测各组ESCs增殖活性,Transwell小室实验检测ESCs的迁移和侵袭数。结果:2组研究对象年龄、体质量指数(BMI)和血清中卵泡刺激素(FSH)、黄体生成素(LH)及催乳素(PRL)水平比较差异均无统计学意义(P<0.05)。与对照组比较,EMT组患者血清中雌二醇(E2)水平升高(P<0.05),EMT组患者EC组织中HAND2-AS1 mRNA表达水平降低(P<0.05),miR-21表达水平升高(P<0.05);与对照组比较,EMT组ESCs中HAND2-AS1 mRNA表达水平降低(P<0.05),miR-21表达水平明显升高(P<0.01)。Pearson相关系数分析,对照组研究对象HAND2-AS1与miR-21表达水平无明显相关性(r=0.34,P>0.05),EMT组患者ES组织中和ESCs中HAND2-AS1与miR-21表达水平呈负相关关系(r=-0.57,P<0.05)。RT-qPCR法检测,与空白对照组比较,HAND2-AS1组ESCs中HAND2-AS1 mRN 展开更多

关键词 子宫内膜异位症 异位子宫内膜 长链非编码RNA HAND2-AS1 MIR-21 子宫内膜基质细胞 细胞迁移 细胞侵袭

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绒癌细胞靶向微泡造影剂结合特性研究 被引量：4

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作者 周力学 朱军 +3 位作者 丁红 贾彩霞 李艳 魏青 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1706-1708,1713,共4页

目的探索体外靶向SonoVue微泡与绒癌细胞的结合特性、结合率及靶向微泡的稳定性,为临床进行滋养细胞肿瘤的超声定位提供依据。方法用SonoVue微泡与兔抗人HCG抗体作用制成靶向造影剂,然后分别与绒癌细胞及子宫内膜间质细胞作用,比较各自... 目的探索体外靶向SonoVue微泡与绒癌细胞的结合特性、结合率及靶向微泡的稳定性,为临床进行滋养细胞肿瘤的超声定位提供依据。方法用SonoVue微泡与兔抗人HCG抗体作用制成靶向造影剂,然后分别与绒癌细胞及子宫内膜间质细胞作用,比较各自的结合率及冲洗前后的结合率。结果SonoVue微泡与兔抗人HCG抗体的结合率为77.6%;绒癌细胞与靶向SonoVue微泡的花环形成率为(87.8±6.3)%,明显高于子宫内膜间质细胞花环形成率的(9.4±1.7)%(P<0.05);靶向SonoVue微泡与贴壁生长的绒癌细胞结合率为(85.4±4.7)%,冲洗后结合率为(83.1±3.8)%(P>0.05);流式细胞仪检测绒癌细胞与靶向SonoVue微泡的结合率为81.0%。结论在体外靶向SonoVue微泡与绒癌细胞可特异性结合,其结合力具有一定的强度,可望能抵抗毛细血管内血流生理性冲洗的破坏,实现靶向显影。 展开更多

关键词 SONOVUE 靶向微泡造影剂 抗HCG抗体 绒癌细胞 子宫内膜间质细胞

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