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半枝莲与白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分分析及其抗子宫内膜癌细胞活性研究 被引量:17
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作者 逄亚楠 国锦 +4 位作者 闫辉 容蓉 巩丽丽 蒋海强 吕青涛 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期789-794,共6页
目的:对半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分进行分析,并研究体外抗子宫内膜癌细胞活性。方法:采用GC-MS结合保留指数(Kovats retention index,KI)对主要成分进行分析和鉴定;甲基偶氮唑盐类(MTT)法研究三者的抗子宫内膜癌细胞活... 目的:对半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位成分进行分析,并研究体外抗子宫内膜癌细胞活性。方法:采用GC-MS结合保留指数(Kovats retention index,KI)对主要成分进行分析和鉴定;甲基偶氮唑盐类(MTT)法研究三者的抗子宫内膜癌细胞活性。结果:通过GC-MS分析鉴定出半枝莲、白花蛇舌草及药对石油醚部位中同时含有不饱和脂肪酸、酯类、甾醇类等成分,白花蛇舌草和药对相区别于半枝莲的石油醚部位又含有较多蒽醌类化合物。半枝莲、白花蛇舌草及其药对石油醚部位抗子宫内膜癌细胞HEC-1A的IC50值分别为275.204μg/m L,105.826μg/m L,148.645μg/m L,抗子宫内膜癌细胞Ishikawa的IC50值分别为189.114μg/m L,77.974μg/m L,137.999μg/m L。结论:半枝莲与白花蛇舌草及其药对石油醚部位对子宫内膜癌细胞HEC-1A和Ishikawa均有抑制作用,其中白花蛇舌草的抗子宫内膜癌细胞活性最强,推测可能与含量较高的蒽醌类化合物有关。 展开更多
关键词 半枝莲 白花蛇舌草 药对 石油醚部位 GC-MS 子宫内膜癌细胞
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顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖及自噬的影响 被引量:6
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作者 林琼燕 王沂峰 +1 位作者 熊汉真 生秀杰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第4期524-528,共5页
目的:观察顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖及自噬的影响。方法:MTS法检测不同剂量顺铂对Ishikawa细胞增殖的作用。透射电镜观察自噬泡形成,应用Western blot检测LC3及Beclin1的积累,免疫荧光检测LC3的荧光聚集情况。结果:(1)10μg/... 目的:观察顺铂对子宫内膜癌Ishikawa细胞的增殖及自噬的影响。方法:MTS法检测不同剂量顺铂对Ishikawa细胞增殖的作用。透射电镜观察自噬泡形成,应用Western blot检测LC3及Beclin1的积累,免疫荧光检测LC3的荧光聚集情况。结果:(1)10μg/m L顺铂对Ishikawa细胞的增殖有抑制作用,随着时间及浓度的增加,细胞增殖的抑制作用明显增加(P<0.01);(2)透射电镜显示顺铂处理后子宫内膜癌细胞发生自噬,随着时间剂量增加,Western blot检测LC3表达增加,Becline1表达无明显变化;(3)与对照组相比,20μg/m L-12 h组的自噬体及LC3表达增加;20μg/m L-24 h组较12 h组的自噬体及LC3表达增加。结论:顺铂对Ishikawa细胞增殖有明显抑制作用,呈时间剂量依赖性;顺铂诱导Ishikawa细胞发生自噬,呈时间剂量依赖性。自噬相关基因LC3的变化可能为顺铂诱导子宫内膜癌自噬分子机制之一。 展开更多
关键词 顺铂 ISHIKAWA细胞 增殖 自噬 自噬相关基因
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DNA甲基化介导miR-128-2沉默对子宫内膜癌细胞中DJ-1表达的影响
3
作者 朱其舟 李慧娟 +3 位作者 肖仲清 龙生根 陈和平 舒宽勇 《中国计划生育和妇产科》 2024年第4期66-71,共6页
目的在子宫内膜癌细胞系水平,进一步明确上调子宫内膜癌细胞内DJ-1表达的重要调控机制。方法1.利用正常人子宫内膜上皮细胞(ESC)和4种子宫内膜癌细胞株,检测细胞中miR-128-2基因启动子区DNA甲基化的水平、miR-128-2、DJ-1 mRNA及DJ-1蛋... 目的在子宫内膜癌细胞系水平,进一步明确上调子宫内膜癌细胞内DJ-1表达的重要调控机制。方法1.利用正常人子宫内膜上皮细胞(ESC)和4种子宫内膜癌细胞株,检测细胞中miR-128-2基因启动子区DNA甲基化的水平、miR-128-2、DJ-1 mRNA及DJ-1蛋白表达水平,比较分析它们在不同的子宫内膜癌细胞系中的差异变化及相关性。2.将miR-128-2 mimic和miR-128-2 inhibitor依次分别转染Ishikawa和SPEC-2子宫内膜癌细胞株,测定细胞中miR-128-2、DJ-1 mRNA及DJ-1蛋白表达水平的变化,以求阐明miR-128-2是否能调控内源性DJ-1表达。3.分别构建含野生型DJ-1-3’UTR的重组荧光素酶报告载体pGL3-DJ-1-3’UTR-wt和含有突变型DJ-1-3’UTR的重组荧光素酶报告载体pGL3-DJ-1-3’UTR-mut,验证DJ-1是否为miR-128-2直接靶基因。4.Ishikawa和SPEC-2子宫内膜癌细胞经5μM甲基化抑制剂5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-dC)药物预处理48 h或5-Aza-dC预处理后再转染miR-128-2 inhibitor 48 h,随后检测miR-128-2基因启动子DNA甲基化水平的变化、miR-128-2和DJ-1 mRNA表达丰度的变化、DJ-1蛋白的表达水平变化,以求阐明子宫内膜癌细胞中miR-128-2基因启动子DNA甲基化是否沉默miR-128-2表达进而上调DJ-1表达。结果1.与正常ESC相比较,Ishikawa、RL95-2、KLE及SPEC-2四种子宫内膜癌细胞中miR-128-2基因启动子区DNA甲基化水平均显著增加(P<0.01),同时miR-128-2表达明显下调(P<0.01),而DJ-1 mRNA及蛋白表达显著增加(P<0.01);通过相关性分析发现miR-128-2甲基化水平与miR-128-2表达具有显著负相关性(r=-0.9124,P<0.01),而与DJ-1 mRNA表达具有显著正相关性(r=0.8304,P<0.01);此外,miR-128-2表达与DJ-1 mRNA的表达表现为负相关性(r=-0.8963,P<0.01)。2.Ishikawa和SPEC-2细胞中转染miR-128-2 inhibitor后,DJ-1 mRNA及蛋白表达水平较对照组均有明显升高(P<0.01),而miR-128-2 mimic转染细胞后,DJ-1 mRNA及蛋白表达水平较对照组均出现明显下降(P<0.01)。3.m 展开更多
关键词 miR-128-2 DNA甲基化 DJ-1 子宫内膜癌细胞 5-AZA-DC
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CircWHSC1调节miR-212-3p/CD47轴对子宫内膜癌细胞免疫逃逸和紫杉醇耐药性的影响 被引量:1
4
作者 耿熙雪 钱红霞 +1 位作者 韩燕 李丽 《现代妇产科进展》 北大核心 2023年第7期510-515,共6页
目的:探讨环状链非编码RNA(Circ)WHSC1调节微小RNA(miR)-212-3p/整合素相关蛋白(CD47)轴对子宫内膜癌(EC)细胞免疫逃逸和紫杉醇(PTX)耐药性的影响。方法:qRT-PCR检测EC细胞系(Ishikawa、RL95-2、HEC-1-A、HEC-1B)及人子宫内膜基质细胞(E... 目的:探讨环状链非编码RNA(Circ)WHSC1调节微小RNA(miR)-212-3p/整合素相关蛋白(CD47)轴对子宫内膜癌(EC)细胞免疫逃逸和紫杉醇(PTX)耐药性的影响。方法:qRT-PCR检测EC细胞系(Ishikawa、RL95-2、HEC-1-A、HEC-1B)及人子宫内膜基质细胞(ESC)系CL0453中CircWHSC1、miR-212-3p、CD47 mRNA表达水平;以Ishikawa细胞为研究对象,分为对照组、RNA干扰CircWHSC1载体(sh-CircWHSC1)组、阴性对照(sh-NC)组、sh-CircWHSC1+miR-212-3p抑制剂(miR-212-3p inhibitor)组、sh-CircWHSC1+抑制剂阴性对照(inhibitor NC)组;CCK-8分别检测各组Ishikawa细胞增殖及对PTX耐药性;流式细胞仪检测细胞凋亡状况;Western blot检测CD47及免疫逃逸蛋白(B7-H1、PD-L1)表达;双荧光素酶验证miR-212-3p分别与CircWHSC1、CD47靶向关系。结果:Ishikawa、RL95-2、HEC-1-A、HEC-1B细胞较CL0453细胞CircWHSC1、CD47 mRNA均显著增加,miR-212-3p表达显著下降(P<0.05);与对照组、sh-NC组相比,sh-CircWHSC1组CircWHSC1、CD47 mRNA、增殖率、IC 50、B7-H1、PD-L1表达均显著下降,凋亡率、miR-212-3p表达显著增加(P<0.05);与sh-CircWHSC1+inhibitor NC组相比,sh-CircWHSC1+miR-212-3p inhibitor组CD47 mRNA、增殖率、IC 50、B7-H1、PD-L1表达均显著增加,凋亡率、miR-212-3p表达显著下降(P<0.05)。miR-212-3p分别与CircWHSC1、CD47存在靶向关系。结论:干扰CircWHSC1表达可抑制Ishikawa细胞增殖,降低PTX耐药性,促进其凋亡,并可能抑制癌细胞免疫逃逸,其作用机制可能是通过调控miR-212-3p/CD47轴实现的。 展开更多
关键词 CircWHSC1 miR-212-3p/CD47轴 子宫内膜癌细胞 免疫逃逸 紫杉醇耐药性
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过表达MicroRNA-195抑制子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力 被引量:5
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作者 张玉虹 孙喜斌 +3 位作者 石克威 马会 于治芳 陈江平 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2020年第1期1-5,共5页
目的:观察MicroRNA-195对子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。方法:取对数生长期人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,分别转染MicroRNA-195模拟物(MicroRNA-195过表达组)、MicroRNA-195抑制物(MicroRNA-195低表达组)及阴性对照质粒Micr... 目的:观察MicroRNA-195对子宫内膜癌细胞增殖、迁移与侵袭能力的影响。方法:取对数生长期人子宫内膜癌细胞系Ishikawa,分别转染MicroRNA-195模拟物(MicroRNA-195过表达组)、MicroRNA-195抑制物(MicroRNA-195低表达组)及阴性对照质粒MicroRNA-NC(空白质粒组)。转染48h后,qRT-PCR法检测细胞中MicroRNA-195表达,CCK-8法检测细胞增殖,Transwell小室实验检测细胞迁移与侵袭能力,Western blot法检测Akt、p-Akt蛋白表达。将转染MicroRNA-195模拟物、MicroRNA-195抑制物及阴性对照质粒MicroRNA-NC的人子宫内膜癌细胞系Ishikawa分别注射至裸鼠皮下,每天检测肿瘤体积,实验周期为3周。结果:MicroRNA-195过表达可抑制人子宫内膜癌细胞系Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),提高p-Akt蛋白表达(P<0.05);MicroRNA-195低表达可促进人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力(P<0.05),降低p-Akt蛋白表达(P<0.05)。MicroRNA-195过表达可抑制裸鼠体内人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖(P<0.05),MicroRNA-195低表达可促进裸鼠体内人子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖(P<0.05)。结论:MicroRNA-195可抑制子宫内膜癌细胞Ishikawa的增殖、迁移与侵袭能力,其作用机制可能与激活PI3K/Akt信号通路有关。 展开更多
关键词 MicroRNA-195 PI3K/AKT信号通路 子宫内膜癌细胞 细胞增殖 迁移与侵袭
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大豆皂苷调控miR-584-5p/HDAC1通路对子宫内膜癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量:1
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作者 帅仁亚 李晴宇 +1 位作者 范敏慧 徐炜 《中国现代医生》 2023年第33期35-40,共6页
目的研究大豆皂苷调控微小RNA-584-5p(microRNA-584-5p,miR-584-5p)/组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylasel,HDAC1)通路对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞增殖及凋亡的影响。方法以终浓度Oltg/rml、20μg/ml、40μg/ml、80μg... 目的研究大豆皂苷调控微小RNA-584-5p(microRNA-584-5p,miR-584-5p)/组蛋白去乙酰化酶1(histone deacetylasel,HDAC1)通路对子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)细胞增殖及凋亡的影响。方法以终浓度Oltg/rml、20μg/ml、40μg/ml、80μg/ml、120μg/ml、160μg/ml的大豆皂苷处理体外培养的人EC细胞系HEC-1-A,以细胞计数试剂盒8(cell counting Kit-8,CCK-8)法测定各浓度处理后的细胞活力,计算半数抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))。将对数生长期的HEC-1-A细胞随机分为对照组、大豆皂苷组、miR-584-5p抑制剂组、大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂组、大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂阴性对照组,分组转染及用药处理后,以CCK-8法测定各组细胞活力;以流式细胞实验检测各组细胞凋亡率;以免疫印迹实验检测各组细胞HDAC1蛋白、增殖相关蛋白增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及凋亡相关蛋白[天冬氨酸特异性半胱氨酸蛋白酶9(cysteine-containing aspartate-specific proteases 9,caspase-9)、B淋巴细胞瘤-2相关X蛋白(B-cell lymphoma-2-associated X protein,Bax)]表达;以实时荧光定量PCR(real-time quantitative PCR,qRT-PCR)实验检测各组细胞miR-584-5p与HDAC1 mRNA表达。结果不同浓度大豆皂苷可抑制HEC-1-A细胞生长,IC_(50)为98.56μg/ml。与对照组相比,大豆皂苷组与大豆皂苷+miR-584-5p抑制剂阴性对照组的细胞活力、PCNA蛋白表达、HDACl mRNA及蛋白表达降低(P<0.05),凋亡率、caspase-9及Bax蛋白表达、miR-584-5p表达增高(P<0.05);miR-584-5p抑制剂组的细胞各指标与大豆皂苷组相反。miR-584-5p抑制剂可减弱大豆皂苷对细胞各指标的作用。结论大豆皂苷可上调miR-584-5p表达,下调HDAC1表达,促使EC细胞凋亡,抑制其增殖。 展开更多
关键词 大豆皂苷 miR-584-5p/HDAC1通路 子宫内膜癌细胞 增殖 凋亡
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miR-613靶向PTBP1抑制子宫内膜癌细胞侵袭和迁移的实验研究 被引量:3
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作者 顾少君 钱春艳 傅欢泉 《中华全科医学》 2022年第5期781-784,827,共5页
目的探讨微RNA-613(miR-613)靶向多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)增殖、迁移及侵袭的影响。方法采用RT-qPCR法检测子宫内膜癌组织miR-613及PTBP1 mRNA表达;体外培养Ishikawa细胞并对Ishikawa细胞进行干预,过表达m... 目的探讨微RNA-613(miR-613)靶向多聚嘧啶区结合蛋白1(PTBP1)对子宫内膜癌细胞(Ishikawa)增殖、迁移及侵袭的影响。方法采用RT-qPCR法检测子宫内膜癌组织miR-613及PTBP1 mRNA表达;体外培养Ishikawa细胞并对Ishikawa细胞进行干预,过表达miR-613、抑制PTBP1表达或共同过表达miR-613与PTBP1,分别检测Ishikawa细胞增殖、迁移与侵袭及PTBP1、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、MMP-9蛋白表达情况;双荧光素酶报告实验验证miR-613与PTBP1的靶向关系。结果子宫内膜癌组织中miR-613表达水平为0.48±0.09,显著低于癌旁组织的1.03±0.11(P<0.05),PTBP1 mRNA表达水平为2.78±0.23,显著高于癌旁组织的1.01±0.12(P<0.05),miR-613与PTBP1 mRNA呈负相关关系(r=-0.523,P<0.05);双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-613靶向负调控PTBP1表达;过表达miR-613与抑制PTBP1表达,Ishikawa细胞存活率、细胞迁移与侵袭数、PTBP1、MMP-2及MMP-9表达水平显著降低(均P<0.05);过表达PTBP1逆转过表达miR-613对Ishikawa细胞增殖、迁移与侵袭的抑制作用。结论miR-613在子宫内膜癌组织中低表达,过表达miR-613可通过靶向抑制PTBP1表达,抑制人子宫内膜癌细胞的增殖、迁移及侵袭。 展开更多
关键词 微RNA-613 多聚嘧啶区结合蛋白1 子宫内膜癌细胞 增殖 迁移 侵袭
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吴茱萸碱对子宫内膜癌细胞EMT及JAK/STAT3/HIF-1α通路的影响 被引量:3
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作者 张莉 周丽 +1 位作者 唐艳 万朝霞 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2022年第9期3516-3523,共8页
目的探究吴茱萸碱(EVO)对子宫内膜癌(EC)细胞的抗癌作用,并探讨其可能的作用机制。方法培养EC细胞株HEC-1A、Ishikawa和AN3CA,不同浓度EVO(0、1、2、4、8μmol/L)处理,噻唑蓝(MTT)检测EVO对不同EC细胞株增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC... 目的探究吴茱萸碱(EVO)对子宫内膜癌(EC)细胞的抗癌作用,并探讨其可能的作用机制。方法培养EC细胞株HEC-1A、Ishikawa和AN3CA,不同浓度EVO(0、1、2、4、8μmol/L)处理,噻唑蓝(MTT)检测EVO对不同EC细胞株增殖的影响并计算半数抑制浓度(IC50)。培养Ishikawa细胞,将其分为:Control组(不做任何处理)、EVO组(4μmol/L EVO)、AG490组[50μmol/L AG490,Janus激酶(JAK)抑制剂]、EVO+RO8191组(4μmol/L EVO+20μmol/L RO8191,JAK激动剂)。分别使用划痕实验和Transwell实验检测各组Ishikawa细胞迁移和侵袭能力;蛋白免疫印迹(Western Blot)法检测上皮-间质转化(EMT)及JAK/转录激活因子3(STAT3)/缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)信号通路相关蛋白水平。结果MTT结果显示,EVO对HEC-1A、Ishikawa和AN3CA细胞增殖有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性(P<0.05);EVO可显著抑制Ishikawa细胞的迁移和侵袭,上调上皮标志物E-钙粘附蛋白(E-cadherin)的蛋白表达,下调间质标志物E-钙粘附蛋白(N-cadherin)和波形蛋白(Vimentin)以及磷酸化JAK2(p-JAK2)、p-STAT3、HIF-1α的蛋白表达(P<0.05)。与EVO组相比,EVO+RO8191组Ishikawa细胞的划痕愈合率、侵袭率及N-cadherin、Vimentin、p-JAK2、p-STAT3、HIF-1α蛋白水平明显增高,E-cadherin蛋白水平明显降低(P<0.05)。结论EVO通过抑制EC细胞EMT及JAK/STAT3/HIF-1α通路进而抑制细胞迁移和侵袭。 展开更多
关键词 吴茱萸碱 子宫内膜癌细胞 上皮-间质转化 JAK/STAT3/HIF-1α通路
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瑞香素对人子宫内膜癌细胞生物学功能的影响 被引量:4
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作者 周娟 张洁清 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第4期511-516,共6页
目的:探讨瑞香素对人子宫内膜癌HEC-1A和HEC-1B细胞生物学功能的影响。方法:取对数生长期的人子宫内膜癌HEC-1A和HEC-1B细胞,分为对照组(0μmol/L瑞香素)和不同浓度(50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L)瑞香素处理组,培养48h后,采用CCK-... 目的:探讨瑞香素对人子宫内膜癌HEC-1A和HEC-1B细胞生物学功能的影响。方法:取对数生长期的人子宫内膜癌HEC-1A和HEC-1B细胞,分为对照组(0μmol/L瑞香素)和不同浓度(50μmol/L、75μmol/L、100μmol/L)瑞香素处理组,培养48h后,采用CCK-8法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术AnnexinV-APC/PI双染法检测细胞凋亡率,划痕实验和Transwell细胞侵袭实验分别检测瑞香素对细胞体外迁移能力和侵袭能力的影响。结果:在HEC-1A和HEC-1B细胞中,不同浓度瑞香素处理组细胞增殖抑制率和迁移率均较对照组显著降低,Transwell细胞侵袭实验中的跨膜细胞数显著减少,而细胞凋亡率明显升高,差异均有统计学意义(均P<0.05),且不同浓度瑞香素处理组组间两两比较,差异亦有统计学意义(P<0.05)。结论:瑞香素可抑制人子宫内膜癌HEC-1A和HEC-1B细胞增殖、侵袭和迁移,并诱导细胞凋亡,且呈剂量依赖关系。 展开更多
关键词 子宫内膜癌细胞 瑞香素 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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miR-3942-3p负调控靶基因BARD1增加子宫内膜癌放射敏感性的研究 被引量:3
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作者 王亮 黄琰菁 +1 位作者 陈晶 王天柱 《徐州医科大学学报》 CAS 2021年第3期166-172,共7页
目的探讨微小RNA-132-3p(microRNA-132-3p,miR-3942-3p)对子宫内膜癌细胞放射敏感性的影响及其可能的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测子宫内膜癌细胞(HEC-1A细胞)和人子宫内膜上皮细胞... 目的探讨微小RNA-132-3p(microRNA-132-3p,miR-3942-3p)对子宫内膜癌细胞放射敏感性的影响及其可能的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链反应(quantitative real-time PCR,RT-qPCR)检测子宫内膜癌细胞(HEC-1A细胞)和人子宫内膜上皮细胞(HEEC细胞)中miR-3942-3p和BRCA1关联环域1(BRCA1 associated RING domain 1,BARD1)的表达量。X射线(0、2、4、6 Gy)照射HEC-1A细胞后,RT-qPCR检测miR-3942-3p和BARD1的表达量。下调miR-3942-3p表达且经6 Gy X射线照射后,分别利用CCK-8、流式细胞仪和蛋白质免疫印迹(Western blot)检测HEC-1A细胞增殖能力、细胞凋亡率、B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)和Bcl-2-相关X蛋白(BCL2-Associated X,Bax)表达量。Targetscan和双荧光素报告基因实验分析miR-3942-3p与BARD1之间的关系。下调BARD1表达且经6 Gy X射线照射后,分析HEC-1A细胞增殖能力、细胞凋亡率以及Bax、Bcl-2表达量。检测miR-3942-3p通过BARD1对HEC-1A细胞放射敏感性的影响。结果和癌旁正常组织相比,子宫内膜癌组织中miR-3942-3p的表达量明显降低(P<0.05),BARD1表达量明显升高(P<0.05)。和HEEC细胞相比,HEC-1A细胞中miR-3942-3p的表达量明显降低(P<0.01),BARD1表达量明显升高(P<0.01)。miR-3942-3p表达量随着X射线放射剂量增加而上升,BARD1表达量随着X射线放射剂量增加而降低。HEC-1A细胞经6 Gy X射线照射后,下调miR-3942-3p降低了HEC-1A细胞的放射敏感性。miR-3942-3p靶向BARD1。下调BARD1后经6 Gy X射线照射显著提高HEC-1A细胞增殖能力,降低细胞凋亡率,上调miR-3942-3p通过BARD1增强了HEC-1A细胞的放射敏感性。结论上调miR-3942-3p负调控靶基因BARD1增强子宫内膜癌细胞的放射敏感性。 展开更多
关键词 miR-3942-3p BARD1 子宫内膜癌 放射敏感性
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拮抗miR-21对人工合成高效孕激素作用下子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 田春花 张娇 +4 位作者 杨梅芳 杨威龙 吴阳 金秋 马鸿云 《宁夏医学杂志》 CAS 2021年第10期865-868,共4页
目的探讨拮抗miR-21联合人工合成高效孕激素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡的影响。方法采用流式细胞法、细胞计数法(CCK-8)、Transwell实验及划痕实验检测各组Ishikawa细胞的凋亡、增殖、侵袭及迁移能力;实验分为两组。空白细胞组... 目的探讨拮抗miR-21联合人工合成高效孕激素对子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、凋亡的影响。方法采用流式细胞法、细胞计数法(CCK-8)、Transwell实验及划痕实验检测各组Ishikawa细胞的凋亡、增殖、侵袭及迁移能力;实验分为两组。空白细胞组:未经任何处理的子宫内膜Ishikawa细胞;高效孕激素组:经人工合成高效孕激素处理的子宫内膜Ishikawa细胞;高效孕激素+miR-21组:经人工合成高效孕激素和miR-21拮抗剂共同处理的子宫内膜Ishikawa细胞。结果干预前与干预24 h后高效孕激素组细胞增殖率、高效孕激素+miR-21组细胞增殖率比较差异有统计学意义(P<0.05);高效孕激素+miR-21组细胞增殖率与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预前与干预24 h后高效孕激素组细胞迁移率、高效孕激素+miR-21组细胞迁移率比较差异有统计学意义(P<0.05);高效孕激素+miR-21组细胞迁移率与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预前与干预24 h后高效孕激素组细胞侵袭力、高效孕激素+miR-21组细胞侵袭力比较差异有统计学意义(P<0.05);高效孕激素+miR-21组细胞侵袭力与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.05);干预前与干预24 h后高效孕激素组细胞凋亡率、高效孕激素+miR-21组细胞凋亡率比较差异有统计学意义(P<0.05);高效孕激素+miR-21组细胞凋亡率与其他2组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论拮抗miR-21可促进人工合成高效孕激素作用下Ishikawa细胞的凋亡及抑制其增殖。 展开更多
关键词 人工高效孕激素 miR-21拮抗剂 人子宫内膜癌细胞 细胞计数法
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miR-122通过AXLHIF-1α通路抑制子宫内膜癌细胞增殖和上皮间质转化 被引量:3
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作者 马香莲 冯海霞 吴德慧 《西部医学》 2020年第9期1318-1323,共6页
目的探讨miR-122对子宫内膜癌细胞(RL-952)增殖、上皮间质转化(EMT)及受体酪氨酸激酶(AXL)/缺氧诱导因-1α(HIF-1α)信号通路的影响。方法体外培养人子宫内膜癌细胞株RL-952,将细胞分为空白对照组(仅用培养基)、阴性对照组(转染miR-122 ... 目的探讨miR-122对子宫内膜癌细胞(RL-952)增殖、上皮间质转化(EMT)及受体酪氨酸激酶(AXL)/缺氧诱导因-1α(HIF-1α)信号通路的影响。方法体外培养人子宫内膜癌细胞株RL-952,将细胞分为空白对照组(仅用培养基)、阴性对照组(转染miR-122 NC)、miR-122 mimics组(转染miR-122 mimics),采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测各组细胞miR-122水平,利用人胆囊收缩素/缩胆囊素八肽(CCK-8)试剂盒检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,Transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,蛋白印迹(WB)法检测AXL、HIF-1α蛋白以及EMT相关蛋白E-cadherin、α-catenin、N-cadherin和Vimentin的表达变化。结果与空白对照组、阴性对照组相比,miR-122 mimics组RL-952细胞转染后48小时细胞增殖能力、细胞迁移数、细胞侵袭数、AXL、HIF-1α、N-cadherin和Vimentin蛋白表达均显著下降(P<0.05),E-cadherin、α-catenin蛋白表达、细胞凋亡率均明显升高(P<0.05),空白对照组与阴性对照组比较,细胞增殖能力、细胞迁移数、细胞侵袭数、细胞凋亡率、细胞AXL、HIF-1α、E-cadherin、α-catenin、N-cadherin和Vimentin蛋白表达差异均无统计学意义(P>0.05)。结论过表达miR-122可抑制子宫内膜癌细胞增殖、迁移、侵袭及上皮间质转化,促进细胞凋亡,可能是通过抑制AXL/HIF-1α通路而实现。 展开更多
关键词 MIR-122 子宫内膜癌细胞 受体酪氨酸激酶 缺氧诱导因-1α 增殖 上皮间质转化
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DNA甲基化转移酶抑制剂5-aza-dC通过上调WIF-1表达抑制子宫内膜癌细胞增殖并诱导凋亡的作用机制研究 被引量:1
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作者 张保华 周小莉 +6 位作者 季静 胡明珠 李岚 聂启勤 蓝波 杨慧宇 徐红 《医药论坛杂志》 2022年第20期6-11,16,共7页
目的 探讨5-aza-dC通过上调WIF-1基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响并阐明作用机制。方法 通过慢病毒途径在子宫内膜癌细胞JEC和KLE中靶向沉默WIF-1基因。使用梯度5-aza-dC处理WIF-1基因沉默及未沉默的子宫内膜癌细胞分别检测... 目的 探讨5-aza-dC通过上调WIF-1基因表达对子宫内膜癌细胞增殖和凋亡的影响并阐明作用机制。方法 通过慢病毒途径在子宫内膜癌细胞JEC和KLE中靶向沉默WIF-1基因。使用梯度5-aza-dC处理WIF-1基因沉默及未沉默的子宫内膜癌细胞分别检测细胞增殖活性及凋亡率,同时检测WIF-1及β-catenin蛋白表达或者磷酸化。结果 通过慢病毒途径,可以在JEC和KLE细胞中有效沉默WIF-1基因(P<0.01,vs细胞对照组)。1和5μM的5-aza-dC能够有效抑制JEC细胞对数期增殖活性(P<0.01,vs细胞对照组或者溶媒对照组72 h)。1和5μM的5-aza-dC能够有效诱导KLE细胞发生凋亡(P<0.01,vs细胞对照组或者溶媒对照组)。免疫印迹检测结果表明,5μM的5-aza-dC能够有效上调JEC和KLE细胞中WIF-1表达并下调β-catenin蛋白磷酸化。5-aza-dC的上述作用均呈现梯度依赖,且能够被WIF-1沉默所逆转(P<0.01,vs 5-aza-dC处理组)。结论 5-aza-dC能够通过抑制Wnt/β-catenin通路活化而抑制子宫内膜癌细胞的增殖并诱导凋亡,且作用依赖于其对WIF-1的表达上调。 展开更多
关键词 5-AZA-DC 子宫内膜癌 WIF-1 WNT/Β-CATENIN
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芦荟大黄素调控miR-30b促进子宫内膜癌细胞自噬的研究 被引量:2
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作者 薛飞 董传莹 +1 位作者 田莉 张春瑞 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2021年第10期61-67,共7页
目的探讨芦荟大黄素(AE)调控子宫内膜癌细胞HEC-1-B中miR-30b表达促进细胞自噬的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测miR-30b在正常子宫内膜细胞和不同子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、HEC-1-B、RL95-2中的表达水平。取mi... 目的探讨芦荟大黄素(AE)调控子宫内膜癌细胞HEC-1-B中miR-30b表达促进细胞自噬的作用机制。方法实时荧光定量聚合酶链式反应(q RT-PCR)检测miR-30b在正常子宫内膜细胞和不同子宫内膜癌细胞株HEC-1-A、HEC-1-B、RL95-2中的表达水平。取miR-30b表达水平最高的HEC-1-B癌细胞分为HEC-1-B癌细胞组、miR-30b inhibitor NC组(转染miR-30b inhibitor NC)、miR-30b inhibitor组(转染miR-30b inhibitor)以及AE组(30μmol/L AE,未转染)和AE+转染组:AE+miR-30b mimics NC组(30μmol/L AE,转染miR-30b mimics NC)、AE+miR-30b mimics组(30μmol/L AE,转染miR-30b mimics)。q RT-PCR法检测各组细胞miR-30b表达水平;CCK-8法检测各组细胞增殖活性;流式细胞术检测各组细胞凋亡率;单丹磺酰尸胺(MDC)荧光染色法检测各组细胞自噬率;蛋白免疫印迹法(Western blot)法检测各组细胞自噬相关蛋白Beclin1、LC3-I、LC3-II和p62表达水平。结果与人正常子宫内膜上皮细胞相比,HEC-1-A、HEC-1-B和RL95-2癌细胞中miR-30b表达水平显著升高(P<0.05)。其中HEC-1-B癌细胞中miR-30b表达水平最高,所以后续将选择HEC-1-B癌细胞进行转染实验。与HEC-1-B癌细胞组和miR-30b inhibitor NC组相比,miR-30b inhibitor组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著升高(P<0.05)。与HEC-1-B癌细胞组相比,AE组和AE+miR-30b mimics NC组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著降低(P<0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著升高(P<0.05)。与AE+miR-30b mimics NC组相比,AE+miR-30b mimics组癌细胞miR-30b表达水平、细胞增殖率以及p62蛋白表达水平显著升高(P<0.05),细胞凋亡率、自噬率以及Beclin1蛋白表达水平和LC3-II/I比值显著降低(P<0.05)。结论子宫内膜癌细胞中miR-30b表达较高,AE可能通过抑制miR-30b表达,促进� 展开更多
关键词 芦荟大黄素 miR-30b 子宫内膜癌细胞 自噬 增殖 凋亡
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下调YAP1蛋白对子宫内膜癌细胞增殖的影响及其机制 被引量:2
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作者 李翠芝 姚海英 《解剖学研究》 CAS 2019年第1期16-19,共4页
目的探讨下调YAP1蛋白对子宫内膜癌细胞增殖的影响和其相关的机制。方法运用慢病毒载体建立YAP1缺失的细胞株(HEC-1-B-shYAP)和阴性对照(HEC-1-B-NC),分别采用Real-time PCR及Western blot法检测细胞YAP1的表达。CKK-8方法检测细胞增殖... 目的探讨下调YAP1蛋白对子宫内膜癌细胞增殖的影响和其相关的机制。方法运用慢病毒载体建立YAP1缺失的细胞株(HEC-1-B-shYAP)和阴性对照(HEC-1-B-NC),分别采用Real-time PCR及Western blot法检测细胞YAP1的表达。CKK-8方法检测细胞增殖能力的改变,Western blot法检测Wnt信号通路相关蛋白β-catenin的表达。结果成功构建YAP1稳定缺失的卵巢癌细胞株(HEC-1-B-shYAP1),与阴性对照组和空白对照组细胞相比,HEC-1-B-shYAP组细胞增殖能力明显减弱(P<0.01),同时β-catenin的表达明显降低(P<0.01)。结论 YAP1可促进子宫内膜癌的增殖,其机制可能Wnt-β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 Yes相关蛋白1 子宫内膜癌细胞 细胞增殖
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MAPK信号通路调控子宫内膜癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响 被引量:2
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作者 翁亚菡 鲍伟杰 +1 位作者 梁瑞敏 常子涛 《临床与病理杂志》 2019年第3期470-478,共9页
目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1-B,采用MTT法检测增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell试... 目的:探讨丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)信号通路对人子宫内膜癌细胞HEC-1-B增殖、侵袭和迁移的影响。方法:体外培养人子宫内膜癌细胞HEC-1-B,采用MTT法检测增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期,Transwell试验检测细胞侵袭能力,划痕试验检测细胞迁移能力,Western印迹法检测细胞中磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38MAPK)、增殖细胞核抗原(PCNA)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)蛋白表达水平的影响。结果:p38MAPK信号通路抑制剂SB203580对子宫内膜癌细胞HEC-1-B的增殖具有抑制作用,且随着作用浓度的升高抑制作用增强(P<0.05)。与对照组比,施加抑制剂SB203580能够导致G0/G1期HEC-1-B细胞比例增多,S期和G2/M期细胞比例减少,细胞侵袭抑制率升高,细胞划痕愈合率降低,细胞中p-p38MAPK, PCNA,MMP-2蛋白表达下调,差异具有统计学意义(P<0.05)。且抑制剂SB203580组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:抑制MAPK信号通路能够抑制人子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖、侵袭和迁移,其作用机制可能与下调细胞中PCNA,MMP-2蛋白表达有关。 展开更多
关键词 MAPK信号通路 子宫内膜癌细胞 增殖 侵袭 迁移
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子宫内膜癌细胞外泌体长链非编码RNA-C00473对人脐静脉内皮细胞VEGF和VEGFR-2表达的影响
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作者 贺新 兰飞 +1 位作者 马媛 张义灵 《山西医科大学学报》 CAS 2022年第3期299-304,共6页
目的 分析子宫内膜癌患者血清外泌体(exosome, Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell, HUVECs)中血管内皮生长因子(vascular end... 目的 分析子宫内膜癌患者血清外泌体(exosome, Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(human umbilical vascular endothelial cell, HUVECs)中血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)和血管内皮细胞生长因子受体2(vascular endothelial growth factor receptor 2,VEGFR-2)表达的影响。方法 选取在空军军医大学唐都医院手术治疗的15例子宫内膜癌患者为研究对象,同时选取15例子宫内膜正常患者作为对照,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测两组血清外泌体中lncRNA-C00473表达情况。将Ishikawa细胞分为过表达组(转染pcDNA3.1-C00473)、抑制组(转染siRNA-C00473)和空白组,并提取各组外泌体。透射电镜、蛋白免疫印迹(Western blot)、纳米颗粒跟踪分析技术(nanosight tracking analysis, NTA)鉴定外泌体粒径及浓度。体外培养HUVEC细胞并添加提取的外泌体,分为过表达Exo组(添加C00473过表达组血清Exo)、抑制Exo组(添加C00473抑制组血清Exo)和对照组(添加未转染组血清Exo)。qRT-PCR、Western blot检测各组HUVEC中VEGF、VEGFR-2表达情况。结果 与子宫内膜正常患者相比,子宫内膜癌患者血清外泌体中lncRNA-C00473的表达增高(P<0.05)。从各组Ishikawa细胞中提取的外泌体均具有较好的粒径及浓度、形态,并表达特征性蛋白CD63、CD9。与抑制Exo组相比,过表达Exo组HUVEC细胞中VEGF、VEGFR-2在mRNA和蛋白水平均增高(均P<0.05)。结论 lncRNA-C00473在子宫内膜癌患者血清外泌体中高表达,且过表达lncRNA-C00473的Ishikawa细胞来源外泌体能够促进HUVEC细胞中VEGF、VEGFR-2表达增高。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 外泌体 子宫内膜癌细胞 人脐静脉内皮细胞 血管内皮生长因子
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子宫内膜癌细胞外泌体lnc-C00473影响人脐静脉内皮细胞成管能力
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作者 张义灵 兰飞 +1 位作者 马媛 贺新 《热带医学杂志》 CAS 2022年第10期1334-1339,1320,共7页
目的分析子宫内膜癌患者血清外泌体(Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成管能力的影响。方法采用qRT-PCR检测15例子宫内膜癌患者(研究组)与15例子宫内膜正常患者(... 目的分析子宫内膜癌患者血清外泌体(Exo)中长链非编码RNA(lncRNA)C00473表达情况,及子宫内膜癌细胞(Ishikawa)外泌体对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成管能力的影响。方法采用qRT-PCR检测15例子宫内膜癌患者(研究组)与15例子宫内膜正常患者(对照组)血清外泌体中lncRNA-C00473表达情况。将Ishikawa细胞分为过表达组(转染pcDNA3.1-C00473)、敲低组(转染siRNA-C00473)、空白对照组(未转染组),并提取各组外泌体。采用透射电镜、蛋白免疫印迹、纳米颗粒跟踪分析技术鉴定外泌体。HUVEC添加外泌体培养分为过表达Exo组(C00473过表达组外泌体)、抑制Exo组(C00473抑制组外泌体)、对照组(未转染组外泌体)。采用管样形成实验检测各组HUVEC细胞功能。结果与对照组比较,研究组血清外泌体中lncRNA-C00473的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。三组Ishikawa细胞外泌体具有较好的粒径及浓度、形态,并表达特征性蛋白CD63、CD9。与对照组比较,过表达Exo组HUVEC成管能力增强,抑制Exo组HUVEC成管能力降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论lncRNA-C00473在子宫内膜癌患者血清外泌体中高表达,且过表达lncRNA-C00473的子宫内膜癌Ishikawa细胞来源外泌体能够促进HUVEC成管能力。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 外泌体 子宫内膜癌细胞 人脐静脉内皮细胞
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壳聚糖对人子宫内膜癌细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:1
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作者 张晓梅 潘宇 +5 位作者 魏勉 顾方乐 吕芳 孙燕 董乃俊 王大新 《中国药业》 CAS 2013年第4期30-31,共2页
目的研究壳聚糖对人子宫内膜癌细胞Ishikawa的影响。方法用不同质量浓度的壳聚糖处理Ishikawa细胞48 h后,通过加入MTT和BrdU测定细胞的增殖和DNA合成情况,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果壳聚糖质量浓度在不大于10μg/mL时,对Ishi... 目的研究壳聚糖对人子宫内膜癌细胞Ishikawa的影响。方法用不同质量浓度的壳聚糖处理Ishikawa细胞48 h后,通过加入MTT和BrdU测定细胞的增殖和DNA合成情况,用流式细胞仪检测细胞周期的变化。结果壳聚糖质量浓度在不大于10μg/mL时,对Ishikawa细胞的增殖、DNA合成以及细胞周期没有明显影响。结论低质量浓度的壳聚糖(≤10μg/mL)对Ishikawa细胞的生长没有影响,可作为节育器的生物材料。 展开更多
关键词 壳聚糖 子宫内膜癌细胞 影响
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下调雌激素受体相关受体α对不同类型子宫内膜癌细胞增殖凋亡的影响 被引量:1
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作者 毛晓丹 孙蓬明 +3 位作者 林东红 阮冠宇 董滨华 林芬 《福建医药杂志》 CAS 2016年第3期9-12,共4页
目的探讨雌激素受体相关受体α(Estrogen receptor-related receptorα,ERRα)特异性拮抗剂XCT790作用于不同类型子宫内膜癌细胞时ERRα的表达改变及细胞增殖、凋亡情况。方法将XCT790药物作用组设为XCT组,未加药物处理组设为阴性对照组... 目的探讨雌激素受体相关受体α(Estrogen receptor-related receptorα,ERRα)特异性拮抗剂XCT790作用于不同类型子宫内膜癌细胞时ERRα的表达改变及细胞增殖、凋亡情况。方法将XCT790药物作用组设为XCT组,未加药物处理组设为阴性对照组(Negtive Control,NC),加入XCT790溶剂DMSO设为空白对照组(Control,CON),比较ERRαmRNA表达改变。采用定量PCR(Quantitative PCR,qPCR)和免疫印迹法(Western blot,WB)分别检测RL952、AN3-CA[(Estrogen receptorα+,ERα+),ERRα+]和HEC-1A、HEC-1B(ER-,ERRα+)细胞的ERRαmRNA和蛋白表达水平;采用XCT790处理4株子宫内膜癌细胞,qPCR检测ERRαmRNA的表达情况,WB检测ERRα蛋白的表达情况。应用噻唑蓝比色法(MTT)及流式细胞术分别检测4株子宫内膜癌细胞生长和凋亡情况。结果RL952、AN3-CA细胞ERRαmRNA表达量高于HEC-1A、HEC-1B细胞,差异有统计学意义(P<0.05)。WB显示,ERRα蛋白在RL952、AN3-CA中均呈较高表达,而HEC-1A、HEC-1B中均呈较低表达,与mRNA水平相吻合。XCT790处理后,XCT组与CON组相比ERRαmRNA和蛋白表达水平均显著下降,差异有统计学意义(P<0.05)。NC组与CON组ERRαmRNA和蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。MTT法显示,肿瘤细胞数量在XCT790作用下显著减少,差异有统计学意义(P<0.05);流式细胞术显示各株细胞的XCT790组凋亡率较各自CON组显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 XCT790能有效抑制子宫内膜癌中ERRα的表达水平,ERRα表达下调与子宫内膜癌细胞增殖、凋亡密切相关。 展开更多
关键词 ERRα XCT790 增殖 凋亡 子宫内膜癌细胞
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