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番茄红素ε-环化酶果实特异性RNAi载体的构建及对番茄的遗传转化
被引量：
1
1
作者
任秀娟
崔百明
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期2371-2376,共6页
为了研究番茄LCYE基因对其果实中番茄红素含量的影响机制,培育高品质番茄品种,在Gen Bank中根据已知的LCYE(ID:544 129)扩增出337 bp的保守序列;根据KJ 561 284.1扩增出2 203 bp的果实特异性启动子E8;查找番茄LCYE的内含子,选择第三个长...
为了研究番茄LCYE基因对其果实中番茄红素含量的影响机制,培育高品质番茄品种,在Gen Bank中根据已知的LCYE(ID:544 129)扩增出337 bp的保守序列;根据KJ 561 284.1扩增出2 203 bp的果实特异性启动子E8;查找番茄LCYE的内含子,选择第三个长112 bp的Intron片段;利用同尾酶构建出载体p Ri E8-LCYE,与p CAMBIA1301连接构建出果实特异性RNAi表达载体p CRi E8-LCYE,测序表明载体构建正确。农杆菌介导,叶盘法转化番茄,PCR检测表明得到了转基因番茄植株。与同样条件下番茄LCYB基因干扰载体的遗传转化过程相比,表明:对LCYE基因的干扰使番茄子叶开始褐化时间提前,且褐化率更高,说明筛选培养时子叶的褐化与所干扰的基因也有关系。
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关键词
LCY
e
基因
e
8
果实特异性启动子
RNAI
遗传转化
原文传递
灵芝-8基因的番茄果实特异性启动子植物表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
胡正萍
杨家森
+2 位作者
叶亮
刑莹莹
奚涛
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2009年第1期23-26,共4页
构建含有灵芝-8(LZ-8)基因和番茄果实特异性E8启动子的重组载体,并将其转化到根瘤农杆菌中。通过PCR法获取LZ-8基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pB I121中,获得果实特异性表达LZ-8蛋白的重组质粒。并采用...
构建含有灵芝-8(LZ-8)基因和番茄果实特异性E8启动子的重组载体,并将其转化到根瘤农杆菌中。通过PCR法获取LZ-8基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pB I121中,获得果实特异性表达LZ-8蛋白的重组质粒。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定,将其转入根瘤农杆菌GV3101中。PCR法、限制性内切酶酶切图谱和序列测定分析均表明番茄果实特异性表达LZ-8蛋白的重组质粒构建成功。获得了含有LZ-8基因和E8启动子的重组质粒,并成功转化根瘤农杆菌,为下一步LZ-8蛋白在番茄果实中特异表达奠定基础。
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关键词
灵芝-
8
蛋白
果实特异性启动子
载体构建
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职称材料
题名
番茄红素ε-环化酶果实特异性RNAi载体的构建及对番茄的遗传转化
被引量：
1
1
作者
任秀娟
崔百明
机构
石河子大学生命科学学院农业生物技术重点实验室
出处
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2016年第9期2371-2376,共6页
基金
农业部转基因生物新品种培育科技重大专项(2011ZX08005-002)资助
文摘
为了研究番茄LCYE基因对其果实中番茄红素含量的影响机制,培育高品质番茄品种,在Gen Bank中根据已知的LCYE(ID:544 129)扩增出337 bp的保守序列;根据KJ 561 284.1扩增出2 203 bp的果实特异性启动子E8;查找番茄LCYE的内含子,选择第三个长112 bp的Intron片段;利用同尾酶构建出载体p Ri E8-LCYE,与p CAMBIA1301连接构建出果实特异性RNAi表达载体p CRi E8-LCYE,测序表明载体构建正确。农杆菌介导,叶盘法转化番茄,PCR检测表明得到了转基因番茄植株。与同样条件下番茄LCYB基因干扰载体的遗传转化过程相比,表明:对LCYE基因的干扰使番茄子叶开始褐化时间提前,且褐化率更高,说明筛选培养时子叶的褐化与所干扰的基因也有关系。
关键词
LCY
e
基因
e
8
果实特异性启动子
RNAI
遗传转化
Keywords
LCY
e
g
e
n
e
e
8
fruit
-
specific
promoter
RNAi
G
e
n
e
tic
transformation
分类号
S641.2 [农业科学—蔬菜学]
Q943.2 [农业科学—园艺学]
原文传递
题名
灵芝-8基因的番茄果实特异性启动子植物表达载体的构建
被引量：
1
2
作者
胡正萍
杨家森
叶亮
刑莹莹
奚涛
机构
中国药科大学生命科学与技术学院
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2009年第1期23-26,共4页
文摘
构建含有灵芝-8(LZ-8)基因和番茄果实特异性E8启动子的重组载体,并将其转化到根瘤农杆菌中。通过PCR法获取LZ-8基因和E8启动子序列,将目的基因和E8启动子序列构建到植物表达载体pB I121中,获得果实特异性表达LZ-8蛋白的重组质粒。并采用PCR、限制性内切酶酶切和序列测定分析法,对重组质粒进行鉴定,将其转入根瘤农杆菌GV3101中。PCR法、限制性内切酶酶切图谱和序列测定分析均表明番茄果实特异性表达LZ-8蛋白的重组质粒构建成功。获得了含有LZ-8基因和E8启动子的重组质粒,并成功转化根瘤农杆菌,为下一步LZ-8蛋白在番茄果实中特异表达奠定基础。
关键词
灵芝-
8
蛋白
果实特异性启动子
载体构建
Keywords
LZ-
8
prot
e
in
e
8
fruit
-
specific
promoter
construction
of
e
xpr
e
ss
v
e
ctor
分类号
Q943.2 [生物学—植物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
番茄红素ε-环化酶果实特异性RNAi载体的构建及对番茄的遗传转化
任秀娟
崔百明
《分子植物育种》
CAS
CSCD
北大核心
2016
1
原文传递
2
灵芝-8基因的番茄果实特异性启动子植物表达载体的构建
胡正萍
杨家森
叶亮
刑莹莹
奚涛
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2009
1
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职称材料
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参考文献
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