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红景天苷通过miRNA-210-3p/E2F3抑制非小细胞肺癌细胞的增殖和迁移 被引量:4
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作者 杨琪 明昱均 +2 位作者 王秀娟 蒋莉 陈绍平 《现代肿瘤医学》 CAS 北大核心 2023年第4期625-631,共7页
目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)通过miRNA-210-3p/E2F3对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法:通过生物信息网站分析miR-210-3p及其靶基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达及生存... 目的:探讨红景天苷(salidroside,Sal)通过miRNA-210-3p/E2F3对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)细胞增殖和迁移的影响及作用机制。方法:通过生物信息网站分析miR-210-3p及其靶基因在肺腺癌组织和正常组织中的表达及生存影响。采用免疫组化法检测肺腺癌组织和正常组织中E2F3蛋白的表达;qRT-PCR检测NSCLC细胞中miR-210-3p和E2F3基因表达;Western blot检测NSCLC细胞中E2F3蛋白表达;CCK-8、细胞划痕及克隆形成实验分别检测红景天苷和miR-210-3p对NSCLC细胞增殖、迁移及克隆形成的影响。结果:生物信息网站显示miR-210-3p和E2F3在肺腺癌组织中高表达,且与不良预后相关。Sal以时间-浓度依赖抑制NSCLC细胞的增殖活性(P<0.05),并显著降低NSCLC细胞的迁移及克隆形成能力(P<0.05),而低浓度Sal对正常肺上皮细胞的增殖无明显抑制效果。miRNA-210-3p和E2F3表达在NSCLC细胞中上调(P<0.05),Sal可抑制二者表达(P<0.05)。与对照组比较,miR-210-3p inhibitor组E2F3表达上调(P<0.05),miR-210-3p mimics组E2F3表达被抑制(P<0.05),Sal与miR-210-3p mimics联用进一步抑制了miR-210-3p mimics所致的E2F3表达下调和细胞增殖和迁移的增强作用(P<0.05)。结论:miR-210-3p和E2F3在肺腺癌中高表达,Sal可通过时间-浓度依赖负调控miRNA-210-3p/E2F3影响NSCLC细胞的生物学行为,发挥抗癌作用。 展开更多
关键词 红景天苷 肺癌 miRNA-210-3p e2f3 增殖 迁移
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Linc01419调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖与侵袭
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作者 向威 吕磊 +2 位作者 郑福鑫 袁敬东 吴维 《现代肿瘤医学》 CAS 2024年第16期2921-2929,共9页
目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(rea... 目的:探讨长链非编码RNA Linc01419对膀胱癌细胞增殖和侵袭的影响及作用机制。方法:通过UALCAN软件(https://ualcan.path.uab.edu/)分析TCGA数据库中Linc01419在膀胱癌组织与正常膀胱组织中的表达差异;采用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测Linc01419在不同膀胱癌细胞系、22例经病理证实为膀胱癌的手术患者的肿瘤组织及癌旁正常膀胱组织中的表达水平;应用细胞增殖/毒性检测(cell counting kit-8,CCK-8)实验和Transwell小室侵袭实验检测敲低Linc01419表达对膀胱癌细胞增殖与侵袭的影响;采用双荧光素酶报告基因检测法分析Linc01419与miR-34a-5p及miR-34a-5p与E2F3之间的靶向调控关系。结果:UALCAN数据库分析显示相较正常膀胱组织,Linc01419在膀胱癌组织中显著高表达(P<0.001);RT-qPCR分析结果显示相较癌旁正常膀胱组织,Linc01419在22例膀胱癌组织中表达明显上调(P<0.001),与UALCAN数据库分析结果一致;Linc01419在4株膀胱癌细胞中的表达明显高于正常膀胱上皮细胞(P<0.01);敲低Linc01419表达,可显著抑制膀胱癌细胞的增殖、侵袭及N-cadherin、PCNA蛋白的表达,而显著促进E-cadherin的蛋白表达(P<0.05);miR-34a-5p过表达对膀胱癌细胞具有类似的抑制作用;双荧光素酶报告基因实验、RIP及Pull-down实验证实Linc01419可靶向结合miR-34a-5p,而后者进一步介导了对E2F3的靶向调控;抑制miR-34a-5p表达,可显著削弱Linc01419沉默对膀胱癌细胞生物学行为及E-cadherin、N-cadherin、PCNA、E2F3表达的影响。结论:Linc01419在膀胱癌中异常高表达,其通过调控miR-34a-5p/E2F3轴促进膀胱癌细胞增殖和侵袭,很可能是膀胱癌发生、发展过程中的一个重要环节。 展开更多
关键词 膀胱癌 Linc01419 miR-34a-5p e2f3
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miR-3691-3p靶向调控E2F3/PRDM1对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量:4
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作者 孙莉 牛涵波 +1 位作者 徐义英 孙茂民 《江苏大学学报(医学版)》 CAS 2018年第1期22-27,共6页
目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-36... 目的:探讨微小RNA-3691-3p(miR-3691-3p)调控的靶基因E2F3(E2F transcription factor 3)和PR结构域蛋白1(PR domain containing 1,PRDM1)对前列腺癌细胞增殖、迁移与侵袭的影响。方法:在前列腺癌DU145细胞株中,转染不同浓度梯度的miR-3691-3p mimic后,采用实时荧光定量PCR和蛋白质印迹法检测候选靶基因E2F3和PRDM1 mRNA和蛋白表达的变化;人工合成候选靶基因的小干扰RNA(E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA)转染入DU145细胞中,采用实时荧光定量PCR检测siRNA在细胞中的转染率;DU145细胞株分别转染阴性对照siRNA、E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA后,采用MTT、Transwell、划痕实验检测DU145细胞株增殖、迁移、侵袭能力的变化。结果:随着miR-3691-3p mimic转染浓度增高,在DU145细胞株中E2F3和PRDM1 mRNA的表达量逐渐下降(P<0.01或P<0.05),两个蛋白的表达水平均明显降低(P<0.01)。与阴性对照组相比,转染E2F3 siRNA和PRDM1 siRNA的DU145细胞株中,E2F3和PRDM1在mRNA水平上表达量显著减少(E2F3:t=31,P<0.01;PRDM1:t=10.44,P<0.01)。且转染E2F3 siRNA的DU145细胞增殖、迁移和侵袭能力显著下降(均P<0.01);而转染PRDM1 siRNA的DU145细胞增殖和侵袭能力显著下降(均P<0.01),迁移能力没有明显变化(P>0.05)。结论:在DU145细胞中,低水平的miR-3691-3p通过靶向调控E2F3和PRDM1的增高来增强细胞的生物学特性。 展开更多
关键词 前列腺癌 DU145细胞株 miR-3691-3p e2f3 PRDM1 生物学特性
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联合检测E2F3a和CASP8AP2表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病预后中的意义 被引量:4
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作者 金芬芬 梅妍妍 +4 位作者 王凯玲 王婵娟 吴敏媛 崔蕾 李志刚 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2018年第9期697-701,共5页
目的探讨联合检测E2F3a和CASP8AP2的表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)预后判断中的意义。方法选取2008年3月至2010年7月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的初诊ALL患儿141例,其中男97例,女44例;确诊时年龄1.2~... 目的探讨联合检测E2F3a和CASP8AP2的表达水平在儿童急性淋巴细胞白血病(ALL)预后判断中的意义。方法选取2008年3月至2010年7月首都医科大学附属北京儿童医院血液肿瘤中心收治的初诊ALL患儿141例,其中男97例,女44例;确诊时年龄1.2~15.5岁,中位数5.2岁。采用实时荧光定量PCR(qPCR)方法检测141例ALL患儿的E2F3a和CASP8AP2的基因表达水平。利用受试者工作特征(ROC)曲线确定E2F3a和CASP8AP2表达水平的最佳分界点,将患儿分为高表达组和低表达组,比较其预后差异。Cox回归方法分析E2F3a和CASP8AP2的联合表达水平的预后意义。结果E2F3a和CASP8AP2双低表达组儿童ALL的5年无复发生存(RFS)率、无病生存(EFS)率和总生存(OS)率分别为(58.9±10.0)%、(56.0±9.9)%和(72.0±9.0)%,均明显低于双高表达组[(94.9±2.5)%、(93.7±2.7)%和(96.2±2.2)%],差异均有统计学意义(均P〈0.05)。E2F3a和CASP8AP2 2个基因均低表达的患儿与其他患儿相比,其预后很差;2个基因均低表达与MLL重排、诱导治疗结束时微小残留病水平是儿童ALL的独立预后因素。结论初诊E2F3a和CASP8AP2低表达的ALL患儿预后差,联合分析E2F3a与CASP8AP2 2个基因的表达水平能更准确地判断预后、预测复发。 展开更多
关键词 e2f3a CASP8AP2 急性淋巴细胞白血病 预后 儿童
原文传递
E2F3基因腺相关病毒干扰载体的构建 被引量:4
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作者 胡海龙 韩瑞发 +5 位作者 孙岩 刘利维 任海林 梁恩利 王春阳 吴长利 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第19期1117-1119,共3页
目的:构建针对E2F3基因的腺相关病毒干扰穿梭质粒载体,为进一步包装能够表达干扰序列的病毒奠定基础。方法:通过已经合成的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo干扰质粒载体,进行限制性内切酶Mlu酶切,将干扰片段克隆入线性质粒pAAV-MCS中,构建具有表... 目的:构建针对E2F3基因的腺相关病毒干扰穿梭质粒载体,为进一步包装能够表达干扰序列的病毒奠定基础。方法:通过已经合成的pRNAT-U6.1-siE2F3/Neo干扰质粒载体,进行限制性内切酶Mlu酶切,将干扰片段克隆入线性质粒pAAV-MCS中,构建具有表达沉默E2F3基因的RNA干扰穿梭质粒。通过Bgl Ⅱ及Mlu单酶切,BamH1和HandⅢ双酶切、PCR鉴定及基因片段序列分析验证构建是否成功。结果:pAAV-siE2F3线性化后,片段大小约6 300bp;以Mlu为两边酶切位点设计的引物对重组质粒进行PCR,可获得的产物大小1 700bp;应用ITR专用引物进行重组质粒的PCR后证实本研究所构建的重组质粒ITR片段存在,大小约3 500bp,上述指标均与预期设计结果相符。基因测序结果表明插入序列无基因突变,序列完整。结论:穿梭质粒载体的成功构建,为进一步包装能够表达针对E2F3基因干扰序列的腺相关病毒,进一步研究E2F3基因在肿瘤中的功能奠定基础。 展开更多
关键词 AAV系统 RNAI e2f3
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胸苷酸合成酶在上皮性卵巢癌中表达的相关生物信息学分析
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作者 苏欣欣 李晓阳 +1 位作者 邹丹 杨丽华 《中国生育健康杂志》 2023年第4期313-318,共6页
目的通过生物信息学方法分析探讨胸苷酸合成酶(TYMS)基因在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达、生物学功能和通路。方法使用Oncomine数据库分析TYMS在EOC和正常卵巢样本中的表达,cBioPortal数据库用于挖掘TYMS在EOC中的相关基因,并通过STRING... 目的通过生物信息学方法分析探讨胸苷酸合成酶(TYMS)基因在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达、生物学功能和通路。方法使用Oncomine数据库分析TYMS在EOC和正常卵巢样本中的表达,cBioPortal数据库用于挖掘TYMS在EOC中的相关基因,并通过STRING数据库构建PPI网络,DAVID用于进行GO功能注释和KEGG通路富集分析。结果与正常卵巢组织相比,TYMS在EOC中呈现高表达(P<0.05)。DAVID富集分析表明,TYMS高表达与调节有丝分裂细胞G1/S期转化,细胞周期、嘧啶代谢、DNA复制和碱基切除修复通路有关。其次,TYMS上游调控基因E2F3是G1/S期增殖调控的关键因子。结论TYMS在EOC中表达显著增高,其生物学功能和通路主要与细胞周期、DNA合成和修复有关。E2F3可能通过与TYMS结合调控其表达,调节细胞周期进展。 展开更多
关键词 卵巢癌 生物信息学 TYMS e2f3
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基于多种数据库分析E2F3基因在黑色素瘤中的变异、表达及临床意义
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作者 韩利民 叶钢 +2 位作者 邓川 代姣 赵海龙 《海南医学院学报》 2023年第20期1563-1573,共11页
目的:探究E2F3基因在黑色素瘤中的变异、表达及临床意义。方法:首先,采用cBioportal数据库、Oncomine数据库、GEO数据库分析E2F3基因在黑色素瘤中的变异情况和表达水平,OSskcm数据库和TISIDB数据库分析E2F3与黑色素瘤的预后和肿瘤免疫... 目的:探究E2F3基因在黑色素瘤中的变异、表达及临床意义。方法:首先,采用cBioportal数据库、Oncomine数据库、GEO数据库分析E2F3基因在黑色素瘤中的变异情况和表达水平,OSskcm数据库和TISIDB数据库分析E2F3与黑色素瘤的预后和肿瘤免疫浸润细胞的关系。接着,采用LinkedOmics数据库鉴定黑色素瘤中与E2F3表达相关的差异基因并进行生物学功能分析,利用Cytoscpae筛选Hub基因。最后,通过CMap数据库筛选治疗黑色素瘤的小分子化合物。结果:E2F3基因在黑色素瘤中的变异率为约4%,突变位点有21个。与正常皮肤组织相比,E2F3基因在黑色素瘤中的表达明显升高(P<0.01)。E2F3基因的变异和表达水平升高与黑色素瘤患者的总生存期(OS)缩短有关(P<0.05)。E2F3的CNA水平与pDC、Neutrophil、Act DC、Th17等淋巴细胞的表达水平呈负相关,与CXCL5、CCL13、CCR1等趋化因子的表达水平呈负相关。E2F3的甲基化水平与Th1、Neutrophil、Act DC等淋巴细胞的表达水平呈正相关,与CXCL16、CXCL12、CCR1等趋化因子的表达水平呈正相关。E2F3的表达水平与Th17、Tcm CD4、Th1等淋巴细胞的表达水平呈负相关,与CXCL 16、CCL 22、CCL 2等趋化因子的表达水平呈负相关。黑色素瘤中UHRF1BP1等96个基因的表达与E2F3的表达呈显著相关(|cor|≥0.5,P<0.05),以上基因主要与RNA转运、真核生物的核糖体生物生成、细胞周期等通路有关;其中,WDR12、WDR43、RBM28、UTP18、DKC1、PAK1IP1、DDX31、TEX10、TRUB1、TRMT61B是前10位hub基因。YC-1、辛伐他汀、细胞松弛素-d、Deforolimus和细胞松弛素-b可能是治疗黑色素瘤的5种潜在小分子化合物。结论:E2F3基因突变和表达水平升高与黑色素瘤的不良预后有关,可通过影响不同肿瘤免疫浸润细胞亚型的表达参与黑色素瘤的发生和发展,其可能是黑色素瘤的潜在诊断标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 黑色素瘤 e2f3 数据库 突变 免疫浸润 预后
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基于生信数据库探究E2F3在上皮性卵巢癌中的表达及临床意义
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作者 张晶 孔丽丽 《中国实验诊断学》 2023年第7期861-866,共6页
目的探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点... 目的探讨转录因子E2F3在上皮性卵巢癌(EOC)中的表达及临床意义。方法在癌症基因组图谱(TCGA)数据库及基因表达数据库(GEO)中分析E2F家族成员在EOC组织与正常组织中的表达差异及临床意义,同时借助生物信息数据库预测E2F3的转录调控靶点。应用RT-qPCR和Western blot检测EOC及对照组中转录因子E2F3及其靶基因的mRNA及蛋白表达水平。结果TCGA数据信息结合GEO测序结果提示,与对照组相比在EOC中E2F1、E2F3呈现显著高表达(P<0.05),且均具有良好的诊断价值(AUC=0.964、AUC=0.967),E2F3高表达组中患者预后较差。联合JASPAR及Cistrome DB数据库预测E2F3转录调控靶基因ERCC1,且二者呈负相关(R=-0.243、P<0.001)。与对照组相比,EOC中E2F3与ERCC1的mRNA及蛋白表达水平均显著增高(P<0.05)。结论转录因子E2F3可靶向调控ERCC1,在EOC中呈现高表达,且与预后不良相关,可作为EOC早期诊断和治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 转录因子 上皮性卵巢癌 TCGA GeO e2f3 eRCC1
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Analysis of E2F3 gene variants,expression and clinical significance in melanoma based on multiple databases
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作者 HAN Li-min YE Gang +2 位作者 DENG Chuan DAI Jiao ZHAO Hai-long 《Journal of Hainan Medical University》 CAS 2023年第20期41-50,共10页
Objective:To investigate the variation,expression and clinical significance of E2F3 gene in melanoma.Methods:Firstly,cBioportal database,Oncomine database and GEO database were used to analyze the variation and expres... Objective:To investigate the variation,expression and clinical significance of E2F3 gene in melanoma.Methods:Firstly,cBioportal database,Oncomine database and GEO database were used to analyze the variation and expression level of E2F3 gene in melanoma.OSskcm database and TISIDB database were used to analyze the relationship between E2F3 and melanoma prognosis and tumor immune infiltrating cells.Then,the LinkedOmics database was used to identify the differential genes related to E2F3 expression in melanoma and analyze their biological functions.Finally,small molecule compounds for the treatment of melanoma were screened through the CMap database.Results:The mutation rate of E2F3 gene in melanoma is about 4%,and there are 21 mutation sites.Compared with normal skin tissues,the expression of E2F3 gene in melanoma was significantly increased(P<0.01).The mutation and increased expression of E2F3 gene were associated with the shortened overall survival(OS)of melanoma patients(P<0.05).The CNA level of E2F3 was negatively correlated with the expression levels of lymphocytes such as pDC,Neutrophil,Act DC and Th17,and negatively correlated with the expression levels of chemokines such as CXCL5,CCL13 and CCR1.The methylation level of E2F3 was positively correlated with the expression levels of Th1,Neutrophil,Act DC and other lymphocytes,and positively correlated with the expression levels of CXCL16,CXCL12,CCR1 and other chemokines.The expression level of E2F3 was negatively correlated with the expression levels of lymphocytes such as Th17,Tcm CD4 and Th1,and negatively correlated with the expression levels of chemokines such as CXCL 16,CCL 22 and CCL 2.The expression of 96 genes such as UHRF1BP1 in melanoma was significantly correlated with the expression of E2F3(|cor|0.5,P<0.05).The above genes were mainly related to RNA transport,eukaryotic ribosome biogenesis,cell cycle and other pathways.Among them,WDR12,WDR43,RBM28,UTP18,DKC1,PAK1IP1,DDX31,TEX10,TRUB1 and TRMT61B were the top 10 hub genes.YC-1,simvastatin,cytochalasin 展开更多
关键词 MeLANOMA e2f3 Database MUTATION Immune infiltration Prognosis
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转录因子E2F3对浸润性膀胱癌细胞因子的调控反应 被引量:3
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作者 李瑞晓 李雪莲 +6 位作者 李智 焦勇 赵致广 王禾 张波 贾洪涛 Kamal Pohar 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 北大核心 2016年第12期768-774,793,共8页
目的 E2F3在浸润性膀胱癌的发生、发展中起着重要作用,但是其具体调控分子机制尚不明确,本研究旨在探讨E2F3对浸润性膀胱癌细胞调控的分子机制。方法采用RNAi技术使E2F3在浸润性膀胱癌细胞系中低表达,通过蛋白质印迹法、PCR进行检测及... 目的 E2F3在浸润性膀胱癌的发生、发展中起着重要作用,但是其具体调控分子机制尚不明确,本研究旨在探讨E2F3对浸润性膀胱癌细胞调控的分子机制。方法采用RNAi技术使E2F3在浸润性膀胱癌细胞系中低表达,通过蛋白质印迹法、PCR进行检测及后续实验,通过CHIP实验等观察E2F3在HT1376和TCCSUP细胞系中与信号转导及转录激活因子3(STAT3)和Ets1之间及其相关侵袭细胞因子的调节关系。结果 E2F3、STAT3和Ets1基因在高表达E2F3细胞系(HT1376和TCCSUP)中成功被沉默,CHIP测序显示,E2F3与Ets1和STAT3基因启动子结合增多只出现在过表达膀胱癌细胞系中;免疫组化和蛋白质印迹法检测结果显示,E2F3过表达细胞癌中,Ets1和STAT3基因过表达,二者呈正相关,r=0.421,P=0.023;E2F3高表达同时相关细胞因子也增加(IL-1、IL-8、TNF-α和VEGFA等),Ets1和STAT3被沉默后,上述细胞因子也相对降低,CHIP实验显示,与低表达E2F3膀胱癌相比,在高表达E2F3膀胱癌中,Ets1和STAT3启动子活性增强。结论 E2F3过表达在人膀胱癌细胞系中通过Ets1和STAT3调节免疫相关基因的表达,E2F3的过表达促进Ets1和STAT3的表达。 展开更多
关键词 膀胱癌 e2f3 转录激活因子3 RNAI 免疫组织化学
原文传递
E2F⁃3、E2F⁃4蛋白在透明细胞性肾细胞癌中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 孟贵卿 李芳 殷凤朝 《诊断病理学杂志》 2022年第1期31-36,共6页
目的通过检测E2F3、E2F4蛋白在透明细胞性肾细胞癌(ccRCC)及相应癌旁组织中的表达情况,探讨E2F3、E2F4蛋白与ccRCC发生发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测147例ccRCC及相应癌旁组织中E2F3、E2F4蛋白的表达情况,进一步分析与ccRC... 目的通过检测E2F3、E2F4蛋白在透明细胞性肾细胞癌(ccRCC)及相应癌旁组织中的表达情况,探讨E2F3、E2F4蛋白与ccRCC发生发展的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测147例ccRCC及相应癌旁组织中E2F3、E2F4蛋白的表达情况,进一步分析与ccRCC患者临床病理特征的关系。结果E2F3蛋白在ccRCC组织中的阳性率(76.19%)明显高于癌旁组织(18.37%),差异具有显著统计学意义(P<0.001)。E2F4在ccRCC组织中的阳性率(68.71%)明显高于相应的癌旁组织阳性率(28.57%),差异具有显著统计学意义(P<0.001)。E2F3的表达强度与WHO/ISUP分级、临床分期、肿瘤大小、肿瘤性坏死、肾静脉内癌栓相关(P<0.05);而与年龄、性别、有无淋巴结转移、有无远处转移无关(P>0.05)。E2F4的表达强度与WHO/ISUP分级、肿瘤大小、肾静脉内癌栓相关(P<0.05);而与年龄、性别、临床分期、有无淋巴结转移、远处转移、肿瘤性坏死无关(P>0.05)。E2F3、E2F4蛋白表达的相关性检验显示,二者表达无明显相关性(rs=0.105,P=0.206)。结论E2F3、E2F4可能参与了ccRCC的发生及进展,二者表达无明显协同作用。 展开更多
关键词 e2f3 e2f4 透明细胞性肾细胞癌 免疫组织化学 临床病理特征
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miR-214通过靶向调控E2F3抑制肝癌细胞的增殖 被引量:3
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作者 杜朝阳 杨如玉 +1 位作者 李超 段丽娟 《中国比较医学杂志》 北大核心 2017年第6期27-32,共6页
目的探讨miR-214通过靶向调控E2F转录因子3(E2F3)抑制肝癌细胞的增殖。方法 RT-PCR法检测细胞株SMMC-7721、Hep G2、SK-Hep-1和Huh 7中miR-214的表达量,并利用脂质体转染miR-214 NC及miR-214 mimics。采用MTT法检测miR-214对肝癌细胞活... 目的探讨miR-214通过靶向调控E2F转录因子3(E2F3)抑制肝癌细胞的增殖。方法 RT-PCR法检测细胞株SMMC-7721、Hep G2、SK-Hep-1和Huh 7中miR-214的表达量,并利用脂质体转染miR-214 NC及miR-214 mimics。采用MTT法检测miR-214对肝癌细胞活力的影响;Hoechst染色试剂盒检测miR-214对细胞凋亡的影响,流式细胞术检测miR-214对细胞周期的影响;Western blot及RT-PCR法检测miR-214对肝癌细胞中E2F3蛋白及mRNA表达量的影响,并通过荧光素酶报告基因进行验证。结果 SMMC-7721、SK-Hep-1、Huh 7及Hep G2中miR-214的表达量分别为(0.83±0.08)、(0.32±0.03)、(0.33±0.03)、(0.08±0.01),其中Hep G2中miR-214表达量最低,因此选用Hep G2作为后续实验细胞株。Hep G2细胞转染miR-214 NC及miR-214 mimics、miR-214mimics组中miR-214表达量(0.65±0.06)明显高于miR-214 NC组(0.14±0.01),miR-214 mimics组细胞活力(0.35±0.03)明显低于miR-214 NC组(0.69±0.06),miR-214 mimics组细胞凋亡率(36.37±3.43)%明显高于miR-214 NC组(3.74±0.34)%,miR-214 mimics组G1期明(57.79±5.78)显长于miR-214 NC组(45.319±4.53),miR-214 mimics组中E2F3蛋白[(0.23±0.02)、(0.24±0.02)]及mRNA表达量明显低于miR-214 NC组[(0.98±0.09)、(0.99±0.10)],差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论 miR-214过表达能通过下调E2F3表达抑制肝癌细胞的增殖。 展开更多
关键词 miR-214 肝癌细胞 e2f3 增殖
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miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响 被引量:3
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作者 冉伟 曾玉华 +2 位作者 马晓洁 廖萍 刘兴兰 《四川大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第2期178-184,共7页
目的探讨miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响。方法将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic-NC组、miR-503-5p mimic组、E2F3组、mimic+E2F3组,并通过Lipofectamine2000将质粒分别或者联合转染... 目的探讨miR-503-5p通过靶向调控E2F3对宫颈癌Hela细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化的影响。方法将宫颈癌HeLa细胞分为对照组、mimic-NC组、miR-503-5p mimic组、E2F3组、mimic+E2F3组,并通过Lipofectamine2000将质粒分别或者联合转染进入各组HeLa细胞,运用基因预测软件预测靶基因,荧光素实验验证靶向关系,RT-PCR检测miR-503-5p和E2F3的表达,MTT法检测细胞增殖,Western blot检测Ki67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)、E-cadherin和N-cadherin的表达,Transwell检测细胞侵袭,划痕实验检测细胞迁移。将裸鼠分为对照组和miR-503-5p mimic组,在裸鼠右后肢腹侧皮下分别注射0.2 mL转染mimic-NC或miR-503-5p mimic的宫颈癌HeLa细胞悬液,第30天颈椎脱位法处死裸鼠,测量肿瘤质量,并用免疫组化方法检测肿瘤组织中Ki67和Vimentin表达情况。结果宫颈癌HeLa细胞中miR-503-5p的表达量明显下调,miR-503-5p与E2F3在3′UTR区存在结合位点,miR-503-5p直接靶向作用于E2F3,过表达miR-503-5p抑制E2F3表达;miR-503-5p过表达降低细胞生长速度、Ki67和PCNA表达量,减少侵袭细胞数目,增宽划痕、降低愈合率,上调E-cadherin表达、下调N-cadherin表达(P<0.01);miR-503-5p过表达减小移植瘤体积、减轻移植瘤重量,减少Ki67和Vimentin的阳性所占比率(P<0.01)。结论 miR-503-5p通过靶向调控E2F3抑制宫颈癌HeLa细胞增殖、侵袭、迁移和上皮间质化。 展开更多
关键词 miR-503-5p e2f3 宫颈癌HeLA细胞
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MicroRNA-152在胃癌细胞中表达及对细胞增殖的影响 被引量:3
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作者 王春明 左君波 +1 位作者 居峰 姚立新 《海南医学》 CAS 2013年第7期943-946,共4页
目的探讨microRNA-152(miR-152)在胃癌细胞中的表达情况以及对胃癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法检测胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901、BGC-823和胃上皮细胞GES-1(作为对照)中miR-152的表达情... 目的探讨microRNA-152(miR-152)在胃癌细胞中的表达情况以及对胃癌细胞增殖的影响及其可能的机制。方法采用实时荧光定量PCR(real-timePCR)方法检测胃癌细胞系MGC-803、SGC-7901、BGC-823和胃上皮细胞GES-1(作为对照)中miR-152的表达情况。采用脂质体法,转染miR-152模拟物(miR-152mimics)构建miR-152过表达体系,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测miR-152对MGC-803胃癌细胞系增殖能力的影响,Westernblot检测转染miR-152mimics后E2F3蛋白的表达情况。结果 MGC-803、SGC-7901、BGC-823胃癌细胞系中miR-152的相对表达量分别为(0.05±0.01)、(0.19±0.03)、(0.48±0.09),表明在胃癌细胞中miR-152的表达明显下调(P<0.05)。MTT法检测结果显示,转染miR-152mimics后可明显抑制MGC-803胃癌细胞的增殖(P<0.05)。Westernblot结果表明,转染miR-152后,E2F3蛋白水平显著下降。结论 miR-152在胃癌细胞中明显低表达,并可能通过下调癌基因E2F3的表达,抑制肿瘤细胞的增殖,从而发挥抑癌基因的功能。 展开更多
关键词 MiR-152 胃癌 e2f3 细胞增殖
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HMGB1通过上调E2F3促进卵巢癌细胞增殖和侵袭能力 被引量:3
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作者 梁婉琪 赵宗霞 +1 位作者 李芬霞 常丽花 《现代生物医学进展》 CAS 2020年第4期654-660,共7页
目的:探讨高迁移率族蛋白B1(High-mobility Group Box 1 protein,HMGB1)是否通过激活E2F转录调节因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭作用。方法:选取本院2017年10月-2018年7月收治的38例卵巢癌患者。qRT... 目的:探讨高迁移率族蛋白B1(High-mobility Group Box 1 protein,HMGB1)是否通过激活E2F转录调节因子3(E2F transcription factor 3,E2F3)促进卵巢癌细胞的增殖和侵袭作用。方法:选取本院2017年10月-2018年7月收治的38例卵巢癌患者。qRT-PCR、Western blot和免疫组化分别检测患者肿瘤组织和癌旁组织中HMGB1的表达;qRT-PCR和Western blot检测HMGB1在卵巢癌细胞系A2780、HO8910、ES-2和SKOV3中的表达;RNA沉默技术敲除HMGB1在SKOV3中的表达,同时CCK-8和Trans-well观察SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化;RNA转录组测序(RNA transcriptome sequencing,RNA-seq)检测敲除HMGB1前后SKOV3细胞中mRNA的变化;qRT-PCR和Western blot检测验证RNA-seq结果;RNA沉默技术敲除E2F3在SKOV3细胞中的表达,同时CCK-8和Trans-well观察SKOV3细胞增殖和侵袭能力变化。结果:卵巢癌肿瘤组织中HMGB1表达显著高于癌旁组织(P<0.05);HMGB1在四种卵巢癌细胞系中的SKOV3细胞中表达最高(P<0.05);si-RNA基因沉默后,HMGB1在SKOV3细胞中几乎无表达,CCK-8和Trans-well实验表明HMGB1 si-RNA沉默后其增殖和侵袭能力显著被抑制(P<0.05);RNA-seq检测结果表明,HMGB1 si-RNA沉默后E2F3、叉状头转录因子3(Forkhead box protein P3,FOXP3)和趋化因子5(chemokine 5,CXCL5)下调倍数最明显其中E2F3下调倍数最高,同时在细胞系中验证结果显示同样结果(P<0.05);si-RNA基因沉默E2F3后,E2F3在SKOV3细胞中几乎无表达,CCK-8和Trans-well实验表明E2F3 si-RNA沉默后其增殖和侵袭能力显著被抑制(P<0.05)。结论:HMGB1可能通过上调E2F3的表达增加促进卵巢癌SKOV3细胞增殖和转移。 展开更多
关键词 HMGB1 e2f3 卵巢癌 增殖 侵袭
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膀胱移行细胞癌E2F3、miR-17-5p、miR-20a的表达及相关性分析 被引量:3
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作者 任海林 孙岩 +1 位作者 李世斌 韩瑞发 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第20期23-25,共3页
目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western ... 目的检测E2F3、miR-17-5p、miR-20a在膀胱癌中的表达情况,分析E2F3与miR-17-5p、miR-20a之间是否存在关联性。方法荧光定量RT-PCR法检测不同病理分级膀胱移行细胞癌组织和细胞系5637、T24中miR-17-5p、miR-20a和E2F3基因的表达,Western blot检测E2F3蛋白的表达。结果与正常膀胱黏膜比较,膀胱移行细胞癌组织及5637、T24细胞系中E2F3、miR-17-5p和miR-20a均高表达(P<0.05)。E2F3表达随着病理分级的升高逐步增多,miR-20a表达随病理分级的升高有降低趋势。5637细胞系相对T24细胞系高表达E2F3(P<0.05)。结论膀胱移行细胞癌中miR-17-5p、miR-20a和E2F3均高表达,miR-20a和miR-17-5p的表达与E2F3的增高密切相关。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 e2f3 miR-17-5p miR-20a
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MicroRNA-10a通过靶向作用E2F3抑制肝癌细胞的增殖 被引量:3
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作者 赵锴 王春梅 曹雪涛 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期383-388,共6页
目的:探讨微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本,Real-ti... 目的:探讨微小RNA-10a(microRNA-10a,miR-10a)对肝癌细胞增殖的影响及其作用机制。方法:收集广西医科大学附属肿瘤医院肿瘤科2001年10月至2005年7月144例肝癌患者手术切除的肝癌组织和癌旁组织(距癌灶组织边缘2~5 cm)标本,Real-time PCR法分析144例肝癌组织及癌旁组织中miR-10a的表达量。在肝癌细胞(QGY-7701、Huh7、PCL/PRF/5)中转染miR-10a模拟物,Real-time PCR法检测转染后细胞miR-10a的表达水平;CCK-8法检测过表达miR-10a的肝癌细胞的增殖水平,流式细胞术检测过表达miR-10a的肝癌细胞的凋亡和细胞周期;生物信息学预测并以Western blotting检测过表达miR-10a的肝癌细胞中转录因子E2F3的表达量。结果:与癌旁组织相比,肝癌组织中的miR-10a显著低表达[(-9.89±1.68)vs(-7.84±1.97),P=0.000]。转染miR-10a模拟物后肝癌细胞系中miR-10a的表达量是转染对照小RNA组或空白组细胞的16倍左右。过表达miR-10a可显著抑制7种肝癌细胞(QGY-7701、QGY-7703、Huh7、PCL/PRF/5、HepG2、BeL-7402、SMMC-7721)的增殖(均P〈0.05),并引起肝癌细胞细胞周期G1/S期阻滞,但并不能诱导肝癌细胞发生凋亡。生物信息学预测显示E2F3是miR-10a可能的靶分子,Western blotting检测显示过表达miR-10a可明显抑制肝癌细胞中E2F3的表达[(0.50±0.12)vs(0.79±0.21),P〈0.05]。结论:人肝癌组织中低表达miR-10a,转染miR-10a模拟物后多种肝癌细胞的增殖均受到明显抑制,其机制可能与miR-10a靶向作用转录因子E2F3并阻滞肝癌细胞细胞周期于G1/S期有关。 展开更多
关键词 肝癌 微小RNA-10a 增殖 转录因子 e2f3 G1 S期阻滞
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miR-122通过调控E2F3的表达对胶质瘤细胞增殖和侵袭的影响 被引量:3
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作者 朱春伟 周东 《医学分子生物学杂志》 CAS 2018年第6期384-388,共5页
目的探讨miR-122对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的机制。方法通过qPCR检测不同胶质瘤细胞株中miR-122的表达水平和人胶质瘤组织miR-122的表达水平;双荧光素酶实验检测miR-122和E2F转录因子3(E2F3)蛋白间的相互关系;MTT增殖... 目的探讨miR-122对胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响及其可能的机制。方法通过qPCR检测不同胶质瘤细胞株中miR-122的表达水平和人胶质瘤组织miR-122的表达水平;双荧光素酶实验检测miR-122和E2F转录因子3(E2F3)蛋白间的相互关系;MTT增殖实验检测miR-122对胶质瘤细胞增殖能力的影响;Transwell试验检测miR-122对胶质瘤细胞侵袭能力的影响;裸鼠成瘤实验检测转染miR-122后,胶质瘤细胞的体外增殖能力;免疫组化实验检测裸鼠内成瘤组织中miR-122对E2F3蛋白的表达水平的影响。结果人胶质瘤中miR-122的表达水平低于于正常脑组织[(0.35±0.06)vs.(1.01±0.13)(P<0.05)];E2F3在胶质瘤中的表达水平高于正常脑组织[(1.63±0.45)vs.(1.07±0.34)(P<0.05)];miR-122mimics与野生型载体E2F33′-UTR Wt共转染的胶质瘤细胞中E2F3的荧光素酶活性显著降低(P<0.05);转染miR-122mimics的胶质瘤细胞株细胞增殖、侵袭能力明显减弱(P<0.05)];过表达miR-122的胶质瘤细胞G,期细胞数目增加并且在裸鼠内的成瘤能力降低,并且裸鼠胶质瘤组织内E2F3蛋白的表达水平降低(P<0.05)]。结论miR-122通过下调E2乃表达抑制肝癌细胞的增殖、侵袭。 展开更多
关键词 MIR-122 e2f3 胶质瘤 增殖 侵袭
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LncRNA HOXC-AS3通过miR-15b-5p/E2F3生物学轴促进胃癌细胞的增殖和迁移 被引量:2
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作者 蔡鲍平 余昌俊 吴文涌 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期407-418,共12页
背景与目的:胃癌是一种发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类具有调控功能的大分子非编码RNA,在胃癌的转移中发挥着重要的作用。探讨lncRNA HOXC-AS3(lnc-HOXC-AS3)在胃癌中的表达模式,以... 背景与目的:胃癌是一种发病率和死亡率均较高的恶性肿瘤。长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)是一类具有调控功能的大分子非编码RNA,在胃癌的转移中发挥着重要的作用。探讨lncRNA HOXC-AS3(lnc-HOXC-AS3)在胃癌中的表达模式,以及通过miR-15b-5p/E2F3生物学轴促进胃癌细胞增殖和转移的分子机制。方法:根据生物信息学分析的方法寻找收集2017年4月—2018年12月安徽医科大学第一附属医院收治并经病理学检查诊断为胃癌的90例患者的胃癌组织中异常表达的lncRNA,并且利用实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RTFQ-PCR)检测lnc-HOXC-AS3的表达水平;在对lnc-HOXC-AS3功能的研究中,采用细胞计数试剂盒(cell counting kit-8,CCK-8)和transwell等方法确定了lnc-HOXC-AS3对胃癌细胞(MGC803)增殖和迁移的影响;在机制上,采用双荧光素酶报告基因检测lnc-HOXC-AS3、miR-15b-5p和E2F3的靶向调控关系。结果:Lnc-HOXC-AS3在胃癌组织和胃癌细胞系中异常高表达。功能上,lnc-HOXC-AS3促进胃癌细胞增殖和迁移,相反,敲低lnc-HOXC-AS3则明显抑制胃癌细胞增殖和迁移。在机制的探讨中,通过双荧光素酶报告基因和一系列体外实验证实lnc-HOXC-AS3通过靶向下调miR-15b-5p的表达,进而解除miR-15b-5p对E2F3的抑制作用,促进了胃癌细胞增殖和迁移。结论:Lnc-HOXC-AS3在胃癌中异常高表达,并通过调控miR-15b-5p/E2F3生物学轴促进胃癌细胞增殖和迁移,渴望成为研究胃癌早期诊断和治疗的靶点。 展开更多
关键词 HOXC-AS3 miR-15b-5p e2f3
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miR-449b通过E2F3-p53途径抑制子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B的生长 被引量:2
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作者 陈慧君 黄亦波 +1 位作者 林蓉蓉 郑飞云 《医学研究杂志》 2015年第8期41-45,共5页
目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活... 目的探讨miR-449b对子宫内膜腺癌细胞HEC-1-B增殖和凋亡的影响及其作用的分子途径。方法脂质体lipofectamine 2000包被miR-449b并转染入HEC-1-B细胞,实时荧光定量PCR检测转染前后细胞内miR-449b的表达水平,CCK-8试验检测转染前后细胞活性,流式细胞仪来检测转染前后细胞凋亡情况。细胞克隆形成实验观察转染前后细胞克隆形成能力。Western blot方法检查转染前后细胞内E2F3蛋白和p53的表达情况。结果转染后实验组miR-449b表达量较NC组增加,细胞增殖能力和克隆能力减弱,而细胞凋亡增加(P<0.05)。miR-449b使E2F3表达下调,p53表达上调(P<0.05)。结论 miR-449b通过E2F3-p53途径抑制HEC-1-B细胞增殖并促进凋亡,可能作为治疗子宫内膜腺癌的新分子靶标。 展开更多
关键词 miR-449b HeC-1-B细胞 增殖 凋亡 e2f3 P53
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