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传染性法氏囊病超强病毒株VP2基因原核表达及其免疫原性检测 被引量:3
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作者 朱彩霞 朱瑞良 +3 位作者 刘冠华 翁立雪 马荣德 孙寅剑 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期154-156,共3页
为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-... 为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约69 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄BALB/c小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清效价在1∶5 120以上,表明vvIBDV VP2具有良好的免疫原性,为建立vvIBDV的ELISA检测方法提供了试验依据。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病超强病毒株 VP2 e.colibl21(de3)plyss 表达
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重组BbFGF工程菌的发酵条件(英文) 被引量:1
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作者 熊盛 林剑 +4 位作者 姚汝华 刘杰森 张玲 张美英 李志英 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2001年第4期53-58,共6页
利用大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS生产重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (BbFGF) ,对此工程菌的发酵条件进行了研究 .在前期试验的基础上 ,重点探索培养基、诱导剂及葡萄糖添加方式对T7启动子指导下的bFGF合成的影响 .根据摇瓶试验和分批发酵... 利用大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS生产重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (BbFGF) ,对此工程菌的发酵条件进行了研究 .在前期试验的基础上 ,重点探索培养基、诱导剂及葡萄糖添加方式对T7启动子指导下的bFGF合成的影响 .根据摇瓶试验和分批发酵试验结果 ,建立了一套变速流加葡萄糖的高密度补料分批发酵工艺 .在此工艺下 ,经 11h发酵 ,可得光密度为 30 .7、bFGF产量为 95mg/L的发酵产物 .两步法纯化目的蛋白 ,得到纯度为 95%的重组bFGF ,其生物活性和标准品一致 . 展开更多
关键词 大肠杆菌bl21(de3)plyss T7启动子 补料分批发酵 牛碱性成纤维细胞生长因子 工程菌 发酵工艺 培养基 BbFGF
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