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传染性法氏囊病超强病毒株VP2基因原核表达及其免疫原性检测
被引量:
3
1
作者
朱彩霞
朱瑞良
+3 位作者
刘冠华
翁立雪
马荣德
孙寅剑
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期154-156,共3页
为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-...
为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约69 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄BALB/c小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清效价在1∶5 120以上,表明vvIBDV VP2具有良好的免疫原性,为建立vvIBDV的ELISA检测方法提供了试验依据。
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关键词
传染性法氏囊病超强病毒株
VP2
e
.
coli
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de
3)
plyss
表达
下载PDF
职称材料
重组BbFGF工程菌的发酵条件(英文)
被引量:
1
2
作者
熊盛
林剑
+4 位作者
姚汝华
刘杰森
张玲
张美英
李志英
《华南理工大学学报(自然科学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期53-58,共6页
利用大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS生产重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (BbFGF) ,对此工程菌的发酵条件进行了研究 .在前期试验的基础上 ,重点探索培养基、诱导剂及葡萄糖添加方式对T7启动子指导下的bFGF合成的影响 .根据摇瓶试验和分批发酵...
利用大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS生产重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (BbFGF) ,对此工程菌的发酵条件进行了研究 .在前期试验的基础上 ,重点探索培养基、诱导剂及葡萄糖添加方式对T7启动子指导下的bFGF合成的影响 .根据摇瓶试验和分批发酵试验结果 ,建立了一套变速流加葡萄糖的高密度补料分批发酵工艺 .在此工艺下 ,经 11h发酵 ,可得光密度为 30 .7、bFGF产量为 95mg/L的发酵产物 .两步法纯化目的蛋白 ,得到纯度为 95%的重组bFGF ,其生物活性和标准品一致 .
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关键词
大肠杆菌
bl
21
(
de
3)
plyss
T7启动子
补料分批发酵
牛碱性成纤维细胞生长因子
工程菌
发酵工艺
培养基
BbFGF
下载PDF
职称材料
题名
传染性法氏囊病超强病毒株VP2基因原核表达及其免疫原性检测
被引量:
3
1
作者
朱彩霞
朱瑞良
刘冠华
翁立雪
马荣德
孙寅剑
机构
山东农业大学动物科技学院山东省动物生物技术与疫病防治重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第2期154-156,共3页
基金
高等学校博士学科点专项科研基金(060434011)
山东省科技攻关项目(2008GG10009023)
+1 种基金
农业部公益性行业科研专项(200803019)
山东省博士后科研项目择优资助经费(200603040)
文摘
为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约69 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄BALB/c小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清效价在1∶5 120以上,表明vvIBDV VP2具有良好的免疫原性,为建立vvIBDV的ELISA检测方法提供了试验依据。
关键词
传染性法氏囊病超强病毒株
VP2
e
.
coli
bl
21
(
de
3)
plyss
表达
Keywords
v
e
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VP2
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分类号
S852.61 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
重组BbFGF工程菌的发酵条件(英文)
被引量:
1
2
作者
熊盛
林剑
姚汝华
刘杰森
张玲
张美英
李志英
机构
华南理工大学生物工程系
暨南大学生物工程研究所
出处
《华南理工大学学报(自然科学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001年第4期53-58,共6页
基金
国家'九五'重点科技攻关项目!(96 -C0 2 - 0 1- 0 3)&&
文摘
利用大肠杆菌BL2 1(DE3) pLysS生产重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (BbFGF) ,对此工程菌的发酵条件进行了研究 .在前期试验的基础上 ,重点探索培养基、诱导剂及葡萄糖添加方式对T7启动子指导下的bFGF合成的影响 .根据摇瓶试验和分批发酵试验结果 ,建立了一套变速流加葡萄糖的高密度补料分批发酵工艺 .在此工艺下 ,经 11h发酵 ,可得光密度为 30 .7、bFGF产量为 95mg/L的发酵产物 .两步法纯化目的蛋白 ,得到纯度为 95%的重组bFGF ,其生物活性和标准品一致 .
关键词
大肠杆菌
bl
21
(
de
3)
plyss
T7启动子
补料分批发酵
牛碱性成纤维细胞生长因子
工程菌
发酵工艺
培养基
BbFGF
Keywords
bFGF
e
.
coli
bl
21
(
de
3)
plyss
T7
promot
e
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分类号
TQ929 [轻工技术与工程—发酵工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
传染性法氏囊病超强病毒株VP2基因原核表达及其免疫原性检测
朱彩霞
朱瑞良
刘冠华
翁立雪
马荣德
孙寅剑
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2011
3
下载PDF
职称材料
2
重组BbFGF工程菌的发酵条件(英文)
熊盛
林剑
姚汝华
刘杰森
张玲
张美英
李志英
《华南理工大学学报(自然科学版)》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2001
1
下载PDF
职称材料
已选择
0
条
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参考文献
引证文献
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