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几种外源基因真核表达体系研究进展 被引量:3
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作者 李成伟 贾孟 +2 位作者 张怡 周庆峰 张红绪 《商丘师范学院学报》 CAS 2008年第9期88-91,共4页
随着分子生物学的飞速发展,进入到后基因组时代后,人们对蛋白质的结构和功能研究越加深入,对蛋白质表达载体的研究也逐渐丰富.本文主要综述了几种常见的真核表达载体以及影响外源基因在这些载体中表达效率的一些因素,旨在对研究者有所启发.
关键词 酵母表达系统 杆状病毒表达系统 哺乳动物细胞表达系统 杜氏盐藻表达系统 转基因植物表达系统
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新型基因编辑技术加速盐藻表达系统的成熟和应用
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作者 黄晓雯 皇甫雨静 +3 位作者 姬聪浩 代月优 李姝璇 冯书营 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期102-111,共10页
盐藻因具备低成本、易培养、便于转基因操作、可调控的转录和翻译等优点,已成为基因工程领域备受关注的新型表达系统。但盐藻表达系统存在低表达和不稳定遗传等技术瓶颈,严重限制了其应用。CRISPR/Cas系统凭借高稳定性、高靶点特异性、... 盐藻因具备低成本、易培养、便于转基因操作、可调控的转录和翻译等优点,已成为基因工程领域备受关注的新型表达系统。但盐藻表达系统存在低表达和不稳定遗传等技术瓶颈,严重限制了其应用。CRISPR/Cas系统凭借高稳定性、高靶点特异性、可编程性等优点,可作为助推盐藻表达系统改进和应用的重要工具,从而大幅提高盐藻表达系统重组蛋白、脂质积累和胡萝卜素等高附加值产物的产量。由于盐藻兼具原核细胞和真核细胞的双重特点,基因编辑存在较大的难度和限制性,因而必须不断提高基因编辑技术在盐藻中的精确性和编辑效率,以确保目标基因得到准确修饰。探讨盐藻表达系统的基因工程研究现状,包括盐藻转化方法、外源基因的表达和基因编辑的研究现状等,分析CRISPR/Cas编辑技术在盐藻中面临的主要挑战,提出未来的发展方向和增效策略,以期加速盐藻表达系统的成熟和应用。 展开更多
关键词 盐藻 新型表达系统 基因编辑 CRISPR/Cas9系统
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胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因新型真核表达载体的构建及其在盐藻中的表达 被引量:2
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作者 徐文琦 柴晓杰 +2 位作者 张婷 代靖宇 张晓琳 《中国生物工程杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期29-34,共6页
应用PCR技术扩增Nos基因、CaMV35S启动子片段和氯霉素抗性基因Cat,并与胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因连接,构建真核表达载体pMDCKN-Cat。DNA序列分析结果表明:表达载体中的胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因、启动子CaMV35S、终止子Nos和氯霉素抗性基... 应用PCR技术扩增Nos基因、CaMV35S启动子片段和氯霉素抗性基因Cat,并与胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因连接,构建真核表达载体pMDCKN-Cat。DNA序列分析结果表明:表达载体中的胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因、启动子CaMV35S、终止子Nos和氯霉素抗性基因Cat与已知序列完全一致。采用LiAc/PEG介导法将质粒pMDCKN-Cat转化至盐藻细胞中,通过氯霉素抗性基因筛选和PCR鉴定获得转基因盐藻细胞。经Western blotting检测,在硝酸纤维素膜上出现清晰的条带,分子量为20.1kDa,证明胰蛋白酶抑制剂KSTI3基因在盐藻中得到成功表达。 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂KST13 基因 盐藻 LiAc/PEG介导法 真核表达载体
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