期刊导航
期刊开放获取
cqvip
退出
期刊文献
+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
检索
高级检索
期刊导航
共找到
2
篇文章
<
1
>
每页显示
20
50
100
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
显示方式:
文摘
详细
列表
相关度排序
被引量排序
时效性排序
鸡Piwil1基因启动子区转录调控元件的初步分析
被引量:
1
1
作者
夏明秀
常国斌
+8 位作者
陈蓉
翟飞
戴爱琴
马腾
王洪志
徐璐
陈静
刘璐
陈国宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1349-1354,共6页
旨在确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,预测转录因子结合位点,并探讨转录因子对家禽Piwil1基因核心启动子活性的影响。通过将Piwil1基因启动子系列缺失片段插入到pGL3-basic载体,构建重组体质粒,将重组体分别转染COS-7和GC-1细胞系,...
旨在确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,预测转录因子结合位点,并探讨转录因子对家禽Piwil1基因核心启动子活性的影响。通过将Piwil1基因启动子系列缺失片段插入到pGL3-basic载体,构建重组体质粒,将重组体分别转染COS-7和GC-1细胞系,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,并对调控区进行转录因子结合位点预测;对预测的转录因子NF-Y结合位点进行定点突变,构建重组体质粒,并通过双荧光素酶报告基因检测系统分析其对启动子活性的影响。狼山鸡Piwil1基因的-1 377^-268bp区域在COS-7和GC-1细胞中都有不同程度的启动活性,-221^+1bp启动子活性几乎完全丧失,在-268^-221bp区域有转录因子NF-Y结合位点,定点突变后启动子活性显著下降,认为转录因子NF-Y对启动子活性可能起着重要的调控作用。转录因子NF-Y为Piwil1基因核心启动子区的重要调控元件,为进一步研究Piwil1基因的转录调控机制奠定了理论基础。
展开更多
关键词
Piwil1基因
核心启动子
定点突变
双荧光素酶活性检测系统
NF-Y
下载PDF
职称材料
促血小板生成素模拟肽二联体连接肽的筛选
被引量:
1
2
作者
王海晴
史彦斌
+3 位作者
支德娟
王亚军
李红玉
王燕萍
《药物生物技术》
CAS
2016年第2期99-102,共4页
比较不同Linker连接的促血小板生成素模拟肽二联体(d TMP)的生物活性,筛选高生物活性d TMP的Linker设计。全基因合成4个d TMP基因,将片段克隆到p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-1/d TMP,筛选阳性目的克隆,转化大肠杆菌BL21(DE3...
比较不同Linker连接的促血小板生成素模拟肽二联体(d TMP)的生物活性,筛选高生物活性d TMP的Linker设计。全基因合成4个d TMP基因,将片段克隆到p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-1/d TMP,筛选阳性目的克隆,转化大肠杆菌BL21(DE3),0.1 mmol/L IPTG诱导表达融合蛋白。超声细胞破碎仪破菌,Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析获得GST-d TMP融合蛋白,凝血酶酶切,再次亲和层析除去GST标签,收集目的 d TMP肽片段,双荧光素酶法检测各目的肽片段的活性。通过实验,正确构建了4个不同的p GEX-4T-1/d TMP表达载体,经表达纯化得到了GST-d TMP融合蛋白,酶切后再次亲和层析纯化,并获得了相对分子质量与理论值3 920,3 640,3 610,3 430相符的4个d TMP肽片段,它们的活性大小依次为:d TMP-Linker3>d TMP-Linker4>d TMP-Linker1>d TMP-Linker2。实验发现,不同的连接肽显著影响d TMP肽片段的生物活性,该实验成功筛选到了活性较高的连接肽Linker3。
展开更多
关键词
促血小板生成素模拟肽
融合蛋白
原核表达
双荧光素酶检测
亲和层析
生物活性
原文传递
题名
鸡Piwil1基因启动子区转录调控元件的初步分析
被引量:
1
1
作者
夏明秀
常国斌
陈蓉
翟飞
戴爱琴
马腾
王洪志
徐璐
陈静
刘璐
陈国宏
机构
扬州大学动物科学与技术学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期1349-1354,共6页
基金
国家自然科学基金(31172199)
国家科技支撑计划(2011BAD28B03)
国家高技术研究发展计划(863计划)项目(2011AA100305)
文摘
旨在确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,预测转录因子结合位点,并探讨转录因子对家禽Piwil1基因核心启动子活性的影响。通过将Piwil1基因启动子系列缺失片段插入到pGL3-basic载体,构建重组体质粒,将重组体分别转染COS-7和GC-1细胞系,使用双荧光素酶报告基因检测系统测定其转录活性,确定Piwil1基因核心启动子活性调控区,并对调控区进行转录因子结合位点预测;对预测的转录因子NF-Y结合位点进行定点突变,构建重组体质粒,并通过双荧光素酶报告基因检测系统分析其对启动子活性的影响。狼山鸡Piwil1基因的-1 377^-268bp区域在COS-7和GC-1细胞中都有不同程度的启动活性,-221^+1bp启动子活性几乎完全丧失,在-268^-221bp区域有转录因子NF-Y结合位点,定点突变后启动子活性显著下降,认为转录因子NF-Y对启动子活性可能起着重要的调控作用。转录因子NF-Y为Piwil1基因核心启动子区的重要调控元件,为进一步研究Piwil1基因的转录调控机制奠定了理论基础。
关键词
Piwil1基因
核心启动子
定点突变
双荧光素酶活性检测系统
NF-Y
Keywords
Piwil1gene
core promoter
point mutation
dual
-
glo
Luciferase Assay System
NF-Y
分类号
S831.2 [农业科学—畜牧学]
下载PDF
职称材料
题名
促血小板生成素模拟肽二联体连接肽的筛选
被引量:
1
2
作者
王海晴
史彦斌
支德娟
王亚军
李红玉
王燕萍
机构
兰州大学药学院
兰州大学生命科学学院
出处
《药物生物技术》
CAS
2016年第2期99-102,共4页
基金
科技部国家国际科技合作专项项目(No.2012DFA30480)
甘肃省科技重大专项计划项目(No.1002WKDE55)
兰州市科技计划项目(2010-1-154)
文摘
比较不同Linker连接的促血小板生成素模拟肽二联体(d TMP)的生物活性,筛选高生物活性d TMP的Linker设计。全基因合成4个d TMP基因,将片段克隆到p GEX-4T-1载体,构建重组表达载体p GEX-4T-1/d TMP,筛选阳性目的克隆,转化大肠杆菌BL21(DE3),0.1 mmol/L IPTG诱导表达融合蛋白。超声细胞破碎仪破菌,Glutathione Sepharose 4 Fast Flow亲和层析获得GST-d TMP融合蛋白,凝血酶酶切,再次亲和层析除去GST标签,收集目的 d TMP肽片段,双荧光素酶法检测各目的肽片段的活性。通过实验,正确构建了4个不同的p GEX-4T-1/d TMP表达载体,经表达纯化得到了GST-d TMP融合蛋白,酶切后再次亲和层析纯化,并获得了相对分子质量与理论值3 920,3 640,3 610,3 430相符的4个d TMP肽片段,它们的活性大小依次为:d TMP-Linker3>d TMP-Linker4>d TMP-Linker1>d TMP-Linker2。实验发现,不同的连接肽显著影响d TMP肽片段的生物活性,该实验成功筛选到了活性较高的连接肽Linker3。
关键词
促血小板生成素模拟肽
融合蛋白
原核表达
双荧光素酶检测
亲和层析
生物活性
Keywords
Thrombopoietin mimetic peptide(TMP)
GST fusion protein
Prokaryotic expression
dual
glo
luciferase assay system
Affinity chromatography
分类号
Q516 [生物学—生物化学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
鸡Piwil1基因启动子区转录调控元件的初步分析
夏明秀
常国斌
陈蓉
翟飞
戴爱琴
马腾
王洪志
徐璐
陈静
刘璐
陈国宏
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
下载PDF
职称材料
2
促血小板生成素模拟肽二联体连接肽的筛选
王海晴
史彦斌
支德娟
王亚军
李红玉
王燕萍
《药物生物技术》
CAS
2016
1
原文传递
已选择
0
条
导出题录
引用分析
参考文献
引证文献
统计分析
检索结果
已选文献
上一页
1
下一页
到第
页
确定
用户登录
登录
IP登录
使用帮助
返回顶部