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PCR制备地高辛标记的探针检测禽流感病毒核酸 被引量:37
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作者 黄庚明 辛朝安 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第12期3-7,共5页
用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,制备了广东禽流感无致病力分离株 A/goose/China/2 4/96 (H7N3 )核蛋白基因片段(NPc)的地高辛标记的 c DNA探针。建立并优化了检测禽流感病毒核酸的探针杂交法 ,探针杂交法能鉴别出非免疫鸡胚和SPF鸡胚尿囊... 用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,制备了广东禽流感无致病力分离株 A/goose/China/2 4/96 (H7N3 )核蛋白基因片段(NPc)的地高辛标记的 c DNA探针。建立并优化了检测禽流感病毒核酸的探针杂交法 ,探针杂交法能鉴别出非免疫鸡胚和SPF鸡胚尿囊液中的病毒 ,攻毒后第 3天的 SPF和非免疫鸡泄殖腔拭子中 AIV的最大检出率为 1/10 ,对临床样品中的 AIV的最大检出率为 1/7,而直接 HA和 HI法及 AGP试验检不出临床样品的 AIV。该探针具有较好的特异性和敏感性 ,为从分子水平探讨 AIV的发病机理、临床早期快速诊断提供了新的研究手段。 展开更多
关键词 地高辛标记 PCR探针 禽流感病毒 核酸检测 禽流感
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生物素肼化学标记和DIG标记cDNA探针检测柑桔裂皮病类病毒 被引量:7
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作者 胡勤学 张春立 +2 位作者 陈捷 吴德喜 林木兰 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期159-163,共5页
分别用生物素肼化学标记和DIG标记我国柑桔裂皮病类病毒(CEVd)全长克隆cDNA,用以上探针对不同来源的核酸样品进行斑点杂交。两种探针可检出病柑桔总核酸的最低含量约为400ng/斑点和80ng/斑点;生物素肼标记C... 分别用生物素肼化学标记和DIG标记我国柑桔裂皮病类病毒(CEVd)全长克隆cDNA,用以上探针对不同来源的核酸样品进行斑点杂交。两种探针可检出病柑桔总核酸的最低含量约为400ng/斑点和80ng/斑点;生物素肼标记CEVd-cDNA探针,可检出CEVd-cDNA的最低含量约为10pg/斑点。研制的CEVd检测试剂盒能检测出发病和隐性带毒苗木中的CEVd,灵敏、特异、简便、快速、试剂盒已被用于检测来自我国主要裂皮病病区、湖南、湖北、福建等地的柑桔和香橼材料。 展开更多
关键词 植物病毒 柑桔裂皮病 类病毒 生物素肼 化学标记
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PCR制备地高辛素标记的探针检测轮状病毒核酸 被引量:2
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作者 卓礼梅 徐帆 +1 位作者 陈火胜 严泳楷 《中国病毒学》 CSCD 1995年第1期22-27,共6页
用聚合酶链反应(PCR)技术,制备了轮状病毒第9基因部分片段的地高辛标记的cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交表明该探针具有轮状病毒A组的特异性,可检出10pgHRV-RNA。实验中选择了粪便标本提取核酸后点膜和粪便... 用聚合酶链反应(PCR)技术,制备了轮状病毒第9基因部分片段的地高辛标记的cDNA探针。DNA-RNA斑点杂交表明该探针具有轮状病毒A组的特异性,可检出10pgHRV-RNA。实验中选择了粪便标本提取核酸后点膜和粪便上清直接点膜进行斑点杂交,两种方法的结果一致;同时将斑点杂交法与PAGE法的结果进行了比较。实验结果表明用PCR技术直接制备地高辛索标记的cDNA探针具有方便、快速、标记率高、特异性强的特点,具有一定的应用前景。 展开更多
关键词 聚合酶链反应 地高辛素标记 斑点杂交 轮状病毒
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