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EHEC O157：H7二重PCR的建立及应用 被引量：7
1
作者 李丽 张雪寒 +13 位作者 何孔旺 姜平 赵攀登 叶青 栾晓婷 温立斌 倪艳秀 周俊明 吕立新 郭容利 俞正玉 茅爱华 李彬 王小敏 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2011年第6期59-66,共8页
建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以E... 建立用于从临床样品中检测EHEC O157:H7的二重PCR方法。根据GenBank登录EHEC O157:H7序列,通过对菌体和鞭毛抗原保守性核苷酸序列的比对和分析,分别设计编码O抗原rfbE基因和编码H抗原fliC基因各1对特异性引物,建立二重PCR检测方法,并以EHEC O157:H7纯培养和模拟制备的3种阳性样品为原材料,对方法的敏感性和特异性进行分析。运用成功建立的二重PCR,从带菌率最高的牛粪便中检测EHEC O157:H7,并进行菌株分离和鉴定。成功建立了rfbE与fliC的二重PCR方法,rfbE与fliC引物比例为2.5∶1,PCR循环参数中退火温度为56℃,扩增片段长度rfbE为812 bp,fliC为625 bp。检测阳性临床样品检测敏感性可以达到10 cfu/g。检测24株非EHEC O157:H7大肠杆菌和15株非大肠杆菌,只有EHECO157:H7能够扩增出特异性的rfbE条带,EHEC O157:H7和EPEC O55:H7能够扩增出fliC。只有EHEC O157:H7能够同时扩增出rfbE与fliC 2条目的条带。从63份牛粪便样品中分离到4株EHEC O157:H7:生化试验表明4株EHEC O157:H7具有典型EHECO157:H7的生化特性;药敏试验表明4株EHEC O157:H7具有较为广谱的耐药性;rfbE序列分析与GenBank序列同源性介于97.3%～99.2%之间,fliC序列与GenBank序列同源性介于97.6%～100%之间;4株EHEC O157:H7对Balb/c小鼠的致病性有差异,EHEC O157:H728#和EHEC O157:H738#致病性强,EHEC O157:H73#和EHEC O157:H717#较弱。以rfbE和fliC为目的基因成功建立了二重PCR,敏感性和特异性良好,可用于临床样品的检测,提高细菌分离率。 展开更多
关键词 O157:H7 二重PCR 方法建立 细菌分离 样品检测
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探伤样棒搬运的双桁架机器人系统设计
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作者 杨海涛 丰飞 +1 位作者 孙占荣 陈凡 《机械工程师》 2022年第12期139-142,共4页
在特种钢材出厂前,为了保证所生产钢材的表面和内部质量需要通过探伤机进行检测,探伤机通常每工作4~8 h或更换棒材型号时都需要进行校准工作。在探伤机的校准过程中,需要进行样棒的搬运及存储工作。针对该工作,研制了一套双桁架机器人... 在特种钢材出厂前,为了保证所生产钢材的表面和内部质量需要通过探伤机进行检测,探伤机通常每工作4~8 h或更换棒材型号时都需要进行校准工作。在探伤机的校准过程中,需要进行样棒的搬运及存储工作。针对该工作,研制了一套双桁架机器人系统。文中主要介绍探伤样棒搬运的桁架机器人系统的组成、机械结构、控制系统等,并且详细介绍了桁架机器人系统样棒取放的工作流程。 展开更多
关键词 双桁架机器人系统 特钢探伤样棒 样棒立体仓储库
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PCR技术检测猪肺炎支原体的研究进展 被引量：17
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作者 张旭 白方方 +5 位作者 武昱孜 刘茂军 冯志新 熊祺琰 张映 邵国青 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期54-60,共7页
猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶... 猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae)是引起猪支原体肺炎的重要病原,该病常引起继发感染和混合感染,严重威胁养猪业发展,造成巨大的经济损失。利用PCR技术对猪支原体肺炎早期正确诊断具有非常重要的意义。从猪肺炎支原体的特异性靶基因、临床样品采集方法与样品DNA处理方法、关键技术因素及普通PCR技术、多重PCR技术、套式PCR技术、荧光定量PCR技术、芯片检测和环介导等温扩增技术等在猪肺炎支原体检测中的研究进展、主要优缺点及应用进行综述。 展开更多
关键词 猪支原体肺炎 猪肺炎支原体 PCR检测 临床样品采集
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全自动血凝分析仪Sysmex CS-5100的性能验证与评价 被引量：5
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作者 张巧云 彭华 梁委军 《右江医学》 2016年第1期82-87,共6页
目的对全自动血凝分析仪Sysmex CS-5100的性能进行验证与评价。方法用高低浓度混合血浆验证批内精密度,用高低浓度质控品验证日间精密度,用高浓度混合血浆分别按100%、80%、60%、40%、20%、10%、5%的比例稀释后对仪器进行线性验证,用接... 目的对全自动血凝分析仪Sysmex CS-5100的性能进行验证与评价。方法用高低浓度混合血浆验证批内精密度,用高低浓度质控品验证日间精密度,用高浓度混合血浆分别按100%、80%、60%、40%、20%、10%、5%的比例稀释后对仪器进行线性验证,用接近预期检测限的低/高浓度血浆样本来验证可报告范围,通过检测定值质控品和仪器比对来验证正确度,用正常体检血浆验证参考区间,用高低浓度血浆标本验证携带污染率。结果 Sysmex CS-5100检测PT、APTT、FIB批内CV〈3.0%;TT、D-二聚体、FDP批内CV〈4.0%;PT、APTT、FIB日间CV〈5.0%;TT、D-二聚体、FDP日间CV〈6.0%;FIB、D-二聚体、FDP的可报告范围分别是：0.21-24.6 g/L,0.06-89.6 mg/L,0.09-2001.28μg/ml;各项目相对偏差均在10.5%以内;95%以上样本处于引用参考区间内,携带污染率均〈2.5%。结论 Sysmex CS-5100全自动血凝分析仪性能良好,可用于检测临床样本。 展开更多
关键词 SYSMEX CS-5100 血凝分析仪 性能验证
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纸片尿液标本Nit、pH、Clu、Pro、OBT、Ket、Bil、Uro检测的应用 被引量：3
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作者 苏琼 张莉 王文达 《伤残医学杂志》 1998年第2期41-42,共2页
目的：对386例纸片尿液标本Nit、pH、Glu、Pro、OBT、Ket、Bil、Uro检测进行了研究，为基层伤残人员初诊观察，提供了一种简便、可靠、实用的方法．方法：尿液标本浸离提取法及试剂与尿液中被测成份反应先学测定法．结果：386例纸片尿... 目的：对386例纸片尿液标本Nit、pH、Glu、Pro、OBT、Ket、Bil、Uro检测进行了研究，为基层伤残人员初诊观察，提供了一种简便、可靠、实用的方法．方法：尿液标本浸离提取法及试剂与尿液中被测成份反应先学测定法．结果：386例纸片尿液标本与新鲜尿液标本对照结果完全相同．结论：纸片尿液标本经置37℃1周和实地邮寄试验，其结果不受影响． 展开更多
关键词 检测 尿液标本 纸片 创伤
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