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孕妇外周血中胎儿有核红细胞的富集
1
作者 方朴 吴有光 +1 位作者 匡渤海 冯微 《江西医学院学报》 2001年第4期25-28,共4页
目的 :从孕妇外周血中分选富集出胎儿有核红细胞 ,以便用于无创伤性产前诊断。方法从 32例孕 11～ 2 0周的孕妇血中用Histopaque 10 77密度梯度离心富集以及流式细胞仪计数出胎儿有核红细胞 ,并用喹吖因荧光染色检测Y 染色体以及用PCR检... 目的 :从孕妇外周血中分选富集出胎儿有核红细胞 ,以便用于无创伤性产前诊断。方法从 32例孕 11～ 2 0周的孕妇血中用Histopaque 10 77密度梯度离心富集以及流式细胞仪计数出胎儿有核红细胞 ,并用喹吖因荧光染色检测Y 染色体以及用PCR检测Y -染色体DNA特异序列。结果流式细胞仪计数 ,每毫升孕妇外周血中计数到 0 .93× 10 3 ～ 8.11× 10 3 个GPA阳性细胞 ;PCR结果与产后性别证实 ,符合率为 90 .0 6 %。结论孕妇外周血中的胎儿有核红细胞经密度梯度离心和流式细胞仪分离后 ,可得到一定程度的富集和纯化 ,11～ 2 0周内FNRBCs数与孕期似无相关性 。 展开更多
关键词 胎儿 有核红细胞 密度梯度离心 流式细胞仪 孕妇外周血 遗传性疾病 产前诊断
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树鼩淋巴细胞的快速分离和分析方法的初步建立 被引量：1
2
作者 张理超 张捷 +5 位作者 付必莽 赵越 唐波 陈贵元 王维 李梅章 《云南大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2013年第S2期359-363,367,共6页
本研究旨在建立树鼩淋巴细胞分离和培养的方法.根据组织来源,本实验分为3个实验组,第1组,采用树鼩活体改良心脏采血法并联合密度梯度离心法分离树鼩淋巴细胞;第2组,CO2处死树鼩,采用逆向解剖法游离其胫骨股骨制备骨髓细胞;第3组,直接获... 本研究旨在建立树鼩淋巴细胞分离和培养的方法.根据组织来源,本实验分为3个实验组,第1组,采用树鼩活体改良心脏采血法并联合密度梯度离心法分离树鼩淋巴细胞;第2组,CO2处死树鼩,采用逆向解剖法游离其胫骨股骨制备骨髓细胞;第3组,直接获取脾脏细胞.上述3种方法收集过的淋巴细胞,经过12 h培养后,先用台盼蓝染色检测细胞的存活率,再应用流式细胞技术分析淋巴细胞的活力.结果显示3种方法所获取的树鼩淋巴细胞所占比例各异,具有组织特异性.0.5 mL的树鼩外周血可获得淋巴细胞大约为6.25×104个,占细胞总数的50%;双侧胫骨股骨可获得淋巴细胞大约为1.96×105个,占细胞总数的6.31%;树鼩脾脏可获得淋巴细胞大约为1.59×106个,占细胞总数的23.7%.各方法所获得细胞活力良好,且在流式细胞技术检测中可见明显分群.本研究初步建立快速分离和培养树鼩淋巴细胞的方法,为树鼩后续的淋巴细胞的免疫研究打下坚实的基础. 展开更多
关键词 树鼩 淋巴细胞 流式细胞技术 密度梯度离心法
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密度梯度离心联合传代贴壁法分离、培养兔骨髓间充质干细胞 被引量：1
3
作者 丁冬 闫鑫 +7 位作者 李晓亮 张博闻 董梦婷 温鹏 姚占川 黄永禄 杨子洋 赵飞 《宁夏医学杂志》 CAS 2017年第11期977-979,I0001,共4页
目的探讨密度梯度离心联合传代贴壁法分离、培养兔骨髓间充质干细胞的可行性。方法应用密度梯度离心联合传代贴壁法分离、培养兔骨髓间充质干细胞,观察细胞形态变化,应用免疫荧光法鉴定细胞并计算纯度,应用八肽胆囊收缩素(CCK-8)法绘制... 目的探讨密度梯度离心联合传代贴壁法分离、培养兔骨髓间充质干细胞的可行性。方法应用密度梯度离心联合传代贴壁法分离、培养兔骨髓间充质干细胞,观察细胞形态变化,应用免疫荧光法鉴定细胞并计算纯度,应用八肽胆囊收缩素(CCK-8)法绘制细胞生长曲线。结果应用密度梯度离心联合传代贴壁法可以分离、培养兔骨髓间充质干细胞,第3代细胞接种后2~8 d进入细胞增殖对数期,兔骨髓间充质干细胞的纯度可达(81.77±2.10)%,3代细胞纯度组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论应用密度梯度离心联合传代贴壁法可以分离、培养并获取正常活性及理想纯度的兔骨髓间充质干细胞。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 密度梯度离心法 传代贴壁法 细胞增殖
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人血浆LDL的分离纯化及兔抗人apoB-100抗体的制备
4
作者 沈瑶杰 徐亚雅 +1 位作者 李芳芳 王杨萍 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第14期2652-2654,2666,共4页
目的:为分离得到较高纯度的人血载脂蛋白B-100(apoB-100)及制备高效的兔抗人apoB-100抗体。方法:采用两步密度梯度离心分离人血浆得到LDL,产物经6%琼脂糖凝胶(Sepharose-6B)分子筛分离纯化后,再由透析浓缩获得纯化产物即apoB-100,同时... 目的:为分离得到较高纯度的人血载脂蛋白B-100(apoB-100)及制备高效的兔抗人apoB-100抗体。方法:采用两步密度梯度离心分离人血浆得到LDL,产物经6%琼脂糖凝胶(Sepharose-6B)分子筛分离纯化后,再由透析浓缩获得纯化产物即apoB-100,同时用5%聚丙烯酰胺凝胶(PAGE)电泳鉴定为一条带。用分离纯化得到的apoB-100与完全及不完全福氏佐剂混合,以此作为免疫原经4-3-2-2-1(周)免疫新西兰大白兔,随后心脏取血制备兔抗人apoB-100抗体。结论:分离纯化apoB-100浓度为1.4625mg/ml,制备的兔抗体经免疫双扩散测定其效价为1:32。 展开更多
关键词 apoB-100 密度梯度离心 纯化 免疫双扩散 抗体
原文传递
大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养
5
作者 李延清 刘霞 《西北农林科技大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2006年第5期23-26,共4页
为了确定大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离和培养的方法,建立了稳定的MSCs体外培养扩增体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,观察了细胞的形态,研究了其增殖及生长特征,并应用流式细胞术测定... 为了确定大鼠骨髓间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSCs)体外分离和培养的方法,建立了稳定的MSCs体外培养扩增体系,通过密度梯度离心和贴壁筛选法分离培养大鼠MSCs,观察了细胞的形态,研究了其增殖及生长特征,并应用流式细胞术测定了细胞周期及CD29,CD44,CD45和HLA-DR的表达。结果表明,在体外培养条件下大鼠MSCs贴壁生长,为成纤维细胞样;CD45和HLA-DR的表达呈阴性,CD29和CD44的表达呈阳性;细胞周期的G0/G1期约占95%,具有原始细胞的特征。说明建立的体外培养扩增体系可获得形态单一、生长稳定、增殖性较强、较均一的大鼠MSCs。 展开更多
关键词 大鼠 骨髓间充质干细胞 细胞形态 细胞周期 密度梯度离心 流式细胞术
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