血细胞减少患者衰变加速因子和膜反应性溶血抑制物表达缺失检测的临床意义 被引量：3

1

作者 吕敏 朱焕玲 +1 位作者 蒋能刚 曾婷婷 《华西医学》 CAS 2012年第2期163-167,共5页

目的检测血细胞减少患者外周血红细胞和中性粒细胞细胞膜糖基磷脂酰肌醇(GPI)连接的补体调节蛋白衰变加速因子(CD55)和膜反应性溶血抑制物(CD59)表达情况,并探讨其临床意义。方法 2006年7月-2011年3月,采用直接免疫荧光标记法流式细胞... 目的检测血细胞减少患者外周血红细胞和中性粒细胞细胞膜糖基磷脂酰肌醇(GPI)连接的补体调节蛋白衰变加速因子(CD55)和膜反应性溶血抑制物(CD59)表达情况,并探讨其临床意义。方法 2006年7月-2011年3月,采用直接免疫荧光标记法流式细胞仪检测182例血细胞减少患者外周血CD55及CD59表达情况,其中阵发性睡眠性血红蛋白尿(PNH)9例,再生障碍性贫血(AA)-PNH综合征8例,AA 83例,骨髓增生异常综合征51例,自身免疫性溶血性贫血11例,造血功能停滞6例,缺铁性贫血7例,巨幼细胞性贫血4例,脾功能亢进3例。结果 PNH及AA-PNH患者CD55、CD59抗原缺失率均较其他血细胞减少者明显增高。结论流式细胞仪检测外周血中红细胞和中性粒细胞膜CD55和CD59抗原表达缺失率是目前诊断PNH可靠和敏感的方法,也是对PNH、AA-PNH早期诊断敏感指标,并且PNH克隆检测还能为诊断疾病提供鉴别诊断依据。 展开更多

关键词 血细胞减少 阵发性睡眠性血红蛋白尿 衰变加速因子 膜反应性溶血抑制物

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DAF与CD3协同刺激人外周血T细胞活化的实验研究 被引量：5

2

作者 邹强 郑萍 +2 位作者 李华 郭波 谢佩蓉 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期329-332,共4页

目的　探讨人促衰变加速因子 (decay acceleratingfactor,DAF)作为共刺激分子参与T细胞活化的作用机制。方法　观察 3株针对DAF不同SCR的单抗单独使用或者与抗人CD3单抗联合使用时 ,对人外周血T细胞增殖、IL 2分泌以及胞浆Ca2 + 水平的... 目的　探讨人促衰变加速因子 (decay acceleratingfactor,DAF)作为共刺激分子参与T细胞活化的作用机制。方法　观察 3株针对DAF不同SCR的单抗单独使用或者与抗人CD3单抗联合使用时 ,对人外周血T细胞增殖、IL 2分泌以及胞浆Ca2 + 水平的影响。结果　所用 3株抗人DAF单抗不能活化T细胞 ,而抗人DAF单抗与抗人CD3单抗可协同刺激T细胞增殖 ,促进IL 2分泌以及提高胞浆Ca2 + 水平。 展开更多

关键词 CD3协同刺激 外周血 实验研究 促衰变加速因子 单克隆抗体 T细胞活化

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补体过度激活与自身免疫型复发性流产的关系 被引量：8

3

作者 肖世金 赵爱民 鲍世民 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1125-1128,共4页

目的建立自身免疫型复发性流产(RSA)小鼠模型,探讨补体在自身免疫型RSA发病机制中的作用。方法采用子宫注射人β2GP-1免疫Balb/c小鼠(子宫β2GP-1注射组,n=15);分别以子宫无关蛋白注射组(n=6)、子宫佐剂注射组(n=13)、子宫生理盐水(NS)... 目的建立自身免疫型复发性流产(RSA)小鼠模型,探讨补体在自身免疫型RSA发病机制中的作用。方法采用子宫注射人β2GP-1免疫Balb/c小鼠(子宫β2GP-1注射组,n=15);分别以子宫无关蛋白注射组(n=6)、子宫佐剂注射组(n=13)、子宫生理盐水(NS)注射组(n=10)及正常未孕组(n=10)、正常妊娠组(n=15)作为对照。比较各组小鼠胚胎丢失率、胎盘平均质量、外周血补体C3浓度及胎盘组织衰变加速因子(DAF)的质量浓度。结果子宫β2GP-1注射组小鼠胚胎丢失率显著高于正常妊娠组和各子宫注射对照组(P<0.05),胎盘平均质量显著低于正常妊娠组和各子宫注射对照组(P<0.05),外周血补体C3水平和胎盘组织DAF的质量浓度显著低于正常妊娠组和各子宫注射对照组(P<0.05)。结论通过子宫注射人β2GP-1的方法可诱导建立符合自身免疫型RSA临床特征的小鼠模型,补体系统过度激活可能是自身免疫型RSA的发病机制之一。 展开更多

关键词 复发性流产 自身免疫 动物模型 β2GP-1 补体C3 衰变加速因子 小鼠

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异种移植转基因用含杂合增强子UI的人衰变加速因子重组基因的构建 被引量：5

4

作者 刘秉乾 马志方 +3 位作者 李胜芝 张玥 王广有 马腾骧 《天津医科大学学报》 2005年第4期528-530,共3页

目的:构建含杂合增强子UI的人衰变加速因子(DAF)重组基因的表达载体,应用于转基因动物克服异种器官移植排斥反应的研究。方法:ClaI/EcoRI双酶切质粒pXMT2得到UI增强子插入片段(0.3Kb),将其插入pBlue-scriptIISK+克隆载体的相应酶切位点... 目的:构建含杂合增强子UI的人衰变加速因子(DAF)重组基因的表达载体,应用于转基因动物克服异种器官移植排斥反应的研究。方法:ClaI/EcoRI双酶切质粒pXMT2得到UI增强子插入片段(0.3Kb),将其插入pBlue-scriptIISK+克隆载体的相应酶切位点之间;XbaI/BamHI双酶切质粒pGEM-7zf-DAF,得到含人ICAM-2启动子及DAFcDNA序列的插入片段(3.7Kb),将其也插入到pBluescriptIISK+克隆载体的相应酶切位点之间。随后转化细菌,阳性转化菌落质粒抽提及酶切鉴定。设计引物行PCR特异扩增检验。结果:特异性3组酶切重组载体均产生了符合要求的相应条带;PCR扩增出特异的330bp及321bp的片断,符合设计要求。结论:含杂合增强子UI的人衰变加速因子(DAF)重组基因的表达载体构建成功。 展开更多

关键词 异种器官移植 衰变加速因子 基因重组 增强子

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心肺转流不同氧分压对红细胞衰变加速因子的影响 被引量：4

5

作者 王晓军 张红 +1 位作者 蔡回钧 丁君 《临床麻醉学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期388-390,共3页

目的 探讨心肺转流（CPB）中不同动脉氧分压（PaO2）对红细胞衰变加速因子（DAF或CD55）的影响.方法 40例心脏病患者随机均分为四组：紫绀型先天性心脏病高氧分压组（A组）及正常氧分压组（B组）,非紫绀型心脏病高氧分压组（C组）及正... 目的 探讨心肺转流（CPB）中不同动脉氧分压（PaO2）对红细胞衰变加速因子（DAF或CD55）的影响.方法 40例心脏病患者随机均分为四组：紫绀型先天性心脏病高氧分压组（A组）及正常氧分压组（B组）,非紫绀型心脏病高氧分压组（C组）及正常氧分压组（D组）.CPB中,A、C组PaO2控制在300～500 mm Hg,B、D组PaO2控制在100～250 mm Hg.于CPB前（T1）、CPB15 min（T2）、主动脉开放15 min（T3）、术后24 h（T4）采集动脉血,用小鼠抗人CD55 FITC荧光单克隆抗体直接标记,流式细胞仪检测红细胞CD55活性及数量.结果 A组T2、T3时的红细胞CD55活性明显高于T1时（P〈0.05）.但红细胞CD55数量差异无统计学意义.B、C、D三组各时点红细胞CD55活性及数量差异无统计学意义.结论 CPB中高氧分压可使紫绀型心脏病患者的红细胞CD55活性明显增强,缺氧红细胞可能存在再氧合损伤;控制氧分压对红细胞免疫功能有一定的保护作用. 展开更多

关键词 心肺转流 动脉血氧分压 衰变加速因子

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衰变加速因子在Jurkat细胞增殖及分泌IL-2中的作用 被引量：3

6

作者 程晓刚 白云 +1 位作者 姜曼 黎万玲 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期261-264,共4页

目的研究衰变加速因子对 CD3阳性与阴性 Jurkat细胞的增殖效应及对 IL- 2分泌的影响。方法应用 MTT比色实验观察交联 DAF单抗 DG3与固相化抗 CD3联合作用对 CD3阳性与 CD3阴性 Jurkat细胞增殖效应 ;IL - 2依赖 CTL L3H- Td R掺入实验检... 目的研究衰变加速因子对 CD3阳性与阴性 Jurkat细胞的增殖效应及对 IL- 2分泌的影响。方法应用 MTT比色实验观察交联 DAF单抗 DG3与固相化抗 CD3联合作用对 CD3阳性与 CD3阴性 Jurkat细胞增殖效应 ;IL - 2依赖 CTL L3H- Td R掺入实验检测 CD3阳性与 CD3阴性 Jurkat细胞 IL - 2的分泌 ;细胞 EL ISA检测 CD3阳性与 CD3阴性 Jurkat细胞IL - 2 R的表达。结果交联 DG3可协助促进固相化抗 CD3对 CD3阳性 Jurkat细胞的增殖效应和 IL - 2分泌 ,并可引起 IL - 2 Rα链表达增加 ,此作用可被 Src家族酪氨酸激酶抑制剂 PP2所抑制 ,而对 CD3阴性 Jurkat细胞无此作用。结论衰变加速因子可协同促进固相化抗 CD3对 CD3阳性 Jurkat细胞的刺激增殖效应、IL- 2分泌及 IL- 2 R表达增加。 展开更多

关键词 衰变加速因子 JURKAT细胞 细胞增殖 IL-2 IL-2R

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构建人补体衰变加速因子真核载体并转染NIH/3T3成纤维细胞 被引量：2

7

作者 乔庆 陈勇 +2 位作者 窦科峰 张静 李剑平 《医学研究生学报》 CAS 2006年第4期302-305,i0012,共5页

目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecT... 目的:构建人补体衰变加速因子(DAF)真核表达载体pSecTag2/HygroBDAF,并利用壳聚糖组装成纳米微粒复合体,转染小鼠NIH/3T3成纤维细胞。方法:应用PCR方法,从DAFpGEMTEasyVector克隆相关的DNA序列,插入具有相应酶切位点的真核表达载体pSecTag2/HygroB中,构建pSecTag2/HygroBDAF真核表达质粒,并进行酶切鉴定及序列测定;利用壳聚糖包裹质粒,转染小鼠NIH/3T3细胞,并对转染细胞用抗DAF进行免疫组化染色。结果:DAF基因大小为1049bp,与基因序列数据库中记载的人DAFcDNA序列结果完全一致;利用壳聚糖DAF纳米微粒转染NIH/3T3细胞24h后,免疫组化染色显示细胞质弥漫染色阳性。结论:成功构建了人DAF真核表达载体并通过壳聚糖介导转染NIH/3T3细胞。 展开更多

关键词 补体衰变加速因子 壳聚糖 纳米微粒 基因克隆 基因转染

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携带人衰变加速因子基因转基因小鼠的建立 被引量：2

8

作者 王剑鹏 马腾骧 +4 位作者 王广有 李光三 王为先 沈玉 于建康 《中华器官移植杂志》 CAS CSCD 2000年第6期322-324,共3页

目的　通过建立转人衰变加速因子 (DAF)基因小鼠 ,为研究异种器官移植的超急性排斥反应提供有效的研究手段。方法　采用受精卵显微注射技术 ,将人DAF基因导入小白鼠受精卵的原核中。Dot blot及Southern blot杂交确定阳性转基因小鼠。以N... 目的　通过建立转人衰变加速因子 (DAF)基因小鼠 ,为研究异种器官移植的超急性排斥反应提供有效的研究手段。方法　采用受精卵显微注射技术 ,将人DAF基因导入小白鼠受精卵的原核中。Dot blot及Southern blot杂交确定阳性转基因小鼠。以Northern杂交法检测人DAF基因的表达情况。结果　基因注射后共生出小鼠 2 4只 ,4只为转基因小鼠 ,人DAF基因在其中 1只小鼠体内得到表达。结论　所导入的人DAF基因在小鼠的基因组中实现整合及表达。 展开更多

关键词 移植 异种 衰变加速因子 小鼠 转基因

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衰变加速因子在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义 被引量：2

9

作者 赵伟鹏 朱波 +2 位作者 段玉忠 叶明福 陈正堂 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期58-60,共3页

目的检测衰变加速因子(decay accelerating factor,DAF,CD55)在非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)中的表达,分析其表达与临床分期、化疗用药及预后的关系。方法免疫组化法检测8例NSCLC癌旁组织和36例NSCLC手术标本中DA... 目的检测衰变加速因子(decay accelerating factor,DAF,CD55)在非小细胞肺癌(non-small cell lung carcinoma,NSCLC)中的表达,分析其表达与临床分期、化疗用药及预后的关系。方法免疫组化法检测8例NSCLC癌旁组织和36例NSCLC手术标本中DAF的蛋白表达,分析临床资料。结果免疫组化结果显示36例NSCLC标本中,共有18例(50.0%)表达DAF,其中18例肺鳞癌中有15例(83.3%)表达,而16例肺腺癌中有3例(18.8%)表达,两者有显著差异(P<0.05);不同的病理分期的DAF免疫组化平均积分光密度表达有显著性差异(P<0.05);DAF的表达与无病生存期无相关关系(P>0.05)。结论NSCLC中有DAF的表达,尤其是肺鳞癌;提示在NSCLC抗体治疗中应同时阻断DAF的免疫抑制效应。 展开更多

关键词 衰变加速因子 补体依赖细胞毒作用 非小细胞肺癌

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人衰变加速因子基因在猪血管内皮细胞中的表达 被引量：2

10

作者 李胜芝 姚旭东 +1 位作者 王广有 马腾骧 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期50-51,共2页

目的　通过转基因方法使猪的血管内皮细胞表达人DAF蛋白 ,抑制猪供人移植超急性排斥反应。方法　体外培养猪腹主动脉内皮细胞 ,用透射电镜方法进行鉴定。脂质体转染法将含有人DAF基因的真核表达载体PSFFV DAF转染进猪的血管内皮细胞 ,经... 目的　通过转基因方法使猪的血管内皮细胞表达人DAF蛋白 ,抑制猪供人移植超急性排斥反应。方法　体外培养猪腹主动脉内皮细胞 ,用透射电镜方法进行鉴定。脂质体转染法将含有人DAF基因的真核表达载体PSFFV DAF转染进猪的血管内皮细胞 ,经G418筛选 (浓度为10 0mg/L) 12d ,获得具有抗性的克隆 ,进而增殖 ,传代 ,保种。通过流式细胞仪检测转染细胞DAF的表达情况。结果　转染了基因的细胞与未转染基因的细胞在流式细胞仪检测中其莹光强度分别为 82 .18和 1.69。转染的细胞 5代后其荧光强度为 71.96。结论　转染了人DAF基因的细胞荧光强度明显高于对照组。导入的外源基因在细胞内能高效、稳定地表达 ,为转基因猪的建立奠定一定的基础。 展开更多

关键词 基因转移 衰变加速因子 血管内皮细胞 动物实验

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衰变加速因子介导Jurkat细胞的PTK信号传递机制的实验研究 被引量：1

11

作者 程晓刚 白云 +1 位作者 姜曼 黎万玲 《上海免疫学杂志》 CSCD 北大核心 2002年第2期96-98,112,共4页

为研究衰变加速因子 (DAF )介导Jurkat细胞信号传递的机制 ,本文应用免疫印迹及化学发光技术 (ECL)发现交联DAF单抗可使CD3+ 与CD3 Jurkat细胞总蛋白酪氨酸磷酸化水平增加 ,但磷酸化水平不同。免疫共沉淀实验检测到DAF与Src家族酪氨酸激... 为研究衰变加速因子 (DAF )介导Jurkat细胞信号传递的机制 ,本文应用免疫印迹及化学发光技术 (ECL)发现交联DAF单抗可使CD3+ 与CD3 Jurkat细胞总蛋白酪氨酸磷酸化水平增加 ,但磷酸化水平不同。免疫共沉淀实验检测到DAF与Src家族酪氨酸激酶 (SrcPTK )可发生共沉淀反应。去污剂不溶膜复合物 (DIG )抽提与鉴定检测到DIG内有SrcPTK与DAF的特异性聚集。说明DAF对Jurkat细胞的信号传递有辅助激活效应 。 展开更多

关键词 衰变加速因子 JURKAT细胞 信号传递 膜微区 PTK信号传递机制 实验研究

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人红细胞膜DAF的亲和纯化及活性研究 被引量：2

12

作者 郑萍 邹强 +3 位作者 周伟 谢佩蓉 李华 郭波 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1316-1319,共4页

目的　获得纯化并具有生物学活性的人红细胞膜促衰变加速因子。方法　经胰蛋白酶消化、正丁醇抽提及DE3 2离子交换色谱和抗体亲和层析等步骤从人红细胞膜影中分离纯化人红细胞膜DAF。以SDS PAGE及免疫印迹实验检测纯度及抗原特异性 ,以C... 目的　获得纯化并具有生物学活性的人红细胞膜促衰变加速因子。方法　经胰蛋白酶消化、正丁醇抽提及DE3 2离子交换色谱和抗体亲和层析等步骤从人红细胞膜影中分离纯化人红细胞膜DAF。以SDS PAGE及免疫印迹实验检测纯度及抗原特异性 ,以C3转化酶体外组装实验及促衰变加速活性实验检测其补体抑制活性。结果　 40 0ml人全血最终可得纯化DAF约 42 0 μg ,回收率达 2 6% ;比活性为 4 5× 10 5U/mg ;纯化产物在SDS PAGE中表现为 70× 10 3 的单一蛋白条带 ,并在免疫印迹实验中可与抗人DAF单抗特异性结合。在生物学活性实验中 ,纯化产物既可促进C3转化酶的衰变 ,也可抑制C3转化酶的形成。 展开更多

关键词 人红细胞DAF 亲和纯化 活性研究

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促衰变因子在三阴性乳腺癌中的表达及其对预后的影响 被引量：2

13

作者 李铁军 张海燕 姜伟 《中国医学装备》 2015年第12期41-44,共4页

目的:探讨长度促衰变因子(DAF,CD55)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及与预后的关系。方法:用免疫组化S-P法检测100例TNBC及50例TNBC旁乳腺组织中CD55的表达;结合临床病理和随访资料,建立Cox模型进行预后分析。结果:CD55在TNBC中的表达率... 目的:探讨长度促衰变因子(DAF,CD55)在三阴性乳腺癌(TNBC)中的表达及与预后的关系。方法:用免疫组化S-P法检测100例TNBC及50例TNBC旁乳腺组织中CD55的表达;结合临床病理和随访资料,建立Cox模型进行预后分析。结果:CD55在TNBC中的表达率为56.0%,在癌旁乳腺中的表达率为8.0%,两者之间差异有统计学意义(x2=32.0,P<0.05)。CD55的表达与肿瘤大小、临床分期及腋下淋巴结转移均具有显著相关(x2=7.404,x2=8.688,x2=4.802;P<0.05),而与年龄和组织学分级无显著相关。多因素分析显示,年龄、临床分期、CD55及腋淋巴结转移情况4项指标是影响患者DFS的独立危险因素;临床分期及腋淋巴结转移情况两项指标是影响患者OS的独立危险因素。结论:CD55的高表达可能参与了TNBC的发生、发展过程,并与预后有相关性,提示CD55的表达可能成为判断TNBC浸润进展及预后的指标之一。 展开更多

关键词 三阴性乳腺癌 促衰变因子 免疫组织化学 预后

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酵母细胞表面展示的hDAF对补体在酵母细胞表面沉积的抑制作用 被引量：2

14

作者 郭波 郑萍 +2 位作者 谢佩蓉 吴玉章 邹强 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期269-271,共3页

目的 :研究酿酒酵母细胞表面展示的人衰变加速因子 (hDAF) ,是否具有天然衰变加速因子的补体抑制活性。方法 :先用正常人血清处理酵母细胞EBY10 0 ,然后用流式细胞仪检测酵母细胞表面C5b 9复合物的沉积和hDAF在酵母细胞表面的表达。结... 目的 :研究酿酒酵母细胞表面展示的人衰变加速因子 (hDAF) ,是否具有天然衰变加速因子的补体抑制活性。方法 :先用正常人血清处理酵母细胞EBY10 0 ,然后用流式细胞仪检测酵母细胞表面C5b 9复合物的沉积和hDAF在酵母细胞表面的表达。结果 :酵母细胞EBY10 0可直接活化人血清中的补体成分 ,导致酵母细胞表面C5b 9的沉积 ;而表达DAF的酵母细胞表面C5b 9的沉积明显减少。结论 :酵母细胞表面展示的DAF可正确折叠 。 展开更多

关键词 补体 衰变加速因子 酵母细胞 表面展示

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人DAF基因在转基因小鼠中的遗传与表达 被引量：1

15

作者 王剑鹏 马腾骧 +3 位作者 王广有 沈玉 李光三 于建康 《生命科学研究》 CAS CSCD 2000年第4期321-327,共7页

为研究人 DAF基因在小鼠体内遗传与表达的规律 ,从质粒 p SFFV- DAF分离出一段包含人 DAF基因的 DNA片段 .采用受精卵显微注射法建立转人 DAF基因小鼠 .提取出生小鼠的染色体 DNA,经 Dot- blot与 Southern- blot杂交相结合确定首建转基... 为研究人 DAF基因在小鼠体内遗传与表达的规律 ,从质粒 p SFFV- DAF分离出一段包含人 DAF基因的 DNA片段 .采用受精卵显微注射法建立转人 DAF基因小鼠 .提取出生小鼠的染色体 DNA,经 Dot- blot与 Southern- blot杂交相结合确定首建转基因小鼠 ,并经Dot- blot杂交研究人 DAF基因在转基因小鼠体内的遗传特征 ,Northern杂交确定其表达情况 .小鼠受精卵经基因导入后 ,共生出 2 4只小鼠 ,其中 4只被确定为首建转基因小鼠 ,整合率为 1 5% .在首建转基因小鼠两两交配生出的 F1代小鼠中分别有 70 %和 75%继续携带人DAF基因 .首建转基因小鼠中有 1只小鼠在 RNA水平表达了人 DAF基因 .可见 ,人 DAF基因整合入小鼠基因组中 ,并能够稳定遗传及表达 . 展开更多

关键词 衰变加速因子 转基因小鼠 异种器官移植 DAF基因 表达

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人α1，2-岩藻糖苷转移酶和衰变加速因子基因转移克服异种移植急性血管排斥反应的研究

16

作者 刘秉乾 武玉东 +6 位作者 魏金星 李沛寰 李光三 张立霞 李胜芝 张志宏 马腾骧 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期780-782,共3页

目的观察人α1，2-岩藻糖苷转移酶（HT）和衰变加速因子（DAF）基因转移对抑制血管内皮细胞激活从而克服异种移植急性血管排斥反应的能力。方法通过显微注射建立转基因小鼠动物模型，Southern印迹杂交和流式细胞计数筛选出人HT和／或DA... 目的观察人α1，2-岩藻糖苷转移酶（HT）和衰变加速因子（DAF）基因转移对抑制血管内皮细胞激活从而克服异种移植急性血管排斥反应的能力。方法通过显微注射建立转基因小鼠动物模型，Southern印迹杂交和流式细胞计数筛选出人HT和／或DAF基因整合与表达阳性的子代转基因小鼠。研究表达不同目的基因的转基因小鼠血管内皮细胞与15％人血清孵育后溶破细胞的百分数，免疫细胞化学染色检测细胞核因子（NF）-KB的激活，流式细胞计数检测细胞表面血管细胞黏附分子（VCAM）-1的表达。结果子代小鼠血管内皮细胞人HT／DAF共基因表达7只，人HT与DAF单基因表达分别为6只和8只。与15％人血清孵育后，人HT／DAF共表达组细胞的溶破细胞百分数（4±2）％低于人HT表达组细胞（25±10）％、人DAF表达组细胞（31±11）％及正常组细胞（76±24）％（P均〈0．05）。转双基因抑制细胞NF—KB激活的能力强于转人HT或DAF单基因，且转双基因细胞表面VCAM-1的表达较转单基因细胞显著降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论人HT／DAF基因联合转移具有部分抑制血管内皮细胞激活从而克服异种移植急性血管排斥反应的能力。 展开更多

关键词 异种移植 急性排斥反应 衰变加速因子 基因表达

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人红细胞膜衰变加速因子的分离纯化及其生物学活性鉴定

17

作者 邹强 郑萍 +3 位作者 周伟 谢佩蓉 李华 郭波 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期61-65,共5页

目的　获得纯化并具有生物学活性的人红细胞膜衰变加速因子。方法　经胰蛋白酶消化、正丁醇抽提及DE32和Sepharose 6B色谱分离等步骤从人红细胞膜影中分离纯化人红细胞膜衰变加速因子 (DAF)。以SDS PAGE及免疫印迹实验检测纯度及抗原特... 目的　获得纯化并具有生物学活性的人红细胞膜衰变加速因子。方法　经胰蛋白酶消化、正丁醇抽提及DE32和Sepharose 6B色谱分离等步骤从人红细胞膜影中分离纯化人红细胞膜衰变加速因子 (DAF)。以SDS PAGE及免疫印迹实验检测纯度及抗原特异性 ,以C3转化酶体外组装实验及促衰变活性实验检测其补体抑制活性。结果　 4 0 0mL人全血最终可得纯化DAF约 370 μg ,回收率达 10 .4 % ;比活性为每毫克 2 .2 4× 10 5units;纯化产物在SDS PAGE表现为 70 0 0 0u的单一蛋白条带 ,在免疫印迹实验中可与抗人DAF单抗特异性结合。在生物学活性实验中 ,纯化产物既可促进C3转化酶衰变 ,也可抑制C3转化酶形成。 展开更多

关键词 衰变加速因子 分离纯化 C3转化酶 生物学活性 鉴定

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衰变加速因子在神经病理性疼痛中的作用

18

作者 朱海娟 王金保 《现代中西医结合杂志》 CAS 2014年第5期460-462,共3页

目的观察衰变加速因子(DAF)在2种外周神经损伤模型大鼠脊髓背角的表达情况,旨在探索它在神经病理性疼痛(NPP)发病机制中的作用。方法将60只健康雄性SD大鼠分为假手术组、CCI组和SNI组3组,按分组制作模型,分别于术前及术后1,3,7 d,用热... 目的观察衰变加速因子(DAF)在2种外周神经损伤模型大鼠脊髓背角的表达情况,旨在探索它在神经病理性疼痛(NPP)发病机制中的作用。方法将60只健康雄性SD大鼠分为假手术组、CCI组和SNI组3组,按分组制作模型,分别于术前及术后1,3,7 d,用热刺激和机械刺激法测定大鼠的痛阈值变化,评估其可靠性后,于术后7 d处死大鼠,取L4—6段脊髓背角,用Western-blot和免疫组化两种技术测定其DAF蛋白含量。结果 CCI组和SNI组大鼠于术后1,3,7 d痛阈值降低,与假手术组比较有显著性差异,表明模型制作成功。Western-blot检测显示,3组模型大鼠脊髓背角DAF表达发生不同程度降低,CCI组和SNI组与假手术组相比有显著性差异。免疫组化染色显示:CCI组、SNI组大鼠脊髓背角DAF阳性细胞较假手术组显著减少。结论 NPP大鼠脊髓背角CD55蛋白表达下降,可能是此处发生补体级联反应的重要原因,CD55在NPP的形成中发挥作用。 展开更多

关键词 CD55蛋白 神经病理性疼痛 大鼠 衰变加速因子

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衰变加速因子(DAF)与异种器官移植免疫

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作者 叶华虎 姜恒 魏泓 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第z1期104-107,共4页

超急性排斥反应一直是异种器官移植中的主要障碍之一 ,其分子基础是补体及其激活。hDAF作为一种重要的膜结合补体调节蛋白 ,是同源限制分子。转基因技术为跨越DAF的同源限制性发挥了重要作用 ,将人DAF基因插入猪基因组 ,获得转基因猪 。

关键词 DAF 超急性排斥反应 转基因技术 异种器官移植

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猪导入人类促衰变因子(hDAF)的整合与表达 被引量：11

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作者 魏庆信 樊俊华 +6 位作者 郑新民 陈付学 熊忠良 华文君 曹军平 李文化 孙方臻 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期219-221,共3页

将人类促衰变因子 ( human decay accelerating factor,h DAF)基因显微注入 51 7枚猪的受精卵 ,移植到2 6头受体母猪的输卵管内。 2 1头怀孕 ,产仔 93头。产仔后 ,取仔猪的耳或尾组织 ,提取总 DNA。以 5′-TGGCGAGAAGGACTCAGTGATCT-3′... 将人类促衰变因子 ( human decay accelerating factor,h DAF)基因显微注入 51 7枚猪的受精卵 ,移植到2 6头受体母猪的输卵管内。 2 1头怀孕 ,产仔 93头。产仔后 ,取仔猪的耳或尾组织 ,提取总 DNA。以 5′-TGGCGAGAAGGACTCAGTGATCT-3′和 5′-TGAACTGTTGGTGGGACCTTGGA-3′为引物 ,进行 PCR扩增 ,有 1 8头显示阳性。转基因效率为 3 .5%( 1 8/ 51 7)。对存活的 1 4头转基因猪用免疫荧光法进行检测 ,并采用 MPIAS-50 0多媒体彩色病理图文分析系统进行图像分析 ,其中有 7头的动脉肌肉层中显现有荧光 ,其平均灰度在 1 2 7.3～ 1 70 . 展开更多

关键词 转基因猪 促衰变因子 基因导入 异种器官移植

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