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红外荧光成像技术分析DNA-蛋白复合物电泳迁移率的变动 被引量:3
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作者 王毅飞 蔡德鸿 +3 位作者 陈宏 莫永炎 伊娜 邢飞跃 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期289-291,共3页
目的通过红外荧光技术研究糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)与过氧化物酶体增殖物活化受体γ2(PPARγ2)启动子寡核苷酸的结合,了解一种非放射性研究电泳迁移率变动分析的新方法。方法原核表达制备GILZ蛋白,与红外荧光染料IRDye800标... 目的通过红外荧光技术研究糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白(GILZ)与过氧化物酶体增殖物活化受体γ2(PPARγ2)启动子寡核苷酸的结合,了解一种非放射性研究电泳迁移率变动分析的新方法。方法原核表达制备GILZ蛋白,与红外荧光染料IRDye800标记的PPARγ2启动子寡核苷酸结合,丙烯酰胺非变性胶电泳分离,Odyssey红外荧光成像系统扫描分析。结果一条DNA-蛋白结合复合物图像清晰直观,信号强度随着蛋白量的增加而增加。结论红外荧光技术可用于DNA-蛋白复合物电泳迁移率变动的分析,具有灵敏度高、操作方便的优点。 展开更多
关键词 红外荧光 电泳迁移率 dna-蛋白复合物 糖皮质激素诱导亮氨酸拉链蛋白 过氧化物酶体增殖物活化受体γ2
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用光波导光模光谱技术研究DNA-DNA结合蛋白相互作用 被引量:3
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作者 吴中伟 刘全俊 +5 位作者 吴凌伟 谢骁 庄萤 温恬 白云飞 陆祖宏 《光学学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第3期521-525,共5页
探讨了应用光波导光模光谱(Optical waveguide lightmode spectroscopy,OWLS)技术研究DNA-DNA结合蛋白相互作用的可行性和灵敏性。以固定在传感器芯片表面的DNA探针为捕捉分子,溶液中同时含有探针结合序列和NF—κB结合位点序列的寡核... 探讨了应用光波导光模光谱(Optical waveguide lightmode spectroscopy,OWLS)技术研究DNA-DNA结合蛋白相互作用的可行性和灵敏性。以固定在传感器芯片表面的DNA探针为捕捉分子,溶液中同时含有探针结合序列和NF—κB结合位点序列的寡核苷酸与NF-κB亚单位p50同源二聚体形成的DNA-蛋白质复合物为检测分子,用光波导光模光谱检测技术建立非标记DNA-DNA结合蛋白相互作用检测研究体系。利用这一体系对不同样品中NF-κB p50浓度和具不同NF-κB结合位点序列的寡核苷酸与NF-κB p50亲合和力进行检测。样品中低至0.33 nmol/1的NF-κB p50被光波导光模光谱检测出,不同的NF-κB结合序列与NF-κB p50亲合力有显著的差异。研究发现,光波导光模光谱技术可以用于DNA-DNA结合蛋白相互作用研究,所建立的非标记检测研究体系可以进行样品中结合蛋白含量高灵敏检测和核酸序列与结合蛋白的亲合力的检测研究。 展开更多
关键词 医用光学与生物技术 传感器 非标记检测 光波导光模光谱技术 dna-蛋白质复合物 NF-ΚB P50
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SSINCC: Simple separation of interacting nucleoprotein complex components
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作者 Roderick A. Slavcev Nafiseh Nafissi Tranum Kaur 《Advances in Biological Chemistry》 2012年第2期146-151,共6页
Protein-DNA binding assays have been used in a va-riety of applications from fundamental studies re-garding the binding process itself to serve as probes for the detection, quantification and separation of target anal... Protein-DNA binding assays have been used in a va-riety of applications from fundamental studies re-garding the binding process itself to serve as probes for the detection, quantification and separation of target analytes. Here we describe a novel method of analyzing and identifying intermolecular DNA interactions that allows for the simple separation of interacting nucleoprotein complex components (SSINCC), focusing specifically on DNA-DNA interactions using P1 plasmid active partition system nucleoprotein complexes as a model to demonstrate DNA sequence specificity and tolerance of composite factor complexity. Traditional and recent assays of protein-DNA interaction are summarized and compared with SSINC. Although SSINC is examined here employing P1 partition nucleoprotein complex as an example of DNA-DNA intermolecular association, universal applications of this methodology to nucleo-protein complex studies can be envisioned. 展开更多
关键词 dna-protein-dna Interaction Assay PLASMID PARTITION NUCLEOprotein complex Specific NUCLEOprotein complex Separation
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外源基因高效转移与整合策略:人工引导转化系统
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作者 郭骁才 《山西农业科学》 2000年第4期F002-F002,F003,共2页
外源基因的引导转化是相对直接转化而言 ,包括两类蛋白分子对转移DNA的的共价结合和包被 ,涉及转移DNA复合物的形成、转移和在受体细胞核基因中的整合。认为引导转化将提高外源基因转移和整合的频率。在此认识的基础上 。
关键词 外源基因 引导转化 转移dna复合物 整合效率
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DNA及其蛋白质复合体的电镜观察及研究应用 被引量:1
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作者 刘玉军 小川智子 李一勤 《生物工程进展》 CSCD 2000年第6期79-83,67,共6页
对生物大分子形状的正确了解有助于对其功能的解析。事实上 ,借助于电子显微镜观察法 ,使我们在对构成细胞各组分功能的探讨和研究方面收益匪浅。自从生物学家们认识到DNA在细胞行使其功能中的重要性以来 ,电子显微镜便成为一种最重要... 对生物大分子形状的正确了解有助于对其功能的解析。事实上 ,借助于电子显微镜观察法 ,使我们在对构成细胞各组分功能的探讨和研究方面收益匪浅。自从生物学家们认识到DNA在细胞行使其功能中的重要性以来 ,电子显微镜便成为一种最重要的技术手段而被用于分析DNA的结构 ,研究DNA的复制、重组和转录机制。近年来 ,这一领域的研究技术又有了非常大的改进 ,使人们已经能够借助于电子显微镜 ,观察介入DNA复制、重组和转录等过程中的DNA 蛋白质复合体的活体状态。今后 ,在对生物大分子的活体行为进行探讨时 ,电子显微镜技术将发挥越来越重要的作用。 展开更多
关键词 dna dna-蛋白质复合体 电子显微镜观察 结构
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