一种用于PCR的植物基因组DNA快速制备方法 被引量：29

1

作者 王兰 龙云铭 刘耀光 《分子植物育种》 CAS CSCD 2009年第2期425-428,共4页

本文介绍了一种用于PCR的植物基因组DNA的快速制备方法。该方法只需将少量（4～6mg）植物叶片、适量（200μL）TE缓冲液、和一粒钨合金珠放入1个2mL离心管，在多功能组织细胞研磨器中振动5min破碎组织后，直接取1μL DNA溶液作为PCR的... 本文介绍了一种用于PCR的植物基因组DNA的快速制备方法。该方法只需将少量（4～6mg）植物叶片、适量（200μL）TE缓冲液、和一粒钨合金珠放入1个2mL离心管，在多功能组织细胞研磨器中振动5min破碎组织后，直接取1μL DNA溶液作为PCR的模板。本方法具有简单快速、操作效率高、成本低、扩增效果好等优点，特别适合于大量样品的基因型检测。 展开更多

关键词 水稻 dna制备 PCR

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高多糖含量植物——莲DNA的提取方法 被引量：21

2

作者 王经源 郭明亮 +1 位作者 林文雄 吴锦忠 《福建稻麦科技》 2004年第1期8-9,共2页

提出一种适用于莲等高多糖含量植物叶片组织的DNA提取方法。用CTAB -free缓冲液对叶片组织匀浆洗涤后再进行DNA提取 ,可有效克服多糖等次生代谢物质对提取的干扰 ,所得DNA的分子量达 49kb ,OD2 6 0 /OD2 80 比值为 1 87± 0 0 6,... 提出一种适用于莲等高多糖含量植物叶片组织的DNA提取方法。用CTAB -free缓冲液对叶片组织匀浆洗涤后再进行DNA提取 ,可有效克服多糖等次生代谢物质对提取的干扰 ,所得DNA的分子量达 49kb ,OD2 6 0 /OD2 80 比值为 1 87± 0 0 6,产率为2 3 0～ 3 2 0 μg/ (g·鲜重 ) 。 展开更多

关键词 多糖 含量 莲 dna 提取方法 次生代谢物质

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灰树花总DNA的制备及基因组文库的构建 被引量：10

3

作者 徐志祥 程度 李宝健 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期711-713,共3页

灰树花是一种珍贵的药用真菌,因为多糖含量较高,较难获得高质量的总DNA,本文提出了一种制备高质量灰树花总DNA及构建灰树花基因组文库的方法。该方法制备的灰树花总DNA,经Sau3AⅠ酶切后,用于构建基因组文库,可得到2×105个转化子/50... 灰树花是一种珍贵的药用真菌,因为多糖含量较高,较难获得高质量的总DNA,本文提出了一种制备高质量灰树花总DNA及构建灰树花基因组文库的方法。该方法制备的灰树花总DNA,经Sau3AⅠ酶切后,用于构建基因组文库,可得到2×105个转化子/50mg,平均插入片段为14kb。为下一步克隆灰树花中的基因以及进行其他分子生物学研究奠定了基础。 展开更多

关键词 灰树花 dna提取 基因组文库

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用于DNA提取的刺桫椤叶片组织保存方法研究 被引量：9

4

作者 王经源 黄儒珠 《福建师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 2002年第1期82-85,共4页

用一种由 1 .5 % SDS,1 0 0 m mol/ L Tris( p H8.3) ,5 0 m mol/ L EDTA( p H8.0 ) ,5 0 0 m mol/L Na Cl和 5 0 0 m mol/ Lβ-巯基乙醇组成的 SDS提取液保存野外采集的刺桫椤 ( Alsophila spinulosa)叶片组织 ,结果表明 ,保存 7d、 1 ... 用一种由 1 .5 % SDS,1 0 0 m mol/ L Tris( p H8.3) ,5 0 m mol/ L EDTA( p H8.0 ) ,5 0 0 m mol/L Na Cl和 5 0 0 m mol/ Lβ-巯基乙醇组成的 SDS提取液保存野外采集的刺桫椤 ( Alsophila spinulosa)叶片组织 ,结果表明 ,保存 7d、 1 5 d、 30 d、 90 d、 1 80 d(室温下 )的刺桫椤叶片组织提得的 DNA分子量与鲜叶一致 ,均大于 4 8kb,得率为 6 0 0～ 1 2 0 0 μg/ g· FW.采自同一植株不同保存时间的叶片组织获得的 DNA用于 RAPD分析 ,结果完全一致 .用该方法保存的 8个刺桫椤天然居群的 91份样品 ,提得的 展开更多

关键词 dna提取 保存方法 RAPD 棘桫椤 叶片组织 保存时间 植物材料保存

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从冻藏凝血块中制备DNA技术 被引量：13

5

作者 赵庆伟 申萍 +2 位作者 周梦玲 张华 余铭鹏 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 1998年第3期257-258,共2页

从凝血块中分离DNA技术在现有分子生物学实验技术参考书中没有具体的叙述。本文归纳出一套自冻藏凝血块中制备高分子量基因组DNA技术，经长期应用表明该方法简便可靠．易于掌握．可快速地进行大量标本的DNA制备；尤其适用于流行病学现... 从凝血块中分离DNA技术在现有分子生物学实验技术参考书中没有具体的叙述。本文归纳出一套自冻藏凝血块中制备高分子量基因组DNA技术，经长期应用表明该方法简便可靠．易于掌握．可快速地进行大量标本的DNA制备；尤其适用于流行病学现场调查采集的血液标本的处理。 展开更多

关键词 冻藏凝血块 制备 dna

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适宜AFLP分析的龙眼基因组DNA提取方法 被引量：9

6

作者 李冬波 李江舟 朱建华 《西南农业学报》 CSCD 2007年第3期478-480,共3页

以龙眼“石硖”、“大乌圆”、“大广眼”、“龙荔”叶片为试材,研究了一种适宜AFLP分析的龙眼基因组DNA提取方法,其改良策略是:在细胞核被裂解前先除去多酚类等次生物质,防止多酚类的氧化,细胞裂解后再加入10%的CTAB,进一步除去杂质。... 以龙眼“石硖”、“大乌圆”、“大广眼”、“龙荔”叶片为试材,研究了一种适宜AFLP分析的龙眼基因组DNA提取方法,其改良策略是:在细胞核被裂解前先除去多酚类等次生物质,防止多酚类的氧化,细胞裂解后再加入10%的CTAB,进一步除去杂质。此方法不仅适用于嫩叶采样,也适用于老叶采样,所提取的基因组DNA可成功进行AFLP标记分析,为龙眼的分子生物学研究提供了科学依据。 展开更多

关键词 龙眼 dna提取 AFLP

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刺桫椤DNA的简便快速提取方法 被引量：9

7

作者 王经源 黄儒珠 《福建林学院学报》 CSCD 北大核心 2001年第4期376-379,共4页

采用 SDS高盐提取介质简便快速提取刺桫椤 ( Alsophila spinulosa)叶片 DNA,整个提取过程可在 1 0 0 min内完成 ,且对鲜叶或用硅胶快速干燥的干叶均适用 .提取的 DNA相对分子量为48kb,OD2 60 /OD2 80 =1 .84± 0 .0 3;DNA 得率分别... 采用 SDS高盐提取介质简便快速提取刺桫椤 ( Alsophila spinulosa)叶片 DNA,整个提取过程可在 1 0 0 min内完成 ,且对鲜叶或用硅胶快速干燥的干叶均适用 .提取的 DNA相对分子量为48kb,OD2 60 /OD2 80 =1 .84± 0 .0 3;DNA 得率分别为 :60 0～ 1 2 0 0 μg/( g·鲜叶 ) ,35 0～ 5 5 0 μg/( g·干叶 ) ;提取的 DNA无需经 RNase消化等后处理 ,即可用于限制性内切酶酶切和 展开更多

关键词 刺桫椤 dna提取 限制性内切酶消化 RAPD SDS高盐提取介质

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DNA制剂对中老龄大鼠组织的抗氧化作用 被引量：7

8

作者 徐跃飞 任凤 赵宝昌 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2004年第3期323-324,共2页

目的　观察DNA制剂对中老龄大鼠心、肝和肾组织过氧化脂质含量和超氧物歧化酶活性的影响 ,探讨其抗氧化作用及机制。方法　选择 2 0只健康SD大鼠 ,随机分为对照组和DNA制剂治疗组 ,每日分别按DNA0 ,3 0mg腹腔注射 ,连续 2 2d。在第 2 3... 目的　观察DNA制剂对中老龄大鼠心、肝和肾组织过氧化脂质含量和超氧物歧化酶活性的影响 ,探讨其抗氧化作用及机制。方法　选择 2 0只健康SD大鼠 ,随机分为对照组和DNA制剂治疗组 ,每日分别按DNA0 ,3 0mg腹腔注射 ,连续 2 2d。在第 2 3d时 ,宰杀大鼠 ,采集心、肝和肾组织 ,测定其匀浆中过氧化脂质 (LPO)含量和超氧物歧化酶 (SOD)的活性。结果　与对照组比较 ,DNA治疗组大鼠心、肝和肾组织LPO水平有不同程度的下降 (P <0 0 5) ,SOD活性有不同程度的提高 (P <0 0 5)。结论　DNA能直接捕获自由基和间接通过提高氧自由基清除剂活性发挥复合抗氧化作用 ,对延缓心。 展开更多

关键词 dna制剂 自由基 抗氧化作用

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基因DNA制备方法的探讨 被引量：8

9

作者 刘伏玲 倪晓燕 马咸成 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 2002年第9期70-71,76,共3页

目的 :探讨基因组DNA的制备方法。方法 :酚 -氯仿法、改良盐析法及口腔粘膜法。结果 :三种方法提取的DNA产量均能满足PCR及基因分型的需要。结论 :改良的盐析法相对简单、经济和快速 ,更适合临床上基因诊断的需要 ;而口腔粘膜法特别适... 目的 :探讨基因组DNA的制备方法。方法 :酚 -氯仿法、改良盐析法及口腔粘膜法。结果 :三种方法提取的DNA产量均能满足PCR及基因分型的需要。结论 :改良的盐析法相对简单、经济和快速 ,更适合临床上基因诊断的需要 ;而口腔粘膜法特别适用于儿童及家系调查。 展开更多

关键词 dna 制备 盐析 上皮细胞

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一种应用PCR缓冲液快速制备水稻DNA模板的方法 被引量：6

10

作者 田孟祥 张时龙 +3 位作者 余本勋 何友勋 叶永印 李雪松 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期438-442,共5页

本研究介绍一种应用PCR缓冲液快速制备水稻DNA模板的方法。操作方法如下:取少量水稻叶片,用剪刀剪碎后移至200μL离心管或96孔PCR板中,在每个样品中加入50μL 0.5倍的PCR扩增缓冲液,置于PCR基因扩增仪上在95℃条件下煮12 min,取出,无需... 本研究介绍一种应用PCR缓冲液快速制备水稻DNA模板的方法。操作方法如下:取少量水稻叶片,用剪刀剪碎后移至200μL离心管或96孔PCR板中,在每个样品中加入50μL 0.5倍的PCR扩增缓冲液,置于PCR基因扩增仪上在95℃条件下煮12 min,取出,无需离心,所得提取液直接作为DNA模板用于PCR扩增。结果表明,该方法所制备的水稻DNA模板在PCR扩增中稳定、准确,其效果与用常规SDS法提取的相当,且这种DNA模板可在短期内保存而不影响扩增效率。该方法具有成本低、操作快速简便等优点,适合推广应用。 展开更多

关键词 PCR缓冲液 水稻 dna模板 dna制备

原文传递

大熊猫气味标记DNA的制备和序列分析 被引量：2

11

作者 丁波 Oliver A.Ryder +3 位作者 张亚平 张金国 张成林 张锡格 《Zoological Research》 CAS CSCD 1998年第5期344-349,共6页

大熊猫气味标记在其个体间的通讯中具有重要意义。用不同方法收集了７只大熊猫个体的９个气味标记样品，运用ＩｎｓｔａｇｅｎｅＫｉｔ制备出了ＤＮＡ。采用ＰＣＲ扩增线粒体Ｄ－环区和细胞色素ｂ基因、ＴｈｒｔＲＮＡ基因片段并作序... 大熊猫气味标记在其个体间的通讯中具有重要意义。用不同方法收集了７只大熊猫个体的９个气味标记样品，运用ＩｎｓｔａｇｅｎｅＫｉｔ制备出了ＤＮＡ。采用ＰＣＲ扩增线粒体Ｄ－环区和细胞色素ｂ基因、ＴｈｒｔＲＮＡ基因片段并作序列分析。结果提示，不同收集方式所得气味标记样品均有ＤＮＡ，但用干棉花棒收集样品的方法最佳。该方法为大熊猫的遗传多样性研究提供了新的简捷有效的ＤＮＡ来源。 展开更多

关键词 大熊猫 气味标记 dna制备 序列分析

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TTV核酸模板快速制备方法 被引量：1

12

作者 苏明权 冯继红 +5 位作者 于文彬 徐光华 马越云 张建芳 张林 刘家云 《第四军医大学学报》 北大核心 2001年第19期1781-1783,共3页

目的　寻求建立适合大批量临床标本检测 TT病毒(TTV)核酸快速制备方法 ,直接用于 PCR扩增 .方法　应用蛋白酶 K裂解酚氯仿抽取法与直接快速裂解法 ,分别制备TTV核酸做 PCR模板 ,用于 TTV的聚合酶链反应的快速检测 .结果　在 30例非甲～... 目的　寻求建立适合大批量临床标本检测 TT病毒(TTV)核酸快速制备方法 ,直接用于 PCR扩增 .方法　应用蛋白酶 K裂解酚氯仿抽取法与直接快速裂解法 ,分别制备TTV核酸做 PCR模板 ,用于 TTV的聚合酶链反应的快速检测 .结果　在 30例非甲～非庚型肝炎血清和 5 0例慢性乙型肝炎患者血清 ,应用经典的蛋白酶 K裂解酚氯仿抽取法和直接快速裂解法 ,分别制备 TTV核酸模板 ,在相同条件下进行PCR扩增 ,结果两种制备方法的符合率为 89% .结论　 TTV是一种新发现的肝炎病毒 ,目前主要以实验室检测病毒核酸的存在为诊断依据 ,建立了具有快速、简便、适合大批量临床标本中 TTV核酸制备方法 ,对 TTV肝炎的快速诊断 。 展开更多

关键词 TT病毒 聚合酶链反应 核酸制备 诊断 肝炎病毒

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3种保存血样方法对山羊DNA制备的影响

13

作者 苟本富 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第5期1499-1500,共2页

采取全血4℃保存(方法Ⅰ)、沉淀白细胞加消化液室温保存(方法Ⅱ)和全血加SDS-EDTANa2缓冲液室温保存(方法Ⅲ)等3种血样保存方法,用常规方法制备山羊DNA并对其效果进行评价。结果表明:方法Ⅰ、Ⅱ均能得到较纯净、完整的DNA,方法Ⅲ操作简... 采取全血4℃保存(方法Ⅰ)、沉淀白细胞加消化液室温保存(方法Ⅱ)和全血加SDS-EDTANa2缓冲液室温保存(方法Ⅲ)等3种血样保存方法,用常规方法制备山羊DNA并对其效果进行评价。结果表明:方法Ⅰ、Ⅱ均能得到较纯净、完整的DNA,方法Ⅲ操作简便、得率较高,但DNA有一定降解。方法Ⅱ可作为野外远距离采血的首选方法。 展开更多

关键词 山羊全血 保存方法 dna制备

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瓠瓜类型砧木品种根系DNA提取方法比较及指纹图谱构建

14

作者 宋慧 张香琴 +3 位作者 应泉盛 严蕾艳 王迎儿 王毓洪 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期401-408,共8页

为利用瓠瓜砧木根系提取DNA进行品种真实性分子检测,本研究比较了CTAB法(方法 1)、SDS简易法(方法 2)、SDS法(方法 3)、TPS法(方法 4)、快速制备法(方法 5)和简易快速制备法(方法 6)提取瓠瓜类型砧木根系基因组DNA的效果。研究结果表明,... 为利用瓠瓜砧木根系提取DNA进行品种真实性分子检测,本研究比较了CTAB法(方法 1)、SDS简易法(方法 2)、SDS法(方法 3)、TPS法(方法 4)、快速制备法(方法 5)和简易快速制备法(方法 6)提取瓠瓜类型砧木根系基因组DNA的效果。研究结果表明,SDS简易法(方法 2)提取瓠瓜根系总DNA质量好,蛋白污染小,PCR扩增条带清晰稳定,满足瓠瓜根系DNA分子检测的要求。利用该法提取的‘甬砧1号’、‘甬砧3号’、‘甬砧4号’、‘甬砧5号’、‘神通力’和‘京欣砧1号’的根系DNA可重复上述6份瓠瓜材料幼叶DNA的指纹图谱结果(01001,10010,10101,01010,00110和00000)。新增加‘华欣948’、‘5756’、‘1715’和‘56YZ2’等4份瓠瓜砧木材料,通过根系DNA构建的指纹图谱分别是00110、01011、11000和01000。10份瓠瓜类型砧木品种根系DNA指纹图谱出现概率为1/13 500,图谱出现概率低,表明可以利用根系取代叶片提取DNA,用于构建指纹图谱进行品种鉴定与保护。 展开更多

关键词 瓠瓜 根系 dna制备 指纹图谱

原文传递

转基因番木瓜基因组DNA的快速制备和PCR检测方法

15

作者 潘志文 陈伟庭 +4 位作者 高洁儿 周峰 姚涓 王声斌 姜大刚 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期286-294,共9页

转基因番木瓜检测中,模板DNA的制备是关键一步。为了提高检测效率,建立快速制备番木瓜样品基因组DNA和PCR检测方法十分重要。建立了番木瓜基因组DNA的快速制备方法,包括样品准备、制备缓冲液匀浆和稀释上清。在完成不同番木瓜样品的基因... 转基因番木瓜检测中,模板DNA的制备是关键一步。为了提高检测效率,建立快速制备番木瓜样品基因组DNA和PCR检测方法十分重要。建立了番木瓜基因组DNA的快速制备方法,包括样品准备、制备缓冲液匀浆和稀释上清。在完成不同番木瓜样品的基因组DNA快速制备后,对获得的DNA进行PCR检测验证。普通PCR验证结果显示,本方法制备的叶片和果肉基因组DNA溶液稀释5倍时,PCR扩增条带清晰,更高稀释倍数时,叶片基因组DNA扩增条带强于果肉基因组DNA;实时荧光PCR验证结果显示,叶片基因组DNA的PCR扩增效率位于合理区间。灵敏度测试结果表明,含量低至0.1%的叶片和果肉样品,内标准基因和外源基因特异性片段普通PCR和实时荧光PCR均能得到预期扩增,且重复性较好。本研究建立的番木瓜基因组DNA快速制备与PCR方法效果良好,体系稳定。 展开更多

关键词 转基因番木瓜 dna制备 PCR 检测方法

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利用氯化苄提取适于分子生物学分析的真菌 DNA 被引量：306

16

作者 朱衡 瞿峰 朱立煌 《真菌学报》 CSCD 北大核心 1994年第1期34-40,共7页

随着生物技术的飞速发展,更加需要简便、快速地提取高质量的DNA。以往报导的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破坏细胞壁和膜的方式,从而导致繁琐、复杂和费时的提取过程。根据氯化苄在弱碱条件下与多糖上的羟基反应形成醚从而... 随着生物技术的飞速发展,更加需要简便、快速地提取高质量的DNA。以往报导的提取真菌DNA的方法大都采用液氮研磨或酶解破坏细胞壁和膜的方式,从而导致繁琐、复杂和费时的提取过程。根据氯化苄在弱碱条件下与多糖上的羟基反应形成醚从而使多糖长链断裂的事实,我们发展了一种全新的真菌DNA提取方法,该方法使氯化苄在pH9.0时与细胞壁多糖作用,破坏细胞壁,基因组DNA因而得以从细胞中释放出来。新方法具有简便、快速、价廉的优点,得到的DNA蛋白质污染少、质量较高、产量稳定。对该法提取的DNA作进一步的分子生物学分析,如限制性内切酶酶解、RFLP分析、RAPD扩增,都取得了令人满意的结果。利用氯化苄提取真菌DNA的研究,迄今在国际、国内均尚未见报道。 展开更多

关键词 dna 提取 细胞壁 氯化苄 真菌

原文传递

高通量PCR模板植物基因组DNA制备方法 被引量：19

17

作者 王慧娜 初志战 +2 位作者 马兴亮 李日清 刘耀光 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1200-1205,共6页

制备大量生物样品的模板DNA用于PCR检测是费时费工的工作。本文介绍一种快速高通量的植物基因组DNA(gDNA)制备及其用于PCR基因型检测的操作方法。将一小段单子叶植物苗叶片(与96方孔板的孔深大致相同)或一小块(约2～5mg)双子叶植物叶片... 制备大量生物样品的模板DNA用于PCR检测是费时费工的工作。本文介绍一种快速高通量的植物基因组DNA(gDNA)制备及其用于PCR基因型检测的操作方法。将一小段单子叶植物苗叶片(与96方孔板的孔深大致相同)或一小块(约2～5mg)双子叶植物叶片放入96方孔板的各孔中、放入一粒直径4mm或3mm的合金珠和150μL制备缓冲液,盖上硅橡胶盖,在涡旋器或震动研磨器震动2～4min破碎组织。此方法获得的粗制gDNA样品浓度约2～4ngμL?1。用96针复制器或多通道移液器转移约0.5～1.0μL的gDNA溶液到96孔PCR板的反应液中,利用各种类型的PCR标记(简单序列重复SSR,插入缺失InDel等)进行基因型检测。此方法制备的gDNA模板也适合于较大DNA片段(>1kb)的扩增。本方法的关键是控制好在一定溶液量中破碎合适量的叶片,以及不要加入过量的gDNA溶液,以免带入过多的杂质抑制PCR效果。这种从材料种植、制备gDNA、转移样品gDNA,到PCR都是96格式化操作的快速、高通量、低成本的方法特别适合大量植物样品的规模化基因型检测。 展开更多

关键词 基因组dna制备 PCR 基因分型

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番茄叶片基因组DNA快速制备技术及其在基于实时荧光定量PCR的转基因检测中的应用 被引量：12

18

作者 王伟伟 朱长青 +2 位作者 刘小花 陈昆松 徐昌杰 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1017-1022,共6页

以番茄（Solanum lycopersicum L.cv.Micro-Tom）叶片为试材,建立了一种简便快速制备叶片基因组DNA的方法。2~20 mm2的叶片即可满足制备要求,制备过程只需一种提取试剂、只涉及1次移液和1次离心操作,不涉及沉淀。确定了所制备的DNA用于... 以番茄（Solanum lycopersicum L.cv.Micro-Tom）叶片为试材,建立了一种简便快速制备叶片基因组DNA的方法。2~20 mm2的叶片即可满足制备要求,制备过程只需一种提取试剂、只涉及1次移液和1次离心操作,不涉及沉淀。确定了所制备的DNA用于实时荧光定量PCR的合适用量为0.1~0.2μL（反应总体积为12.5μL）,发现过量模板的使用可降低PCR效率且可导致扩增失败。该项DNA快速制备及相适应的实时荧光定量PCR技术已成功应用于番茄转基因植株检测。 展开更多

关键词 番茄 dna快速制备 实时荧光定量PCR 转基因检测

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香菇基因组高分子量DNA的提取 被引量：9

19

作者 程水明 《生物技术通报》 CAS CSCD 2006年第5期84-86,共3页

介绍了一种简便快速提取香菇基因组DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS和CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS-CTAB法可在较短时间内高效地提取香菇基因组总DNA.制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;OD260/28... 介绍了一种简便快速提取香菇基因组DNA的方法,该法是对提取真菌DNA的SDS和CTAB法进行改进而成,经过修改后的SDS-CTAB法可在较短时间内高效地提取香菇基因组总DNA.制备物经琼脂糖凝胶电泳检测到大于20kb的DNA主带,基本无DNA碎带;OD260/280值显示产物纯度高,完全符合AFLP分析的要求。 展开更多

关键词 香菇 基因组dna提取 SDS CTAB AFLP分析

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一种快速高效提取革兰氏阳性菌微杆菌基因组DNA的新方法 被引量：9

20

作者 丁娟芳 杨嘉 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2010年第23期12334-12336,共3页

[目的]探索可以快速从革兰氏阳性菌微杆菌中提取高质量基因组总DNA的新方法。[方法]采用3种不同方法提取微杆菌基因组DNA,并进行DNA纯度、完整度鉴定及16SrDNA扩增检测。[结果]紫外吸收结果表明,采用改良方法所获DNAA260/A280大于1.80,A... [目的]探索可以快速从革兰氏阳性菌微杆菌中提取高质量基因组总DNA的新方法。[方法]采用3种不同方法提取微杆菌基因组DNA,并进行DNA纯度、完整度鉴定及16SrDNA扩增检测。[结果]紫外吸收结果表明,采用改良方法所获DNAA260/A280大于1.80,A260/A230为2.0,5ml过夜菌液可得6.5μg基因组总DNA。DNA凝胶电泳结果表明,DNA完整度高且无RNA污染。以此方法提取的基因组总DNA样品为模板,可灵敏有效地扩增16SrDNA基因。[结论]该方法用时短,操作简易,纯度好、产率高、成本低,适用于革兰氏阳性菌各相关的分子生物学研究。 展开更多

关键词 革兰氏阳性菌 微杆菌 基因组dna提取 dna质量 16Srdna

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