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灵芝多糖对老年小鼠脾细胞DNA多聚酶α活性及免疫功能的影响 被引量:39
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作者 雷林生 林志彬 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1993年第8期577-582,共6页
24月龄老年小鼠脾细胞中DNA多聚酶α的活性比3月龄小鼠明显低下。每日ip灵芝多糖(GL-B)25和50 mg·kg^(-1)共4 d,均可明显增强老年小鼠脾细胞内DNA多聚酶α的活性,与老年对照组相比分别增加44.0和58.4%。体外实验发现,老年小鼠脾细... 24月龄老年小鼠脾细胞中DNA多聚酶α的活性比3月龄小鼠明显低下。每日ip灵芝多糖(GL-B)25和50 mg·kg^(-1)共4 d,均可明显增强老年小鼠脾细胞内DNA多聚酶α的活性,与老年对照组相比分别增加44.0和58.4%。体外实验发现,老年小鼠脾细胞自发增殖能力和自发分泌IL-2的能力明显低于年轻对照组,对同种异型抗原引起的混合淋巴细胞反应也明显减弱,加入GL-B(50,100,200μg·ml^(-1))以后,这些指标均可明显恢复。 展开更多
关键词 灵芝 多糖 dna 多聚酶α 免疫功能
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灵芝多糖对同种异型抗原刺激的小鼠脾细胞DNA多聚酶α活性的影响(英文) 被引量:32
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作者 雷林生 林志彬 《北京医科大学学报》 CSCD 1991年第4期329-333,共5页
去蛋白灵芝多糖是从芝灵Ganoderma lucidum(Leyss·ex Fr.)Karst子实体中提取的纯多糖部分,根据分子量不同,命名为GL-A,GL-B和GL-C。混合淋巴细胞培养反应是同种异型抗原(主要组织相容性抗原)刺激的特异性免疫反应。GL-A(16~250μg... 去蛋白灵芝多糖是从芝灵Ganoderma lucidum(Leyss·ex Fr.)Karst子实体中提取的纯多糖部分,根据分子量不同,命名为GL-A,GL-B和GL-C。混合淋巴细胞培养反应是同种异型抗原(主要组织相容性抗原)刺激的特异性免疫反应。GL-A(16~250μg·ml^(-1)),GL~B(62~250μg·ml^(-1)),GL-C(16~250μg·ml^(-1))都可以明显促进混合淋巴细胞培养中脾细胞对[~3H]TdR的摄取。而且促进作用与药物浓度之间呈正相关。三种灵芝多糖还可以在同样条件下增加脾细胞中DNA多聚酶α的活性。但是在无细胞体系中,同样的药物浓度反而抑制[~3H]TTP参入酸不溶物。以上结果提示,去蛋白灵芝多糖可以促进由同种异型抗原刺激的淋巴细胞转化作用。其作用机制是通过间接诱导DNA多聚酶的产生,从而促进免疫细胞中DNA的合成和促进细胞的增殖,加速免疫应答过程。 展开更多
关键词 灵芝多糖 灵芝 dna多聚酶 脾细胞
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商陆多糖I对小鼠淋巴细胞DNA多聚酶α活性的影响 被引量:16
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作者 王洪斌 王劲 +3 位作者 郑钦岳 李铁军 李书桐 陈海生 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第2期150-153,共4页
本实验在建立DNA多聚酶α活性测定方法的基础上观察了商陆多糖I(PAP-I)对小鼠淋巴细胞增殖及淋巴细胞DNA多聚酶α活性的影响。采用[3H]-TdR掺入法和模板活化法([3H]-dTTP掺入法)分别检测PAP-I给... 本实验在建立DNA多聚酶α活性测定方法的基础上观察了商陆多糖I(PAP-I)对小鼠淋巴细胞增殖及淋巴细胞DNA多聚酶α活性的影响。采用[3H]-TdR掺入法和模板活化法([3H]-dTTP掺入法)分别检测PAP-I给药组及对照组小鼠淋巴细胞增殖能力和淋巴细胞DNA多聚酶α活性。体外实验发现PAP-I显著增强ConA诱导的小鼠脾淋巴细胞增殖及其DNA多聚酶α的活性;小鼠腹腔注射PAP-I(每周1次)对脾淋巴细胞DNA多聚酶α活性基本上无影响,但加入ConA(5μg/ml)刺激后,PAP-I10mg/kg剂量组DNA多聚酶α活性显著增强。结果提示PAP-I增强DNA多聚酶α活性可能是促进脾淋巴细胞增殖、增强免疫功能的机制之一。 展开更多
关键词 商多糖 dna 多聚酶α 淋巴细胞 中药
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血清中DNA聚合酶α在阿尔茨海默病中的表达和诊断价值分析
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作者 赵越 刘静 +2 位作者 张晓敏 崔雨婷 王培昌 《国际检验医学杂志》 CAS 2024年第1期1-5,共5页
目的探究血清中DNA聚合酶α(DNA polα)在阿尔茨海默病(AD)中的表达水平,分析其在AD中的诊断价值。方法选取2019年3月至2023年4月在首都医科大学宣武医院就诊的AD痴呆(DAT)期患者100例作为DAT组,轻度认知障碍(MCI)期患者43例作为MCI组;... 目的探究血清中DNA聚合酶α(DNA polα)在阿尔茨海默病(AD)中的表达水平,分析其在AD中的诊断价值。方法选取2019年3月至2023年4月在首都医科大学宣武医院就诊的AD痴呆(DAT)期患者100例作为DAT组,轻度认知障碍(MCI)期患者43例作为MCI组;同期,选取68例同年龄组别的健康者作为HC组。检测各组血清样本中DNA polα的表达水平,利用受试者工作特征(ROC)曲线分析DNA polα在AD中的诊断价值。结果DAT组血清DNA polα表达水平高于MCI组(P<0.05)和HC组(P<0.001),随着AD病程发展,DNA polα表达水平有递增趋势。DNA polα表达水平与简易智能精神状态检查量表(MMSE)和蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分均呈负相关(r=-0.1553、-0.2037,P<0.05)。DNA polα诊断DAT期的曲线下面积(AUC)为0.682,灵敏度为0.900,特异度为0.412;DNA polα诊断MCI期的AUC为0.546,灵敏度为0.977,特异度为0.250;DNA polα鉴别诊断MCI期和DAT期的AUC为0.664,灵敏度为0.780,特异度为0.535。结论DNA polα在DAT期AD患者中表达水平升高,且其表达水平与AD病程发展存在一定联系,推测DNA polα有可能是诊断AD潜在的血液生物标志物。 展开更多
关键词 dna聚合酶α 阿尔茨海默病 生物标志物 诊断价值
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雷公藤内酯对L_(1210)细胞补救通路DNA合成的影响 被引量:1
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作者 许建华 李常春 黄自强 《福建医学院学报》 1993年第4期281-285,共5页
用[~3 H]TdR参入法发现雷公藤内酯对L_(1210)细胞TdR转运有较强的抑制作用,而对TdR磷酸化的影响较弱。通过分析药物对DNA溶液粘滞性的影响、药物对DNA平衡透析及药物与DNA作用后的紫外光谱与荧光光谱变化等,均未发现药物与DNA之间存在... 用[~3 H]TdR参入法发现雷公藤内酯对L_(1210)细胞TdR转运有较强的抑制作用,而对TdR磷酸化的影响较弱。通过分析药物对DNA溶液粘滞性的影响、药物对DNA平衡透析及药物与DNA作用后的紫外光谱与荧光光谱变化等,均未发现药物与DNA之间存在相互作用。从药物对无细胞体系DNA合成无明显影响可进一步证实该药对DNA模板功能及DNA聚合酶α均无明显影响。因此对补救通路DNA合成的抑制,主要缘于该药对细胞核苷转运的抑制。 展开更多
关键词 雷公藤内脂 核苷磷酸化 dna聚合酶
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Developmental activity variations of DNA polymerase α,δ,ε in mouse forebrains and spleens
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作者 杨荣武 陆长德 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1995年第10期1237-1245,共9页
The levels of DNA polymerase α,δ,ε were examined in the neonatal mouse forebrains andspleens.The levels of DNA polymerase α were determined by the difference of polymerase activity in theabsence and the presence ... The levels of DNA polymerase α,δ,ε were examined in the neonatal mouse forebrains andspleens.The levels of DNA polymerase α were determined by the difference of polymerase activity in theabsence and the presence of α specific inhibitor,BuPdGTP,or its monoclonal antibody.The levels of DNApolymerase δ were determined in H · A fractions after separating it from the other two enzymes.The levelsof DNA polymerase ε were identified in H · A fractions by the use of α-monoclonal antibody or BuPdGTP.Results showed that in the mouse forebrain DNA polymerase α,δ,ε activities are the highest before birth,decline sharply following birth and are very low on the 8th day and hardly detectable on the 17th day;as forthe mouse spleen,however,DNA polymerase α,δ,ε activities are the lowest at birth,increase rapidly afterbirth and reach their maxima on the 8th day and then decline gradually but remain in higher levels.Theseresults not only prove that DNA polymerase α and δ take part in cell DNA replication but also suggest thatDNA polymerase ε is involved in DNA replication. 展开更多
关键词 dna polymerase α δ ε MOUSE SPLEEN FOREBRAIN
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乙型肝炎病毒DNA聚合酶TP257抗α-干扰素机制初步探讨
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作者 梁菲菲 黄连真 +1 位作者 陈婉南 林旭 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2011年第4期241-245,共5页
目的筛选与乙型肝炎病毒DNA聚合酶N端257个氨基酸(TP257)相结合的抗α-干扰素(IFN-α)相关性肝细胞蛋白,初步探讨TP257抗IFN-α作用机制。方法构建TP257腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-TP257,并与腺病毒骨架载体pADEasy-1重组,以293... 目的筛选与乙型肝炎病毒DNA聚合酶N端257个氨基酸(TP257)相结合的抗α-干扰素(IFN-α)相关性肝细胞蛋白,初步探讨TP257抗IFN-α作用机制。方法构建TP257腺病毒穿梭载体pShuttle-IRES-hrGFP-TP257,并与腺病毒骨架载体pADEasy-1重组,以293A细胞包装重组腺病毒。用重组腺病毒感染Huh7细胞并以IFN-α诱导,收获细胞蛋白,Western blot验证TP257蛋白在细胞中的表达。细胞蛋白进行免疫沉淀,SDS-PAGE分离后通过质谱鉴定差异蛋白。结果构建的重组腺病毒AD-TP257能有效感染Huh7细胞并大量表达TP257蛋白。Huh7细胞感染AD-TP257后以IFN-α处理,并通过免疫沉淀筛选到4种差异蛋白,其中3种经肽质量指纹图谱鉴定分别为热休克蛋白60、组蛋白HIST1H2BC和肌凝蛋白调节轻链12A。结论 TP257抗IFN-α效应可能与它和特定肝细胞蛋白结合并相互作用有关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 dna聚合酶 α-干扰素 免疫沉淀
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表达于工程菌 DH5α 中 Taq DNA 聚合酶的纯化 被引量:3
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作者 包永明 祖国仁 《大连轻工业学院学报》 1997年第4期67-70,共4页
采用聚乙烯亚胺沉淀、BioRex70离子交换、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、PCR检测等简单方法,在30h内完成TaqDNA聚合酶的基因重组质粒在工程菌DH5α中超表达酶的提取纯化及酶活标定。2000ml发酵液可提纯3... 采用聚乙烯亚胺沉淀、BioRex70离子交换、变性聚丙烯酰胺凝胶电泳、PCR检测等简单方法,在30h内完成TaqDNA聚合酶的基因重组质粒在工程菌DH5α中超表达酶的提取纯化及酶活标定。2000ml发酵液可提纯3万U的TaqDNA聚合酶,与国外优质产品(promega)相比,热稳定性没有差别,扩增特异性尚需进一步探讨。 展开更多
关键词 Taq-dna聚合酶 纯化 大肠杆菌DH5α DH5α
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尖毛虫属ActinⅠ、α-TBP和DNA polα乱序基因的模式研究 被引量:1
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作者 杨然 陈天兵 +3 位作者 黄俊 石文俊 区淑青 伊珍珍 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期285-295,共11页
研究旨在对尖毛虫属内现有物种的3种乱序小核基因结构进行比较,探讨其乱序模式。于湛江湖光红树林水域中采集到一个尖毛虫属物种Oxytricha sp.(ZJ),成功扩增了其肌动蛋白Ⅰ(ActinⅠ)、端粒结合蛋白(α-TBP)、DNA聚合酶α(DNA polα)3个... 研究旨在对尖毛虫属内现有物种的3种乱序小核基因结构进行比较,探讨其乱序模式。于湛江湖光红树林水域中采集到一个尖毛虫属物种Oxytricha sp.(ZJ),成功扩增了其肌动蛋白Ⅰ(ActinⅠ)、端粒结合蛋白(α-TBP)、DNA聚合酶α(DNA polα)3个乱序基因的完整大核基因序列和完整/部分小核基因序列,并结合已有资料对比研究了尖毛虫属这3个乱序基因的进化。结果表明:(1)Oxytricha sp.(ZJ)与O.nova的小核ActinⅠ基因具有相同的乱序模式,区别于其余的尖毛虫属物种;在增加尖毛虫属物种的基础上,对前人推测提出了质疑,我们认为MDS-IES接合处移动现象在乱序MDSs之间并非比非乱序MDSs之间更保守。(2)Oxytricha sp.(ZJ)与O.nova的小核α-TBP基因具有相同乱序模式和相似长度的IESs。(3)Oxytricha sp.(ZJ)的小核DNA polα基因乱序模式,区别于任一已报道物种,与属内O.trifallax最为相近。基于序列分析,在DNA polα基因中发现了一例IES转换为MDS的痕迹,以及由此导致原先MDS的丢失。研究发现在编码区内IES向MDS的转变,使得本应删除的序列成为基因组永久保留的一部分。 展开更多
关键词 尖毛虫 乱序基因 大核命运序列 内部删除序列 肌动蛋白Ⅰ型 端粒结合蛋白 dna聚合酶α
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Lipofectin介导DNA聚合酶α反义寡核苷酸抑制人胃癌细胞生长 被引量:1
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作者 程黎阳 宋新明 +1 位作者 高毅 杨继震 《广东医学》 CAS CSCD 2000年第1期11-13,共3页
目的 研究阳离子脂质体Lipofectin(Lip)介导的DNA 聚合酶α(DNA- polα) 反义寡核苷酸(ASODN)体外抑制人胃癌细胞的生长。方法 合成与人pol α催化亚基mRNA 翻译起始区18 个碱基互补的寡... 目的 研究阳离子脂质体Lipofectin(Lip)介导的DNA 聚合酶α(DNA- polα) 反义寡核苷酸(ASODN)体外抑制人胃癌细胞的生长。方法 合成与人pol α催化亚基mRNA 翻译起始区18 个碱基互补的寡核苷酸(ODN) ,与Lip 混合制备Lip+ ODN复合物,作用于MGC-803、SGC-7901 人胃癌细胞24 h 后,细胞换液,继续培养24 h,用噻唑蓝(MTT)比色法测细胞存活状态,流式细胞术(FCM)分析癌细胞DNA含量。结果 10 μg/mlpolα特异的ASODN在Lip 介导下可显著抑制人胃癌细胞的DNA复制和细胞增殖,正义ODN(SODN) 无此作用。结论 DNA- polα特异ASODN可用于胃癌的基因治疗, 阳离子脂质体可促进ASODN大量进入癌细胞, 增强其生物效应。 展开更多
关键词 dna聚合酶α 胃肿瘤 Lipofectin ASODN
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米托蒽醌对肿瘤细胞DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的抑制作用 被引量:2
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作者 朱孝峰 刘宗潮 潘启超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1998年第3期212-214,共3页
目的进一步探讨米托蒽醌抗癌作用机制,为临床联合用药提供理论指导。方法以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料,通过DE-52和P-11层析柱,提取DNA引物酶-多聚酶α复合体,研究米托蒽醌对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的... 目的进一步探讨米托蒽醌抗癌作用机制,为临床联合用药提供理论指导。方法以小鼠艾氏腹水癌细胞破碎液为材料,通过DE-52和P-11层析柱,提取DNA引物酶-多聚酶α复合体,研究米托蒽醌对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的影响以及对引物合成和引物延长活性的作用。结果检测DNA引物酶-多聚酶α复合体的比活性为6.0133×106Ug-1。米托蒽醌抑制DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的IC50值为(13.54±0.89)μmolL-1,随着药物浓度的增加,对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的抑制作用增强。进一步研究米托蒽醌对引物合成或延长影响时发现,其对引物合成几乎无作用,可见是对DNA引物酶-多聚酶α复合体的延长活性起抑制作用。结论米托蒽醌对DNA复制的影响至少部分是因抑制DNA引物酶-多聚酶α复合体的引物延长活性。 展开更多
关键词 米托蒽醌 抗癌药 肿瘤细胞 dna引物酶 多聚酶
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DMTCCI对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的抑制作用及其细胞毒作用的研究 被引量:1
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作者 李志铭 朱孝峰 +4 位作者 管忠震 戴仁科 谢冰芬 冯公侃 刘宗潮 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2001年第12期1339-1343,共5页
目的:研究碘化-3,3'-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(3,3'-Diethyl-9-methylthiacarbocyanineiodide;DMTCCI)对DNA引物酶-多聚酶α复合体的抑制作用,并观察其对多种肿瘤细胞株的细胞毒作用。方法:提取纯化艾氏腹水癌细胞DNA引物酶-... 目的:研究碘化-3,3'-二乙基-9-甲基-硫杂羰花青(3,3'-Diethyl-9-methylthiacarbocyanineiodide;DMTCCI)对DNA引物酶-多聚酶α复合体的抑制作用,并观察其对多种肿瘤细胞株的细胞毒作用。方法:提取纯化艾氏腹水癌细胞DNA引物酶-多聚酶α复合体,液闪计数法测定其抑酶活性。用MTT法观察化合物对多种肿瘤细胞株的细胞毒作用。结果:18.5nmol/L、37.0nmol/L、111nmol/L、333nmol/L和1000nmol/LDMTCCI对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性的抑制率分别为(27.9±1.3)%、(32.2±1.9)%、(39.2±1.5)%、(51.0±2.3)%和(77.8±1.8)%,其IC50值为(168.2±5.5)nmol/L。显示对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性有强烈的抑制作用。MTT实验发现DMTCCI对4种肝癌细胞株Bel-7402、HepG2、Hep3B和SMMC的IC50值分别为(2.09±0.10)μmol/L、(3.84±0.08)μmol/L、(7.01±0.08)μmol/L和(4.91±0.08)μmol/L;对四种鼻咽癌细胞株HNE1、CNE1、CNE2和HK的IC50值分别为(5.27±0.03)μmol/L、(4.30±0.07)μmol/L、(1.78±0.05)μmol/L和(6.76±0.03)μmol/L;对人宫颈癌细胞株HeLa和人急性早幼粒细胞性白血病细胞株HL-60的IC50值分别为(3.23±0.02)μmol/L和(0.24±0.04)μmol/L。结论:DMTCCI对DNA引物酶-多聚酶α复合体活性有显著的抑制作用,并? 展开更多
关键词 dna引物酶-多聚酶α复合体 碘化-3 3′-二乙基-9-甲基-硫杂炭花青 计算机模拟 优化筛选
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