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基因芯片技术在检测肠道致病菌方面的应用 被引量:18
1
作者 金大智 文思远 王升启 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期500-503,共4页
基因芯片技术具有高通量、自动化、快速检测等特点,因此被广泛地应用于各种研究领域,如细菌分子流行病学、细菌基因鉴定、致病分子机理、基因突变及多态性分析、表达谱分析、DNA测序和药物筛选等。现介绍基因芯片检测肠道致病菌方面的... 基因芯片技术具有高通量、自动化、快速检测等特点,因此被广泛地应用于各种研究领域,如细菌分子流行病学、细菌基因鉴定、致病分子机理、基因突变及多态性分析、表达谱分析、DNA测序和药物筛选等。现介绍基因芯片检测肠道致病菌方面的国外研究进展,基因芯片应用于检测肠道致病菌的3个方面:结合多重PCR对致病菌的毒力因子或者特异性基因进行鉴定;直接检测细菌的DNA或者RNA;以致病细菌核糖体RNA作为检测的靶基因同时检测多种肠道致病菌。由于其检测的高效率,该技术要优于其他分子生物学检测方法。基因芯片技术在肠道致病菌检测中有着巨大的应用价值,具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 基因芯片 肠道致病菌 检测
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奶牛乳房炎主要致病菌16S rDNA基因芯片检测方法的建立 被引量:13
2
作者 邢会杰 曹荣峰 +4 位作者 师志海 贾坤 杨林 林志雄 李守军 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第12期939-943,共5页
本研究建立了快速检测奶牛乳房炎主要致病菌的基因芯片方法,试验以奶牛乳房炎4种主要致病菌的16S rDNA基因作为基因芯片检测的靶片段,设计和筛选通用性引物和特异性探针,对通用引物进行荧光标记、PCR扩增、芯片杂交和信号扫描分析,根据... 本研究建立了快速检测奶牛乳房炎主要致病菌的基因芯片方法,试验以奶牛乳房炎4种主要致病菌的16S rDNA基因作为基因芯片检测的靶片段,设计和筛选通用性引物和特异性探针,对通用引物进行荧光标记、PCR扩增、芯片杂交和信号扫描分析,根据杂交信号强度和聚类分析结果,判定奶牛乳房炎感染的致病菌种类。实验结果显示:以16S rDNA为靶基因检测奶牛乳房炎主要致病菌(无乳链球菌、肺炎克雷伯氏菌、奇异变形杆菌、金黄色葡萄球菌)的基因芯片方法,可以快速、特异、准确地对这4种试验菌株进行检测和鉴定。该检测方法的建立将为流行病学调查、食品卫生监督、乳房炎的防控等提供快速、有效的检测方法,具有良好的市场应用前景。 展开更多
关键词 基因芯片 奶牛乳房炎 致病菌 聚合酶联反应
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人乳头瘤病毒(HPV)基因芯片的研究 被引量:6
3
作者 刘翠华 马文丽 +2 位作者 张宝 石嵘 郑文岭 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第5期613-618,T001,共7页
探讨将基因芯片与限制性显示技术相结合对HPV进行基因检测和分型的方法。分离HPV6,1 1 ,1 6和 1 8型的基因片段作为探针 ,纯化后应用PixSys 5 5 0 0点样仪将其打印在氨基包被的玻片上制作HPV基因芯片 ,对HPV样品进行荧光标记后与芯片杂... 探讨将基因芯片与限制性显示技术相结合对HPV进行基因检测和分型的方法。分离HPV6,1 1 ,1 6和 1 8型的基因片段作为探针 ,纯化后应用PixSys 5 5 0 0点样仪将其打印在氨基包被的玻片上制作HPV基因芯片 ,对HPV样品进行荧光标记后与芯片杂交 ,经清洗和干燥后对芯片进行扫描和结果分析。对HPV基因检测芯片的制作与检测的实验条件进行了初步研究 ,并对应用HPV基因芯片进行分型做了初步探讨。建立的检测芯片实验方法可行 。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒 HPV 基因芯片 限制性显示技术
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Expression of a novel bHLH-Zip gene in human testis 被引量:4
4
作者 Jia-HaoSHA Zuo-MinZHOU +7 位作者 Jian-MinLI MingLIN: HuiZHU HuZHU Ya-DongZHOU Li-LongWANG Yi-QuanWAIG Kai-YaZHOU 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2003年第2期83-88,共6页
<abstract>Aim: To identify specifically expressed genes in the adult and fetal testes. Methods: A human testis cDNA microarray was established. Then the mRNA of adult and fetal testis was purified and probes wer... <abstract>Aim: To identify specifically expressed genes in the adult and fetal testes. Methods: A human testis cDNA microarray was established. Then the mRNA of adult and fetal testis was purified and probes were prepared by a reverse transcription reaction with the testis mRNA as template. The microarray was hybridized with probes of adult and fetal testes. The nucleic sequences of differentially expressed genes were determined and homologies were searched in the databases of the GenBank. Results: When hybridized with adult or fetal testis probes, the positive clones were 96.8 % and 95.4 %, respectively. Among these genes, one was a new testis-specific gene, which was named TSP1. TSP1 was highly expressed in human adult testis. The cDNA of TSP1 was 1,484 bp in length. The cDNA sequence of this clone was deposited in the Genbank (AF333098). TSP1 was also determined as Interim Gen Symbol (Unigene, No. Hs.98266). Protein analysis showed that TSP1 contained two functional domains: an N-terminal basic helix-loop-helix (bHLH) and a C-terminal leucine zipper (Zip). Homologous analysis showed that the 430 amino acid sequences deduced from the 1,293 bp open reading frame (ORF) had a homology with the human gene FLJ2509 (AK098575). TSP1 had also a sequence homology with Spz 1 protein of mouse. Expression profiles showed that TSP1 was specifically and strongly expressed in the testis. Conclusion: TSP1 is a gene highly expressed in adult testis. It may play an important role in spermatogenesis in the humans. 展开更多
关键词 basic helix-loop-helix leucine zipper TESTIS SPERMATOGENESIS dna microarrays
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基因芯片检测肝炎肝硬化患者肝组织中HBVDNA 被引量:5
5
作者 曹新民 赵伟 +4 位作者 刘伟 刘全俊 张林 周镇先 刘新珏 《中国全科医学》 CAS CSCD 2005年第8期633-635,共3页
目的研究病毒性肝炎基因芯片的制备,用肝炎基因诊断芯片,免疫组织化学法和原位分子杂交法,检测99例乙型肝炎后肝硬化肝组织,比较各种方法的优缺点。方法将PCR扩增的HBVDNA探针用点样仪点于玻片介质上,并经过点样处理后制备成基因芯片;... 目的研究病毒性肝炎基因芯片的制备,用肝炎基因诊断芯片,免疫组织化学法和原位分子杂交法,检测99例乙型肝炎后肝硬化肝组织,比较各种方法的优缺点。方法将PCR扩增的HBVDNA探针用点样仪点于玻片介质上,并经过点样处理后制备成基因芯片;收集肝炎后肝硬化肝组织标本99份,分别用基因芯片、原位分子杂交法、免疫组织化学法检测HBVDNA和HBcAg。结果53例HBcAg、HBVDNA阳性组织中基因芯片检测阳性40例;22例HBcAg阳性组织中基因芯片检测阳性6例;32例HBcAg、HBVDNA阴性组织中基因芯片检测均阴性。结论肝炎基因诊断芯片可以检测肝组织中HBVDNA,准确率可达75%,假阳性率低。 展开更多
关键词 基因芯片检测 肝硬化患者 肝炎基因诊断芯片 原位分子杂交法 免疫组织化学法 HBCAG HBVdna阳性 肝炎后肝硬化 病毒性肝炎 硬化肝组织 dna探针 PCR扩增 肝组织标本 假阳性率 优缺点 准确率 制备 点样 阴性
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HIV基因芯片的初步研究 被引量:4
6
作者 李凌 马文丽 +2 位作者 毛向明 祝骥 郑文岭 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2002年第8期724-727,共4页
目的建立HIV基因检测芯片的分析技术。方法分离HIV1U26942基因限制性显示片段作探针,应用PixSys 5500点样仪将探针打印在氨基包被的玻片上制作基因芯片。然后与随机引物荧光标记的HIV样品进行杂交,以分析限制性显示基因片段的杂交动力... 目的建立HIV基因检测芯片的分析技术。方法分离HIV1U26942基因限制性显示片段作探针,应用PixSys 5500点样仪将探针打印在氨基包被的玻片上制作基因芯片。然后与随机引物荧光标记的HIV样品进行杂交,以分析限制性显示基因片段的杂交动力学。经杂交后清洗和干燥,扫描芯片进行检测。结果对基因检测芯片的制作与检测的实验条件进行了初步研究并筛选了12个限制性显示基因探针。结论建立的检测芯片的实验方法可行且较特异。 展开更多
关键词 基因芯片 dna微矩阵 HIV感染 限制性显示
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酪胺信号放大-量子点标记银染增强的基因芯片可视化检测方法的建立 被引量:6
7
作者 张春 刘琪琦 +2 位作者 陈苏红 张宏刚 王升启 《生物技术通讯》 CAS 2012年第4期558-562,共5页
目的:建立一种酪胺信号放大-量子点标记银染增强的基因芯片可视化检测方法,提高基因芯片检测的灵敏度。方法:待测靶基因与固定在玻片上的探针杂交,依次加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶、生物素标记的酪胺及链霉亲和素标记的量... 目的:建立一种酪胺信号放大-量子点标记银染增强的基因芯片可视化检测方法,提高基因芯片检测的灵敏度。方法:待测靶基因与固定在玻片上的探针杂交,依次加入链霉亲和素标记的辣根过氧化物酶、生物素标记的酪胺及链霉亲和素标记的量子点,37℃孵育,然后加入银增强试剂显色,最后用可视化生物芯片扫描仪扫描并记录结果;以牛布鲁菌 210105 株为检测对象,以酪胺信号放大-荧光素 Cy3(TSA-Cy3)检测法为对照方法,测定酪胺信号放大-量子点标记银染增强(TSA-QDS)检测法的灵敏度。结果:确定了基因芯片量子点标记银染增强可视化检测方法的检测流程,优化了检测条件,并考察了检测灵敏度。优化的检测条件为:酪胺-生物素稀释比例为 1∶4000,链酶亲和素标记的量子点稀释比例为 1∶50,37℃孵育时间为 25~30 min,银染增强时间为 6~7 min。检测牛布鲁菌的灵敏度为 103 CFU/mL。结论:该方法实现了基因芯片高灵敏度可视化检测,其灵敏度与荧光法相当,并且有可视化的优势。 展开更多
关键词 量子点 生物素-酪胺 基因芯片 可视化检测 辣根过氧化物酶
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DNA芯片检测肝组织及血清中乙型肝炎病毒DNA的临床研究 被引量:4
8
作者 赵伟 万建民 +4 位作者 刘伟 张林 刘全俊 周镇先 刘新珏 《中华检验医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期79-82,共4页
目的 研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的应用价值。方法 用点样仪将聚合酶链反应 (PCR)扩增的HBVDNA探针制成基因芯片。对 15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织 ,99例乙型肝炎后肝硬化肝... 目的 研究DNA芯片检测乙型肝炎和肝硬化患者肝组织及血清中乙型肝炎病毒(HBV)DNA的应用价值。方法 用点样仪将聚合酶链反应 (PCR)扩增的HBVDNA探针制成基因芯片。对 15例慢性乙型肝炎病人的血清和肝活检组织 ,99例乙型肝炎后肝硬化肝组织 ,分别用基因芯片、原位分子杂交、免疫组织化学和雅培试剂检测HBVDNA、乙型肝炎核心抗原 (HBcAg)、乙型肝炎表面抗原 (HBsAg)和乙型肝炎e抗原 (HBeAg)。结果 用基因芯片对 15份HBsAg、HBeAg阳性的乙型肝炎患者血清进行检测 ,HBVDNA均阳性 ,阳性率符合率为 10 0 % ;15份肝活检组织标本 ,免疫组化法检测HBcAg阳性 15例 ,原位分子杂交法和基因芯片检测HBVDNA均阳性 14例 ,阳性率 93%。 99份肝炎后肝硬化患者肝组织标本 ,HBcAg阳性 6 7份 ,HBVDNA阳性 5 3份 ,基因芯片检测HBVDNA阳性 46份 ,阳性率分别为 6 9%、88%。 32例HBcAg、HBVDNA阴性的肝组织中 ,基因芯片检测HBVDNA均为阴性。结论 肝炎基因诊断芯片可检测肝组织及血清中HBVDNA ,诊断准确率高 ,假阳性率低。 展开更多
关键词 dna芯片 检测 肝组织 血清 乙肝病毒dna
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Cancer/testis antigens: novel tools for discerning aggressive and non-aggressive prostate cancer 被引量:3
9
作者 Takumi Shiraishi Robert H Getzenberg Prakash Kulkarni 《Asian Journal of Andrology》 SCIE CAS CSCD 2012年第3期400-404,I0006,共6页
The introduction of serum prostate-specific antigen (PSA) in the 1980s has dramatically altered and benefited the initial diagnosis of prostate cancer. However, the widespread use of PSA testing has resulted in over... The introduction of serum prostate-specific antigen (PSA) in the 1980s has dramatically altered and benefited the initial diagnosis of prostate cancer. However, the widespread use of PSA testing has resulted in overdetection and overtreatment of potentially indolent disease. Thus, a clinical dilemma today in the management of prostate cancer is to discern men with aggressive disease who need definitive treatment from men whose disease are not lethal. Although several serum and tissue biomarkers have been evaluated during the past decade, improved markers are still needed to enhance the accuracy, with which patients at risk can be discerned and treated more aggressively. The cancer/testis antigens (CTAs) are a group of proteins that are restricted to the testis in the normal adult, but are aberrantly expressed in several types of cancers. Because of their restricted expression pattern, the CTAs represent attractive biomarker candidates for cancer diagnosis/prognosis. Furthermore, several studies to date have reported the differential expression of CTAs in prostate cancer. Here, we review recent developments that demonstrate the potential of the CTAs as biomarkers to discern the a^ressive Dhenotvoe of orostate cancer. 展开更多
关键词 cancer/testis antigens dna microarrays prostate cancer prostate carcinoma tumor antigen
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分枝杆菌菌种鉴定DNA微阵列的初步研究与应用 被引量:1
10
作者 吴雪琼 张俊仙 +7 位作者 张琼 庞劲松 梁建琴 张亮 李洪敏 陆阳 雷红 张广宇 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期746-751,共6页
目的制备快速鉴定分枝杆菌菌种的DNA微阵列。方法根据19种分枝杆菌标准株的16SRNA序列设计寡核苷酸探针,制备DNA微阵列,通过反向杂交技术鉴定19种分枝杆菌标准株、9种非分枝杆菌标准株和31株分枝杆菌临床分离株带荧光标记的PCR产物。结... 目的制备快速鉴定分枝杆菌菌种的DNA微阵列。方法根据19种分枝杆菌标准株的16SRNA序列设计寡核苷酸探针,制备DNA微阵列,通过反向杂交技术鉴定19种分枝杆菌标准株、9种非分枝杆菌标准株和31株分枝杆菌临床分离株带荧光标记的PCR产物。结果该DNA微阵列与9种非分枝杆菌标准株不杂交,具有分枝杆菌特异性;可将19种分枝杆菌标准株鉴定到群或种,具有较高的分枝杆菌种特异性。应用PCR-SSCP分枝杆菌初步菌种鉴定方法对31株分枝杆菌临床分离株进行初步的鉴定,9株为结核分枝杆菌复合群和22株为非结核分枝杆菌。应用DNA微阵列进一步进行菌种鉴定,9株与探针a杂交阳性,为结核分枝杆菌复合群;2株与探针c杂交阳性,为胞内分枝杆菌;8株与探针d杂交阳性,为堪萨斯分枝杆菌或瘰疬分枝杆菌或猿猴分枝杆菌或胃分枝杆菌;1株与探针k杂交阳性,为戈登分枝杆菌;2株与探针p杂交阳性,为龟分枝杆菌脓肿亚种;2株与探针r杂交阳性,为偶然分枝杆菌;1株与探针s杂交阳性,为草分枝杆菌;2株与探针a和p杂交阳性,为结核分枝杆菌和龟分枝杆菌脓肿亚种复合感染株;1株与探针a和r杂交阳性,为结核分枝杆菌和偶然分枝杆菌复合感染株;3株与该芯片杂交阴性。2株临床分离株经基因测序也证实DNA微阵列鉴定的特异性。结论该DNA微阵列有可能简便、快速。 展开更多
关键词 dna微阵列 菌种鉴定 分枝杆菌 聚合酶链反应
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先兆子痫胎盘的基因表达谱研究 被引量:4
11
作者 毛东伟 杨东霞 +5 位作者 段志宇 周立群 车建华 石亚凤 谭文华 王孝铭 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1806-1809,共4页
目的:利用cDNA芯片分析先兆子痫胎盘中基因表达的变化情况,寻找新的先兆子痫相关基因。方法:建立含12 000个与代谢、凋亡、细胞黏附、信号转导、转录因子等有关基因的cDNA表达谱芯片,将先兆子痫及正常胎盘mRNA与cDNA芯片进行杂交,得到... 目的:利用cDNA芯片分析先兆子痫胎盘中基因表达的变化情况,寻找新的先兆子痫相关基因。方法:建立含12 000个与代谢、凋亡、细胞黏附、信号转导、转录因子等有关基因的cDNA表达谱芯片,将先兆子痫及正常胎盘mRNA与cDNA芯片进行杂交,得到先兆子痫的基因表达谱;对部分差异表达基因进行Northern验证。结果:在4例先兆子痫胎盘组织中发现均有差异表达的基因44个,其中表达上调有30个,表达下调有14个,Northern杂交鉴定的结果与芯片结果相符合。结论:重度妊娠高血压疾病的基因表达谱存在明显差异,差异的基因可能涉及信号转导、细胞代谢、炎性细胞因子等方面,这些基因可能与妊娠高血压病的发病相关。 展开更多
关键词 妊娠高血压 胎盘 基因表达 dna微序列
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Bioinformatic screening of the binding transcription sites in the regulatory regions of genes up-regulated in response to oxidative stress
12
作者 Shkurat TP Ponomareva NS +3 位作者 Aleksandrova AA Shkurat MA Butenko AI Panich AE 《Open Journal of Genetics》 2012年第4期1-4,共4页
This study focuses on bioinformatics search for new regulatory structures in the non-coding DNA, located around the patterns of gene expression levels changed significantly in response to oxidative stress. Hypothesize... This study focuses on bioinformatics search for new regulatory structures in the non-coding DNA, located around the patterns of gene expression levels changed significantly in response to oxidative stress. Hypothesized that all of the genes increase the expression in response to oxidative stress may have the same motifs in non-coding DNA. To search for motifs created an integrated collection database of transcription binding sites - JASPAR, TRANSFAC, Hocomoco TF Homo sapiens, Uniprobe TF Mus musculus. Two types of regulatory regions: the promoter region and the sequence with the capture of potential cis-regulatory modules. In the regulatory regions of genes increase the expression in response to oxidative stress, in contrast to the gene expression level did not change, families of transcription factors identified SOX (1-30) and HX (A, B, C, D). 展开更多
关键词 Gene Expression dna microarrays Noncoding dna Oxidative Stress TRANSCRIPTION FACTOR SITES of TRANSCRIPTION FACTOR BINDING dna Motif
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Effects of Aging and Advanced Glycation on Gene Expression in Cerebrum and Spleen of Mice 被引量:2
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作者 YUE-XIN LIANG, ZHEN WANG, DIAN-DONG LI, JIAN-MIN JIANG,AND RONG-GUANG SHAOInstitute of Medicinal Biotechnology, Chinese Academy of Medical Sciences and Peking Union Medical College, Beijing 100050, China 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 2003年第4期323-332,共10页
Objective To analyze the effects of aging or advanced glycation on gene expression in the cerebrum and spleen of female C57BL/6J mice. Methods The gene expression profile was determined by using cDNA expression arrays... Objective To analyze the effects of aging or advanced glycation on gene expression in the cerebrum and spleen of female C57BL/6J mice. Methods The gene expression profile was determined by using cDNA expression arrays containing 588 cDNA. Results Aging and advanced glycation resulted in differential gene expression patterns of cerebrum and spleen compared with young mice. Among the 80 genes detected in cerebrum, 43 exhibited a change in mRNA ratios with aging or treatment. Thirty-four changes (79%) were common in aged and D-galactose treated mice, whereas the cerebrum from aged and AGE-lysine treated mice showed common changes in expression of 38 genes (88%). Of the 86 genes detected in spleen, 29 (34%) displayed an age-related decrease in expression, whereas 3 (3%) displayed an increase in expression levels with aging. Eighteen genes from the detectable genes exhibited expression changes in both cerebrum and spleen of mice. Conclusions The gene expression profiles of D-galactose and AGE-lysine treated mice resemble those of aged mice. Use of cDNA hybridization arrays may provide a promising tool to explore the mechanism of aging at a molecular level. 展开更多
关键词 AGING GALACTOSE Advanced glycation Gene expression dna microarrays CEREBRUM SPLEEN
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基因芯片技术在脓毒症中的应用 被引量:1
14
作者 张佃良 黎介寿 江志伟 《肠外与肠内营养》 CAS 2002年第1期53-55,共3页
基因芯片是近期出现的一项技术 ,它能够研究基因的表达、寻找新的基因、基因突变检测和多态性检测等 ,真正体现了基因分析的高通量、小型化、平行化和自动化。本文主要介绍基因芯片在脓毒症中的应用。
关键词 基因芯片 基因 脓毒症
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激活后γδT细胞迅速增殖分子机制的初步研究 被引量:3
15
作者 贺伟锋 程文广 +4 位作者 胡婕 罗高兴 陈希炜 尹芝南 吴军 《重庆医学》 CAS CSCD 2006年第24期2224-2227,共4页
目的通过比较分析初始γδT细胞和初始CD4^+T细胞激活后增殖动力学,以深入了解γδT细胞增殖特点以及相关分子机制。方法应用流式细胞技术分离技术分选出初始γδT细胞和初始CD4^+T细胞。在此基础之上.用[~3H]掺入法检测不同剂量的anti... 目的通过比较分析初始γδT细胞和初始CD4^+T细胞激活后增殖动力学,以深入了解γδT细胞增殖特点以及相关分子机制。方法应用流式细胞技术分离技术分选出初始γδT细胞和初始CD4^+T细胞。在此基础之上.用[~3H]掺入法检测不同剂量的anti-CD3刺激培养48h后细胞增殖的情况,并进行NIA15K高密度基因芯片分析差异表达基因。结果在经anti- CD3刺激后,初始γδT细胞比初始CD4^+T细胞更快速地被激活增殖。细胞激活后,DNA芯片分析显示出γδT细胞比CD4^+T细胞表达明显更高水平的细胞增殖相关基因。其后,通过定量RT-PCR检测c-Myc基因表达情况,得到与基因芯片分析相同的结果。结论这些细胞增殖相关基因为γδT细胞早期激活增殖的力学特性提供了分子基础。 展开更多
关键词 ΓΔT细胞 CD4^+T细胞 增殖力学 基因芯片
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水稻白叶枯病菌在寄主体内外不同生长条件下致病基因差异表达的分析 被引量:1
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作者 高世强 张新建 +1 位作者 吴茂森 何晨阳 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期653-658,共6页
To demonstrate the expression profiling of Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo) in vitro and in planta,DNA microarrays of 371 genes potentially associated with pathogenicity and virulence were used to compare the transcr... To demonstrate the expression profiling of Xanthomonas oryzae pv.oryzae(Xoo) in vitro and in planta,DNA microarrays of 371 genes potentially associated with pathogenicity and virulence were used to compare the transcriptional level alteration of the wild-type strain PXO99A and gene deletion mutants ΔgacAxoo and ΔfleQxoo of Xoo grown in the rich medium NBY vs.hrp-inducing minimal medium XOM2 or leaf tissues of rice.Results indicated that 17 and 38 genes of PXO99A were differentially expressed in XOM2 and the leaf tissues of rice relative to NBY,respectively.Twenty-eight genes of ΔgacAxoo grown in XOM2 and 12 genes of ΔfleQxoo in NBY were differentially expressed relative to PXO99A.The identification of differentially-expressed genes,GacAxoo-and FleQxoo-regulons and novel candidate genes of Xoo strains would provide us the target genes for further functional analysis in pathogenesis of Xoo. 展开更多
关键词 Xanthomonas oryzae pv.oryzae growth in vitro and in planta dna microarrays pathogenicity gene differentially-expressed genes
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一种用于基因芯片可靠的双轮RNA线性扩增技术 被引量:1
17
作者 周荣荣 卫军霞 +3 位作者 王亚辉 张亮 程京 周玉祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期498-507,共10页
DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改... DNA微阵列能在一次实验中检测成千上万个基因的表达情况,有助于阐明疾病发生的分子机制及发现新的诊治靶标.但常规方法需要大量RNA,因而基于T7RNA线性扩增技术逐渐成为微阵列表达谱实验中最常用的探针制备方法.本方法将实验步骤进一步改进,增加额外的一轮体外转录,并结合Klenow酶标记技术来制备cDNA靶标和寡核苷酸芯片杂交.从纳克量级的总RNA起始,本方法和常规的RNA单轮线性扩增法相比,仍然准确地保留了约70%的基因表达信息.同一RNA样本的自身比较实验及重复实验结果也显示,该方法具有较高的可靠性和重复性.RNA双轮体外扩增法需要的起始RNA相对于常规的单轮扩增法减少了很多(10ng甚至更少),因而非常适合分析那些只能提供微量RNA的样本. 展开更多
关键词 dna微阵列 双轮RNA线性扩增 双轮体外转录 可靠性和重复性
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限制性显示技术制备HIV-1B亚型基因片段的研究
18
作者 李凌 马文丽 +3 位作者 甄莉 吴清华 刘翠华 郑文岭 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期177-180,共4页
In order to isolate expeditiously the HIV1U26942 DNA fragments for preparation of DNA microarrays, the multiple gene fragments with sizes suitable for DNA microarrays, produced by digesting the dissociated HIV gene wi... In order to isolate expeditiously the HIV1U26942 DNA fragments for preparation of DNA microarrays, the multiple gene fragments with sizes suitable for DNA microarrays, produced by digesting the dissociated HIV gene with Sau 3AⅠ, were ligated with universal adapters. PCR primers were designed to match the universal adapters (including the restriction site sequence) but with one "nesting" base overhanging at the 3’ end. The PCR reactions that were performed with various single primers or primer combinations were divided into ten subgroups. PCR products were purified and then cloned into the T vectors. The positive clones were propagated and the plasmids were extracted. The target HIV gene fragments were isolated and sequenced, which were correlated precisely with the prediction of restriction analysis. Eighteen gene fragments ranging from 0.1kb to 1kb were prepared for DNA microarray. Restriction display is an effective and rapid method for the isolation of gene 展开更多
关键词 限制性显示技术 制备 HIV-1B亚型 基因片段 人类免疫缺陷病毒1型 dna芯片
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肠淋巴管结扎对失血性休克大鼠肺组织基因表达谱的影响 被引量:2
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作者 牛春雨 赵自刚 +3 位作者 邱景富 韩瑞 张玉平 张静 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期1127-1133,共7页
目的:应用DNA芯片技术,检测和分析肠淋巴管结扎对失血性休克大鼠肺组织基因表达谱的影响,筛选肠淋巴途径与休克肺损伤的相关基因。方法:20只Wistar雄性大鼠随机分为休克组与休克肠淋巴管结扎组,无菌手术,均复制重症失血性休克模型;输液... 目的:应用DNA芯片技术,检测和分析肠淋巴管结扎对失血性休克大鼠肺组织基因表达谱的影响,筛选肠淋巴途径与休克肺损伤的相关基因。方法:20只Wistar雄性大鼠随机分为休克组与休克肠淋巴管结扎组,无菌手术,均复制重症失血性休克模型;输液复苏后休克肠淋巴管结扎组行肠淋巴管结扎,休克组仅在肠淋巴管下穿线;于输液复苏后3 h无菌留取固定位置肺组织,制备匀浆,提取总RNA,反转录cDNA,制备Cy3和Cy5标记的cDNA探针,与包含12 028种基因的大鼠全基因组cDNA芯片杂交,分析差异表达基因。结果:在获得的6 979个有效数据中,2组的基因转录变化在2倍以上的基因共有218个,其中肠淋巴管结扎引起失血性休克大鼠肺组织7个基因上调,211个下调。这些差异表达基因编码蛋白的功能涉及运输、转录调控、信号转导、应激、代谢、细胞发育与分化、细胞黏附、细胞凋亡等方面。结论:肠淋巴管结扎干预休克肺损伤的机制与上调或下调上述相关基因的表达有关。 展开更多
关键词 肠系膜淋巴管 结扎术 休克 失血性 急性肺损伤 dna微序列 大鼠
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HIV基因芯片在艾滋病母婴传播早期诊断中的应用 被引量:2
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作者 石向东 赵广录 +1 位作者 王晓辉 陈琳 《现代预防医学》 CAS 北大核心 2005年第6期639-641,共3页
目的:建立适用于艾滋病母婴传播早期诊断的HIV基因芯片检测技术。方法:在产后180d内,采集HIV抗体阳性母亲所生婴幼儿的样本进行检测。从HIV基因组Gag区选取3对适宜引物,经逆转录-聚合酶链反应(RT PCR)扩增3个HIV目的基因片断。扩增产物... 目的:建立适用于艾滋病母婴传播早期诊断的HIV基因芯片检测技术。方法:在产后180d内,采集HIV抗体阳性母亲所生婴幼儿的样本进行检测。从HIV基因组Gag区选取3对适宜引物,经逆转录-聚合酶链反应(RT PCR)扩增3个HIV目的基因片断。扩增产物纯化后与载体连接,转化到JM10 9宿主菌,接种平板培养,提取质粒。将探针点于尼龙膜上,制成基因芯片。样本提取DNA后与阳性对照质粒混合,地高辛标记显色观察结果,并和抗体检测结果相比较。结果:采用HIV基因芯片对9位HIV抗体阳性母亲所生婴幼儿进行检测,其中阳性2名,阴性7名,与抗体确认结果相比,敏感性和特异性均为10 0 0 %。结论:该方法能够对婴幼儿进行早期诊断,判断HIV母婴传播的方式,便于干预和治疗。 展开更多
关键词 HIV-1 母婴传播 RT-PCR 基因芯片
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