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荧光微量检测细胞内DNA与蛋白质含量 被引量：5
1
作者 王炜 廖国宁 +2 位作者 季金林 雷景迈 何善述 《同济医科大学学报》 CSCD 1999年第3期267-268,272,共3页
应用荧光试剂（３３２５８Ｈｏｅｃｈｓｔ）微量测定细胞内ＤＮＡ含量，应用荧光胺（Ｆｌｕｏｒｅｓｃａｍｉｎｅ）微量测定细胞内蛋白质含量。结果：荧光试剂与ＤＮＡ的Ａ－Ｔ碱基形成复合物后，其激发波长（ＥＸ）由３２０ｎｍ移至３... 应用荧光试剂（３３２５８Ｈｏｅｃｈｓｔ）微量测定细胞内ＤＮＡ含量，应用荧光胺（Ｆｌｕｏｒｅｓｃａｍｉｎｅ）微量测定细胞内蛋白质含量。结果：荧光试剂与ＤＮＡ的Ａ－Ｔ碱基形成复合物后，其激发波长（ＥＸ）由３２０ｎｍ移至３５０ｎｍ，发射波长（ＥＭ）由４８０ｎｍ移至４６０ｎｍ，且荧光强度大为增强。荧光胺与蛋白质反应生成强荧光化合物，在ＥＸ３９０ｎｍ，ＥＭ４７５ｎｍ条件下最低检测限为０．５μｇ／μｌ。该法操作简便，微量快速，重复性好。可用于荧光微量测定ＤＮＡ与蛋白质含量，还可用于观察细胞的增殖。 展开更多
关键词 荧光光度测定法 dna微量测定 蛋白质 细胞增殖
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福建省平潭岛春季恙虫病疫源地现场标本的芯片检测及防制措施 被引量：2
2
作者 操敏 郭恒彬 +3 位作者 唐家琪 李越希 张锦海 陶开华 《西南国防医药》 CAS 2005年第5期467-470,共4页
目的:利用基因芯片技术对平潭岛春季恙虫病疫区的恙虫病疑似病人、宿主、媒介标本进行检测,证实疫源地的存在,采取有针对性的防制措施控制流行。方法:现场采集恙虫病疑似病人外周静脉血和捕鼠采集体表恙螨。根据Ot56kD外膜蛋白基因序列... 目的:利用基因芯片技术对平潭岛春季恙虫病疫区的恙虫病疑似病人、宿主、媒介标本进行检测,证实疫源地的存在,采取有针对性的防制措施控制流行。方法:现场采集恙虫病疑似病人外周静脉血和捕鼠采集体表恙螨。根据Ot56kD外膜蛋白基因序列,设计群特异性引物及探针,制备寡核苷酸芯片。PCR技术分别扩增样本OtDNA片段,与芯片上的探针杂交,用荧光扫描仪检测并分析信号;加强卫生宣传,做好个人防护,搞好环境卫生,做好灭鼠、灭螨等防制措施。结果:对疑似病人血块3份、野鼠脾脏40份、恙螨5份DNA进行基因芯片检测,其中病人血3份,野鼠脾脏4份,恙螨2份检出阳性;经过2年防制,该地区2004年无恙虫病病例报告。结论:基因芯片检测样本具有特异、灵敏、快速的特点,从基因水平证实平潭岛春季恙虫病存在,所采取的防制措施切实有效。 展开更多
关键词 恙虫病 基因芯片 东方体(Ot) 防制
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基于杂交的基因差异表达技术在人胃癌研究中的应用
3
作者 陈怡 姒健敏 《国际消化病杂志》 CAS 2007年第4期278-280,286,共4页
寻找胃癌与正常胃黏膜及癌旁组织的差异基因对全面阐明胃癌发生发展及转移的分子机制具有重要意义。目前,基于杂交的基因差异表达分析技术已广泛用于寻找疾病以及细胞生长发育不同阶段的相关基因。此文就基于杂交的基因差异表达技术的... 寻找胃癌与正常胃黏膜及癌旁组织的差异基因对全面阐明胃癌发生发展及转移的分子机制具有重要意义。目前,基于杂交的基因差异表达分析技术已广泛用于寻找疾病以及细胞生长发育不同阶段的相关基因。此文就基于杂交的基因差异表达技术的原理、特点以及在人胃癌研究中的应用作一综述。 展开更多
关键词 基因差异表达 抑制消减杂交 Cdna微阵列 胃癌
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基因芯片检测技术检测结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药的实际应用效果评价 被引量：18
4
作者 李卫彬 李新旭 +3 位作者 张彤群 屈亚虹 马振亚 李仁忠 《中华临床医师杂志（电子版）》 CAS 2012年第16期4666-4670,共5页
目的评价基因芯片检测技术(基因芯片技术)在结核病防治工作中对结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的检测效果。方法利用传统罗氏培养及药敏试验和基因芯片技术同时对开封市2011年3～11月登记的541例涂阳肺结核患者的痰标本进行异烟肼和... 目的评价基因芯片检测技术(基因芯片技术)在结核病防治工作中对结核分枝杆菌异烟肼和利福平耐药性的检测效果。方法利用传统罗氏培养及药敏试验和基因芯片技术同时对开封市2011年3～11月登记的541例涂阳肺结核患者的痰标本进行异烟肼和利福平耐药检测,以传统罗氏培养及药敏试验为金标准对基因芯片技术的检测效果进行评价。结果具有完整的异烟肼和利福平耐药检测结果的473例患者纳入分析。基因芯片技术对初治涂阳患者异烟肼耐药的检测效果与金标准有统计学差异(P<0.05),灵敏度为68.97%,Kappa值为0.51,阳性预测值为46.51%;检测复治涂阳患者异烟肼耐药的灵敏度为92.59%,Kappa值为0.76,阳性预测值为78.13%;检测初治涂阳患者利福平耐药的灵敏度为90.48%,Kappa值为0.82,阳性预测值为76.00%;检测复治涂阳患者利福平耐药的灵敏度为91.18%,Kappa值为0.82,阳性预测值为88.57%。所有检测结果的特异度均>87.00%,阴性预测值均>93.00%。结论基因芯片技术对初治涂阳患者异烟肼耐药的检测效果不理想,可能会导致该技术对初治涂阳患者耐多药检测的阳性预测值偏低,在结核病防治工作中造成过度诊断。 展开更多
关键词 分枝杆菌 结核 基因型 耐药 基因芯片技术 肺/预防控制
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基因芯片快速检测结核分枝杆菌评估利福平和异烟肼耐药性的价值 被引量：5
5
作者 唐佩军 吴妹英 +4 位作者 施美华 虞忻 宋华锋 朱雪峰 王霞芳 《江苏医药》 CAS 2017年第7期460-463,F0002,共5页
目的探讨基因芯片法快速检测结核分枝杆菌(MTB)评估利福平和异烟肼耐药性的价值。方法收集283例结核患者的痰液标本,采用罗氏固体培养绝对浓度法对MTB进行传统药敏试验。应用晶芯MTB耐药检测试剂盒对MTB利福平耐药相关基因rpoB的rpoB-... 目的探讨基因芯片法快速检测结核分枝杆菌(MTB)评估利福平和异烟肼耐药性的价值。方法收集283例结核患者的痰液标本,采用罗氏固体培养绝对浓度法对MTB进行传统药敏试验。应用晶芯MTB耐药检测试剂盒对MTB利福平耐药相关基因rpoB的rpoB-RRDR 511、513、516、526、531和533位点以及异烟肼耐药相关基因katG315、inhA-15位点进行检测,比较两种检测方法的结果。结果与罗氏法相比,基因芯片法对菌株利福平药敏检测的灵敏度为83.33%,特异度为98.42%,对菌株异烟肼药敏检测的灵敏度为89.19%,特异度为97.15%。结论采用基因芯片法对rpoB基因和katG基因相关位点的检测可为临床评估结核病患者利福平和异烟肼耐药提供一种快速、准确和批量性的检测手段。 展开更多
关键词 基因芯片 结核病 利福平 异烟肼 耐药
原文传递
基因芯片法对苏州市结核临床分离株RFP耐药性快速检测价值的研究 被引量：3
6
作者 叶志坚 唐佩军 +2 位作者 沈兴华 吴妹英 肖玉梅 《临床肺科杂志》 2013年第12期2169-2172,共4页
目的通过基因芯片法检测结核分离株RFP的耐药性,为在临床诊断中利用该法快速鉴别苏州市结核RFP耐药菌株的可靠性奠定基础。方法收集痰液标本45例,利用罗氏固体培养法(金标准)对结核分枝杆菌进行传统药敏试验;利用晶芯结核分枝杆菌耐... 目的通过基因芯片法检测结核分离株RFP的耐药性,为在临床诊断中利用该法快速鉴别苏州市结核RFP耐药菌株的可靠性奠定基础。方法收集痰液标本45例,利用罗氏固体培养法(金标准)对结核分枝杆菌进行传统药敏试验;利用晶芯结核分枝杆菌耐药检测试剂盒及相关仪器通过核酸提取、PCR扩增、芯片杂交和芯片扫描,对结核分枝杆菌RFP耐药相关基因rpoB的rpoB-RRDR 511,513,516,526,531和533位点进行检测,将基因芯片检测获得的RFP药敏判读结果与金标准法获得的结果进行比较分析;将17例经基因芯片检测过的菌株用PCR法扩增包含rpoB-RRDR的基因片段,经纯化后进行DNA直接测序,将基因芯片对rpoB-RRDR 526,531位点的检测结果与DNA测序获得的结果进行比较分析。结果与金标准法相比,基因芯片法对菌株RFP药敏检测的准确率为93.3%(42/45);与DNA测序法相比,基因芯片法对rpoB-RRDR 526,531位点突变型检测的准确率为82.4%(14/17)。结论 rpoB-RRDR 526,531位点突变是导致苏州市结核病RFP耐药的主要因素,通过基因芯片法对rpoB基因相关位点的检测可为临床对RFP耐药结核鉴定提供一种快速、准确和批量性的检测手段,具有极大的应用价值。 展开更多
关键词 基因芯片 结核病 利福平 耐药 dna测序
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基因芯片在分支杆菌菌型鉴定及耐药检测分析
7
作者 周建华 李卫彬 《医药论坛杂志》 2013年第7期57-58,共2页
目的比较基因芯片技术鉴定分支杆菌菌型及检测其耐药性与传统培养药敏方法的一致性。方法应用基因芯片技术对713例涂阳肺结核患者的痰标本进行分支杆菌菌型鉴定及对异烟肼和利福平耐药检测,并与传统罗氏培养及比例法药敏试验进行比较。... 目的比较基因芯片技术鉴定分支杆菌菌型及检测其耐药性与传统培养药敏方法的一致性。方法应用基因芯片技术对713例涂阳肺结核患者的痰标本进行分支杆菌菌型鉴定及对异烟肼和利福平耐药检测,并与传统罗氏培养及比例法药敏试验进行比较。结果基因芯片技术对涂阳痰标本分枝杆菌菌型鉴定的灵敏度和特异度分别为99.83%和80.00%,Kappa值为0.85;检测异烟肼、利福平和异烟肼与利福平同时耐药的灵敏度和特异度分别为80.00%～93.44%和94.21%～98.33%,Kappa值分别为0.65～0.89。结论基因芯片技术对涂阳痰标本进行分枝杆菌菌型鉴定以及对异烟肼、利福平耐药性的检测,与传统培养药敏比较具有较高的一致性。 展开更多
关键词 肺 预防控制 结核分枝杆菌 耐药 基因型 基因芯片技术
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