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细胞毒素相关基因蛋白A抗体阳性幽门螺杆菌感染与急性冠状动脉综合征患者发病的关系研究 被引量:7
1
作者 高峰 季汉华 陈刚 《中国医药》 2017年第5期720-724,共5页
目的探讨细胞毒素相关基因蛋白A(CagA)抗体阳性幽门螺杆菌(Hp)感染与急性冠状动脉综合征(ACS)发病的关系。方法选取2015年3月至2016年10月于民航总医院心血管内科住院拟诊为ACS的患者170例,根据冠状动脉造影检查结果分为ACS组(... 目的探讨细胞毒素相关基因蛋白A(CagA)抗体阳性幽门螺杆菌(Hp)感染与急性冠状动脉综合征(ACS)发病的关系。方法选取2015年3月至2016年10月于民航总医院心血管内科住院拟诊为ACS的患者170例,根据冠状动脉造影检查结果分为ACS组(112例)和非冠心病组(58例)。免疫印迹法测定患者的Hp抗体谱,并同步测定高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL—C)、总胆固醇、同型半胱氨酸、血尿酸、c反应蛋白等,并加以比较。Hp阳性患者根据CagA状态又可分为CagA抗体阳性组和CagA抗体阴性组,进行组问比较。采用多元Logistic回归分析ACS发病的危险因素。结果总人群的Hp阳性率为70.O%(119/170),CagA抗体阳性率为51.2%(87/170)。ACS组男性、吸烟比例高于非冠心病组,HDL—C低于非冠心病组,差异有统计学意义[66.1%(74/112)比58.6%(34/58)、51.8%(58/112)比20.7%(12/58)、(1.2±0.3)mmol/L比(1.3±0.3)mmol/L](P〈0.05)。CagA抗体阳性组ACS患病率明显高于CagA抗体阴性组[73.6%(64/87)比57.8%(48/83)](P〈0.05)。校正年龄、性别、高血压、糖尿病、吸烟史、家族史、总胆固醇、HDL—C、LDL-C后,CagA抗体阳性的Hp感染与ACS发病呈明显正相关(P=0.037)。结论CagA抗体阳性Hp感染与ACS发病呈正相关。 展开更多
关键词 急性冠状动脉综合征 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因蛋白A
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免疫印迹法测定血清幽门螺旋杆菌抗体及其临床意义 被引量:6
2
作者 伍建业 马淑珍 +3 位作者 施嫣红 邬斌贝斌 牛培勤 郭传勇 《同济大学学报(医学版)》 CAS 2005年第4期60-62,共3页
目的研究幽门螺旋杆菌(Hp)抗体在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及正常对照组血清中的阳性情况;探讨不同类型Hp感染与胃肠疾病发病的关系及免疫印迹法测定血清HP抗体临床价值。方法应用免疫印迹法检测160例血清标本(包括慢性胃炎组、消化... 目的研究幽门螺旋杆菌(Hp)抗体在慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌及正常对照组血清中的阳性情况;探讨不同类型Hp感染与胃肠疾病发病的关系及免疫印迹法测定血清HP抗体临床价值。方法应用免疫印迹法检测160例血清标本(包括慢性胃炎组、消化性溃疡组、胃癌组及正常对照组)中细胞毒素相关基因蛋白(CagA)、空泡毒素(VacA)、尿素酶A(UreA)、尿素酶B(UreB)以及鞭毛蛋白抗体的表达情况,计算阳性率,用统计学方法比较各组的差异。结果各患病组CagA抗体阳性率明显高于正常对照组(P<0.01)。鞭毛抗体和VacA抗体,各组无明显差异(P>0.05);而UreA、UreB抗体阳性率正常对照组明显低于患病组(P<0.05)。结论Ⅰ型Hp感染是胃肠疾病发生和发展的关键。免疫印迹法用于HP感染的普查,分型以及治疗后的复查有其独特的优点,值得临床推广。 展开更多
关键词 幽门螺旋杆菌 抗体 细胞毒素相关基因蛋白 空泡毒素 免疫印迹法
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民航飞行员CagA阳性幽门螺杆菌感染与颈动脉粥样硬化的关系研究 被引量:4
3
作者 谢菲 陈红艳 +1 位作者 李谦 陈刚 《航空航天医学杂志》 2018年第8期938-940,共3页
目的探讨民航飞行员细胞毒素相关基因蛋白A(cag A)抗体阳性幽门螺杆菌感染与颈动脉粥样硬化的关系。方法选取2012年3月-2016年10月在民航医学中心鉴定所体检的40岁及以上男性飞行员409例,采用免疫印迹法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体谱,同时... 目的探讨民航飞行员细胞毒素相关基因蛋白A(cag A)抗体阳性幽门螺杆菌感染与颈动脉粥样硬化的关系。方法选取2012年3月-2016年10月在民航医学中心鉴定所体检的40岁及以上男性飞行员409例,采用免疫印迹法检测幽门螺杆菌(Hp)抗体谱,同时收集受检者高血压、糖尿病、冠状动脉粥样硬化等病史,测定总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、空腹血糖(FBS)。根据Cag A状态可分为cag A抗体阳性组和cag A抗体阴性组,进行组间比较。采用Logistic回归分析颈动脉粥样硬化的危险因素。结果 Hp感染率为62.8%(257/409),Cag A抗体阳性率41.8%(171/409)。颈动脉粥样硬化组高血压、冠脉粥样硬化(狭窄)发病率高于无颈动脉粥样硬化组(P<0.05),两组间在年龄、收缩压、舒张压、甘油三脂存在统计学差异。Cag A抗体阳性组颈动脉粥样硬化发生率(27.49%)高于Cag A抗体阴性组(18.91%)(P<0.05)。Logistic回归分析示Cag A阳性幽门螺杆菌感染与颈动脉粥样硬化呈正相关(P=0.028)。结论在民航飞行员中Cag A阳性幽门螺杆菌感染与颈动脉粥样硬化呈正相关。 展开更多
关键词 飞行员 颈动脉粥样硬化 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因蛋白A
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健康体检人群不同分型幽门螺杆菌感染与代谢综合征的关系 被引量:4
4
作者 刘浚沅 贺永梅 +1 位作者 侯晓琳 崔梅花 《中国综合临床》 2021年第6期555-559,共5页
目的探讨健康体检人群中不同分型幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)之间的关系。方法收集2019年1-12月在航天中心医院进行健康体检的成年人4602名数据进行研究,采用免疫印迹法进行血清Hp抗体... 目的探讨健康体检人群中不同分型幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)感染与代谢综合征(metabolic syndrome,MS)之间的关系。方法收集2019年1-12月在航天中心医院进行健康体检的成年人4602名数据进行研究,采用免疫印迹法进行血清Hp抗体分型的检测,收集肝脏超声检查结果及血液生化检查等资料进行统计分析。结果体检人群中血清Hp抗体阳性者为2018例,血清Hp抗体阴性者为2584例。通过血清Hp抗体分型检测,根据是否表达细胞毒素相关蛋白(cytotoxin-associated gene A protein,CagA)与空泡毒素将2018例血清Hp抗体阳性者分为Ⅰ型组1088例(53.9%,1088/2018)、Ⅱ型组930例(46.1%,930/2018)。Ⅰ型组与Ⅱ型组研究对象的年龄、收缩压及非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)患病率比较差异均有统计学意义(P均<0.05),而两组研究对象的性别、空腹血糖、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、舒张压、体质量指数(body mass index,BMI)及腰围比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。两组研究对象MS患病率比较差异无统计学意义[18.3%(199/1088)与19.0%(177/930),P=0.670]。多因素Logistic回归分析显示,经过年龄、性别及MS相关指标等变量校正后,不同血清Hp抗体分型与MS不存在相关性(OR=1.194,95%CI 0.842~1.693,P=0.319)。结论不同分型的Ⅰ型和Ⅱ型Hp感染与MS不存在明显相关性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白 空泡毒素 代谢综合征
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幽门螺杆菌东亚型菌株GZ7/cagA^(+)和GZ7/ΔcagA源外膜囊泡的蛋白组学比较
5
作者 彭国玲 周佳 +3 位作者 廖永慧 谢渊 周建奖 赵艳 《贵州医科大学学报》 CAS 2024年第5期636-644,共9页
目的通过分离、鉴定和比较细胞毒素相关基因A蛋白(cagA)、阳性幽门螺杆菌(H.pylori)、东亚型菌株GZ7/cagA^(+)及其cagA敲除菌株GZ7/ΔcagA来源的外膜囊泡(OMVs)中的差异表达蛋白(DEPs),分析cagA基因对OMVs中蛋白表达的影响。方法采用超... 目的通过分离、鉴定和比较细胞毒素相关基因A蛋白(cagA)、阳性幽门螺杆菌(H.pylori)、东亚型菌株GZ7/cagA^(+)及其cagA敲除菌株GZ7/ΔcagA来源的外膜囊泡(OMVs)中的差异表达蛋白(DEPs),分析cagA基因对OMVs中蛋白表达的影响。方法采用超速离心法分别提取GZ7/ΔcagA和GZ7/cagA^(+)的OMVs,通过透射电镜和纳米颗粒追踪技术鉴定其形态和粒径,使用Western blot技术验证两组OMVs中cagA蛋白的表达,分析OMVs的蛋白质组学;对蛋白组学数据进行质控分析和主成分分析鉴定后,以上调蛋白倍数变化(FC)>2.0、下调蛋白FC<0.5,FDR≤0.05为筛选条件筛选DEPs,利用OmicsBean在线工具、Gene Ontology和KOBAS对DEPs进行生物信息学分析;采用免疫荧光鉴定OMVs细胞在细胞中的定位,实时无标记细胞分析仪检测细胞活性。结果通过电镜和粒径证实成功分离纯化了OMVs;蛋白质组分析发现,GZ7/cagA^(+)-OMVs组与GZ7/ΔcagA-OMVs组比较有79个DEPs,其中38个蛋白下调、41个蛋白上调;生物信息学分析显示,DEPs主要与丙酮酸代谢、丙酸代谢、糖酵解/糖异生及柠檬酸循环等代谢途径有关;免疫荧光和实时无标记细胞分析证实H.pylori来源的OMVs能进入细胞并定位在线粒体并抑制细胞增殖。结论cagA能影响H.pylori分泌的OMVs中蛋白质的成分,DEPs可能促进cagA^(+)H.pylori在胃黏膜上的定植及致病性。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因A蛋白 胃癌 蛋白组 差异表达蛋白 线粒体
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细胞毒素相关基因A及细胞毒素相关蛋白A研究进展 被引量:1
6
作者 胡永敏 江伟 《医学综述》 2010年第19期2896-2898,共3页
细胞毒素相关基因A及细胞毒素相关蛋白A是幽门螺杆菌重要的毒力因子,具有遗传基因多态性和地区分布的差异,与消化道溃疡、胃炎、胃癌及一些非胃肠道疾病的发生发展密切相关,并影响胃损害的严重程度及最终临床结局。其致病机制主要与影... 细胞毒素相关基因A及细胞毒素相关蛋白A是幽门螺杆菌重要的毒力因子,具有遗传基因多态性和地区分布的差异,与消化道溃疡、胃炎、胃癌及一些非胃肠道疾病的发生发展密切相关,并影响胃损害的严重程度及最终临床结局。其致病机制主要与影响多条细胞信息传递通路有关。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因A 细胞毒素相关蛋白A 毒素相关基因致病岛
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布拉酵母菌辅助治疗对老年CagA和VacA阳性幽门螺杆菌感染患者IL-6和IL-8及肠道菌群的影响 被引量:2
7
作者 何晨熙 孔凡庭 +6 位作者 朱新影 王魁向 孔凡磊 周培培 刘艳玲 赵巍 赵东强 《中国微生态学杂志》 CAS CSCD 2022年第10期1191-1196,共6页
目的评价布拉酵母菌(S.boulardii)对老年细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated gene A protein,CagA)和空泡毒素(vacuolating cytotoxin A,VacA)阳性幽门螺杆菌(H.pylori)感染患者炎症因子及肠道菌群的影响,以探讨S.boulardii治疗H.p... 目的评价布拉酵母菌(S.boulardii)对老年细胞毒素相关蛋白A(cytotoxin-associated gene A protein,CagA)和空泡毒素(vacuolating cytotoxin A,VacA)阳性幽门螺杆菌(H.pylori)感染患者炎症因子及肠道菌群的影响,以探讨S.boulardii治疗H.pylori I型高毒力株感染的机制。方法选择我院200例CagA和VacA阳性的老年H.pylori感染者,采用随机数字表分成四联组和S.boulardii组。四联组患者采用铋剂四联疗法,S.boulardii组在铋剂四联疗法基础上加用S.boulardii。比较两组患者H.pylori根除率、胃黏膜组织学评分、临床疗效评分、不良反应、血清白细胞介素(IL)-6及IL-8水平、肠道菌群分布。结果(1)S.boulardii组H.pylori根除率按方案(PP)分析和按意向性(ITT)分析均高于四联组(85.1%vs 72.8%;80.0%vs 67.0%),差异均有统计学意义(均P<0.05)。(2)S.boulardii组患者不良反应发生率(7.0%)低于四联组(21.0%),差异有统计学意义(χ^(2)=8.140,P=0.004)。(3)治疗后,两组患者胃黏膜组织学评分、临床症状评分、血清IL-6及IL-8水平均较治疗前降低,且S.boulardii组低于四联组(均P<0.05)。(4)治疗后,四联组患者肠道乳杆菌、双歧杆菌数量较治疗前减少,肠杆菌、肠球菌数量较治疗前增加(均P<0.05);而S.boulardii组患者肠道乳杆菌、双歧杆菌数量较治疗前增加(均P<0.05),肠杆菌、肠球菌数量较治疗前差异无统计学意义(均P>0.05)。结论S.boulardii辅助四联疗法可提高老年患者H.pylori I型高毒力株的根除效果,减轻患者胃黏膜组织炎症,降低不良反应,其机制可能与S.boulardii下调免疫炎症介质表达和改善肠道菌群分布有关。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白A 空泡毒素 肠道菌群 布拉酵母菌
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免疫印迹试验在诊断儿童幽门螺旋杆菌感染中的应用评价 被引量:2
8
作者 陈运生 周少明 +1 位作者 刘彬 孙玲玲 《实用医技杂志》 2006年第11期1818-1819,共2页
目的:评价免疫印迹试验(WesternBlotting)在诊断不同年龄组及不同病理表现儿童幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染中的应用价值。方法:对450例有消化道症状的患儿,进行胃镜检查并取病变处胃黏膜组织行病理学检查,以及13C尿素呼气... 目的:评价免疫印迹试验(WesternBlotting)在诊断不同年龄组及不同病理表现儿童幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染中的应用价值。方法:对450例有消化道症状的患儿,进行胃镜检查并取病变处胃黏膜组织行病理学检查,以及13C尿素呼气试验(13Cureabreathtest,13CUBT)、血清免疫印迹试验及胃液HPDNAPCR检查。结果:在4岁~6岁和6岁~12岁组患儿中,13CUBTHP检出率明显高于免疫印迹试验(P<0.01);在12岁~18岁组患儿中,13CUBTHP检出率与免疫印迹试验比较差异无显著性(P>0.05)。细胞毒性基因相关蛋白(Cytotoxinassociatedgeneprotein)阳性的HP感染在溃疡病组明显高于慢性胃炎组和正常组(P<0.05),慢性胃炎组CagA(Cytotoxinassociatedgeneprotein,CagA)阳性HP显著高与正常组(P<0.05)。结论:在12岁以上的少年患儿中,免疫印迹试验可作为快速诊断HP感染的可靠手段,并且能判断出是否为产毒菌株感染。在12岁以下的儿童中,免疫印迹试验最好与13CUBT联合使用。 展开更多
关键词 免疫印迹试验 ^13C-尿素呼气试验 幽门螺旋杆菌 细胞毒性基因相关蛋白 儿童
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胃十二指肠疾病患者感染幽门螺杆菌的cagA基因和血清CagA抗体状况 被引量:1
9
作者 张尤历 刘厚钰 +1 位作者 陈梅芳 周康 《镇江医学院学报》 2000年第1期4-6,共3页
目的 :探讨幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与胃十二指肠疾病的关系。方法 :用聚合酶链反应方法测定 62株由慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因 ;用酶免疫方法测定同一患者血清CagA抗体。结果 :HpcagA基因阳性率为 5 6.45 ... 目的 :探讨幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与胃十二指肠疾病的关系。方法 :用聚合酶链反应方法测定 62株由慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因 ;用酶免疫方法测定同一患者血清CagA抗体。结果 :HpcagA基因阳性率为 5 6.45 %。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者感染HpcagA基因阳性率分别为 5 5 .5 6%、5 4.17%和 63 .64 % ,三种疾病患者之间感染Hp的cagA基因阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 ) ;慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者血清CagA抗体阳性率分别为 70 .3 7%、79.17%和 40 .0 0 % ,血清CagA抗体总阳性率为 68.85 %。慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者之间血清CagA抗体阳性率无显著差异 (P >0 .0 5 )。结论 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 胃十二指肠疾病 Ca基因 CAGA抗体
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幽门螺杆菌CagA抗体检测的间接ELISA法建立及评价
10
作者 李玉萍 成蕾 +3 位作者 王洪涛 乔苗苗 熊丹 林骏 《中国医药生物技术》 2023年第4期304-310,共7页
目的制备高纯度、具有生物活性的CagA蛋白,建立间接ELISA法检测CagA抗体,并对该方法进行评估。方法构建重组表达质粒CagA-PET28a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,利用蛋白纯化液相色谱仪进行镍亲和层析纯化后再进行离子交换层析纯... 目的制备高纯度、具有生物活性的CagA蛋白,建立间接ELISA法检测CagA抗体,并对该方法进行评估。方法构建重组表达质粒CagA-PET28a,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,利用蛋白纯化液相色谱仪进行镍亲和层析纯化后再进行离子交换层析纯化。利用验证后的蛋白建立了间接ELISA法,通过与市售试剂盒进行比对,对间接ELISA法进行评价。结果成功表达并纯化出了高纯度的CagA蛋白,分子量为130 kD,纯度为99.87%。利用该抗原建立了间接ELISA法,并对204例待测血清进行检测。与Mikrogen公司血清学检测试剂盒的结果比较,阳性符合率为86.5%,阴性符合率为91%,总符合率为88.7%。对伯劳特公司提供的参考品进行检测,表明该间接ELISA法具有较好的重复性且最低检测限检测结果符合预期。结论利用重组CagA蛋白建立的检测患者血清中CagA抗体的方法具有较好的检测性能,且重复性较好,最低检测限与市售试剂盒相当。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 细胞毒素相关基因A 蛋白重组表达 间接ELISA 血清学检测
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十二指肠球部溃疡患者幽门螺杆菌感染的表型特征及其意义
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作者 吴炎 林木贤 +3 位作者 赵娅敏 康文全 高燕 张厚德 《中国医师进修杂志(内科版)》 2008年第11期12-14,共3页
目的研究十二指肠球部溃疡患者中Hp的表型特征及其亚型,并评价Hp表型分型在十二指肠球部溃疡患者中的临床意义。方法用免疫印迹法检测135例十二指肠球部溃疡(研究组)及140例慢性浅表性胃炎(对照组)患者血清中细胞毒素相关蛋白A(C... 目的研究十二指肠球部溃疡患者中Hp的表型特征及其亚型,并评价Hp表型分型在十二指肠球部溃疡患者中的临床意义。方法用免疫印迹法检测135例十二指肠球部溃疡(研究组)及140例慢性浅表性胃炎(对照组)患者血清中细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体、空泡细胞毒素A(VacA)抗体和尿素酶(UreA、UreB)抗体及其亚型。结果研究组患者中,中间型Hp感染率为21.5%,明显低于对照组患者的27.9%,P〈0.05。VacA抗体和cagA抗体均可单独表达。Hp表型表达与Hp各亚型表达之间,CagA和VacA抗体在两组间比较差异无统计学意义,P〉0.05,但尿素酶抗体在研究组患者中的表达率明显高于对照组患者,P〈0.05。Ⅰ型Hp中尿素酶30ku亚基在研究组患者中的表达率(45.5%)亦明显高于对照组患者(33.3%),P〈b.05。结论cagA的表达不依赖于VaeA的表达。Hp多种亚型如128kuCagA、116kuCagA、95kuVacA、91kuVacA、30kuUreA同时表达在致十二指肠球部溃疡中起综合作用。Ⅰ型Hp且同时表达30kuUreA的菌株可能有更强的毒力且更易致十二指肠球部溃疡。 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门 免疫印迹法 表型 细胞毒素相关基因蛋白 空泡毒素
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幽门螺杆菌诱导胃上皮细胞白细胞介素-8基因转录的信号转导机制
12
作者 李淑德 许国铭 +1 位作者 李兆申 纪徐淮 《胃肠病学》 2005年第2期107-109,共3页
背景:亚洲与欧美国家的幽门螺杆菌(H.pylori)细胞毒素相关基因致病岛(cagPAI)存在地域差异,但此种差异与胃上皮细胞白细胞介素(IL)-8基因转录信号转导机制之间的关系尚不明确。目的:探讨我国H.pylori菌株诱导胃上皮细胞IL-8基因转录的... 背景:亚洲与欧美国家的幽门螺杆菌(H.pylori)细胞毒素相关基因致病岛(cagPAI)存在地域差异,但此种差异与胃上皮细胞白细胞介素(IL)-8基因转录信号转导机制之间的关系尚不明确。目的:探讨我国H.pylori菌株诱导胃上皮细胞IL-8基因转录的信号转导机制。方法:以DNA杂交法分析长海医院5株临床分离H.pylori菌株的cagPAI状态。将含IL-8报告基因的人胃上皮细胞系L5F11分别与5株H.pylori共培养,或与各蛋白激酶(PK)抑制剂预作用1h后再行共培养,用液体闪烁计数仪测定L5F11细胞的荧光素酶活性(IL-8基因转录),用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测IL-8蛋白浓度。结果:在所分离的5株临床H.pylori菌株中,4株具有完整的cagPAI,1株cagPAI部分丢失。蛋白酪氨酸激酶(PTK)抑制剂除莠霉素A不仅能显著抑制H.pylori诱导的L5F11细胞的荧光素酶活性(P<0.05或P<0.01),而且能抑制其IL-8蛋白的分泌(P<0.05或P<0.01);PKG抑制剂KT5823和PKC抑制剂抑激酶素C对H.pylori诱导的IL-8基因转录和蛋白分泌均无影响。结论:与欧美国家的H.pylori菌株一样,本研究临床分离的H.pylori菌株亦通过PTK途径诱导胃上皮细胞IL-8基因转录。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 诱导 胃上皮细胞 白细胞介素-8 基因转录 信号转导机制
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人胃上皮细胞中幽门螺杆菌CagA相关未知磷酸化蛋白和磷酸化位点分析
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作者 肖迪 赵飞 +4 位作者 孟几亮 何利华 宋衍燕 王海滨 张建中 《胃肠病学》 2009年第1期22-26,共5页
背景:细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)是Ⅰ型幽门螺杆菌(H.pylori)的主要毒力因子。H.pylori胃癌、胃炎相关株和CagA缺失(△CagA)株的蛋白质组学研究尚未发现CagA相关生物标记蛋白。目的:分析H.pyloriCagA阳性株和△CagA株作用后... 背景:细胞毒素相关基因A蛋白(CagA)是Ⅰ型幽门螺杆菌(H.pylori)的主要毒力因子。H.pylori胃癌、胃炎相关株和CagA缺失(△CagA)株的蛋白质组学研究尚未发现CagA相关生物标记蛋白。目的:分析H.pyloriCagA阳性株和△CagA株作用后人胃上皮细胞中差异表达的未知磷酸化蛋白和磷酸化位点,为研究CagA的致病机制提供线索。方法:以金属离子亲和吸附富集技术富集经H.pylori标准株和△CagA株作用4h的人胃腺癌细胞株AGS的磷酸化蛋白,双向电泳(2-DE)分离蛋白,飞行时间质谱(TOF-MS)技术鉴定差异蛋白点。结果:H.pylori标准株作用后,AGS细胞FAM50A蛋白276位丝氨酸发生磷酸化,PQBP1蛋白227~251序列中有磷酸化位点。与H.pylori标准株相比,△CagA株作用于AGS细胞可引起至少13种未知磷酸化蛋白的变化,其质谱图中均出现中性丢失峰,其中2种表达量增加,4种表达量降低,6种消失,1种新发生磷酸化。结论:CagA阳性H.pylori感染可致AGS细胞FAM50A和PQBP1蛋白发生磷酸化。所发现的13种未知磷酸化蛋白为揭示CagA的致病机制提供了线索。 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门 毒力因子类 细胞毒素相关基因A蛋白 磷酸化蛋白 磷酸化位点 蛋白质组学
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成人慢性免疫性血小板减少症与幽门螺杆菌CagA蛋白的临床相关性研究 被引量:5
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作者 吴良华 李慧 +4 位作者 万纯黔 祝彪 王晓冬 王春森 张晋琳 《实用医院临床杂志》 2013年第3期56-61,共6页
目的探讨幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)CagA蛋白(H.pylori-CagA)在慢性免疫性血小板减少症(Chronic Immune thrombocytopenia,CITP)患者发病中的作用。方法收集四川省人民医院110例伴有H.pylori感染的CITP患者,按就诊先... 目的探讨幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,H.pylori)CagA蛋白(H.pylori-CagA)在慢性免疫性血小板减少症(Chronic Immune thrombocytopenia,CITP)患者发病中的作用。方法收集四川省人民医院110例伴有H.pylori感染的CITP患者,按就诊先后顺序编号后,应用随机数字表分为治疗组与对照组各55例,进行CagA蛋白抗体定性、定量检测。治疗组接受根除H.pylori治疗,对照组不接受根除H.pylori治疗,其他治疗方案两组相同。6~8周后复查14碳尿素酶呼气试验(14C-urea breath test,14C-UBT),3~5个月随访监测患者治疗前后血小板计数、H.pylori-CagA-IgG浓度变化,比较两组间是否存在显著差异,进而探讨CITP与幽门螺杆菌CagA蛋白的临床相关性。结果 110例患者中46例CagA蛋白抗体阳性,CagA阳性率41.82%(46/110);治疗组23例H.pylori-CagA阳性病例根除H.pylori治疗后血小板计数明显改善,H.pylori-CagA蛋白抗体滴度较前降低,且有效率明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);而32例CagA蛋白抗体阴性病例治疗前后血小板数量变化无统计学意义(P>0.05)。对照组23例H.pylori-CagA阳性病例H.pylori-CagA蛋白抗体滴度及血小板数量变化无统计学意义(P>0.05);32例CagA蛋白抗体阴性病例,治疗前后血小板数量变化无统计学意义(P>0.05)。提示H.pylori-CagA蛋白与CITP的发生、发展密切相关。结论对有H.pylori感染的CITP患者增加血清抗体检测,对于临床上治疗CITP可能有良好的预测作用且H.pylori-CagA抗体阳性者进行根除H.pylori治疗可作为一个新的非免疫治疗的方法,不良反应少。 展开更多
关键词 慢性免疫性血小板减少症 幽门螺杆菌 幽门螺杆菌CagA蛋白
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幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与VacA表达关系的研究
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作者 张尤历 刘厚钰 《中国临床医学杂志》 1999年第4期324-326,共3页
目的:探讨幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与VacA表达的关系。方法:用聚合酶镇反应法(PCR)测定由62例慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者胃窦粘膜分离获得Hp菌株;用酶免疫技术测定患者血清HpCagA抗体;用Hela细胞培养法测定Hp菌株V... 目的:探讨幽门螺杆菌cagA基因和血清CagA抗体与VacA表达的关系。方法:用聚合酶镇反应法(PCR)测定由62例慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌患者胃窦粘膜分离获得Hp菌株;用酶免疫技术测定患者血清HpCagA抗体;用Hela细胞培养法测定Hp菌株VacA活性。结果:cagA基因阳性和阴性Hp菌株表达VacA阳性率分别为40.00%和33.33%(P>0.05);血清CagA抗体阳性和阴性患者感染Hp菌株体外产生VacA阳性率分别为33.33%和42.11%(P>0.05)。结论:HpcagA基因和血清CagA抗体与VacA表达之间无相互依赖关系,vacA基因是一个独立的标志物。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 空泡形成细胞毒素 CAGA基因 CAGA抗体
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幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A蛋白不同片段对胃癌细胞γH2AX表达的影响
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作者 贾岑岑 王琴容 +2 位作者 周建奖 程薇 赵艳 《贵州医科大学学报》 CAS 2022年第2期133-140,共8页
目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)细胞毒素相关基因A(CagA)蛋白不同片段对胃癌细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达的影响。方法取前期分离的H.pylori东亚株GZ7及其CagA敲除株H.pylori GZ7ΔCagA感染的癌细胞株AGS,采用免疫荧光方法检测DNA... 目的探讨幽门螺杆菌(H.pylori)细胞毒素相关基因A(CagA)蛋白不同片段对胃癌细胞磷酸化组蛋白H2AX(γH2AX)表达的影响。方法取前期分离的H.pylori东亚株GZ7及其CagA敲除株H.pylori GZ7ΔCagA感染的癌细胞株AGS,采用免疫荧光方法检测DNA双链断裂标志物γH2AX的表达;构建不同序列的CagA表达载体(载体a、b、c、d、e),转化大肠杆菌,提取质粒后测序鉴定,将鉴定后的载体转染AGS,采用免疫荧光方法检测γH2AX的表达,并通过流式细胞术检测细胞周期。结果成功鉴定了含不同片段的CagA载体;H.pylori GZ7感染的胃癌细胞AGS核内γH2AX的表达高于H.pylori GZ7ΔCagA感染的细胞(P<0.05);与NC组比较,不同序列CagA载体转染后胃癌细胞AGS中γH2AX表达均有增加(P<0.05或P<0.01),且载体b、c及d表达增加较明显(P<0.01);载体a和c转染后的胃癌细胞AGS的G0/G1期细胞比例升高(P<0.05),载体b、c、d及e转染后胃癌细胞AGS的G2/M期比例明显升高(P<0.01)。结论CagA是H.pylori感染诱导胃癌细胞DNA双链断裂的重要因素,CagA中的EPYIA基序是这种DNA损伤的重要结构。 展开更多
关键词 螺杆菌 幽门 胃肿瘤 细胞周期 细胞毒素相关基因A蛋白 DNA损伤 磷酸化组蛋白H2AX
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幽门螺杆菌cagⅡ对胃上皮细胞IL-8基因转录的影响及机制 被引量:7
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作者 李淑德 许国铭 +2 位作者 李兆申 Crabtree JE Neelam B 《中华消化杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第4期230-233,共4页
目的 探讨HpcagⅡ对胃上皮细胞IL 8基因转录的影响及信号传导机制。 方法 构建cagⅡ基因位点缺失Hp突变株及带有IL 8报告基因的人胃癌细胞系L5F11,用液体闪烁计数仪测定荧光素酶 (IL 8转录 )活性 ,用ELISA法测定IL 8蛋白浓度。结果 ... 目的 探讨HpcagⅡ对胃上皮细胞IL 8基因转录的影响及信号传导机制。 方法 构建cagⅡ基因位点缺失Hp突变株及带有IL 8报告基因的人胃癌细胞系L5F11,用液体闪烁计数仪测定荧光素酶 (IL 8转录 )活性 ,用ELISA法测定IL 8蛋白浓度。结果 所有Hp突变株诱导荧光素酶活性与IL 8蛋白浓度较亲代菌株 2 6 6 95均降低 [(0 .13± 0 .0 1)× 10 6cpm比 (0 .5 9± 0 .0 5 )× 10 6cpm (P <0 .0 1) ;(0 .73± 0 .13)ng/ml比 (2 .2 2± 0 .6 5 )ng/ml,(P <0 .0 5 ) ]。PTK抑制剂herbimycinA不仅抑制Hp诱导的荧光素酶活性 [(0 .71± 0 .18)× 10 6cpm比 (1.5 1±0 .2 3)× 10 6cpm ,(P <0 .0 5 ) ],而且抑制IL 8蛋白表达 [(0 .83± 0 .41)ng/ml比 (3.2 2± 0 .5 9)ng/ml,(P <0 .0 5 ) ],但herbimycinA对TNFα诱导的荧光素酶活性及IL 8蛋白表达均无影响 (P均 >0 .0 5 ) ;PKA抑制剂H7抑制TNFα诱导的荧光素酶活性 [(0 .74± 0 .16 )× 10 6cpm比 (2 .6 2± 0 .2 6 )× 10 6cpm ,(P <0 .0 0 1) ]及IL 8蛋白表达 [(1.45±0 .38)ng/ml比 (4 .12± 0 .43)ng/ml,(P <0 .0 1) ],而对Hp诱导的荧光素酶活性无影响 (P >0 .0 5 )。 结论 HpcagⅡ中的多个基因能够调节胃上皮细胞IL 8基因转录 。 展开更多
关键词 幽门螺杆菌 cagⅡ 胃上皮细胞 白细胞介素-8
原文传递
用噬菌体展示技术筛选幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白基因结合蛋白的研究 被引量:5
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作者 王克霞 陈琳 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2008年第7期487-489,共3页
目的筛选幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)基因结合蛋白,探索CagA致病机理。方法应用噬菌体展示技术,以幽门螺杆菌CagA基因片段作为固相筛选分子,对噬菌体人胃细胞cDNA文库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"富集,噬斑裂解液PCR扩增后... 目的筛选幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白(CagA)基因结合蛋白,探索CagA致病机理。方法应用噬菌体展示技术,以幽门螺杆菌CagA基因片段作为固相筛选分子,对噬菌体人胃细胞cDNA文库进行4轮"吸附-洗脱-扩增"富集,噬斑裂解液PCR扩增后,进行DNA序列分析和同源性生物信息学搜索,确定编码结合蛋白的种类。结果噬菌体经富集后,筛选出36个阳性克隆,构建了克隆载体。序列测定后经过同源性搜索,确定幽门螺杆菌CagA基因共编码核纤层蛋白B1和胰岛素样生长因子结合蛋白2两种已知蛋白。结论用噬菌体人胃cDNA文库筛选得到幽门螺杆菌CagA基因DNA结合蛋白,为研究CagA致病机理,幽门螺杆菌疫苗的研制和治疗等提供依据。 展开更多
关键词 噬菌体展示 幽门螺杆菌 细胞毒素相关蛋白(CagA) 结合蛋白
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血清CagA抗体、G-17、PINP在结直肠癌和腺瘤性息肉中的诊断价值
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作者 王晓倩 于宁 +4 位作者 李华 朱淑娜 刘琼 翟颖 杜洁 《中国实验诊断学》 2024年第11期1334-1339,共6页
目的探究血清细胞毒素相关基因A(CagA)抗体、胃泌素-17(G-17)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)在结直肠癌和腺瘤性息肉中的诊断价值。方法选取保定市第一中医院2022年1月至2023年6月期间收治的77例结直肠癌患者及105例腺瘤性息肉患者作为... 目的探究血清细胞毒素相关基因A(CagA)抗体、胃泌素-17(G-17)、Ⅰ型前胶原氨基端前肽(PINP)在结直肠癌和腺瘤性息肉中的诊断价值。方法选取保定市第一中医院2022年1月至2023年6月期间收治的77例结直肠癌患者及105例腺瘤性息肉患者作为研究对象,另选取同期在医院体检的83名健康者作为对照组。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CagA抗体、G-17和PINP对腺瘤性息肉和结肠癌的诊断价值。结果腺瘤性息肉组和结直肠癌组血清CagA抗体阳性率及G-17表达水平均高于对照组,且结直肠癌组高于腺瘤性息肉组(P<0.05),血清PINP表达水平则与之相反;血清CagA抗体、G-17和PINP表达与息肉直径、结直肠癌分化程度及Dukes分期有关(P<0.05);血清CagA抗体、G-17和PINP单独检测腺瘤性息肉的曲线下面积(AUC)分别为0.547、0.704和0.656,而三者联合检测的AUC为0.829,三者联合检测优于血清CagA抗体、G-17和PINP各自单独检测(Z_(三者联合-CagA抗体)=4.099、Z_(三者联合-G-17)=4.317,Z_(三者联合-PINP)=4.942,P均<0.001);血清CagA抗体、G-17和PINP单独检测结肠癌的AUC分别为0.665、0.659和0.826,而三者联合检测的AUC为0.900,三者联合检测优于血清CagA抗体、G-17和PINP各自单独检测(Z_(三者联合-CagA抗体)=6.196、Z_(三者联合-G-17)=5.988,Z_(三者联合-PINP)=3.992,P均<0.001)。结论血清CagA抗体、G-17和PINP与腺瘤性息肉和结直肠癌的发生及发展密切相关,三者联合检测能够辅助临床诊断腺瘤性息肉和结直肠癌。 展开更多
关键词 细胞毒素相关基因A 胃泌素-17 Ⅰ型前胶原氨基端前肽 结直肠癌 腺瘤性息肉
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CK2介导幽门螺杆菌CagA蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞内IL-8表达的机制研究 被引量:4
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作者 顾岚 陈颖 +1 位作者 周仁民 林琼 《癌症进展》 2019年第22期2652-2655,共4页
目的探讨蛋白激酶CK2在幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(CagA)蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞(AGS)中白细胞介素-8(IL-8)表达中的作用。方法培养人AGS细胞,依据CagA蛋白加入与否分为S1组(加入CagA蛋白)、S2组(未加入CagA蛋白);依据是否转染或加... 目的探讨蛋白激酶CK2在幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(CagA)蛋白诱导人胃腺癌上皮细胞(AGS)中白细胞介素-8(IL-8)表达中的作用。方法培养人AGS细胞,依据CagA蛋白加入与否分为S1组(加入CagA蛋白)、S2组(未加入CagA蛋白);依据是否转染或加入p65 siRNA、CagA分为A1组(未转染p65 siRNA且未加入CagA)、A2组(转染p65 siRNA但未加入CagA)、A3组(未转染p65 siRNA但加入CagA)、A4组(转染p65siRNA且加入CagA);依据芹菜素(apigenin)、CagA加入与否分为B1组(未加入apigenin和CagA)、B2组(加入apigenin但未加入CagA)、B3组(未加入apigenin但加入CagA)、B4组(加入apigenin和CagA)。根据p65 siRNA转染情况分为A组(转染ConsiRAN但未转染p65 siRNA)、B组(转染p65 siRNA但未转染ConsiRAN);将加入CagA蛋白0、20 min时的细胞分为C组、D组。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测IL-8蛋白表达,蛋白质印迹法(Western blot)检测β-actin、p65和p65-p的表达,采用双荧光素酶报告系统检测相对荧光强度。结果 S1组AGS细胞中IL-8蛋白的表达水平为(871.25±12.89)pg/ml,高于S2组的(119.00±12.70)pg/ml,差异有统计学意义(P﹤0.05)。A1组和A2组细胞的IL-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);A4组细胞的IL-8蛋白表达水平明显低于A3组(P﹤0.01)。B组细胞的p65蛋白表达水平低于A组。B1组和B2组细胞的IL-8蛋白表达水平比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);B4组细胞的IL-8蛋白表达水平明显低于B3组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。D组细胞的p65-p蛋白表达水平高于C组,B4组细胞的p65-p蛋白表达水平低于B3组。B1组和B2组细胞的相对荧光强度比较,差异无统计学意义(P﹥0.05);B4组细胞的相对荧光强度水平明显低于B3组,差异有统计学意义(P﹤0.01)。结论 CK2可能参与了CagA诱导AGS细胞中核因子κB(NF-κB)激活及IL-8表达的过程。 展开更多
关键词 细胞毒素相关基因A蛋白 蛋白激酶CK2 核因子κB 白细胞介素-8
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