目的:评估Ca(OH)_2、TAP、DAP的细胞毒性作用及其诱导人牙周膜成纤维细胞中细胞因子mRNA表达的能力。方法:将1 m L移液枪头尖端直径标准化为0. 4 mm。实验材料与蒸馏水混合后填入移液枪头,并固定在1. 5 m L EP管顶盖,EP管加入0. 5 m L...目的:评估Ca(OH)_2、TAP、DAP的细胞毒性作用及其诱导人牙周膜成纤维细胞中细胞因子mRNA表达的能力。方法:将1 m L移液枪头尖端直径标准化为0. 4 mm。实验材料与蒸馏水混合后填入移液枪头,并固定在1. 5 m L EP管顶盖,EP管加入0. 5 m L细胞培养基。样本孵育24 h或48 h,收集洗脱液。将人牙周膜成纤维细胞以2×10~4个细胞/孔的密度接种在96孔板中并孵育24 h。然后将细胞暴露于每种测试材料的洗脱液培养基、0. 1%SDS(阴性对照)并孵育24 h。使用多参数细胞毒性测定法(XTT、NR、CVDE)体外评估测试材料的细胞毒性,实时荧光定量PCR检测炎症细胞因子mRNA表达。结果:用Ca(OH)_2处理的牙周膜成纤维细胞细胞的细胞活力3个测定参数均在90%以上,与Ca(OH)_2和DAP相比,TAP糊剂在所有3种实验中最具细胞毒性(P <0. 05)。经DAP处理的细胞仅在XTT测试中具有大于70%的细胞活力。24 h与48 h洗脱时间对细胞活力的影响较小,未发现统计学差异(P> 0. 05)。IL-6 mRNA是TAP糊剂作用细胞后中表达最多的细胞因子(P <0. 05)。其他组炎症细胞因子有增多趋势,但是差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:TAP具有高度细胞毒性且显著增加促炎细胞因子IL-6在人牙周膜成纤维细胞的表达,更容易造成牙髓再生治疗失败。展开更多
