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黏着斑激酶酪氨酸磷酸化促大鼠肝纤维化形成及其可能机制 被引量：12
1
作者 张晓岚 霍晓霞 +2 位作者 申建刚 魏娟 姜慧卿 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第2期143-147,共5页
目的探讨在肝纤维化发生中,黏着斑激酶(FAK)酪氨酸磷酸化与肝星状细胞(HSC)增殖的关系,并从细胞周期角度探讨其促HSC增殖的机制。方法采用胆总管结扎(BDL)方法建立大鼠肝纤维化模型;免疫组织化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;... 目的探讨在肝纤维化发生中,黏着斑激酶(FAK)酪氨酸磷酸化与肝星状细胞(HSC)增殖的关系,并从细胞周期角度探讨其促HSC增殖的机制。方法采用胆总管结扎(BDL)方法建立大鼠肝纤维化模型;免疫组织化学方法测定α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达;Western blot检测p-FAK(Tyr397)、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)和细胞周期蛋白依赖激酶4(CDK4)在肝组织中的含量。结果正常大鼠肝组织有少量α-SMA分布,随着肝纤维化发展,α-SMA阳性细胞明显增多;肝组织中p-FAK(Tyr397)、cyclin D1及CDK4蛋白表达逐渐增加,造模4周时达峰值。多元相关分析示α-SMA与p-FAK(Tyr397)正相关(r=0.964,P<0.01);α-SMA与cyclin D1、CDK4正相关(r=0.953,0.906;P<0.01);p-FAK(Tyr397)与cyclin D1、CDK4亦明显正相关(r=0.969,0.893;P<0.01)。结论FAK磷酸化促HSC增殖及肝纤维化形成机制可能与调控细胞周期相关蛋白有关。 展开更多
关键词 肝纤维化 肝星状细胞 黏着斑激酶 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白依赖激酶4
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PTKs CDK4及p15在中耳胆脂瘤上皮的表达 被引量：7
2
作者 孙文忠 徐志文 +1 位作者 唐安洲 苏纪平 《临床耳鼻咽喉科杂志》 CSCD 北大核心 2004年第10期616-619,共4页
目的 :从蛋白酪氨酸激酶 (PTKs)信号传递系统及细胞周期调控探讨胆脂瘤上皮细胞增殖的分子机制。方法 :采用免疫组织化学S P方法和计算机图像分析系统 ,观测 30例中耳胆脂瘤上皮及 19例胆脂瘤患者外耳道皮肤中磷酸化PTKs、周期蛋白依赖... 目的 :从蛋白酪氨酸激酶 (PTKs)信号传递系统及细胞周期调控探讨胆脂瘤上皮细胞增殖的分子机制。方法 :采用免疫组织化学S P方法和计算机图像分析系统 ,观测 30例中耳胆脂瘤上皮及 19例胆脂瘤患者外耳道皮肤中磷酸化PTKs、周期蛋白依赖性激酶 4 (CDK4 )、p15的表达 ,并结合上皮下炎症浸润、骨质破坏程度作统计学分析。结果 :磷酸化PTKs以胞膜表达为主 ,CDK4胞核、胞质均有表达 ,以胞核为主 ,而p15仅以胞核表达。与外耳道皮肤相比 ,胆脂瘤上皮细胞磷酸化PTKs、CDK4、p15表达都显著增强 (P <0 .0 1) ,在重度皮下炎性浸润的上皮细胞磷酸化PTKs、CDK4表达增强 (P <0 .0 1) ;处于高水平磷酸化PTKs表达的胆脂瘤上皮细胞CDK4表达增强 (P <0 .0 1) ;两种骨质破坏程度中上述指标表达的差异无统计学意义 (P >0 .0 5 )。结论 :胆脂瘤上皮细胞具有过度增殖能力 ,同时也存在抑制细胞增殖的机制 ; 展开更多
关键词 胆脂瘤 中耳 蛋白酪氨酸激酶 周期蛋白依赖性激酶4 P15
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细胞周期相关蛋白CyclinD1、CDK4、p16在大肠癌中的表达及其意义 被引量：9
3
作者 陈小贺 孟文格 +5 位作者 袁权利 韩增山 武纪生 苑艳娟 付泽娴 蔡建辉 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2008年第4期317-321,共5页
目的探讨细胞周期调控因子在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化S-P法对70例大肠癌组织及距癌灶3 cm以外的癌旁组织,10 cm以外的正常组织中CyclinD1、CDK4、和p16进行检测。结果CyclinD1和CDK4在大肠癌中... 目的探讨细胞周期调控因子在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化S-P法对70例大肠癌组织及距癌灶3 cm以外的癌旁组织,10 cm以外的正常组织中CyclinD1、CDK4、和p16进行检测。结果CyclinD1和CDK4在大肠癌中过度表达,分别为36/70(51.4%)和28/70(40.0%),并与肿瘤的分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,其CyclinD1和CDK4的阳性率分别为70.0%和60.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率分别为44.0%和32.0%,两者相比差异有显著性(P(0.05),p16在大肠癌中为低表达33/70(47.1%),癌旁组织和正常组织中p16的表达分别为57.1%和71.4%,CyclinD1与CDK4呈正相关关系(P(0.05)。CyclinD1与p16呈负相关关系(P(0.05)。结论CyclinD1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;CyclinD1的过度表达和p16的低表达在大肠癌发生中起协同作用;大肠癌的发生机制涉及CyclinD1、CDK4和p16调节环路中多个基因的异常。 展开更多
关键词 大肠癌 细胞周期素D1 CDK4 P16蛋白 免疫组织化学
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cyclinD1、CDK4和Rb在大肠癌中的表达及其意义 被引量：6
4
作者 陈小贺 孟文格 +4 位作者 孟繁杰 谢绍建 李保东 付泽娴 蔡建辉 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第6期428-430,476,共4页
目的探讨细胞周期调控因子在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法对70例大肠癌组织及距癌灶3cm以外的癌旁组织、10cm以外的正常组织中cy-clinD1、CDK4和Rb进行检测。结果cyclinD1和CDK4在大肠癌中过度... 目的探讨细胞周期调控因子在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法对70例大肠癌组织及距癌灶3cm以外的癌旁组织、10cm以外的正常组织中cy-clinD1、CDK4和Rb进行检测。结果cyclinD1和CDK4在大肠癌中过度表达,分别为36/70(51.4%)和28/70(40.0%),并与肿瘤的分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,其cyclinD1和CDK4的阳性率分别为70.0%和60.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率分别为44.0%和32.0%,两者相比差异有显著性(P<0.05)。Rb在大肠癌、癌旁及正常组织中的表达分别为65.7%、78.6%和85.7%。正常组织与癌组织中Rb的阳性率差异有显著性(P<0.01)。cyclinD1与CDK4呈正相关关系(P<0.05)。结论cy-clinD1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;大肠癌的发生机制涉及cyclinD1、CDK4和Rb调节环路中多个基因的异常。 展开更多
关键词 大肠癌 细胞周期素D1 CDK4 RB蛋白 免疫组织化学
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脾相关酪氨酸激酶、蛋白激酶B、真核翻译起始因子4E、细胞周期蛋白依赖性激酶4在胃癌及癌前病变中的表达及相关性 被引量：1
5
作者 李雪滢 王觅柱 《癌症进展》 2023年第3期256-260,共5页
目的探讨脾相关酪氨酸激酶(SYK)、蛋白激酶B(AKT)、真核翻译起始因子4E(EIF4E)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法收集90例患者的胃黏膜组织进行蛋白质印迹实验,其中癌旁正常组织30例,萎缩性胃炎组... 目的探讨脾相关酪氨酸激酶(SYK)、蛋白激酶B(AKT)、真核翻译起始因子4E(EIF4E)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)在胃癌及癌前病变中的表达及相关性。方法收集90例患者的胃黏膜组织进行蛋白质印迹实验,其中癌旁正常组织30例,萎缩性胃炎组织30例,胃癌组织30例。另收集胃癌组织、萎缩性胃炎组织、癌旁正常组织存档蜡块各30例进行免疫组化实验。分别采用蛋白质印迹法和免疫组化法检测各组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4表达情况。分析萎缩性胃炎组织与胃癌组织中SYK、AKT、EIF4E、CDK4的相关性。结果癌旁正常组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中SYK蛋白表达水平及阳性表达率均高于胃癌组织;癌旁正常组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于萎缩性胃炎组织,萎缩性胃炎组织中AKT、EIF4E、CDK4蛋白表达水平及阳性表达率均低于胃癌组织,差异均有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,胃癌组织和萎缩性胃炎组织中SYK与AKT、EIF4E、CDK4表达均呈负相关(P<0.05),AKT、EIF4E、CDK4三者表达均呈正相关(P<0.01)。结论SYK、AKT、EIF4E、CDK4可能通过相互作用共同参与了胃癌的发生,其可能的机制与磷脂酰肌醇-3-羟激酶(PI3K)/AKT信号通路有关。SYK、AKT、EIF4E、CDK4有希望成为胃癌诊断和防治的靶标,检测SYK、AKT、EIF4E、CDK4对胃癌诊断、早期治疗及预防具有重要价值。 展开更多
关键词 胃癌 萎缩性胃炎 脾相关酪氨酸激酶 蛋白激酶B 真核翻译起始因子4E 细胞周期蛋白依赖性激酶4
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子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性分析
6
作者 谭茂梅 林琳 《检验医学与临床》 CAS 2024年第18期2707-2710,共4页
目的分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Beclin1关联X蛋白(Bax)及周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月在联勤保障部队第九〇〇医院就诊的42例子宫内膜癌患者作为恶性组,58例癌前病变患者作... 目的分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Beclin1关联X蛋白(Bax)及周期素依赖性激酶4(CDK4)表达水平的相关性。方法选取2022年1月至2023年1月在联勤保障部队第九〇〇医院就诊的42例子宫内膜癌患者作为恶性组,58例癌前病变患者作为良性组。两组患者均给予超声造影成像检查并测定造影剂平均渡越时间(MMT)、达峰时间(TTP)及峰值强度(Peak),均进行子宫切除术并采集病灶组织,检测Beclin1、Bax、CDK4及周期素依赖性激酶6(CDK6)表达水平。采用Pearson相关分析子宫内膜癌病灶超声造影参数与Beclin1、Bax及CDK4表达水平的相关性。结果恶性组病灶Peak高于良性组,MMT长于良性组,TTP短于良性组,Beclin1、Bax表达水平低于良性组,CDK4、CDK6表达水平高于良性组,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者病灶Peak高于Ⅰ~Ⅱ期患者,MMT长于Ⅰ~Ⅱ期患者,TTP短于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。恶性组中TNM分期为Ⅲ~Ⅳ期患者病灶组织Beclin1、Bax表达水平低于Ⅰ~Ⅱ期患者,CDK4、CDK6表达水平高于Ⅰ~Ⅱ期患者,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,子宫内膜癌病灶Peak、MTT与CDK4及CDK6表达水平呈正相关(P<0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈负相关(P<0.05),TTP与病灶组织CDK4及CDK6表达水平呈负相关(P<0.05),与Beclin1、Bax表达水平呈正相关(P<0.05)。结论子宫内膜癌患者MTT长于癌前病变患者,以及Peak、CDK4、CDK6表达水平均高于癌前病变患者,子宫内膜癌患者病灶超声造影参数MTT、TTP及Peak与Beclin1、Bax及CDK4表达水平相关,超声造影检查有助于辅助临床判断子宫内膜癌患者细胞凋亡相关蛋白表达情况。 展开更多
关键词 子宫内膜癌 超声造影参数 BECLIN1 Beclin1关联X蛋白 周期素依赖性激酶4
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高氧致慢性肺疾病早产鼠肺组织细胞周期依赖蛋白激酶-4、p21表达及其对纤维化的影响 被引量：5
7
作者 富建华 薛辛东 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期858-859,共2页
目的研究慢性肺疾病(CLD)早产鼠的肺组织细胞周期依赖蛋白激酶-4(CDK4)及细胞周期依赖蛋白激酶抑制因子(p21)动态表达规律及其意义。方法将80只早产鼠随机分为模型和对照组(每组40只),采用高体积分数氧诱导CLD模型,于实验后1、3、7、14... 目的研究慢性肺疾病(CLD)早产鼠的肺组织细胞周期依赖蛋白激酶-4(CDK4)及细胞周期依赖蛋白激酶抑制因子(p21)动态表达规律及其意义。方法将80只早产鼠随机分为模型和对照组(每组40只),采用高体积分数氧诱导CLD模型,于实验后1、3、7、14、21 d分别应用酶联免疫吸附法及免疫组织化学技术检测其肺组织Ⅰ型胶原和CDK4、p21蛋白表达。结果与对照组比较,实验组14和21 d Ⅰ型胶原水平及CDK4表达增加,而p21表达水平降低。实验组14和21 d CDK4表达水平与肺纤维化程度呈明显正相关;p21与肺纤维化程度呈明显负相关。结论高氧诱导早产鼠肺组织CDK4及p21异常表达,可能是CLD肺纤维化发生的机制之一。 展开更多
关键词 细胞周期依赖蛋白激酶4 P21 肺纤维化 高氧 早产鼠
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环状RNA_3885通过吸附微小RNA-142-3p增强细胞周期蛋白依赖性激酶4功能提高骨肉瘤细胞的增殖与侵袭能力
8
作者 蔡震海 王觅格 何春华 《中华实验外科杂志》 CAS 北大核心 2023年第2期325-329,共5页
目的探讨环状RNA(circRNA,circ)_3885对骨肉瘤细胞增殖与侵袭行为的影响,并初步分析其作用机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞,设空白对照组、序列对照组、微小RNA(miR)-142-3p过表达组、circ_3885过表达组及联合干预组,其中miR-142-3p... 目的探讨环状RNA(circRNA,circ)_3885对骨肉瘤细胞增殖与侵袭行为的影响,并初步分析其作用机制。方法体外培养骨肉瘤MG-63细胞,设空白对照组、序列对照组、微小RNA(miR)-142-3p过表达组、circ_3885过表达组及联合干预组,其中miR-142-3p过表达组加入miR-142-3p模拟物(miR-142-3p mimic)共培养,circ_3885过表达组加入circ_3885过表达质粒共培养,联合干预组同时加入miR-142-3p mimic与circ_3885过表达质粒,而序列对照组加入miR-142-3p mimic的对照序列mimic NC和circ_3885过表达质粒的对照质粒OE-NC共培养。共培养48 h,采用细胞计数试剂盒(CCK-8)实验测定细胞增殖活力,划痕实验和Transwell小室实验测定细胞迁移与侵袭能力;共培养7 d,采用蛋白质印迹法(Western blot)实验检测细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白(Cyclin)A与Cyclin E的表达。多组间的比较行单因素方差分析,事后两两比较采用LSD-t或SNK检验。结果空白对照组、序列对照组、miR-142-3p过表达组、circ_3885过表达组及联合干预组的增殖活力分别为0.852±0.095、0.878±0.080、0.705±0.080、1.125±0.122、0.985±0.087,细胞迁移率分别为(25.3±5.6)%、(24.0±6.3)%、(12.5±3.2)%、(66.7±13.5)%、(42.3±8.3)%,差异均有统计学意义(F=8.322、20.032,P均<0.05);其中miR-142-3p过表达组增殖活力与迁移数目低于序列对照组,circ_3885过表达组高于序列对照组;联合干预组高于miR-142-3p过表达组同时低于circ_3885过表达组(P<0.05)。空白对照组、序列对照组、miR-142-3p过表达组、circ_3885过表达组及联合干预组的CDK4表达水平分别为0.305±0.052、0.312±0.047、0.175±0.026、0.648±0.085、0.432±0.054,Cyclin A表达水平分别为0.274±0.032、0.266±0.045、0.105±0.020、0.584±0.074、0.385±0.052,差异均有统计学意义(F=30.195、41.224,P<0.001);其中miR-142-3p过表达组的CDK4与Cyclin A表达水平均低于序列对照组(P<0.05),circ_3885过表达组均高于� 展开更多
关键词 环状RNA 微小RNA 细胞周期蛋白依赖性激酶4 骨肉瘤
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亚砷酸钠对人正常肝细胞L-02细胞周期蛋白D1和细胞周期依赖激酶4的影响 被引量：4
9
作者 胡婷 张开菊 +1 位作者 张爱华 罗鹏 《中华地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第3期191-195,共5页
目的研究亚砷酸钠（NaAsO2）对人正常肝细胞L-02细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和细胞周期依赖激酶4（CDK4）表达的影响。方法以0（对照）、50、100、150μmoL／LNaAsO2处理L-02细胞24h，采用流式细胞仪检测细胞周期变化，采用实时荧光定量... 目的研究亚砷酸钠（NaAsO2）对人正常肝细胞L-02细胞周期蛋白D1（CyclinD1）和细胞周期依赖激酶4（CDK4）表达的影响。方法以0（对照）、50、100、150μmoL／LNaAsO2处理L-02细胞24h，采用流式细胞仪检测细胞周期变化，采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹检测Cyclin D1、CDK4mRNA和蛋白表达水平。结果细胞周期检测：与对照组G0．G1期[（60．33±0．40）％]比较，除50μmol／LNaAsO2组细胞比例[（54．58±0140）％]减少外，100、150μmol／LNaAsO2组细胞比例[（64．60±0．62）％、（83．13±0．25）％]显著增加，差异均有统计学意义（P均〈0．05）；对照组，50、100、150μmol／LNaAsO2组S期细胞比例逐渐减少[（34．35±0.30）％、（29．89±0.32）％、（29．50±0.44）％、（11．93±0．12）％]，差异均有统计学意义（P均〈0．05）；对照组，50、100、150μmol／LNaAsO2组G2-M期细胞比例[（5．32±0.11）％、（15．54±0．14）％、（5．90±0．20）％、（4．93±0．15）％]比较，差异有统计学意义（F=908．359，P〈0.05）。CyclinD1和CDK4检测：对照组，50、100、150μmoVLNaAsO2组CyclinD1mRNA（0．48±0．17、1．00±0．31、1．00±0．21、2．06±0．53）和蛋白（0．65±0．02、0．64±0．05、0．71±0．10、0．84±0．05）表达水平比较，差异均有统计学意义（F=167．886、46．575，P均〈0．05）；对照组，50、100、150μmoL／LNaAsO2组CDK4mRNA（1．04±0．19、1.00±0．21、1．29±0．22、2．31±0．31）和蛋白（0．67±0.04、0．74±0．03、0．83±0．07、0．94±0．04）表达水平比较，差异均有统计学意义（F=95．171、145．848，P均〈0．05）。结论NaAsO2通过改变细胞周期调控因子Cyelin D1、CDK4mRNA和蛋白表达水平。使L-02肝细胞的生长周期阻滞于G0—G1期，最终导致细胞损害的发生。 展开更多
关键词 亚砷酸盐类 L-02细胞 细胞周期 细胞周期蛋白D1 细胞周期依赖激酶4
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TTF-1、CDK4、EGFR在非小细胞肺癌组织中的表达及与临床病理特征的相关分析
10
作者 冷茹冰 徐衡 李娜 《医药论坛杂志》 2023年第16期30-34,共5页
目的 探讨甲状腺转录因子1(TTF-1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。方法 选取2021年1月—2022年10月在驻马店市中心医院诊治的NSCLC患者115... 目的 探讨甲状腺转录因子1(TTF-1)、细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)、表皮生长因子受体(EGFR)在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达,并分析其与临床病理特征的关系。方法 选取2021年1月—2022年10月在驻马店市中心医院诊治的NSCLC患者115例,检测癌组织和癌旁组织TTF-1、CDK4、EGFR表达,并分析癌组织TTF-1、CDK4、EGFR表达与年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤位置、肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移、吸烟等临床病理特征的关系。结果 NSCLC患者癌组织TTF-1阳性率(58.26%vs 10.43%)、CDK4阳性率(92.17%vs 84.35%)、EGFR阳性率(64.35%vs 6.09%)明显高于癌旁组织(P<0.05)。NSCLC患者癌组织TTF-1阳性表达与年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤位置、吸烟无关(P>0.05),与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);NSCLC患者癌组织EGFR阳性表达与年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤位置、吸烟无关(P>0.05),与肿瘤分期、分化程度、淋巴结转移有关(P<0.05);NSCLC患者癌组织CDK4阳性表达与年龄、性别、肿瘤直径、肿瘤位置、淋巴结转移、吸烟无关(P>0.05),与肿瘤分期、分化程度有关(P<0.05)。结论 TTF-1、CDK4、EGFR在NSCLC患者癌组织呈高表达,TTF-1、EGFR与NSCLC的发生、发展以及转移有关,CDK4与NSCLC的发生以及发展有关。 展开更多
关键词 甲状腺转录因子1 细胞周期蛋白依赖性激酶4 表皮生长因子受体 非小细胞肺癌 临床病理特征 组织
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CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中的表达 被引量：3
11
作者 李娟 吴平平 +2 位作者 姜叙诚 颜召文 唐剑敏 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期401-404,共4页
目的探讨胃癌组织中CDK4和cyclin D1蛋白的表达及意义。方法收集胃癌石蜡标本40例,运用免疫组化法检测CDK4和cyclin D1蛋白的表达情况,分析其与胃癌的组织学类型、TNM分期和淋巴结转移的关系。结果40例胃癌标本中CDK4和cyclin D1蛋白表... 目的探讨胃癌组织中CDK4和cyclin D1蛋白的表达及意义。方法收集胃癌石蜡标本40例,运用免疫组化法检测CDK4和cyclin D1蛋白的表达情况,分析其与胃癌的组织学类型、TNM分期和淋巴结转移的关系。结果40例胃癌标本中CDK4和cyclin D1蛋白表达的阳性率分别为65%和55%。CDK4与cyclin D1的表达呈正相关(P<0.05)。CDK4和cyclin D1蛋白的表达与胃癌的病理类型、TNM分期和淋巴结转移均无显著相关性(P>0.05)。结论CDK4和cyclin D1蛋白在胃癌组织中有较高的表达阳性率,两者具有协同作用,提示可能与胃癌的发生有密切关系。 展开更多
关键词 胃癌 周期素依赖性激酶4 周期蛋白D1 免疫组织化学
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p16、Rb、CDK4和cyclin D1在非小细胞肺癌中的表达及其作用 被引量：1
12
作者 时梅萍 林震琼 +2 位作者 陈岗 何卫中 冯建民 《实用癌症杂志》 2000年第2期132-133,共2页
目的　探讨细胞周期调控因子在非小细胞肺癌组织中的表达及作用。方法　应用LSAB免疫组化的方法对 12 3例原发性非小细胞肺癌进行检测。结果　 5 1.2 %的肺癌出现cyclinD1的过表达 ,77.2 %的肿瘤组织表达CDK 4,并与肿瘤的分化程度呈反... 目的　探讨细胞周期调控因子在非小细胞肺癌组织中的表达及作用。方法　应用LSAB免疫组化的方法对 12 3例原发性非小细胞肺癌进行检测。结果　 5 1.2 %的肺癌出现cyclinD1的过表达 ,77.2 %的肿瘤组织表达CDK 4,并与肿瘤的分化程度呈反比。有淋巴结转移的肺癌 ,其cyclinD 1和CDK 4的阳性率分别为 87.3 %和 68.4%。无淋巴结转移的肺癌阳性率分别为12 .6%和 3 1.5 %。两者相比差异有显著性 (P <0 .0 5 )。结论　cyclinD1、CDK 4在非小细胞肺癌中过度表达 ,并与肿瘤的分化程度 ,淋巴结转移密切相关。p16的表达可能受Rb蛋白的负调控。肺癌的分子发病机制涉及cyclinD 1和CDK 4、Rb和 p16负反馈调节通路的异常。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 细胞周期素D1 CDK4 P16蛋白
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多片段扩增结合Gibson组装法克隆基因定点突变 被引量：2
13
作者 程盈盈 李国庆 +2 位作者 刘君怡 陈婉煜 陈华波 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第3期1218-1226,共9页
为寻找一种简洁高效的基因定点突变方案,利用Gibson组装技术对重叠延伸PCR法进行简化,并以克隆细胞周期蛋白依赖性激酶4基因单位点与双位点突变为例进行验证。采用与重叠延伸PCR相似的策略扩增含点突变的基因片段,同时采用双酶切制备线... 为寻找一种简洁高效的基因定点突变方案,利用Gibson组装技术对重叠延伸PCR法进行简化,并以克隆细胞周期蛋白依赖性激酶4基因单位点与双位点突变为例进行验证。采用与重叠延伸PCR相似的策略扩增含点突变的基因片段,同时采用双酶切制备线性质粒载体,保证质粒载体与基因片段含有一小段重叠序列作为接头。直接将基因片段与线性载体通过Gibson组装法拼接成完整质粒。经转化、筛选与检测,成功得到数个单位点与双位点目标突变体克隆,且阳性率均为100%。由于没有繁琐的多轮PCR扩增和频繁的DNA回收操作,也无需消化原始质粒,该方案避免了很多干扰定点突变的因素,能简便、高效地克隆基因单位点与多位点突变。对比而言,该方案规避了重叠延伸PCR与滚环扩增法的主要缺陷,是一种基因定点突变的良好解决方案。 展开更多
关键词 定点突变 重叠延伸PCR 滚环扩增 Gibson组装 细胞周期蛋白依赖性激酶4
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细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其意义 被引量：2
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作者 陈小贺 孟文格 +4 位作者 李保东 马云龙 付泽娴 谢绍建 蔡建辉 《实用肿瘤学杂志》 CAS 2007年第2期104-107,共4页
目的探讨细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化S-P法对70例大肠癌组织及距癌灶3cm以外的癌旁组织、10cm以外的正常组织中Cyclin D1、CDK4、p16和Rb进行检测。结果Cyclin D1和CDK4在大肠... 目的探讨细胞周期相关蛋白在大肠癌中的表达及其与大肠癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化S-P法对70例大肠癌组织及距癌灶3cm以外的癌旁组织、10cm以外的正常组织中Cyclin D1、CDK4、p16和Rb进行检测。结果Cyclin D1和CDK4在大肠癌中过度表达,分别为36/70(51.4%)和28/70(40.0%),并与肿瘤的分化程度呈反比,有淋巴结转移的大肠癌,其CyclinD1和CDK4的阳性率分别为70.0%和60.0%,无淋巴结转移的大肠癌阳性率分别为44.0%和32.0%,两者相比差异有显著性(P<0.05),p16在大肠癌中为低表达33/70(47.1%),癌旁组织和正常组织中p16的表达分别为57.1%和71.4%,Rb在大肠癌、癌旁及正常组织中的表达分别为65.7%、78.6%和85.7%。Cyclin D1与CDK4呈正相关关系(P<0.05)。Cyclin D1与p16、p16与Rb是负相关关系(P<0.05、P<0.05)。结论CyclinD1、CDK4的过度表达与肿瘤的分化程度、淋巴结转移密切相关;p16的表达可能受Rb蛋白的负调控;CyclinD1的过度表达和p16的低表达在大肠癌发生中起协同作用; 展开更多
关键词 大肠癌 细胞周期素D1 CDK4 P16蛋白 RB蛋白 免疫组织化学
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CCND1和CDK4基因多态性在早期乳腺癌诊断中的价值 被引量：2
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作者 张汉新 边毅 +1 位作者 李小宁 张丽芳 《临床医学研究与实践》 2020年第35期35-38,共4页
目的探讨细胞周期蛋白D1(CCND1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)基因多态性与早期乳腺癌发生的关系。方法选择2018年3月至2019年3月在我院就诊的56例早期乳腺癌患者为试验组,以同期体检未发现乳腺疾病的56例健康女性为对照组。采用聚... 目的探讨细胞周期蛋白D1(CCND1)和细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)基因多态性与早期乳腺癌发生的关系。方法选择2018年3月至2019年3月在我院就诊的56例早期乳腺癌患者为试验组,以同期体检未发现乳腺疾病的56例健康女性为对照组。采用聚合酶链式反应(PCR)和单链构象多态性(SSCP)相结合的方法对CCND1、CDK4基因进行种系筛选,并进行DNA序列分析。单因素非条件Logistic回归分析各突变类型与早期乳腺癌发生的关系。结果在CCND1基因中共筛选到6种突变类型,其中在外显子(exon 1)中观察到2个错义突变(Cys7Tyr和Val27Met)和1个沉默突变(Ala20Ala),在内含子(intron)1中观察到2个替换突变(1026 G>T和1030 G>T),在3'UTR区观察到1个替换突变(10811 C>T)。在CDK4基因中,共发现3种不同类型的突变,分别为exon 1有2个移码突变(4289delT和4532delG),intron 1有1个替换突变(5693T>A)。单因素非条件Logistic回归分析结果提示,上述各突变均与乳腺癌发生具有较强相关性(OR值均>1且P<0.05),突变能提高女性的乳腺癌患癌风险。月经初潮≤13岁的患者具有更高的CCND1基因的3'UTR:10811 C>T突变与CDK4基因的exon 1:4289delT突变风险(P<0.05)。相较于绝经年龄≥50岁的乳腺癌患者,绝经年龄<50岁的乳腺癌患者具有更高的CDK4基因的exon 1:4532delG突变率(P<0.05)。结论CCND1和CDK4基因突变与乳腺癌发病风险增加有关,可作为乳腺癌早期诊断和检测的生物标志物。 展开更多
关键词 细胞周期蛋白D1 细胞周期蛋白依赖性激酶4 早期乳腺癌 基因多态性
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p16基因克隆及其对结肠癌细胞SW480生长的抑制作用 被引量：2
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作者 孟庆凯 张菁茹 王辉 《上海交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期744-747,共4页
目的探讨p16基因对结肠癌细胞生长的抑制作用。方法采用亚克隆技术将p16基因克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,Lipofectamine法将p16基因转染入结肠癌细胞株SW480。采用MTT法检测未转染细胞(SW480组)、转染空质粒细胞(SW480-GFP组)和转染p1... 目的探讨p16基因对结肠癌细胞生长的抑制作用。方法采用亚克隆技术将p16基因克隆入真核表达载体pEGFP-N3中,Lipofectamine法将p16基因转染入结肠癌细胞株SW480。采用MTT法检测未转染细胞(SW480组)、转染空质粒细胞(SW480-GFP组)和转染p16细胞(SW480-p16组)培养24、48和72 h后细胞的增殖率;Real-Time PCR和Western blotting分别检测3组细胞的p16、CDK4、cyclin D1 mRNA和蛋白的表达情况。结果 p16基因克隆入真核表达载体,并成功转染结肠癌细胞后,在基因和蛋白质水平均有外源性p16基因表达,与SW480组比较,相对表达量均有显著增加(P<0.01)。MTT检测结果显示:培养48 h和72 h后,SW480-p16组的细胞相对增殖率均显著低于SW480组和SW480-GFP组(P<0.01)。Real-Time PCR检测结果显示:SW480-p16组的p16 mRNA相对表达量接近SW480-GFP组的2.38倍,接近SW480细胞的2.59倍,差异具有统计学意义(P<0.01);SW480-p16组的cyclin D1 mRNA相对表达量明显低于SW480组和SW480-GFP组细胞(P<0.05),而CDK4mRNA的相对表达量略低于SW480组和SW480-GFP组,差异无统计学意义(P>0.05)。Western blotting检测结果显示:与SW480-GFP组和SW480组比较,SW480-p16组的P16蛋白表达量明显升高;而CDK4和cyclin D1蛋白表达量明显降低,差异均有统计学意义(P<0.01)。结论 p16基因转染入结肠癌细胞,具有抑制癌细胞生长的功能。 展开更多
关键词 P16基因 克隆 结肠癌细胞 D型细胞周期蛋白 周期蛋白依赖性蛋白激酶4
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慢病毒干扰SKA1对前列腺癌PC-3细胞增殖及CDK4和cyclin D1表达的影响 被引量：1
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作者 王阳 曹志华 +4 位作者 牛桂林 刘磊 朱清 胡跃世 李征 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2018年第10期785-789,799,共6页
目的探究慢病毒介导纺锤体和动粒相关蛋白1(SKA1)沉默对前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)水平的影响。方法构建慢病毒表达载体Lv-shSKA1,转染PC-3细胞。实验分为空白组、Lv-shCon组和Lv... 目的探究慢病毒介导纺锤体和动粒相关蛋白1(SKA1)沉默对前列腺癌PC-3细胞增殖及细胞周期蛋白依赖性激酶4(CDK4)和细胞周期蛋白D1(cyclin D1)水平的影响。方法构建慢病毒表达载体Lv-shSKA1,转染PC-3细胞。实验分为空白组、Lv-shCon组和Lv-shSKA1组。用实时定量PCR(qRT-PCR)技术检测细胞SKA1mRNA表达,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖率,流式细胞仪检测细胞周期,用蛋白质印迹(Western blot)技术检测SKA1、CDK4及cyclin D1蛋白表达。结果 (1)与LvshCon组比较,Lv-shSKA1组细胞中SKA1mRNA和蛋白表达水平均显著下调(P<0.05)。(2)与Lv-shCon组比较,Lv-shSKA1组细胞增殖速率显著较慢(P<0.05)。(3)与Lv-shCon组比较,Lv-shSKA1组G0/G1期细胞数显著减少(P<0.05),S期细胞数显著增加(P<0.05)。(4)与Lv-shCon组比较,Lv-shSKA1组细胞CDK4、cyclin D1蛋白表达水平均显著下调(P<0.05)。结论慢病毒介导的SKA1沉默可抑制前列腺癌PC-3细胞增殖,且细胞增殖相关蛋白CDK4、cyclin D1表达显著下调,提示SKA1可能是前列腺癌基因治疗的新靶点。 展开更多
关键词 前列腺癌 慢病毒 纺锤体和动粒相关蛋白1 细胞增殖 细胞周期蛋白依赖性激酶4 细胞周期蛋白D1
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蛋白酶体抑制剂对星形胶质细胞周期素D1和周期素依赖性激酶4表达的影响 被引量：1
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作者 周君 郭海涛 《中国临床神经科学》 2009年第5期470-474,共5页
目的:研究蛋白酶体抑制对体外培养的星形胶质细胞周期素D1(cyclin D1)和周期素依赖性激酶4(CDK4)表达的影响。方法:SD乳鼠皮质星形胶质细胞原代培养,并纯化鉴定;予不同浓度(2和4μmol·-1)的蛋白酶体抑制剂L(lactacystin)对第二代... 目的:研究蛋白酶体抑制对体外培养的星形胶质细胞周期素D1(cyclin D1)和周期素依赖性激酶4(CDK4)表达的影响。方法:SD乳鼠皮质星形胶质细胞原代培养,并纯化鉴定;予不同浓度(2和4μmol·-1)的蛋白酶体抑制剂L(lactacystin)对第二代星形胶质细胞进行短期(12h)急性干预处理,应用免疫荧光及Western blot检测星形胶质细胞cyclinD1和CDK4表达的水平。结果:纯化传代的皮质星形胶质细胞经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光鉴定,其阳性率可达99%;lactacystin2和4μmol·-1可诱导星形胶质细胞cyclin D1和CDK4表达的下降,与对照组相比差异有显著统L计学意义(P<0.01)。结论:一定程度蛋白酶体活性抑制可诱导培养的星形胶质细胞cyclin D1和CDK4表达的减少,从而影响胶质细胞细胞周期,促进胶质细胞分化。提示蛋白酶体功能障碍后可能通过影响胶质细胞细胞周期来参与阿尔茨海默病的病理改变。 展开更多
关键词 蛋白酶体 星形胶质细胞 周期素D1 周期素依赖性激酶4 阿尔茨海默病
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黄芪扶正汤抑制人甲状腺乳头状癌细胞的机制研究 被引量：1
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作者 王亮萍 王鸿程 +2 位作者 林晶 张志明 陈炯 《医学理论与实践》 2020年第17期2794-2797,2801,共5页
目的:研究黄芪扶正汤抑制人甲状腺乳头状癌细胞增殖及诱导凋亡的机制。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,分为对照组(加完全培养基,黄芪扶正汤药物0g/L)、不同剂量实验组(黄芪扶正汤质量浓度0.5、1.0、2.5、5、10g/L)。MTT法检... 目的:研究黄芪扶正汤抑制人甲状腺乳头状癌细胞增殖及诱导凋亡的机制。方法:体外培养人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞,分为对照组(加完全培养基,黄芪扶正汤药物0g/L)、不同剂量实验组(黄芪扶正汤质量浓度0.5、1.0、2.5、5、10g/L)。MTT法检测各组细胞增殖情况,IC50评价检测出最优有效浓度;流式细胞术检测对照组和最优有效浓度组的细胞周期及凋亡情况;qPCR法检测对照组和最优有效浓度组细胞Rb、CDK4 mRNA的表达情况。结果:IC50评价检测系统结果显示,实验组黄芪扶正汤抑制TPC-1增殖的最优有效浓度为6.118g/L,可引起细胞发生G0/G1期阻滞;与对照组相比,最优有效浓度组细胞凋亡明显增多(P<0.05);Rb及CDK4 mRNA表达明显降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:黄芪扶正汤可有效下调Rb及CDK4 mRNA的表达,从而抑制人甲状腺乳头状癌TPC-1细胞增殖及诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 黄芪扶正汤 人甲状腺乳头状癌 视网膜母细胞瘤蛋白 细胞周期素依赖性激酶4 凋亡 细胞增殖
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氯乙烯对肝细胞周期G_1/S关卡相关蛋白表达影响
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作者 胡君阳 李阳 +2 位作者 王慧 张文平 仇玉兰 《中国公共卫生》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期191-194,共4页
目的探讨氯乙烯(VCM)对细胞周期G1/S关卡功能影响及可能的机制。方法将人正常肝细胞HL-7702暴露于VCM气体(体积分数为0.8%、2.5%、7.5%、15.0%和30.0%)和空气(对照组)48 h后用流式细胞仪检测HL-7702细胞周期;Western blot测定细胞中G1/... 目的探讨氯乙烯(VCM)对细胞周期G1/S关卡功能影响及可能的机制。方法将人正常肝细胞HL-7702暴露于VCM气体(体积分数为0.8%、2.5%、7.5%、15.0%和30.0%)和空气(对照组)48 h后用流式细胞仪检测HL-7702细胞周期;Western blot测定细胞中G1/S关卡相关蛋白表达水平。结果染毒48 h后,在<7.5%剂量时,HL-7702细胞G0/G1期细胞百分数随染毒剂量增加呈上升趋势,与对照组[(73.35±1.56)%]比较,7.5%剂量组G0/G1期细胞百分比[(78.52±4.46)%]升高,差异有统计学意义(P<0.01);与对照组[(12.85±0.02)%]比较,2.5%剂量组S期细胞百分比[(10.97±0.17)%]下降,差异有统计学意义(P<0.05);细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK 4)和P16蛋白表达量均呈上升趋势,与对照组比较,7.5%剂量组HL-7702细胞CDK 4、P16表达[分别为(1.43±0.51)、(0.80±0.30)]均升高,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论低剂量VCM染毒可使肝细胞发生G1期阻滞,高剂量时G1期阻滞作用消失;其机制主要与上调P16、CDK 4蛋白表达有关。 展开更多
关键词 氯乙烯(VCM) G1/S关卡 P16 细胞周期蛋白(cyclin D1) 细胞周期蛋白依赖性激酶(CDK 4)
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