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题名制备肺炎衣原体抗原片检测血清抗体
被引量:2
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作者
陈学勤
陈园园
李雪萍
王卫群
余竹元
钱利生
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机构
复旦大学上海医学院病原生物系
复旦大学附属金山医院
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出处
《生物技术通讯》
CAS
2006年第6期904-907,共4页
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基金
上海市卫生局科技发展基金项目(024006)
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文摘
目的:探索肺炎衣原体抗原片检测血清抗体法在诊断Cpn感染中的实际应用前景。方法:应用进口肺炎衣原体(Cpn)毒株感染Hep-2细胞,分别以瑞氏-姬母萨染色、吖啶橙染色和直接免疫荧光染色等3种方法鉴定Cpn感染细胞。纯化获取大量Cpn抗原,用于制备斑点抗原片。建立微量免疫荧光染色法(MIF)检测血清抗体,诊断Cpn感染。结果:Cpn感染Hep-2细胞的最适条件是用含1μg/mL放线菌酮的维持液,在35℃、5%CO2孵箱中培养7d,并在培养的第0、3、4、5天以2600r/min离心1h,感染成功率极高。染色反应显示,瑞氏-姬母萨染色可将Cpn包涵体染成蓝紫色或红紫色;吖啶橙染色则使Cpn感染的Hep-2细胞呈现鲜明的橘红色;免疫荧光抗体染色后,在Cpn感染细胞内可见亮苹果绿色包涵体。通过斑点抗原荧光抗体染色的方法抽样检测了100份病人血清中的Cpn抗体,其中抗Cpn-IgG抗体的阳性血清共61份,阳性率为61%。与Cpn-外周血单核细胞(Cpn-PBMC)抗原片比较,阳性检出率无明显差别。结论:用Cpn感染细胞制作的Cpn斑点抗原片可用于临床检测血清Cpn-IgG抗体,且具有特异性、敏感性高的特点,但要求检测人员有一定的经验。
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关键词
肺炎衣原体
肺炎衣原体斑点抗原片
肺炎衣原体-PBMC斑点抗原片
微量免疫荧光法
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Keywords
Chlamydia pneumoniae(cpn)
cpn spot antigen slide
cpn-PBMC spot antigenslide
micro-immunofluorescence(MIF)
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分类号
R392.1
[医药卫生—免疫学]
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