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柯萨奇-腺病毒受体在小鼠心肌组织中的表达 被引量:11
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作者 于小华 杜九中 +5 位作者 张新刚 赵刚 邓晖 陈瑞珍 杨英珍 李双杰 《临床心血管病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第10期600-602,共3页
目的 :观察柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)在不同年龄、性别小鼠心肌组织中的表达情况。方法 :采用免疫组化和Western Blotting技术 ,半定量分析胚胎期 18d ,生后 1d ,4、8、12周雄性小鼠及 4周雌性小鼠心肌组织中的CAR含量。结果 :免疫组化... 目的 :观察柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)在不同年龄、性别小鼠心肌组织中的表达情况。方法 :采用免疫组化和Western Blotting技术 ,半定量分析胚胎期 18d ,生后 1d ,4、8、12周雄性小鼠及 4周雌性小鼠心肌组织中的CAR含量。结果 :免疫组化半定量分析示胚胎期 18dCAR表达最高 ,生后 1d(新生鼠 )及 4周龄 (幼年鼠 )表达量依次降低 ,8周龄 (成年鼠 )基本不表达 (P <0 .0 5 ) ,12周龄 (老年鼠 )低表达 ,与 8周龄比较 ,差异有统计学意义 (P <0 .0 1) ,并且 ,4周龄雄性小鼠和雌性小鼠相比 ,CAR表达量雄性高于雌性 (P <0 .0 1) ,Western Blot ting结果示CAR表达变化趋势与免疫组化结果相一致。 结论 :小鼠心肌组织中CAR的表达具有明显的时序性 ,而且性别对CAR的表达有影响。 展开更多
关键词 表达量 心肌组织 腺病毒受体 雌性小鼠 免疫组化 CAR Western-Blotting 雄性小鼠 成年鼠 时序性
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柯萨奇腺病毒受体与病毒性心肌炎 被引量:10
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作者 于小华 杜九中 +1 位作者 李双杰 杨英珍 《心血管病学进展》 CAS 2004年第6期443-446,共4页
柯萨奇 腺病毒受体是一种普通的存在于心肌细胞表面的病毒受体 ,作为柯萨奇病毒和腺病毒的共同受体 ,在它们感染心肌细胞的过程中起着关键性的作用。
关键词 腺病毒受体 病毒性心肌炎 心肌细胞 柯萨奇病毒 感染 关键性 作用 表面
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柯萨奇病毒-腺病毒受体表达、病毒感染与心肌病变之间的关系 被引量:3
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作者 魏春燕 武茜 吴秀霞 《国际病毒学杂志》 2014年第2期79-81,共3页
目的 探讨和分析心肌组织柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor,CAR)表达与病毒持续感染导致心肌病变的关系.方法 以扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)和慢性心肌炎患者的心肌组织标本作为病例组,以医院提... 目的 探讨和分析心肌组织柯萨奇病毒-腺病毒受体(coxsackie-adenovirus receptor,CAR)表达与病毒持续感染导致心肌病变的关系.方法 以扩张型心肌病(dilated cardiomyopathy,DCM)和慢性心肌炎患者的心肌组织标本作为病例组,以医院提供的先心病和冠心病等非感染性心脏疾病心肌组织及正常心肌组织标本作为对照组,采取免疫组化技术对心肌的CAR表达进行检测,采取巢式聚合酶链反应对相关心肌组织中腺病毒(adenovirus,AV) DNA和柯萨奇B组病毒(Coxsackie B virus,CVB) RNA进行检测,比较两组CAR表达、AV-DNA和CVB-RNA检出率的差异.结果 病例组标本33份,对照组标本14份.病例组与对照组患者CAR在心肌组织中表达的免疫组化面积积分分别为0.0118 ±0.0034和0.0039±0.0026,两组间的差异有统计学意义(P<0.05).病例CVB-RNA的检出率为39.4%,对照组标本中未检出CVB-RNA.两组的差异有统计学意义(P<0.05).病例组AV-DNA检出率为12.1%,对照组AV-DNA检测结果均为阴性.两组的差异有统计学意义(P<0.05).结论 AV和CVB感染、CAR表达与DCM和慢性心肌病的发展有紧密的联系. 展开更多
关键词 扩张性心肌病 慢性心肌炎 柯萨奇B组病毒 柯萨奇病毒-腺病毒受体
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肿瘤细胞表面柯萨奇病毒-腺病毒受体与5型腺病毒感染效率的关系 被引量:2
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作者 任鹏康 韦芳 +5 位作者 李惠明 王丰 张巨峰 陈霞芳 李宗海 黄倩 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第3期209-213,共5页
目的:探讨不同肿瘤细胞系柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)和整合素的表达水平与5型腺病毒感染效率的关系,为腺病毒基因治疗研究奠定基础。方法:利用瞬时转染CAR的真核表达质粒提高肿瘤细胞表面CAR的表达,应用抗体封闭细胞表面的CAR和整合素... 目的:探讨不同肿瘤细胞系柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)和整合素的表达水平与5型腺病毒感染效率的关系,为腺病毒基因治疗研究奠定基础。方法:利用瞬时转染CAR的真核表达质粒提高肿瘤细胞表面CAR的表达,应用抗体封闭细胞表面的CAR和整合素后,通过流式细胞仪和荧光素酶分析法测定腺病毒Ad5-CMV-EGFP和Ad5-CMV-Luc对肿瘤细胞的感染效率和基因表达水平的变化。结果:不同肿瘤细胞表面CAR和整合素的表达水平是不同的,其中SMMC-7721和A549细胞CAR的表达量最高,而K562细胞CAR的表达水平最低;荧光显微镜和流式细胞仪检测Ad5-CMV-EGFP对肿瘤细胞的感染效率,结果显示5型腺病毒对于SMMC-7721和A549细胞的感染效率最高,而对于K562细胞则很低;瞬时转染表达CAR的真核质粒可提高多种肿瘤细胞表面CAR的表达,较大幅度提高了5型腺病毒的感染效率。而抗体封闭肿瘤细胞表面的CAR或整合素后,腺病毒感染效率显著下降。结论:肿瘤细胞表面CAR和整合素的表达水平决定了腺病毒对肿瘤细胞的感染效率。 展开更多
关键词 腺病毒 柯萨奇病毒-腺病毒受体 整合素 感染 基因治疗
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胰腺癌细胞CAR受体表达与5型腺病毒转导效率的关系 被引量:1
5
作者 张克君 李德春 朱东明 《医学与哲学(B)》 2007年第12期53-54,共2页
本研究通过体外、体内实验探讨了不同生物特性的胰腺癌细胞系细胞表面柯萨奇腺病毒受体(CAR)表达与Ad-GFP转导效率的关系。结果发现,不同细胞的CAR表达水平不同,细胞CAR表达水平与Ad-GFP转导效率明显呈正相关。因此,胰腺癌患者治疗前检... 本研究通过体外、体内实验探讨了不同生物特性的胰腺癌细胞系细胞表面柯萨奇腺病毒受体(CAR)表达与Ad-GFP转导效率的关系。结果发现,不同细胞的CAR表达水平不同,细胞CAR表达水平与Ad-GFP转导效率明显呈正相关。因此,胰腺癌患者治疗前检测组织CAR表达水平有助于规范腺病毒载体的基因治疗药物的个体化使用,有利于提高疗效,减少病毒的副作用。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 腺病毒 柯萨奇腺病毒受体 基因治疗
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曲古抑菌素A上调肿瘤细胞柯萨奇-腺病毒受体表达而抑制其侵袭力的体外研究 被引量:1
6
作者 方勇 王蓓蓓 +4 位作者 吴鹏 马晓黎 卢运萍 周剑锋 马丁 《医学研究生学报》 CAS 2007年第5期451-454,I0001,共5页
目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)曲古抑菌素A(TSA)抑制肿瘤细胞侵袭力是否通过上调肿瘤细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(CAR)的表达而实现的。方法:在TSA作用T24细胞和MCF-7细胞后,分别检测CAR mRNA和蛋白水平的表达;同时采用体外黏... 目的:探讨组蛋白去乙酰化酶抑制剂(HDACI)曲古抑菌素A(TSA)抑制肿瘤细胞侵袭力是否通过上调肿瘤细胞表面柯萨奇-腺病毒受体(CAR)的表达而实现的。方法:在TSA作用T24细胞和MCF-7细胞后,分别检测CAR mRNA和蛋白水平的表达;同时采用体外黏附实验和Boyden小室体外侵袭实验,以评价细胞黏附和侵袭力的改变。结果:TSA作用72 h后,肿瘤细胞CAR mRNA和蛋白表达水平明显上调,细胞间同型黏附增强,侵袭力下降。且这一过程可被CAR特异性抗体部分逆转。结论:TSA可以通过上调CAR而使肿瘤细胞同型黏附增加,侵袭力下降。 展开更多
关键词 曲古抑菌素A 柯萨奇-腺病毒受体 同型黏附 侵袭
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柯萨奇病毒腺病毒受体在肺癌中的表达和意义
7
作者 董元焕 孙蕾娜 战忠利 《中国中西医结合外科杂志》 CAS 2017年第2期113-118,共6页
目的:明确柯萨奇病毒腺病毒受体(CAR)在正常肺组织、癌旁组织及肺癌组织中的表达情况以及在体外CAR失表达对人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞增殖与侵袭迁移的影响。方法:收集肺癌手术切除新鲜标本100例及其对应的癌旁组织和正常肺组织,应用... 目的:明确柯萨奇病毒腺病毒受体(CAR)在正常肺组织、癌旁组织及肺癌组织中的表达情况以及在体外CAR失表达对人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞增殖与侵袭迁移的影响。方法:收集肺癌手术切除新鲜标本100例及其对应的癌旁组织和正常肺组织,应用免疫组织化学、Western blot和RT-PCR法检测CAR蛋白和mRNA的表达情况;在体外运用RNAi技术建立稳定的低表达CAR的人肺鳞状细胞癌NCI-H520细胞系,用平板克隆形成实验和Transwell侵袭及迁移实验观察RNAi抑制CAR基因表达对NCI-H520肺癌细胞增殖与侵袭迁移的影响,并通过建立动物模型动态观察瘤体的生长。结果:免疫组织化学结果显示,CAR阳性率为48%。Western blot法检测CAR蛋白和RT-PCR检测CAR mRNA在肺癌组织中明显高于正常肺组织和癌旁组织。筛选得到三组CAR基因表达受到抑制的NCI-H520稳定细胞系。半定量RT-PCR和Western blot结果显示,三组稳定细胞系中CAR mRNA和蛋白质表达均有不同程度的下降,其中shRNA-2抑制作用最强。平板克隆形成实验显示,shRNA-2抑制CAR基因表达后,NCI-H520细胞的增殖能力有所下降(P>0.05),Transwell侵袭及迁移实验显示,NCI-H520细胞侵袭迁移能力明显下降(P<0.05)。动物模型结果显示,抑制CAR的表达,则动物体内移植瘤的生长就会缓慢。结论:CAR与肺癌形成和进展有关,并能够促进肺癌细胞的侵袭和迁移活动。裸鼠肺癌移植瘤模型构建成功,为以后肺癌的研究奠定基础。利用RNAi有效抑制了CAR基因的表达,并抑制NCI-H520细胞在裸鼠体内瘤体的生长,CAR有望成为肺癌基因治疗的靶点之一。 展开更多
关键词 柯萨奇病毒腺病毒受体 WESTERN BLOT 逆转录聚合酶链反应 平板克隆形成实验 移植瘤模型
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Correlations among Persistent Viral Infection,Heart Function and Chinese Medicine Syndromes in Dilated Cardiomyopathy Patients 被引量:3
8
作者 刘强 苏小佳 +1 位作者 俞燕 刘永林 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS 2014年第12期928-933,共6页
Objective:To investigate the correlations among persistent viral infection,heart function and Chinese medicine(CM) difined-syndromes in patients with dilated cardiomyopathy(DCM).Methods:Fifty patients with DCM i... Objective:To investigate the correlations among persistent viral infection,heart function and Chinese medicine(CM) difined-syndromes in patients with dilated cardiomyopathy(DCM).Methods:Fifty patients with DCM in the First Affiliated Hospital of Zhejiang Chinese Medical University from October 2009 to December 2011 were selected as the research subjects,and 30 healthy people were simultaneously selected as the normal control group to detect persistent viral infections after admission.The CM syndrome type and grade of heart function were then evaluated.The expression level of Coxsackie adenovirus receptor(CAR) was detected using the flow cytometry(FCM) technique,coxsackie virus RNA(CVB-RNA) using reverse transcription polymerase chain reaction(RTPCR),and the plasma brain natriuretic peptide(BNP) level with a Triage meter plus diagnosis instrument.Finally,the parameters such as left ventricular end diastolic diameter(LVEDd) and left ventricular ejection fraction(LVEF) were measured by ultrasonic cardiogram.Person correlation analysis was used for measured data,Spearman correlation analysis for rating data,and the Chi-square test for numerical data.Results:CVB-RNA was positive in 22 patients(44%) with DCM,while only 6 cases(20%) were CVB-RNA-positive in the normal control group,with a significant difference between the two groups(P〈0.01).The expression level of CAR was significantly elevated in the DCM group compared with the normal control group(P〈0.01).In CVB-RNA-positive patients(22 cases),the expression level of CAR was significantly higher than in CVB-RNA-negative patients(28 cases;P〈0.01).In the DCM patients,there was a positive correlation between the CAR expression and the BNP level(r=0.34,P〈0.05),while no significant difference was found between the CAR expression and the LVEF and LVEDd(r=-0.32,0.30,P〉0.05).There was no clear correlation between virus infection and the CM syndrome types in DCM patients(r=-0.22,P〉0.05). 展开更多
关键词 dilated cardiomyopathy persistent viral infection coxsackie adenovirus receptor heart function Chinese medicine syndrome type brain natriuretic peptide
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低剂量5-Fu与Ad-IL24联用对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用及其机制 被引量:2
9
作者 杨圆圆 卢杨 +3 位作者 张晓龙 张晴 李真真 张砚君 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期1030-1034,共5页
目的探讨低剂量5-Fu与腺病毒表达的IL24联用对HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法采用PCR、酶切、连接等方法构建pAd-IL24腺病毒表达载体,Western blot检测IL24蛋白水平表达情况。CCK8法确定5-Fu联用剂量,检测与Ad-IL24联用对HepG2... 目的探讨低剂量5-Fu与腺病毒表达的IL24联用对HepG2细胞的生长抑制作用及其机制。方法采用PCR、酶切、连接等方法构建pAd-IL24腺病毒表达载体,Western blot检测IL24蛋白水平表达情况。CCK8法确定5-Fu联用剂量,检测与Ad-IL24联用对HepG2肝癌细胞的抑制效果,并计算联合指数。流式细胞术检测不同腺病毒感染复数及不同5-Fu浓度下绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)阳性细胞的比例。流式细胞术检测5-Fu作用前后HepG2细胞表面柯萨奇腺病毒受体(coxsackie adenovirus receptor,CAR)的表达变化。结果成功构建腺病毒表达载体pAd-IL24。确定5-Fu联用剂量为1μg/ml和2μg/ml,Ad-IL24与低剂量5-Fu联用可以协同抑制HepG2肝癌细胞生长,联合指数分别为0.75和0.64。低剂量5-Fu作用于HepG2后使其表面CAR水平显著增加(P<0.01)。结论低剂量5-Fu与Ad-IL24联用对HepG2肝癌细胞系的抑制有协同作用,可能与5-Fu上调HepG2表面CAR水平相关。 展开更多
关键词 肝癌 5氟尿嘧啶 IL24 腺病毒 柯萨奇腺病毒受体
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肿瘤细胞CAR表达水平与5型腺病毒转导效率的关系 被引量:2
10
作者 王海娟 李云峰 +5 位作者 钱海利 张雪燕 付明 梁萧 詹启敏 林晨 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第6期429-434,共6页
目的:通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体(coxsackie adenovirus receptor,CAR)表达水平与腺病毒转导效率的关系,为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法:将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒(Ad.... 目的:通过体外、体内实验探讨肿瘤细胞柯萨奇腺病毒受体(coxsackie adenovirus receptor,CAR)表达水平与腺病毒转导效率的关系,为腺病毒相关的生物制剂在临床个体化应用提供实验依据。方法:将载有绿色荧光蛋白的Ad5型腺病毒(Ad.GFP)以100MOI、200MOI分别感染人食管癌细胞系KYSE510、KYSE150、EC9706、人宫颈癌细胞系HeLa、人卵巢癌细胞系SKOV3、人肝癌细胞系HepG2和人肺癌细胞系A549,感染后48h通过流式细胞术检测Ad—GFP对不同细胞系的转导效率。采用Western blotting方法检测这些细胞中CAR的表达水平。将HeLa、A549、SKOV3、EC9706细胞分别接种于裸鼠腋下,接种细胞数分别为3×10^6、3×10^6、3×10^6、2×10^6,建立裸鼠移植瘤模型。待肿瘤长径达5~7mm时,在裸鼠移植瘤内注射Ad—GFP,每次1×10^9PFU,间隔48h注射第2次。第2次注射后48h处死裸鼠,剖取瘤组织,荧光显微镜观察冰冻切片中GFP的表达情况以判定腺病毒在瘤体内的转导效率,同时用免疫组化法检测瘤组织内的CAR表达水平。结果:200MOIAd—GFP感染A549、HeLa、HepG2、KYSE150细胞48h后分别有92.67%、89.31%、84.98%、74.59%的细胞表达GFP;而SKOV3、KYSE510、EC9706细胞中腺病毒的转导效率明显降低,GFP阳性率分别为30.06%、27.40%、18.93%;各种细胞的CAR蛋白表达水平与腺病毒的转导效率呈正相关。注射Ad—GFP的裸鼠移植瘤组织中可见HeLa、A549瘤组织内有明显的点状绿色荧光,而SKOV3、EC9706瘤组织内表达GFP的细胞数明显少于前两种瘤组织;HeLa、A549裸鼠移植瘤组织内大多数瘤细胞高表达CAR(卅),SKOV3、EC9706移植瘤组织内CAR表达水平较低(+或-),表明瘤体内CAR表达水平与Ad.GFP的转导效率也呈正相关。结论:体内外实验均显示肿瘤细胞的CAR表达水平与5型腺病毒转导效率密切相关。肿瘤患者治疗前检测� 展开更多
关键词 肿瘤 腺病毒 柯萨奇腺病毒受体 基因治疗
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受体依赖性TRAIL重组腺病毒对人肺癌细胞凋亡的诱导作用
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作者 马玲娣 王勇 +6 位作者 倪诚 王仕忠 鲍永仪 关乃富 张科 Leif G. Salford 樊小龙 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期577-582,共6页
目的:观察重组TRAIL腺病毒(Ad5-TRAIL及Ad5F35-TRAIL)对人非小细胞肺癌(nonsmall-cell lung cancer,NSCLC)原代培养细胞和细胞株的凋亡诱导作用,探讨两种Ad-TRAIL用于肺癌基因治疗的价值。方法:采用流式细胞术检测人肺癌细胞系A549、Z79... 目的:观察重组TRAIL腺病毒(Ad5-TRAIL及Ad5F35-TRAIL)对人非小细胞肺癌(nonsmall-cell lung cancer,NSCLC)原代培养细胞和细胞株的凋亡诱导作用,探讨两种Ad-TRAIL用于肺癌基因治疗的价值。方法:采用流式细胞术检测人肺癌细胞系A549、Z793、QG56和NCI-H520及10例原代培养肺癌细胞中CAR和CD46的表达水平;分别以Ad5-TRAIL及Ad5F35-TRAIL重组腺病毒按MOI 10和50感染上述细胞,48 h后Annexin V-FITC双标法流式细胞术检测细胞的早期凋亡。结果:A549、Z793、QG56和NCI-H520 4株肺癌细胞中,CD46的表达均明显高于CAR表达。Z793、QG56细胞对Ad5-TRAIL和Ad5F35-TRAIL的作用较敏感,MOI=10感染后凋亡率分别为(11.76±2.10)%、(15.96±2.89)%和(6.05±1.58)%、(10.11±1.26)%,显著高于对照组[(2.33±0.37)%和(5.95±1.89)%,P<0.05];MOI=50感染时NCI-H520细胞凋亡率分别为(12.89±3.2)%和(9.08±1.35)%,与对照组(7.04±2.17)%相比差异无统计学意义(P>0.05);Ad5-TRAIL和Ad5F35-TRAIL均不能诱导A549细胞凋亡。10例原代肺癌细胞CD46表达也明显较CAR高;Ad5-TRAIL或Ad5F35-TRAIL感染后,5例的原代肺癌细胞检测到凋亡;与Ad5-TRAIL相比,Ad5F35-TRAIL诱导的凋亡率更高。结论:两种TRAIL重组腺病毒对非小细胞肺癌细胞均有凋亡诱导作用,Ad5F35-TRAIL的作用强于Ad5-TRAIL,更适合于非小细胞肺癌的基因治疗。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 肿瘤坏死因子受体相关凋亡诱导配体 腺病毒 凋亡 柯萨奇腺病毒受体(CAR) CD46
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黄芪甲甙对病毒性心肌炎小鼠心肌柯萨奇病毒受体基因表达的影响 被引量:29
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作者 于小华 张新刚 +4 位作者 王时俊 赵刚 陈瑞珍 杨英珍 李双杰 《实用儿科临床杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期215-217,共3页
目的 探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎 (VM)小鼠心肌柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)基因表达影响。方法 Balb/c小鼠 1 0 0只 ,分为 6组。非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液 ,分为正常对照组 (A组 ,1 0只 ,以羧甲基纤维素钠 0 .1mL... 目的 探讨黄芪活性成分黄芪甲甙对病毒性心肌炎 (VM)小鼠心肌柯萨奇 腺病毒受体 (CAR)基因表达影响。方法 Balb/c小鼠 1 0 0只 ,分为 6组。非感染小鼠腹腔无菌注射病毒培养液 ,分为正常对照组 (A组 ,1 0只 ,以羧甲基纤维素钠 0 .1mL灌胃 7d)、9%黄芪甲甙对照组 (B组 ,1 0只 ,9%黄芪甲甙 0 .1mL灌胃 7d) ;余 80只小鼠以柯萨奇病毒 (CVB3)腹腔无菌注射制作病毒性心肌炎模型 ,VM小鼠随机分为心肌炎对照组和 1 %、3 %、9%黄芪甲甙干预心肌炎组 ,分别以生理盐水、1 %、3 %、9%黄芪甲甙 0 .1mL灌胃 7d(分别为C、D、E、F组 ,每组 2 0只 )。 1 4d后处死一小部分鼠并取其心脏。采用RT PCR检测心肌CARmRNA表达水平。结果 F组小鼠死亡率较C组明显降低 (1 0 %与 45 %比较 ) ,(χ2 =6 .1 4 P <0 .0 5) ,B组无小鼠死亡 ;与C组相比较 ,CARmRNA表达水平以心肌病变积分在F组显著下降 ,而 1 %、3 %黄芪甲甙对心肌炎小鼠CARmRNA表达及心肌病变积分无明显影响。结论  9%黄芪甲甙可抑制CAR表达 ,提高心肌炎小鼠生存率 ,减轻心肌损害 ,安全有效 ,对VM有良好的治疗作用。 展开更多
关键词 心肌炎 小鼠 柯萨奇-腺病毒受体 黄芪甲甙
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柯萨奇-腺病毒受体基因-968G/A多态性与柯萨奇病毒性心肌炎的关系 被引量:14
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作者 杨云华 邓晖 +2 位作者 刘丹莉 杜九中 李双杰 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第8期755-757,共3页
目的探讨柯萨奇-腺病毒受体(CAR)基因-968G/A多态性与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎的关系。方法收集病毒性心肌炎患儿280例,将其中CVB-IgM阳性130例作为心肌炎组,并选择同期130名健康儿童作为对照组,采用聚和酶链反应-限制性内... 目的探讨柯萨奇-腺病毒受体(CAR)基因-968G/A多态性与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎的关系。方法收集病毒性心肌炎患儿280例,将其中CVB-IgM阳性130例作为心肌炎组,并选择同期130名健康儿童作为对照组,采用聚和酶链反应-限制性内切酶片断长度多态性(PCR-RFLP)、DNA测序等方法检测2组CAR基因-968G/A多态性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定两组血清CAR水平。结果心肌炎组GG基因型和G等位基因频率均显著高于对照组(P<0.05)。心肌炎组血清CAR水平明显高于对照组(P<0.01),CAR基因-968G/A多态位点中含G等位基因(GG+GA)者血清CAR水平和CVB感染率均显著高于非G等位基因(AA)携带者(P均<0.05)。结论 CAR基因-968G/A多态性可能与中国南方汉族人群柯萨奇病毒性心肌炎有关,G等位基因是柯萨奇病毒性心肌炎的易感基因。 展开更多
关键词 柯萨奇-腺病毒受体 基因多态性 病毒性心肌炎
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柯萨奇-腺病毒受体在肿瘤发生发展机制中的研究进展 被引量:8
14
作者 范良生 陈刚 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第3期333-336,共4页
柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)最早作为2型和5型腺病毒的受体而被人们发现和认识。大量研究发现CAR可以影响肿瘤细胞的生长、细胞骨架的变化、细胞间的粘附等,从而在肿瘤侵袭转移过程中起非常重要的作用。... 柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)最早作为2型和5型腺病毒的受体而被人们发现和认识。大量研究发现CAR可以影响肿瘤细胞的生长、细胞骨架的变化、细胞间的粘附等,从而在肿瘤侵袭转移过程中起非常重要的作用。而且,CAR的表达与肿瘤的预后和腺病毒介导的减瘤效应也有密切的关系。基于CAR的重要作用,CAR已逐渐成为肿瘤发生发展机制及治疗领域研究中新的"热点",本文结合CAR的基本结构及功能对以上研究的进展作一综述。 展开更多
关键词 柯萨奇-腺病毒受体 肿瘤 病因学 减瘤作用 预后
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癌胚抗原相关黏附分子1对CVB3感染后CAR表达及心肌损伤的影响 被引量:4
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作者 张在勇 李新忠 +4 位作者 伍巍兰 宋明才 李健豪 解强 张稳柱 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第7期579-586,共8页
目的探讨癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAM1或CC1)对柯萨奇病毒(CVB3)感染后柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)表达和继发心肌损伤的影响。方法构建过表达小鼠CC1重组病毒,包装重组慢病毒pLVX-CEACAM 1-ZsGreen-Puro(rLV-CEACAM 1)并测定慢病毒... 目的探讨癌胚抗原相关黏附分子1(CEACAM1或CC1)对柯萨奇病毒(CVB3)感染后柯萨奇病毒-腺病毒受体(CAR)表达和继发心肌损伤的影响。方法构建过表达小鼠CC1重组病毒,包装重组慢病毒pLVX-CEACAM 1-ZsGreen-Puro(rLV-CEACAM 1)并测定慢病毒生物学滴度。分为CC1正常组、CC1过表达组、CC1正常+CVB3组和CC1过表达+CVB3组;各组使用AnnxinV-PE/7-AAD双染法检测心肌细胞凋亡率,CCK8检测细胞活性;qPCR检测CAR基因表达;Western blot检测CAR蛋白表达,ELISA检测肿瘤坏死因子α(TNF-α)及白细胞介素1β(IL-1β)水平。结果(1)CEACAM1重组载体测序提示目的基因序列连接,证明小鼠CEACAM1重组病毒载体构建成功,测定重组慢病毒滴度为1.5×10^11 TU/L。(2)CC1过表达+CVB3组较其他组心肌细胞凋亡率明显升高,心肌细胞增殖最低(P<0.05)。(3)CAR基因相对表达量在CC1过表达+CVB3组最高,而在CC1正常组最低,CAR蛋白表达也有类似结果;CC1过表达组较CC1正常组胞内CVB3相对表达量显著升高(P<0.05)。(4)CC1过表达组TNF-α、IL-1β水平较高,CVB3感染后较前明显升高。结论 CC1可能可以促进CVB3感染心肌细胞后心肌组织或细胞上CAR的表达,CAR可能是CC1调控CVB3感染心肌致心肌损伤过程的潜在作用靶点。 展开更多
关键词 癌胚抗原相关黏附分子1 柯萨奇病毒-腺病毒受体 扩张型心肌病 柯萨奇病毒
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柯萨奇-腺病毒受体在病毒性扩张型心肌病外周血白细胞中的表达及意义 被引量:4
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作者 于小华 李双杰 +2 位作者 唐国华 李华 彭寒林 《临床荟萃》 CAS 北大核心 2005年第1期9-11,共3页
目的 观察柯萨奇腺病毒受体 (CAR)在病毒性扩张型心肌病 (DCM )外周血白细胞中的表达及意义。方法 选择柯萨奇B组病毒性DCM及正常人各 15例作为研究对象 ,采用流式细胞术检测外周血白细胞中CAR表达水平 ,并对DCM患者CAR表达值与心功能... 目的 观察柯萨奇腺病毒受体 (CAR)在病毒性扩张型心肌病 (DCM )外周血白细胞中的表达及意义。方法 选择柯萨奇B组病毒性DCM及正常人各 15例作为研究对象 ,采用流式细胞术检测外周血白细胞中CAR表达水平 ,并对DCM患者CAR表达值与心功能值 [射血分数 (EF) ]的变化进行相关性分析。结果 流式细胞术检测表明 ,心肌病组平均荧光强度 (MFI)和阳性细胞百分率 (PPC)均明显高于正常对照组 ,两者比较 ,差异均有统计学意义(t =9.39和 7.2 1,P均 <0 .0 1) ,而且其MFI与EF值呈显著负相关 (r =- 0 .6 4 ,P <0 .0 5 )。结论 柯萨奇B组病毒性DCM患者外周血白细胞中CAR表达水平增加 ,外周血白细胞CAR水平的检测 ,有助于DCM的诊断、判断病情和预后。 展开更多
关键词 柯萨奇-腺病毒受体 扩张型心肌病 病毒 流式细胞术 白细胞
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改良腺病毒AdF35-eGFP转染人及大鼠骨髓间充质干细胞的效率对比研究 被引量:3
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作者 胡硕 熊玲静 +3 位作者 余剑英 雷萌 赵敏 张永学 《中南大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期983-989,共7页
目的:比较改良腺病毒AdF35-增强绿荧光蛋白(eGFP)转染人骨髓间充质干细胞(humanbone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat BMSCs,rBMSCs)的效率。方法:分别从人体、大鼠骨髓中分离出BMSCs,成骨、成脂诱导... 目的:比较改良腺病毒AdF35-增强绿荧光蛋白(eGFP)转染人骨髓间充质干细胞(humanbone marrow mesenchymal stem cells,hBMSCs)和大鼠骨髓间充质干细胞(rat BMSCs,rBMSCs)的效率。方法:分别从人体、大鼠骨髓中分离出BMSCs,成骨、成脂诱导培养以鉴定BMSCs。构建含eGFP的AdF35重组腺病毒载体AdF35-eGFP,以不同感染复数(multiplicity of infection,MOI)分别转染BMSCs后,MTT检测AdF35-eGFP对2种BMSCs的毒性作用,荧光显微镜观察eGFP的表达,流式细胞仪检测转染效率,实时定量PCR检测2种BMSCs表达柯萨奇腺病毒受体(CAR)和CD46mRNA的水平。结果:hBMSCs和rBMSCs从骨髓中分离出来后,分别成功诱导分化成骨和成脂。当MOI为1 000 PFU/mL时,AdF35-EGFP对2种BMSCs的活性均有明显抑制作用(P<0.001)。AdF35-eGFP感染hBMSCs 48 h后,荧光显微镜下可见发强烈绿色荧光的细胞,流式细胞仪检测其转染效率可达(84.8±7.1)%;Ad5-eGFP感染rBMSCs后,荧光显微镜下仅见少量发绿色荧光的细胞,48 h转染效率为(3.1±1.1)%。hBMSCs高表达CD46mRNA,低表达CARmRNA;而rBMSCs则高表达CARmRNA,低表达CD46mRNA,2种基因的表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论:AdF35可作为理想载体携带目的基因转染hBMSCs,但不适合作为转染rBMSCs的载体。 展开更多
关键词 35型腺病毒 骨髓间充质干细胞 转染 CD46 柯萨奇腺病毒受体
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柯萨奇-腺病毒受体基因的原核表达和多克隆抗体制备 被引量:2
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作者 吴赟 陈洪 +2 位作者 黄孝天 陈宏新 刘晶星 《上海第二医科大学学报》 CSCD 2004年第9期726-730,共5页
目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新... 目的利用原核基因工程克隆表达柯萨奇-腺病毒受体(CAR)胞外段,并制备多克隆抗体。方法从HeLa细胞中抽提总RNA,通过RT-PCR获得编码CAR胞外段的cDNA,与pQE31质粒连接,构建表达型重组质粒,测序证实后诱导表达,经Ni-NTA柱亲和纯化后,免疫新西兰兔,ELISA检测抗血清滴度。结果重组质粒转化的大肠杆菌M15经IPTG诱导表达及亲和纯化后得到滴度较高的融合蛋白,SDS-PAGE和Western blot显示其分子量约为26 kd,具有特异的抗原性,主要以包涵体形式存在于菌体中。纯化的融合蛋白免疫新西兰兔后产生的抗体,经ELISA检测抗体滴度>1:32 000。结论CAR胞外段基因的克隆表达和多克隆抗体的制备,为进一步研究该受体在以腺病毒载体为基础的基因治疗中的作用及柯萨奇病毒的致病机制奠定了基础。 展开更多
关键词 胞外段 腺病毒受体 多克隆抗体 滴度 基因 重组质粒 新西兰兔 克隆表达 诱导表达 纯化
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CAR抑制卵巢癌细胞株SKOV3侵袭转移表型的研究 被引量:3
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作者 王蓓蓓 陈刚 +3 位作者 李辅军 周剑锋 卢运萍 马丁 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1054-1058,共5页
背景与目的:柯萨奇-腺病毒受体(coxsackieandadenovirusreceptor,CAR)最早作为2,5型腺病毒的受体而被人们发现和认识,近年的研究发现它还是粘附分子家族的一员,并参与肿瘤恶性表型改变。本研究通过转染真核表达载体,探讨其对卵巢癌细胞... 背景与目的:柯萨奇-腺病毒受体(coxsackieandadenovirusreceptor,CAR)最早作为2,5型腺病毒的受体而被人们发现和认识,近年的研究发现它还是粘附分子家族的一员,并参与肿瘤恶性表型改变。本研究通过转染真核表达载体,探讨其对卵巢癌细胞株SKOV3侵袭转移表型的影响。方法:利用Westernblot和RT-PCR检测4株卵巢癌细胞CAR的表达;脂质体介导转染含有全长CAR基因的真核表达质粒至SKOV3细胞,经G418筛选出稳定表达的阳性细胞克隆;体外粘附实验及软琼脂克隆形成实验验证CAR对SKOV3侵袭转移表型的影响。结果:4株卵巢癌细胞中,CAR表达水平不同程度下调,其中SKOV3细胞CAR表达缺失。转染后,SKOV3细胞CARmRNA和蛋白质水平表达均明显增高;细胞间粘附力明显增强;软琼脂克隆实验显示转染细胞每孔克隆形成数(25.3±8.9)明显低于未转染组(88.8±14.0)和转染空质粒组(82.5±19.4)。结论:外源性CAR基因的导入可以增强卵巢癌细胞SKOV3间的粘附性,从而抑制肿瘤细胞的侵袭转移表型。 展开更多
关键词 卵巢癌/病理学 SKOV3细胞株 柯萨奇-腺病毒受体 侵袭 转移
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腺病毒载体在小鼠肝脏的分布及其表达规律研究 被引量:2
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作者 王鸣 郭建文 +4 位作者 习东 刘君慧 叶华丽 罗小平 宁琴 《实用肝脏病杂志》 CAS 2012年第3期216-219,共4页
目的研究腺病毒载体介导的β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因在小鼠肝脏的分布及表达情况,评价腺病毒载体作为基因治疗转导系统的有效性及安全性,为进一步的目的基因导入及表达奠定基础。方法将Balb/cJ小鼠随机分为正常组及暴发性肝炎组,给... 目的研究腺病毒载体介导的β-半乳糖苷酶(LacZ)报告基因在小鼠肝脏的分布及表达情况,评价腺病毒载体作为基因治疗转导系统的有效性及安全性,为进一步的目的基因导入及表达奠定基础。方法将Balb/cJ小鼠随机分为正常组及暴发性肝炎组,给小鼠经尾静脉注射2×108PFU腺病毒,收集24h、48h、72h、96h、120h和第7天小鼠血清,检测谷丙转氨酶和总胆红素,同时取肝脏、肺脏、心脏、肾脏标本进行X-gal染色,以观察腺病毒载体在各脏器的表达情况。取MHV-3诱导的暴发性肝炎组小鼠24h、48h、72h、96h肝脏,检测腺病毒载体在肝脏的表达情况。结果腺病毒载体主要在小鼠肝脏表达,并于72小时表达最高,在正常小鼠及暴发性肝炎小鼠肝脏中表达效率分别约55.7%和25.7%,之后逐渐消减;正常组小鼠注射腺病毒载体后,肝功能无明显变化。结论腺病毒载体介导的报告基因可在肝脏高效表达且未见明显的肝损害,可作为基因治疗中安全有效的基因传递系统用于治疗肝脏疾病。 展开更多
关键词 暴发性肝炎 腺病毒载体 柯萨奇/腺病毒受体 基因治疗
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