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大豆C_2H_2型锌指蛋白基因SCTF-1转化及功能分析 被引量:6
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作者 韩丹 王丕武 +6 位作者 曲静 高嵩 吴楠 宋阳 何欢 刘双 陈沼汀 《中国油料作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第3期307-312,共6页
为探讨锌指蛋白在大豆对非生物逆境胁迫耐受过程中的作用,构建了锌指蛋白基因SCTF-1的植物表达载体p CPB-SCTF-1,利用花粉管通道法将其导入大豆中,通过抗性筛选及PCR检测,共获得了6株转SCTF-1基因植株,Southern杂交鉴定表明功能元件以... 为探讨锌指蛋白在大豆对非生物逆境胁迫耐受过程中的作用,构建了锌指蛋白基因SCTF-1的植物表达载体p CPB-SCTF-1,利用花粉管通道法将其导入大豆中,通过抗性筛选及PCR检测,共获得了6株转SCTF-1基因植株,Southern杂交鉴定表明功能元件以单拷贝形式整合于受体基因组中。荧光定量PCR检测证明转化植株在根、茎、叶部位的表达与未转化植株相比显著提高。在4℃低温胁迫下,转SCTF-1基因植株相对电导率明显低于非转化植株,降低了21.10%~23.09%;丙二醛含量明显低于非转化植株,降低了10.56%~11.74%;过氧化物酶活性明显高于非转化植株,增加了25.02%~30.38%;转基因植株叶片未呈现明显的萎缩、萎蔫、打卷现象。因此,转SCTF-1基因的过量表达提高了转基因大豆的耐冷能力。 展开更多
关键词 大豆 锌指蛋白 SCTF-1 超表达载体构建 耐冷性
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枸橼C-05小热激蛋白基因HSP23.3克隆与拟南芥遗传转化
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作者 张凯 李益 +2 位作者 王萍 马先锋 邓子牛 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2023年第15期4981-4989,共9页
以枸橼C-05叶片为材料,对枸橼C-05中HSP23.3基因的ORF进行了克隆,并对其生物学信息进行了分析。结果显示:HSP23.3基因在枸橼C-05中的ORF为615 bp,编码204个氨基酸。枸橼C-05的HSP23.3蛋白属于跨膜亲水不稳定蛋白,预测定位于细胞质,二级... 以枸橼C-05叶片为材料,对枸橼C-05中HSP23.3基因的ORF进行了克隆,并对其生物学信息进行了分析。结果显示:HSP23.3基因在枸橼C-05中的ORF为615 bp,编码204个氨基酸。枸橼C-05的HSP23.3蛋白属于跨膜亲水不稳定蛋白,预测定位于细胞质,二级结构由α-螺旋、β-转角、延伸链和无规则卷曲构成,其中,α-螺旋和无规则卷曲是其最主要的二级结构元件,且三级结构和二级结构预测结果高度相似。不同物种同源序列进化分析结果显示枸橼C-05的HSP23.3与漾濞槭的TXG74 151.1亲缘关系最近。含枸橼C-05种质HSP23.3基因的转基因拟南芥T2代株系接种丁香假单胞菌结果显示转基因拟南芥与野生型相比症状较轻且能抑制丁香假单胞菌的繁殖。本研究初步认为HSP23.3基因可能参与枸橼C-05抗溃疡病反应过程。 展开更多
关键词 柑橘 HSP23.3 基因克隆 超表达载体构建 遗传转化
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龙眼DlWRKY57基因克隆与拟南芥遗传转化
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作者 黄幸 丁峰 +7 位作者 潘介春 张树伟 徐炯志 王金英 李琳 王颖 李浩然 刘一 《分子植物育种》 CAS 北大核心 2021年第1期149-157,共9页
以龙眼成熟叶片为材料,利用实验室构建的龙眼转录组数据库,筛选出Dl WRKY57基因c DNA序列,对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析。结果表明,Dl WRKY57基因ORF长度为894 bp,编码297个氨基酸,此蛋白属于WRKY基因家族中的域a类,存... 以龙眼成熟叶片为材料,利用实验室构建的龙眼转录组数据库,筛选出Dl WRKY57基因c DNA序列,对其开放阅读框(ORF)进行克隆和生物信息学分析。结果表明,Dl WRKY57基因ORF长度为894 bp,编码297个氨基酸,此蛋白属于WRKY基因家族中的域a类,存在1个WRKY结合位点。通过生物信息学分析表明,该蛋白属于非跨膜亲水蛋白,预测定位于细胞核,存在45个氨基酸磷酸化位点。其二级结构由无规则卷曲、琢-螺旋和延伸链构成,其中无规则卷曲为二级结构中最主要的结构元件,并且二级结构与三级结构预测结果高度一致。同源基因进化树分析表明该基因与木薯亲缘关系最近。以p MD18-T和p BI121载体为基础,成功构建了植物超表达载体p BI121-Dl WRKY57,利用农杆菌花序法转化拟南芥,经PCR分子检测,获得含Dl WRKY57基因的拟南芥植株,该超表达载体的遗传转化为Dl WRKY57基因功能的深入研究提供依据。 展开更多
关键词 龙眼(Dimocarpus longan) DlWRKY57 基因克隆 超表达载体构建
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