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Traceless photodegradable polymer cocoons for universal protein delivery and light-controlled gene editing
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作者 Huaibin Yu Meron Tsegay Kifle +7 位作者 Lili Chen Feihong Xiong Yan Zhang Shangbang Gao Wei Hou Shuliang Chen Weining Zhao Yuzhou Wu 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS CSCD 2024年第2期664-676,共13页
Polymer conjugation was found highly valuable in clinic to improve the bioavailability of protein therapeutics.However,it is still a tremendous challenge to achieve a complete release of original proteins from the con... Polymer conjugation was found highly valuable in clinic to improve the bioavailability of protein therapeutics.However,it is still a tremendous challenge to achieve a complete release of original proteins from the conjugated hybrid under external stimulus to recover active proteins in the targeted tissue.Herein,we report a general light-controlled protein delivery methodology by weaving a photodegradable polymer cocoon around proteins,which could reliably protect them from degradation in the dark while efficiently releasing them under illumination without any residual atoms.The surface charge of the polymer shell is easily tunable to facilitate efficient cell uptake.The versatility of this strategy is demonstrated by the delivery of the Cas9/sg RNA complex that realized light-controlled gene editing both in vitro and in vivo,and such repertoire is of particular value in regard to minimizing the off-target toxicity of CRISPR-Cas9-based gene therapy. 展开更多
关键词 photodegradable polymer-protein conjugate protein delivery light control gene editing
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由结合疫苗产品历史沿革带来的思考 被引量:3
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作者 杜琳 综述 +1 位作者 蒋仁生 审校 《微生物学免疫学进展》 2013年第6期60-65,共6页
由于优异安全性和有效性数据,结合疫苗已成为细菌性疫苗研制的一个方向,但因不同团体独立研发,产生了不同的结合技术,也带来了一些困惑。通过对几个具有代表性的结合疫苗研发团队的研究历程的回顾,探讨了结合方法、载体蛋白质、剂型等... 由于优异安全性和有效性数据,结合疫苗已成为细菌性疫苗研制的一个方向,但因不同团体独立研发,产生了不同的结合技术,也带来了一些困惑。通过对几个具有代表性的结合疫苗研发团队的研究历程的回顾,探讨了结合方法、载体蛋白质、剂型等热点话题,以期对结合疫苗的研制有所帮助。 展开更多
关键词 结合疫苗 结合方法 载体蛋白质 剂型
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Analysis of Protein Moiety of Polysaccharide Conjugates Water-extracted from Low Grade Green Tea 被引量:2
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作者 CHEN Xiaoqiang SHAO Shengrong +6 位作者 XIE Jianchun YUAN Hao LI Qian WU Long WU Zhengqi YUAN Haibo JIANG Yongwen 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2018年第4期691-696,共6页
Tea polysaccharide conjugates(TPCs) were water-extracted and purified from low-grade green tea. Although TPC contains 1.97% covalent binding proteins, Coomassie brilliant blue G250 and R250 could not detect this pro... Tea polysaccharide conjugates(TPCs) were water-extracted and purified from low-grade green tea. Although TPC contains 1.97% covalent binding proteins, Coomassie brilliant blue G250 and R250 could not detect this protein. The "should-shape" absorption peak observed at 250-280 nm in the UV-Vis spectrum was caused by quinone compounds derived from polyphenol oxidation during TPC extraction. The UV-Vis spectrum could be used to detect the decolorizing degree of TPC. TPC aqueous solution merely presented the negative charge properties of its polysaccharides instead of the acid-base property of its protein section, and exhibited higher stability at pH greater than 5.0. No precipitation or haze occurred in three TPC/epigallocatechin gallate(EGCG) aqueous mixtures during 12 h storage. TPC had emulsifying activity, which indicated that its protein moiety formed hydrophobic groups. It is proposed that some of the physicochemical properties of the TPC protein moiety are shielded by its polysaccharide chain. 展开更多
关键词 Green tea Polysaccharide conjugate protein
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基于新载体的b型流感嗜血杆菌结合疫苗的制备及免疫原性研究 被引量:2
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作者 苗丹青 李军强 +2 位作者 杨鸣鸣 邵忠琦 朱涛 《中国新药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期739-744,共6页
目的:评价Hin47-HiD融合蛋白作为b型流感嗜血杆菌结合疫苗新型载体的可行性。方法:应用重叠延伸PCR法构建Hin47-HiD融合基因,克隆至表达载体p ET-9a,并转化至大肠杆菌中诱导表达。融合蛋白经柱层析纯化后与Hib多糖结合,免疫小鼠并用间接... 目的:评价Hin47-HiD融合蛋白作为b型流感嗜血杆菌结合疫苗新型载体的可行性。方法:应用重叠延伸PCR法构建Hin47-HiD融合基因,克隆至表达载体p ET-9a,并转化至大肠杆菌中诱导表达。融合蛋白经柱层析纯化后与Hib多糖结合,免疫小鼠并用间接ELISA法测定小鼠血清中针对Hib多糖和Hin47、HiD蛋白的抗体滴度。结果:本研究表达、纯化了Hin47-HiD融合蛋白,并制备了以该蛋白为载体的Hib结合疫苗;两针免疫后,免疫Hib-Hin47-HiD结合物的小鼠血清中的抗Hib抗体水平远高于接种Hib多糖的小鼠;此外,Hib-Hin47-HiD结合物还诱导出高水平的针对Hin47和HiD的抗体。结论:Hin47-HiD融合蛋白可以有效的提高Hib多糖的免疫原性,是一个有潜力的新型结合疫苗蛋白载体。 展开更多
关键词 b型流感嗜血杆菌荚膜多糖 结合疫苗 融合蛋白 免疫原性
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Novel polysaccharide-protein conjugates provide an immunogenic 13-valent pneumococcal conjugate vaccine for S.pneumoniae 被引量:2
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作者 Allison E.B.Turner Jonas E.Gerson +3 位作者 Helen Y.So Daniel J.Krasznai Adrienne J.St.Hilaire Donald F.Gerson 《Synthetic and Systems Biotechnology》 SCIE 2017年第1期49-58,共10页
Pneumonia remains the single leading cause of childhood death worldwide.Despite the commercial availability of multiple pneumococcal conjugate vaccines(PCVs),high dosage cost and supply shortages prevent PCV delivery ... Pneumonia remains the single leading cause of childhood death worldwide.Despite the commercial availability of multiple pneumococcal conjugate vaccines(PCVs),high dosage cost and supply shortages prevent PCV delivery to much of the developing world.The current work presents high-yield pneumococcal conjugates that are immunogenic in animals and suitable for use in human vaccine development.The 13-valent pneumococcal conjugate vaccine(PCV-13)investigated in this research incorporated serotypes 1,3,4,5,6A,6B,7F,9V,14,18C,19A,19F,and 23F.Pneumococcal polysaccharides(PnPSs)and CRM197 carrier protein were produced and purified in-house,and used to prepare PnPS-CRM conjugates using unique,cyanide-free,in vacuo glycation conjugation methods.In vitro characterization confirmed the generation of higher molecular weight PnPS-CRM conjugates low in free protein.In vivo animal studies were performed to compare PnuVax's PCV-13 to the commercially available PCV-13,Prevnar®13(Pfizer,USA).A boost dose was provided to all groups post-dose 1 at t?14 days.Post-dose 2 results at t?28 days showed that all 13 serotypes in PnuVax's PCV-13 were boostable.Per serotype IgG GMCs demonstrated that PnuVax's PCV-13 is immunogenic for all 13 serotypes,with 10 of the 13 serotypes statistically the same or higher than Prevnar®13 post-dose 2.As a result,the novel polysaccharideprotein conjugates developed in this work are highly promising for use in human PCV development.The in vacuo conjugation technique applied in this work could also be readily adapted to develop many other conjugate vaccines. 展开更多
关键词 PNEUMONIA Vaccine development PCV Pneumococcal conjugate vaccine POLYSACCHARIDE Carrier protein In vacuo glycation
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基于HIV中和单抗4E10表位的免疫原设计和效果评价的初步研究 被引量:1
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作者 聂建辉 王文波 +1 位作者 宋爱京 王佑春 《中国病毒病杂志》 CAS 2012年第5期335-340,共6页
目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白... 目的构建基于4E10表位的免疫原,评价其在豚鼠体内诱导中和抗体的能力。方法构建3种免疫原,将3个4E10表位基因串联后连接至GST基因上融合表达蛋白GST-3EP;将4E10表位基因连接柔性连接子GGSGG,再将4个该肽串联后连接至CKS基因融合表达蛋白CKS-4EP;将合成的4E10表位多肽通过Sulfo-SMCC连接至P64K载体蛋白构建结合型免疫原PKEP。用SDS-PAGE电泳的方法检测各种免疫原的分子质量和纯度。用假病毒中和试验评价豚鼠体内中和抗体水平。结果蛋白电泳显示所有免疫原的分子量大小正确,纯度在95%以上。GST-3EP能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体,3次免疫后5只豚鼠4只阳转,阳转的豚鼠中2只中和抗体水平IC50>200,另外两只抗体水平在100左右。对各组血清50倍稀释后中和抑制率进行统计分析,3EP组与佐剂对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论构建的融合蛋白GST-3EP 3次免疫后能在豚鼠体内诱导一定水平的中和抗体。 展开更多
关键词 人类免疫缺陷病毒 中和抗体 融合蛋白 偶联蛋白 4E10
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液相色谱-ELISA测定结合疫苗中游离蛋白含量可行性的初步探讨 被引量:1
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作者 谭小梅 杨朝晖 +6 位作者 周园 赵志强 张萍 刘月萍 计永莉 杜琳 谢贵林 《微生物学免疫学进展》 2008年第1期43-47,共5页
用适宜分离范围的色谱柱,预先确定细菌多糖蛋白结合疫苗载体蛋白的洗脱峰出峰时间;然后将细菌多糖-蛋白结合疫苗用相同条件进行分离,分部收集各洗脱峰并直接包被酶标板,与适宜浓度的载体蛋白特异抗体反应后,加入酶标二抗测定各洗脱峰样... 用适宜分离范围的色谱柱,预先确定细菌多糖蛋白结合疫苗载体蛋白的洗脱峰出峰时间;然后将细菌多糖-蛋白结合疫苗用相同条件进行分离,分部收集各洗脱峰并直接包被酶标板,与适宜浓度的载体蛋白特异抗体反应后,加入酶标二抗测定各洗脱峰样品中载体蛋白的吸光值;把载体蛋白出峰后的吸光值总和计为游离载体蛋白质吸光值;以游离载体蛋白吸光值占所有洗脱峰吸光值的比例计算游离载体蛋白含量。以伤寒Vi结合疫苗(载体蛋白rEPA)和甲型副伤寒结合疫苗(载体蛋白为TT)作为实验材料探讨方法的可行性。结果说明,该方法具有较好的特异性和敏感度。 展开更多
关键词 结合疫苗 游离蛋白质 ELISA 液相色谱
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A群脑膜炎球菌多糖-白喉毒素无毒变异体CRM197结合物的制备及其初步评价 被引量:1
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作者 张营营 蔡路奎 +6 位作者 姜博 毕研伟 高丹丹 闫铃梅 姬秋彦 李智华 徐维明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2012年第10期1248-1253,共6页
目的制备A群膜炎球菌多糖(Group A meningococcal polysaccharide,GAMP)-白喉毒素无毒变异体CRM197(Cross-reactive material 197)结合物,并分析其理化性质及免疫学特性。方法白喉棒状杆菌C7 M1菌株经发酵培养表达CRM197,表达产物经DEAE... 目的制备A群膜炎球菌多糖(Group A meningococcal polysaccharide,GAMP)-白喉毒素无毒变异体CRM197(Cross-reactive material 197)结合物,并分析其理化性质及免疫学特性。方法白喉棒状杆菌C7 M1菌株经发酵培养表达CRM197,表达产物经DEAE-4FF层析柱进行纯化,纯化产物经SDS-PAGE及Western blot鉴定。用溴化氰(CNBr)活化GAMP,己二酰肼(ADH)为连接剂,在碳二亚胺(EDAC)催化下将GAMP与CRM197共价结合,制备GAMP-ADH-CRM197结合物,经Sepharose 4FF层析柱纯化后,进行各项生化检测,采用免疫双扩散检测结合物的抗原性,将结合物皮下注射ICR小鼠,间接ELISA法检测小鼠血清中抗GAMP的抗体滴度,分析其免疫原性。结果发酵培养20 h时,菌液上清中的CRM197蛋白表达量最高;CRM197以分泌形式表达,纯化后纯度达95%以上,可与白喉类毒素单抗发生特异性反应;GAMP-ADH-CRM197结合物各项生化指标均符合《中国药典》三部(2010版)要求,与A群流脑诊断血清形成明显的沉淀线,结合物诱生的多糖特异性抗体滴度显著高于多糖组和混合物组。结论成功制备了GAMP-ADH-CRM197结合物,其具有良好的抗原性和免疫原性,为以CRM197为蛋白载体制备脑膜炎球菌结合疫苗奠定了基础。 展开更多
关键词 A群脑膜炎球菌 多糖 白喉毒素 CRM197 变异体 结合物 载体蛋白
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沙门菌鞭毛蛋白作为偶联疫苗载体的应用
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作者 钱锋 徐沪济 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2016年第7期765-769,共5页
鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要成分,通过聚合鞭毛蛋白单体形成鞭毛的丝状体。鞭毛蛋白的N-末端和C-末端区域相互靠拢形成功能区域,该区域处于鞭毛丝状体的内部;中间区域是序列变异区,暴露于鞭毛丝状体表面。沙门菌鞭毛蛋白具有特殊的抗原性... 鞭毛蛋白是细菌鞭毛的主要成分,通过聚合鞭毛蛋白单体形成鞭毛的丝状体。鞭毛蛋白的N-末端和C-末端区域相互靠拢形成功能区域,该区域处于鞭毛丝状体的内部;中间区域是序列变异区,暴露于鞭毛丝状体表面。沙门菌鞭毛蛋白具有特殊的抗原性,称为H抗原,是沙门菌分型的依据之一。作为Toll样受体5(Toll-like receptors 5,TLR5)等先天性免疫系统受体的配体,沙门菌鞭毛蛋白是一种强效的蛋白型佐剂,已广泛应用于细菌、病毒和寄生虫的疫苗研制。本文就沙门菌鞭毛蛋白作为载体蛋白在偶联疫苗的应用作一综述。 展开更多
关键词 沙门菌 鞭毛蛋白 偶联疫苗 载体蛋白
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C群脑膜炎球菌多糖-rP64K结合物的制备及免疫原性
10
作者 王公孝 刘璐 +2 位作者 王斌 秦敏 熊慧玲 《生物技术世界》 2013年第6期46-48,共3页
用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶·四氟化硼(CDAP)活化C群脑膜炎球菌多糖(GCMP),以己二酰肼(ADH)作为连接子,与重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白64 KD(rP64K)在碳二亚胺的(EDAC)作用下结合,制备GCMP-P64K结合物。纯化后免疫NIH小鼠,用间接ELIS... 用1-氰基-4-二甲基氨基吡啶·四氟化硼(CDAP)活化C群脑膜炎球菌多糖(GCMP),以己二酰肼(ADH)作为连接子,与重组B群脑膜炎球菌外膜蛋白64 KD(rP64K)在碳二亚胺的(EDAC)作用下结合,制备GCMP-P64K结合物。纯化后免疫NIH小鼠,用间接ELISA法检测小鼠血清中抗GCMPIgG抗体水平,并GCMP-TT结合物比较载体诱导的免疫抑制。所制备多糖-蛋白结合物(GCMP-P64K)保持了GCMP抗原特异活性,结合物免疫小鼠后可诱生比多糖单独免疫更高水平的GCMP血清IgG抗体,并能形成免疫记忆,为研究理想载体蛋白提供了新的思路。 展开更多
关键词 C群脑膜炎球菌 结合疫苗 载体蛋白 免疫原性
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Quasi-physical Algorithm for Protein Folding in an Off-Lattice Model
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作者 Lü Zhi-Peng HUANG Wen-Qi SHI He 《Communications in Theoretical Physics》 SCIE CAS CSCD 2007年第1期181-185,共5页
We study a three-dimensional off-lattice protein folding model, which involves two species of residues interacting through Lennard-Jones potentials. By incorporating an extra energy contribution into the original pote... We study a three-dimensional off-lattice protein folding model, which involves two species of residues interacting through Lennard-Jones potentials. By incorporating an extra energy contribution into the original potential function, we replace the original constrained problem with an unconstrained minimization of a mixed potential function. As such an efficient quasi-physical algorithm for solving the protein folding problem is presented. We apply the proposed algorithm to sequences with up to 55 residues and compare the computational results with the putative lowest energy found by several of the most famous algorithms, showing the advantages of our method. The dynamic behavior of the quasi-physlcal algorithm is also discussed. 展开更多
关键词 quasi-physical algorithm conjugate gradient method protein folding off-lattice model
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以乙肝核心抗原病毒样颗粒为新型载体蛋白制备流脑多糖结合疫苗
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作者 胥玲玲 李正军 +4 位作者 苏志国 杨延丽 余蓉 郑永祥 张松平 《华西药学杂志》 CAS CSCD 2018年第6期573-577,共5页
目的以乙肝核心抗原(HBc)病毒样颗粒为载体,化学偶联脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖,制备高免疫原性的多糖结合疫苗。方法将双功能聚乙烯二醇对C群脑膜炎多糖衍生化后,与巯基化的乙肝核心抗原连接,采用凝胶过滤色谱纯化得到多糖结合疫苗。对结... 目的以乙肝核心抗原(HBc)病毒样颗粒为载体,化学偶联脑膜炎奈瑟球菌荚膜多糖,制备高免疫原性的多糖结合疫苗。方法将双功能聚乙烯二醇对C群脑膜炎多糖衍生化后,与巯基化的乙肝核心抗原连接,采用凝胶过滤色谱纯化得到多糖结合疫苗。对结合疫苗的结构表征和多糖含量进行定量分析后,皮下免疫BALB/c小鼠,采用酶联免疫吸附法(ELISA)评价免疫效果。结果衍生化多糖与巯基化的HBc按质量比1:1投料,在4℃下反应48h,得到多糖蛋白比为0.69、游离多糖含量为14.66%的多糖结合疫苗,并且能够保持HBc完整的颗粒结构。免疫后,纯糖免疫组只能够产生有限的抗体滴度,而以HBc为载体的多糖结合疫苗能够诱导产生明显高于纯糖组的抗体滴度。结论采用HBc作为载体蛋白制备多糖结合疫苗,可以显著提高多糖的免疫原性。作为制备流脑多糖结合疫苗的新型载体蛋白,具有较好的研究价值和应用前景。 展开更多
关键词 流行性脑脊髓膜炎 C群脑膜炎多糖 乙肝核心抗原 病毒样颗粒 结合疫苗 载体蛋白 免疫活性
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多糖蛋白结合疫苗中载体蛋白的研究与应用 被引量:14
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作者 谭亚军 张庶民 侯启明 《中国疫苗和免疫》 CAS 2013年第4期355-360,共6页
多糖蛋白结合疫苗能弥补多糖疫苗的局限性,有效预防和控制脑膜炎球菌、肺炎球菌、b型流行性感冒嗜血杆菌等侵袭性细菌引起的婴幼儿和高危人群感染。目前,多糖蛋白结合疫苗的研制范围日趋广泛,但可供选择的载体蛋白种类有限,载体蛋白的... 多糖蛋白结合疫苗能弥补多糖疫苗的局限性,有效预防和控制脑膜炎球菌、肺炎球菌、b型流行性感冒嗜血杆菌等侵袭性细菌引起的婴幼儿和高危人群感染。目前,多糖蛋白结合疫苗的研制范围日趋广泛,但可供选择的载体蛋白种类有限,载体蛋白的重复使用可能会引起免疫干扰等现象。为满足结合疫苗发展的需要,解决载体蛋白单一的现状,各种新型载体蛋白正在不断开发,现就多糖蛋白结合疫苗中载体蛋白的研究、应用和发展前景进行综述。 展开更多
关键词 多糖蛋白结合疫苗 载体蛋白
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细菌多糖结合疫苗载体蛋白的免疫原性干扰作用 被引量:8
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作者 陈琼 石继春 叶强 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第7期1034-1039,共6页
细菌多糖蛋白结合疫苗(b型流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌多糖结合疫苗)普遍用于2岁以下婴幼儿免疫。目前该类疫苗广泛使用的蛋白载体有破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、CRM19(7白喉毒素... 细菌多糖蛋白结合疫苗(b型流感嗜血杆菌、脑膜炎奈瑟菌和肺炎链球菌多糖结合疫苗)普遍用于2岁以下婴幼儿免疫。目前该类疫苗广泛使用的蛋白载体有破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)、白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)、CRM19(7白喉毒素的一种突变体)和未分型流感嗜血杆菌蛋白D(nontypeable haemophilus influenzae protein D,PD)。本文就目前这类疫苗免疫接种中载体特异的T辅助细胞刺激作用、载体诱导的表位抑制作用(carrier-induced-epitopic suppression,CIES)和旁观者干扰效应进行初步探讨。 展开更多
关键词 多糖蛋白结合疫苗 载体蛋白 免疫原性 干扰
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合成生物学在多糖结合疫苗研发中的应用 被引量:2
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作者 叶精勤 黄文华 +2 位作者 潘超 朱力 王恒樑 《合成生物学》 CSCD 北大核心 2024年第2期338-352,共15页
由于合成生物学的快速发展,目前已经实现了人工设计DNA和蛋白质的合成,对具有重要生物学功能、结构也更为复杂的糖类物质进行精准设计合成,也将是合成生物学未来发展的重要方向。近年来,一种基于细菌寡糖转移酶体系的蛋白多糖偶联技术... 由于合成生物学的快速发展,目前已经实现了人工设计DNA和蛋白质的合成,对具有重要生物学功能、结构也更为复杂的糖类物质进行精准设计合成,也将是合成生物学未来发展的重要方向。近年来,一种基于细菌寡糖转移酶体系的蛋白多糖偶联技术发展迅速,已被广泛应用于病原细菌多糖结合疫苗的生物合成制备。本文综述了该技术体系中的寡糖转移酶元件、载体蛋白元件、异源多糖抗原合成线路以及工程菌株改造等核心关键模块的最新研究进展。使用生物活体系统,发酵生产多糖结合疫苗,具有产物均一性好、步骤简便、绿色环保等优势,是一种亟待发展的新兴技术,同时也存在一些技术细节需要完善。未来,寡糖转移酶的定向进化、纳米颗粒型蛋白载体的应用、多糖合成基因的组合重排、工程菌株的代谢途径优化,将有望进一步促进多糖结合疫苗的生物合成研究。 展开更多
关键词 糖合成生物学 多糖结合疫苗 蛋白多糖偶联技术 寡糖转移酶
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Lowry法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗蛋白含量干扰现象的排除 被引量:7
16
作者 李新国 袁军 +3 位作者 张洋 孙晓芳 项美娟 杨晓明 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2009年第10期1029-1031,共3页
目的探讨Lowry法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗蛋白含量干扰现象的排除方法。方法分别应用《中国药典》三部(2005版)中Lowry法与第5版《欧洲药典》2.5.16法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液的蛋白含量,并以碳二亚胺(EDAC)为干扰性物质,... 目的探讨Lowry法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗蛋白含量干扰现象的排除方法。方法分别应用《中国药典》三部(2005版)中Lowry法与第5版《欧洲药典》2.5.16法测定b型流感嗜血杆菌结合疫苗原液的蛋白含量,并以碳二亚胺(EDAC)为干扰性物质,验证两方法排除干扰的能力。结果同一批结合疫苗原液用两种方法测定的结果不一致,应用《中国药典》方法测定的结果明显高于第5版《欧洲药典》的方法。在多糖的活化衍生及多糖蛋白结合过程中加入EDAC、己二酰二肼(ADH)等,可干扰测定结果,使结果偏高。结论应用Lowry法测定多糖蛋白结合疫苗中蛋白含量时,应排除干扰性物质的影响。 展开更多
关键词 多糖蛋白结合疫苗 蛋白含量 Lowry法 干扰性物质
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脑膜炎球菌多糖结合疫苗的研究进展
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作者 孟清霞 许项可 +1 位作者 安文珏 张珂 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2024年第3期370-375,共6页
脑膜炎球菌多糖结合疫苗基本采用化学结合方式制备,最常用的方式为酰胺缩合反应,由于多糖与蛋白以共价键形式结合,因此制备的结合疫苗稳定性较高,具有较好的技术优势,在脑膜炎球菌相关疾病预防中发挥重要作用。脑膜炎球菌多糖结合疫苗... 脑膜炎球菌多糖结合疫苗基本采用化学结合方式制备,最常用的方式为酰胺缩合反应,由于多糖与蛋白以共价键形式结合,因此制备的结合疫苗稳定性较高,具有较好的技术优势,在脑膜炎球菌相关疾病预防中发挥重要作用。脑膜炎球菌多糖结合疫苗应用于2岁以内婴幼儿的免疫接种,保护效果持久。本文就脑膜炎球菌多糖结合疫苗制备的影响因素、多糖与载体蛋白的结合方式、国内外现状以及制备过程中存在的问题进行综述。 展开更多
关键词 脑膜炎球菌 多糖结合疫苗 载体蛋白
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2007-2020年中国多糖结合疫苗使用现状
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作者 陈娅妮 王迪 +4 位作者 周佳佳 曹雷 郑徽 刘艳 安志杰 《中国疫苗和免疫》 CSCD 北大核心 2024年第1期71-76,共6页
目的分析中国多糖结合疫苗使用现状。方法从中国药品检定部门网站、国家免疫规划信息管理系统和中国统计年鉴收集2007-2020年多糖结合疫苗批签发量、2014-2020年报告接种剂次数和出生人口,分析疫苗批签发量,估算出生儿童多糖结合疫苗人... 目的分析中国多糖结合疫苗使用现状。方法从中国药品检定部门网站、国家免疫规划信息管理系统和中国统计年鉴收集2007-2020年多糖结合疫苗批签发量、2014-2020年报告接种剂次数和出生人口,分析疫苗批签发量,估算出生儿童多糖结合疫苗人均接种剂次。结果2007-2020年中国多糖结合疫苗共批签发46120.4万剂,年均上升5.53%;其中TT、CRM_(197)、OMP载体蛋白的疫苗分别占92.63%、6.69%、0.68%。2014-2020年出生儿童人均接种多糖结合疫苗1.46剂,从2014年的1.17剂上升至2020年的2.51剂;东部、中部、西部地区人均接种剂次分别为1.84剂、1.62剂、1.13剂。结论2007-2020年中国多糖结合疫苗使用量逐年增加,东部地区疫苗覆盖水平相对较高。需完善多糖结合疫苗免疫策略以指导其合理使用。 展开更多
关键词 多糖结合疫苗 载体蛋白 疫苗接种 覆盖水平
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不同蛋白载体制备A、C、Y、W_(135)群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性 被引量:6
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作者 佟巍 孙晓东 +2 位作者 刘建斌 尹珊珊 刘建凯 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2018年第2期121-124,128,共5页
目的探讨以破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)及白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)为载体的A、C、Y、W_(135)群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性。方法将A、C、Y、W_(135)群流脑多糖经溴化氰(CNBr)活化后,以1,6己二酰肼(1,6-adipic ... 目的探讨以破伤风类毒素(tetanus toxoid,TT)及白喉类毒素(diphtheria toxoid,DT)为载体的A、C、Y、W_(135)群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗的免疫原性。方法将A、C、Y、W_(135)群流脑多糖经溴化氰(CNBr)活化后,以1,6己二酰肼(1,6-adipic acid dihydrazide,ADH)作为衍生剂制备相应的衍生物,分别与TT及DT在碳二亚胺[N-(3-Dimethylami-nopropyl)-N’-ethylcarbodiimide hydrochloride,EDAC]作用下结合,经Sepharose 4FF凝胶层析纯化后,加入冻干保护剂进行冻干,制备成A、C、Y、W_(135)群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗。用两种蛋白载体疫苗分别按1及2.5μg两个剂量(各型多糖的含量为1和2.5μg)免疫小鼠,经腹部皮下注射,于0及14 d各免疫1次,于首次免疫后第28天经静脉采血,分离血清,ELISA法检测血清各型抗体水平。结果 1及2.5μg两个剂量组的阳转率均高于80%,2.5μg免疫组的阳转率优于1μg免疫组;总体上来说,以TT为蛋白载体结合疫苗的阳转率高于以DT为载体的结合疫苗,对A和W_(135)群脑膜炎球菌多糖结合疫苗较明显。结论以TT及DT为载体制备的A、C、Y、W_(135)群四价脑膜炎球菌多糖结合疫苗均具有良好的免疫原性,TT略优于DT。 展开更多
关键词 脑膜炎球菌多糖结合疫苗 蛋白载体 破伤风类毒素 白喉类毒素 免疫原性
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液相体系制备大豆酸沉蛋白-葡聚糖共价复合物及其反应机制(Ⅱ)反应机制的理论分析 被引量:5
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作者 齐军茹 杨晓泉 廖劲松 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第2期142-144,共3页
采用凝胶过滤色谱和红外光谱(FT-IR)分析了反应前后蛋白与多糖Maillard反应产物分子结构特征,证实反应后SAPP与葡聚糖产生了共价结合;并通过凝胶渗透色谱(GPC)技术对干热反应后所得共价复合物的分子量分布进行分析,结果表明液相体系所... 采用凝胶过滤色谱和红外光谱(FT-IR)分析了反应前后蛋白与多糖Maillard反应产物分子结构特征,证实反应后SAPP与葡聚糖产生了共价结合;并通过凝胶渗透色谱(GPC)技术对干热反应后所得共价复合物的分子量分布进行分析,结果表明液相体系所得蛋白-多糖共价复合物与干热法所得产物的数均分子量和重均分子量非常相近。 展开更多
关键词 共价复合物 大豆酸沉蛋白 乳化活性 MAILLARD反应 凝胶渗透色谱
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