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题名免疫磁珠分离技术纯化和检测泰泽氏病原体的研究
被引量:4
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作者
何静云
刘星
张丽芳
李红
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机构
中国医学科学院中国协和医科大学实验动物研究所
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出处
《中国实验动物学报》
CAS
CSCD
2006年第2期126-131,共6页
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文摘
目的建立泰泽氏病原体(Ty)纯化方法,获得纯的菌体供抗原研究,为ELISA诊断抗原的制备提供依据;并尝试建立Ty隐性感染血清学抗原检查方法。方法选择特异性抗体包被磁珠,从感染大鼠肝脏中富集和纯化Ty;用SDS-PAGE和Western blot技术考察纯化Ty的蛋白和抗原图谱;同时用免疫磁珠分离技术(IMS)直接检查隐性感染大鼠肠道上皮细胞内的Ty。结果用辛酸-硫酸铵纯化的Ty单克隆抗体M5以0·5μg/107beads以上浓度包被抗IgG抗体预结合的磁珠4h,可最大效率地富集Ty;分离反应进行1h,敏感性达到103菌体/mL;吖啶黄染色镜检法可以直接、快速地观察到结合于磁珠上的细菌;抗原分析表明,IMS较好地去除了肝组织和真核细胞成分,纯化的Ty RJ株具有3个免疫优势的抗原成分,相对分子质量(Mr)分别为160×103、116×103、55×103;此外,IMS法可直接从隐性感染大鼠盲肠上皮细胞中检测到少量寄生的Ty。结论用IMS技术可有效地富集和纯化Ty,并可以作为Ty隐性感染血清学抗原检查的候选方法。
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关键词
免疫磁珠
泰泽氏病原体
血清学试验
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Keywords
Immunomagnetic beads
clostridium piliformis
Serodiagnostic reagent
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分类号
R378
[医药卫生—病原生物学]
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题名ICR小鼠人工感染泰泽氏菌的组织病变观察
被引量:2
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作者
罗建辉
王春玲
贺争鸣
邢瑞昌
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机构
中国药品生物制品检定所
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出处
《中国实验动物学杂志》
2000年第1期19-22,共4页
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基金
国家科技部资助项目
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文摘
20只ICR小鼠经尾静脉途径人工感染泰泽氏菌。感染小鼠健康活泼 ,与对照小鼠无区别。感染后 4~ 7天 ,10只经醋酸可的松激发的小鼠其肝脏均表现出轻重不等的散在、灶性病变以至弥漫性灶性坏死 ,Giemsa染色镜检可见数量不等、典型的泰泽氏菌 ,细菌培养阴性。 10只未经激发小鼠和 5只对照小鼠均未见有病变 ,镜检也未查到泰泽氏菌。上述试验结果表明 。
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关键词
ICR小鼠
对照
观察
醋酸可的松
养阴
感染后
静脉途径
人工感染
染色镜检
病变
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Keywords
clostridium piliformis Mouse
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分类号
Q965.8
[生物学—昆虫学]
S858
[农业科学—临床兽医学]
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