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CRM1、exportin5在乳腺癌组织中的表达及其临床意义 被引量:1
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作者 应浩杰 王乃金 +3 位作者 周文广 史进 马军伟 苏轲 《中国现代普通外科进展》 CAS 2022年第12期938-942,951,共6页
目的:探究染色体区域维护因子1(CRM1)、输出蛋白5(exportin5)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:2016年6月至2017年6月,行手术切除的乳腺癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤组织≥5 cm)87例,采用免疫组织化学染色法检测CRM1、exportin... 目的:探究染色体区域维护因子1(CRM1)、输出蛋白5(exportin5)在乳腺癌组织中的表达及其临床意义。方法:2016年6月至2017年6月,行手术切除的乳腺癌组织和癌旁正常组织(距离肿瘤组织≥5 cm)87例,采用免疫组织化学染色法检测CRM1、exportin5蛋白在乳腺癌组织中的表达情况。利用GEPIA数据库中的TCGA数据库分析CRM1、exportin5基因在乳腺癌组织中的表达水平。分析CRM1、exportin5表达情况与乳腺癌患者临床病理参数及术后3年内发生复发或转移的关系;采用Cox回归分析影响乳腺癌患者术后复发转移的危险因素。结果:CRM1、exportin5基因在乳腺癌中的表达水平均高于正常乳腺组织,但差异无统计学意义(P>0.05);乳腺癌组织中CRM1、exportin5蛋白的阳性表达率分别为70.11%(61/87)、66.67%(58/87),明显高于正常乳腺组织中的14.94(13/87)、21.84(19/87)(P均<0.05);CRM1、exportin5蛋白表达水平与乳腺癌患者临床分期、分化程度、淋巴结转移有关(P均<0.05);乳腺癌组织中CRM1、exportin5蛋白表达水平之间呈正相关(P<0.05);CRM1蛋白高表达组乳腺癌患者术后复发转移率为70.43%,明显高于低表达组的37.83%(χ^(2)=11.34,P=0.001);exportin5蛋白高表达组乳腺癌患者术后复发转移率为69.82%,明显高于低表达组的41.89%(χ^(2)=10.80,P=0.001);多因素Cox回归分析显示,分化程度低、淋巴结转移、CRM1高表达、exportin5高表达均是影响乳腺癌患者术后复发或转移的危险因素(P均<0.05)。结论:CRM1、exportin5在乳腺癌组织中均呈高表达,二者表达升高是影响乳腺癌患者术后复发或转移的危险因素。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 染色体区域维护因子1 输出蛋白5 表达 复发转移
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核转运信号蛋白1选择性抑制剂KPT-330诱导白血病细胞凋亡的分子机制 被引量:1
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作者 杜薇薇 李之珩 +6 位作者 李晓璐 曹岚 陶燕芳 徐利晓 任俊丽 潘健 卢俊 《中华实用儿科临床杂志》 CSCD 北大核心 2017年第3期226-232,共7页
目的探讨核转运信号蛋白1(CRM1)选择性抑制剂KPT-330对急性白血病细胞凋亡的诱导作用及可能的分子机制。方法白血病细胞株[人急性早幼粒白血病细胞(NB4)、人慢性粒细胞白血病细胞(K562)、人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)]分为... 目的探讨核转运信号蛋白1(CRM1)选择性抑制剂KPT-330对急性白血病细胞凋亡的诱导作用及可能的分子机制。方法白血病细胞株[人急性早幼粒白血病细胞(NB4)、人慢性粒细胞白血病细胞(K562)、人急性早幼粒白血病细胞(HL-60)]分为对照组(不予KPT-330处理)和KPT-330处理组(予终浓度0.01、0.10、0.20、0.50、1.00、5.00、10.00 μmol/L KPT-330孵育细胞)。应用细胞计数试剂盒(CCK-8)比色法观察KPT-330对白血病细胞的生长抑制作用;应用荧光显微镜观察KPT-330诱发白血病细胞形态的变化;应用Annexin V/PI标记流式细胞术分析KPT-330诱发的细胞凋亡;Western blot检测CRM1表达量及凋亡相关蛋白半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-9 (Caspase-9)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、DNA修复酶(poly ADP-ribose polymerase,PARP)的表达水平和活化状态;基因芯片分析KPT-330对急性白血病细胞基因表达谱及长链非编码RNA(lncRNA)表达谱的影响。 结果KPT-330呈剂量依赖性抑制白血病细胞的生长,并使CRM1表达下调;与对照组相比,实验组细胞出现了明显的形态异常,较低浓度的KPT-330(0.2 μmol/L和1.0 μmol/L)即可导致白血病细胞的明显凋亡,0.2 μmol/L KPT-330 24 h处理组NB4、K562、HL-60细胞凋亡率(%)分别为(4.95±0.21)%、(14.05±0.07)%、(4.95±0.63)%;0.20 μmol/L KPT-330 48 h处理组(6.10±0.56)%、(20.75±0.21)%、(5.85±0.07)%; 1.00 μmol/L KPT-330 24 h处理组(41.15±0.21)%、(35.45±0.35)%、(15.65±0.07)%;1.00 μmol/L KPT-330 48 h处理组(52.45±0.35)%、(47.45±2.47)%、(16.80±1.98)%,与对照组[24 h NB4、K562、HL-60:(3.30±0.28)%、(9.50±0.56)%、(2.00±0.14)%;48 h NB4、K562、HL-60:(3.70±0.14)%、(3.50±0.28)%、(2.15±0.21)%]比较差异均有统计学意义(均P〈0.05)。在多种 展开更多
关键词 KPT-330 核转运信号蛋白1 白血病细胞 凋亡 长链非编码RNA
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卵巢上皮癌组织中CRM1、P-p27^(ser10)表达及其对癌细胞增殖的影响
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作者 高菲菲 薛恺 王酉 《山东医药》 CAS 北大核心 2016年第2期1-4,共4页
目的观察卵巢上皮癌(EOC)组织中出核因子1(CRM1)和10号位丝氨酸(S10)磷酸化p27(P-p27^(ser10))的表达,并探讨二者对EOC细胞株SKOV3增殖的影响。方法取64例手术切除的EOC组织,采用免疫组化法检测P-p27^(ser10)、CRM1蛋白表达,分析二者与... 目的观察卵巢上皮癌(EOC)组织中出核因子1(CRM1)和10号位丝氨酸(S10)磷酸化p27(P-p27^(ser10))的表达,并探讨二者对EOC细胞株SKOV3增殖的影响。方法取64例手术切除的EOC组织,采用免疫组化法检测P-p27^(ser10)、CRM1蛋白表达,分析二者与临床病理特征的关系。以p27野生型[p27(WT)]为模板,构建S10突变的p27去磷酸化突变细胞[p27(S10A)组]和拟磷酸化突变细胞[p27(S10D)组],分别转染S10磷酸化通路相关分子CRM1 siRNA和siRNA阴性质粒到p27(S10D)细胞,建立S10D+si CRM1组和S10D+sictrl组,CCK-8法检测p27(WT)、p27(S10A)、阴性对照、S10D+siCRM1和S10D+sictrl组细胞的增殖情况,流式细胞仪分析各组细胞周期。结果 P-p27^(ser10)和CRM1在卵巢癌组织中的高表达率分别为76.6%、64.1%,其表达升高与卵巢癌的组织学分级、病理分期有关(P均<0.05),二者表达呈正相关(r=0.656,P<0.01)。S10D+sictrl组较S10A组G1/S期细胞比例明显减少,S10D+si CRM1组较S10D+sictrl组G1/S期细胞比例明显增多(P均<0.05)。S10D+sictrl组细胞增殖较S10A组加快,S10D+si CRM1组较S10D+sictrl组减慢(P均<0.05)。结论 EOC组织中CRM1和P-p27ser10表达升高;CRM1参与了p27 S10磷酸化的出核降解过程,抑制p27 S10磷酸化及CRM1表达均可引起细胞周期阻滞,降低EOC细胞的增殖能力。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 P27蛋白 10号位丝氨酸 磷酸化 出核因子1 细胞增殖
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出核因子和表皮生长因子受体在胶质瘤中的表达及其相关性
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作者 高建国 陈锋龙 +3 位作者 翁名相 龙建武 刁艺 叶惠龙 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第9期1819-1820,共2页
目的 探讨出核因子(CRM1)和表皮生长因子受体(EGFR)在胶质瘤中的表达及相关性.方法 免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测75例胶质瘤标本中CRM1和EGFR表达,并分析两蛋白间的相关性.结果 Ⅰ~Ⅳ级胶质瘤中CRM1阳... 目的 探讨出核因子(CRM1)和表皮生长因子受体(EGFR)在胶质瘤中的表达及相关性.方法 免疫组织化学链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶(SP)法检测75例胶质瘤标本中CRM1和EGFR表达,并分析两蛋白间的相关性.结果 Ⅰ~Ⅳ级胶质瘤中CRM1阳性率分别为25.00% (2/8)、58.33% (14/24)、80.77% (21/26)及94.12%(16/17) (x2=15.6,P<0.05);EGFR阳性率分别为25.00%(2/8)、54.17% (13/24)、69.23% (18/26)及88.23%(15/17)(x2=10.70,P<0.05).CRM1和EGFR共阳性表达40例,EGFR和CRM1共阴性表达14例,EGFR阳性而CRM1阴性表达8例,EGFR阴性而CRM1阳性表达13例(r=0.371,P<0.05).结论 EGFR和CRM1在胶质瘤中表达呈正相关,有助于判断患者预后. 展开更多
关键词 神经胶质瘤 出核因子 表皮生长因子受体
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新型CRM1抑制剂S109通过阻断核输出抑制非小细胞肺癌细胞增殖
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作者 刘雪娇 种玉龙 +1 位作者 韩焱 牛铭山 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期573-577,共5页
目的:研究新型染色体区域稳定蛋白1(chromosome region maintenance 1,CRM1)抑制剂S109对非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制。方法:S109作用于非小细胞肺癌细胞株H1975和H1650,以CCK-8法检测其对细胞生长的影响,以Ed U法检测细胞中对... 目的:研究新型染色体区域稳定蛋白1(chromosome region maintenance 1,CRM1)抑制剂S109对非小细胞肺癌细胞增殖的影响及其机制。方法:S109作用于非小细胞肺癌细胞株H1975和H1650,以CCK-8法检测其对细胞生长的影响,以Ed U法检测细胞中对细胞增殖的影响,以集落形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响,以流式细胞术检测其对细胞周期的影响,以免疫荧光法检测对核输出标志蛋白Ran BP1细胞内定位的影响,以Western blotting检测对细胞中CRM1和Cyclin D1蛋白表达的影响。结果:S109(0.04、0.2、1、5、25和50μmol/L)可以剂量依赖方式显著抑制非小细胞肺癌H1975和H1650细胞生长(IC50值分别为1.4和1.2μmol/L);2和4μmol/L的S109均可以显著抑制非小细胞肺癌增殖[(51.3±2.8)%、(23.2±2.1)%vs(100±1.2)%,P<0.01]和克隆形成[(43.6±3.2)%、(26.8±2.8)%vs(100±1.4)%,P<0.01],并使细胞阻滞在G1期(G1期细胞数量由50.5%增加至74.9%)。S109可以特异性抑制核质转运标志蛋白Ran BP1的核输出,并诱导CRM1蛋白降解。结论:S109通过特异性抑制CRM1功能阻断核输出,从而抑制非小细胞肺癌细胞增殖并阻滞细胞周期。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 H1975细胞 H1650细胞 染色体区域稳定蛋白1(CRM1) 核输出增殖
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CRM1和SOCS1在胃癌发生发展中作用及与预后的关系 被引量:2
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作者 刘王静 孙端阳 +3 位作者 王兴枝子 龙喜带 赵志文 黄炳臣 《右江民族医学院学报》 2023年第2期313-318,共6页
目的探讨染色体区域稳定蛋白1(chromosomal region maintenance 1,CRM1)与细胞因子信号传导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)表达与胃癌演进、临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化检测低级别上皮内瘤变胃组... 目的探讨染色体区域稳定蛋白1(chromosomal region maintenance 1,CRM1)与细胞因子信号传导抑制因子1(suppressor of cytokine signaling 1,SOCS1)表达与胃癌演进、临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化检测低级别上皮内瘤变胃组织27例、高级别上皮内瘤变胃组织26例,以及进展期胃癌组织67例及对应癌旁组织67例中CRM1及SOCS1蛋白表达水平,分析两者在不同病变胃黏膜中的变化以及与胃癌临床病理特征的关系,通过在线分析工具Kaplan-Meier Plotter、单因素及多因素Cox分析影响胃癌患者预后的相关因素。结果胃癌组织中CRM1表达高于癌旁组织,SOCS1表达低于癌旁组织及瘤变组织(P<0.05);CRM1在胃癌组织高表达与浸润深度及淋巴结转移有关(P<0.05);生存分析显示高表达CRM1提示预后不良(P<0.05),SOCS1表达水平与预后无关(P>0.05);在胃癌组织中,CRM1与SOCS1表达无显著相关性(R=-0.025,P=0.842)。结论CRM1和SOCS1参与胃癌发生,CRM1高表达可能参与胃癌侵袭及转移等恶性进展。 展开更多
关键词 胃肿瘤 染色体区域稳定蛋白1 细胞因子信号传导抑制因子1 免疫组化 生存分析
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Molecular Determinants Responsible for the Subcellular Localization of HSV-1 UL4 Protein
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作者 Wei-wei Pan Jing Long Jun-ji Xing Chun-fu Zheng 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2011年第5期347-356,共10页
The function of the herpes simplex virus type 1 (HSV-1) UL4 protein is still elusive. Our objective is to investigate the subcellular transport mechanism of the UL4 protein. In this study, fluorescence microscopy wa... The function of the herpes simplex virus type 1 (HSV-1) UL4 protein is still elusive. Our objective is to investigate the subcellular transport mechanism of the UL4 protein. In this study, fluorescence microscopy was employed to investigate the subcellular localization of UL4 and characterize the transport mechanism in living cells. By constructing a series of deletion mutants fused with enhanced yellow fluorescent protein (EYFP), the nuclear export signals (NES) of UL4 were for the first time mapped to amino acid residues 178 to 186. In addition, the N-terminal 19 amino acids are identified to be required for the granule-like cytoplasmic pattem of UL4. Furthermore, the UL4 protein was demonstrated to be exported to the cytoplasm through the NES in a chromosomal region maintenance 1 (CRM1)-dependent manner involving RanGTP hydrolysis 展开更多
关键词 Herpes simplex virus type 1 (HSV-1 UL4 Subcellular localization Nuclear export signal (NES) chromosomal region maintenance 1 (CRM 1
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天然产物莱菔素通过下调CRM1表达抑制套细胞淋巴瘤细胞增殖
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作者 王海娜 蔡娟 +2 位作者 楚慧郢 李国辉 杨永亮 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1117-1129,共13页
目的:研究染色体区域维持因子1(chromosomal region maintenance 1,CRM1)在套细胞淋巴瘤中的表达情况,并进一步探讨天然产物莱菔素LFS-01抑制套细胞淋巴瘤细胞增殖的分子机制。方法 :通过Oncomine数据库挖掘分析CRM1在套细胞淋巴瘤中的... 目的:研究染色体区域维持因子1(chromosomal region maintenance 1,CRM1)在套细胞淋巴瘤中的表达情况,并进一步探讨天然产物莱菔素LFS-01抑制套细胞淋巴瘤细胞增殖的分子机制。方法 :通过Oncomine数据库挖掘分析CRM1在套细胞淋巴瘤中的表达水平。用LFS-01处理套细胞淋巴瘤JeKo-1细胞后,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,激光共聚焦显微镜下观察CRM1蛋白的核转运功能,蛋白质印迹法检测CRM1蛋白表达水平,FCM法检测和透射电子显微镜观察细胞周期和凋亡,蛋白质印迹法检测凋亡通路相关蛋白表达,CCK-8和FCM法检测凋亡抑制剂z-VAD-FAM对LFS-01作用的影响。构建CRM1基因突变的慢病毒稳定感染的JeKo-1细胞,激光共聚焦显微镜和CCK-8法再次检测LFS-01对CRM1核转运和细胞增殖的影响。通过RNAseq数据分析LFS-01作用后JeKo-1细胞转录组水平的变化,并采用CCK-8法检测Toll样受体(Toll-likereceptor,TLR)抑制剂TAK-242和LFS-01联用对JeKo-1细胞增殖的影响。结果 :CRM1在套细胞淋巴瘤中呈现高表达(P <0.05)。LFS-01能够抑制JeKo-1细胞增殖,24和48 h时的半数抑制浓度(50%inhibitory concentration,IC50)分别为5.81μmol/L和9.09μmol/L。20.0μmol/L LFS-01可明显抑制CRM1的核转运功能(P <0.05);6.0μmol/LLFS-01可明显下调CRM1的表达水平(P <0.05);10.0μmol/L LFS-01可将细胞周期抑制在G2/M期,并诱导细胞凋亡(P值均<0.05);4μmol/L LFS-01可明显上调凋亡通路蛋白聚腺苷二磷酸核糖聚合酶、剪切型caspase-3和剪切型caspase-9(P值均<0.01)的表达。凋亡抑制剂z-VAD-FAM可逆转LFS-01的凋亡诱导作用(P <0.01)。当CRM1基因突变后,LFS-01失去靶向抑制CRM1核转运和细胞增殖的功能(P值均<0.01)。RNAseq分析表明LFS-01对细胞增殖相关信号通路有明显的抑制作用(P <0.01),并且TLR抑制剂TAK-242联合LFS-01用药具有协同抗肿瘤作用(P <0.01)。结论 :LFS-01可诱导套细胞淋巴瘤细胞发生周期阻滞和凋亡,其中CR 展开更多
关键词 淋巴瘤 膜细胞 抗肿瘤药 植物 主动转运 细胞核 细胞凋亡 染色体区域维持因子1 莱菔素
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莱菔素通过阻断STAT3信号通路杀伤三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468和MDA-MA-231 被引量:6
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作者 高久蕉 张琦 杨永亮 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期837-844,共8页
目的:探讨染色体区域维持因子1(CRM1)抑制剂莱菔素(LFS-01)通过抑制信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路杀伤三阴性乳腺癌(TNBC)细胞的作用及其机制。方法:通过分子动力学模拟技术,验证LFS-01是否可与CRM1分子结构上的核输出信号(N... 目的:探讨染色体区域维持因子1(CRM1)抑制剂莱菔素(LFS-01)通过抑制信号转导及转录激活因子3(STAT3)信号通路杀伤三阴性乳腺癌(TNBC)细胞的作用及其机制。方法:通过分子动力学模拟技术,验证LFS-01是否可与CRM1分子结构上的核输出信号(NES)口袋结合。通过CCK-8法检测LFS-01对4种不同的乳腺癌细胞杀伤活力。用不同浓度的LFS-01处理TNBC细胞MDA-MB-468和MDA-MB-231,免疫荧光法检测CRM1货物蛋白STAT3以及带有NES序列的蛋白在细胞内定位的变化;WB检测LFS-01对STAT-3信号通路以及其下游蛋白表达的影响;WB、细胞免疫荧光和透射电镜法检测自噬的发生;通过流式细胞术检测药物对细胞周期和凋亡的影响。结果:分子动力学模拟结果表明,LFS-01能够与CRM1的NES口袋结合,显示其在结构上影响后者蛋白转运功能的可能性。LFS-01能特异性杀伤TNBC细胞MDA-MB-468和MDA-MB-231。10μmol/L LFS-01处理后TNBC细胞中STAT3和带有NES标签的蛋白均被阻滞于细胞核中,而在对照组中这些蛋白均匀分布在细胞质中。随着LFS-01剂量的提高和处理时间的延长,MDA-MB-468和MDA-MB-231细胞中磷酸化STAT3蛋白、Bcl-xL和Cylin D1表达均降低,细胞内自噬标志蛋白LC3B表达上升;同时出现高密度、多层的团状自噬小体;细胞周期阻滞于S期,并且凋亡率显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:LFS-01可阻断CRM1运载蛋白出核、进而抑制STAT3信号通路的激活,从而促进TNBC细胞MDA-MB-468和MDA-MB-231发生自噬、细胞周期阻滞和凋亡。 展开更多
关键词 莱菔素 信号转导及转录激活因子3 染色体区域维持因子1 三阴性乳腺癌 MDA-MB-468细胞 MDA-MB-231细胞
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Potential effects of CRM1 inhibition in mantle cell lymphoma
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作者 Ke-Jie Zhang Michael Wang 《Chinese Journal of Cancer Research》 SCIE CAS CSCD 2012年第4期374-387,共14页
Mantle cell lymphoma (MCL) is an aggressive histotype of B-cell non-Hodgkin lymphoma. The disease has no known cure, which prompts the urgent need for novel therapeutic agents. Chromosomal region maintenance 1 (CRM... Mantle cell lymphoma (MCL) is an aggressive histotype of B-cell non-Hodgkin lymphoma. The disease has no known cure, which prompts the urgent need for novel therapeutic agents. Chromosomal region maintenance 1 (CRM1) may play a role in human neoplasia and serve as a novel target of cancer treatment. This study summarizes MCL pathogenesis and determines the involvement of CRM1 in the regulation of several vital signaling pathways contributing to MCL pathogenesis, including the pathways of cell cycle progression, DNA damage response, phosphoinositide kinase-3, nuclear factor-kB activation, and chromosomal stability. A preclinical study is also presented to compare the CRNI1 status in MCL cell lines and primary MCL cells with normal B cells, as well as the therapeutic efficiency of CRM1 inhibition in MCL in vitro and in vivo, which make these agents potential targets of novel MCL treatments. 展开更多
关键词 chromosomal region maintenance 1 (CRM1 CRM1 inhibitor mantle cell lymphoma
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