硫酸软骨素生产工艺的优化 被引量：15

1

作者 陈红丽 李玉 +1 位作者 唐亮 雒廷亮 《河南化工》 CAS 2006年第3期15-17,共3页

以鸡胸软骨为原料，采用稀碱和酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。综合考察各种影响因素，设计了正交实验，得出最佳工艺争件。通过该优化条件，产量可以达到21％，与原来的工艺相比，提高了3％～4％，纯度可以达到80％。

关键词 硫酸软骨素 酶解 优化

下载PDF 职称材料

硫酸软骨素酶产生菌的筛选及酶的分离纯化 被引量：9

2

作者 阎浩林 何汉洲 +1 位作者 蔡苏兰 王琦 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期79-82,共4页

利用平板快速筛选法 ,从鱼腹中筛选到一株产生硫酸软骨素酶的细菌YH31 1 ,通过生物特性和生化反应试验考察 ,初步鉴定为温和气单胞菌 (Aeromonassobria)。培养至 36h时 ,该菌株产酶达到高峰期 ,培养液的酶活力达0 9U mL。利用超声波破... 利用平板快速筛选法 ,从鱼腹中筛选到一株产生硫酸软骨素酶的细菌YH31 1 ,通过生物特性和生化反应试验考察 ,初步鉴定为温和气单胞菌 (Aeromonassobria)。培养至 36h时 ,该菌株产酶达到高峰期 ,培养液的酶活力达0 9U mL。利用超声波破碎菌体细胞 ,分别测定培养液和菌体细胞的酶活力 ,发现培养液的酶活力要远远大于菌体细胞的酶活力 ,显示该酶为分泌型表达 ,属于胞外酶。发酵液经离心后 ,上清液用硫酸铵分级沉淀 ,再分别经过CM Cellulose、QAE sephadexA5 0和SephadexG 1 5 0层析柱进行逐级分纯 ,并跟踪酶活 ,最后获得硫酸软骨素酶。SDS PAGE检测为单一条带 ,其分子量约为 80kD。 展开更多

关键词 硫酸软骨素 硫酸软骨素酶 温和气单胞菌 胞外酶

下载PDF 职称材料

3种硫酸多糖的酶抑制作用研究

3

作者 张洋 《食品安全导刊》 2024年第4期74-78,共5页

硫酸多糖具有抗凝血、抗病毒、抗菌、抗癌及促进创伤愈合等多种生物活性,且能抑制生物体内存在的各种酶的过度活性,有效维持生命健康和防止衰老。本文对褐藻糖胶(Fucoidan,FPS)、紫菜多糖(Porphyran,PP)、硫酸软骨素(Chondroitin Sulfat... 硫酸多糖具有抗凝血、抗病毒、抗菌、抗癌及促进创伤愈合等多种生物活性,且能抑制生物体内存在的各种酶的过度活性,有效维持生命健康和防止衰老。本文对褐藻糖胶(Fucoidan,FPS)、紫菜多糖(Porphyran,PP)、硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate,CS)等3种硫酸多糖抑制透明质酸酶(Hyaluronidase,HAase)、胶原蛋白酶(Collagenase,CLS)、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)和弹性蛋白酶(Elastase,PPE)的活性作用进行了研究。结果表明,FPS对HAase、CLS、PPE均有抑制作用;PP和CS对HAase、PPE有较强抑制作用,其中CS具有极强的HAase抑制活性;硫酸多糖抑制HAase活性作用可能与硫酸基有关,需进一步验证;多糖分子量越小,其抑制HAase活性作用越大。本研究有望为硫酸多糖在保湿护肤、抗黑色素生成、维持肌肤弹性等方面的开发利用提供参考。 展开更多

关键词 硫酸多糖 褐藻糖胶 紫菜多糖 硫酸软骨素 酶 抑制作用

下载PDF 职称材料

超声波辅助复合酶提取鸡软骨中硫酸软骨素 被引量：4

4

作者 宋志鹏 徐丽萍 王鑫 《哈尔滨商业大学学报（自然科学版）》 CAS 2016年第1期38-43,共6页

以鸡软骨为原料,采用超声波辅助碱-双酶法提取硫酸软骨素,以硫酸软骨素得率为考察指标,选取最优提取方法,并对最优方法进行单因素试验和响应曲面优化.试验结果表明,最佳工艺参数为超声波功率500 W,超声时间120 min,碱性蛋白酶添加量为1%... 以鸡软骨为原料,采用超声波辅助碱-双酶法提取硫酸软骨素,以硫酸软骨素得率为考察指标,选取最优提取方法,并对最优方法进行单因素试验和响应曲面优化.试验结果表明,最佳工艺参数为超声波功率500 W,超声时间120 min,碱性蛋白酶添加量为1%,木瓜蛋白酶添加量为2%,硫酸软骨素得率可达到36.08%.超声波辅助碱-双酶法耗时短,操作简单且得到的产品纯度高. 展开更多

关键词 鸡软骨 硫酸软骨素 双酶 超声波

下载PDF 职称材料

硫酸软骨素提取用酶的现状及前景 被引量：2

5

作者 王安 刘靓 +2 位作者 刘敏尧 王立杰 戴剑威 《食品研究与开发》 CAS 北大核心 2011年第4期182-183,共2页

硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)在医药、化妆品和食品工业上有广泛的用途,市场前景广阔。对硫酸软骨素提取用酶做了简要的介绍,提出了目前硫酸软骨素行业存在的问题,并阐述了硫酸软骨素生产工艺及行业的发展状况及未来趋势。

关键词 硫酸软骨素 酶制剂 蛋白回收

下载PDF 职称材料

BDNF联合chABC鞘内注射对大鼠脊髓损伤修复的影响

6

作者 周路球 娄明武 +3 位作者 欧阳锡华 黄忠群 刘政委 陈国昌 《医学研究杂志》 2018年第3期122-129,137,共9页

目的探究脑源性神经营养因子(BDNF)联合软骨素酶(ch ABC)鞘内注射对大鼠脊髓损伤后运动感觉功能的影响以及脊髓组织中神经干细胞、神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的影响。方法将SD大鼠分为假手术对照组(A组),损伤对照组(B组),ch AB... 目的探究脑源性神经营养因子(BDNF)联合软骨素酶(ch ABC)鞘内注射对大鼠脊髓损伤后运动感觉功能的影响以及脊髓组织中神经干细胞、神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的影响。方法将SD大鼠分为假手术对照组(A组),损伤对照组(B组),ch ABC治疗组(C组),BDNF治疗组(D组),联合治疗组(E组),采用后肢运动功能评分法(CBS)对大鼠术后1周、2周、4周和2个月后肢运动功能进行评定,苏木精-伊红(HE)染色法观察不同时间点大鼠脊髓组织变化,免疫组化法观察各组大鼠脊髓组织神经干细胞的影响,荧光免疫组化法观察各组大鼠神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞的变化。结果术前各组大鼠神经功能均正常,术后1~2周,B、C、D、E各组CBS评分降低,但各组间对比差异无统计学意义(P>0.05);术后4周~2个月,C、D、E组CBS评分逐渐降低,低于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。与A组相比,B组不同时间点Brd U阳性细胞数目降低,差异有统计学意义(P<0.05)。脊髓损伤后1周,C、D、E组大鼠脊髓组织Brd U阳性细胞数目与B组比较,差异无统计学意义(P>0.05);脊髓损伤后第2~4周,C、D、E组Brd U阳性细胞数高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。与空白对照A组比较,B组脊髓损伤后不同时间点Nestin阳性细胞数目均减少,差异有统计学意义(P<0.05)。脊髓损伤后2周、4周、2个月,C、D、E组脊髓组织Nestin阳性细胞数高于B组,差异有统计学意义(P<0.05)。脊髓损伤后1周,A组星形胶质细胞比例逐渐降低,神经元细胞比例逐渐升高。B组细胞3种细胞比例均较低,随着时间延长,神经元细胞比例缓慢升高,星形胶质细胞比例缓慢下降。C、D、E组脊髓受损后脊髓受损后4周~2个月,C、D、E组神经元比例逐渐升高,星形胶质细胞逐渐下降,与B组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 BDNF、ch ABC鞘内注射后对大鼠脊髓损伤后运动、感觉功能恢复具有一� 展开更多

关键词 脊髓损伤 神经干细胞 脑源性神经营养因子 软骨素酶

下载PDF 职称材料

碱—酶法提取硫酸软骨素的工艺研究 被引量：16

7

作者 吴枫楠 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期81-83,共3页

研究以猪软骨组织为原料,采用碱液提取和酶解相结合的方式提取硫酸软骨素。通过对影响碱液提取效率和酶解效果因素的研究,确定了碱液提取的最佳条件为:碱液的体积分数7.5%、提取温度为50℃、提取时间2 h、提取2次。酶解的最佳条件为:采... 研究以猪软骨组织为原料,采用碱液提取和酶解相结合的方式提取硫酸软骨素。通过对影响碱液提取效率和酶解效果因素的研究,确定了碱液提取的最佳条件为:碱液的体积分数7.5%、提取温度为50℃、提取时间2 h、提取2次。酶解的最佳条件为:采用木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的混合酶1∶1(w∶v)、添加质量分数1.0%,pH值8、提取36 h。 展开更多

关键词 硫酸软骨素 碱—酶法 木瓜蛋白酶 胰蛋白酶 猪软骨

下载PDF 职称材料

硫酸软骨素快速提取法研究 被引量：13

8

作者 罗曼 蒋立科 《动物学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期37-39,共3页

硫酸软骨素是用于治疗冠心病、神经系统疼痛及链霉素引起的肝脏障碍和肝炎辅助治疗的药物 ,来源于动物的软骨。本文采用先高温蒸煮后加稀碱与酶解相结合的方法提取药物 ,并用氯仿反萃取 ,较其他方法缩短了原工艺一半流程 ,提高了纯度 。

关键词 硫酸软骨素 快速提取 氯仿 稀碱-酶解 药物

下载PDF 职称材料

微生物硫酸软骨素裂解酶的研究进展 被引量：11

9

作者 蔡苏兰 阎浩林 何汉洲 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 2004年第1期76-80,共5页

目的综述硫酸软骨素裂解酶的种类、分离纯化方法及药理学作用的研究进展。方法在检索国内外相关文献的基础上 ,对硫酸软骨素裂解酶的种类、分离纯化方法及药理学作用进行整理和归纳。结果硫酸软骨素裂解酶具有 4种类型 ;硫酸软骨素裂解... 目的综述硫酸软骨素裂解酶的种类、分离纯化方法及药理学作用的研究进展。方法在检索国内外相关文献的基础上 ,对硫酸软骨素裂解酶的种类、分离纯化方法及药理学作用进行整理和归纳。结果硫酸软骨素裂解酶具有 4种类型 ;硫酸软骨素裂解酶可作为工具酶及药用酶用于基础理论及药学领域的研究中。结论作为工具酶和药用酶 ,硫酸软骨素裂解酶在科研及医药领域拥有广阔的发展前景。 展开更多

关键词 硫酸软骨素裂解酶 低分子量硫酸软骨素 胞内酶 胞外酶

下载PDF 职称材料

驴软骨硫酸软骨素提取工艺的优化 被引量：9

10

作者 丁璞 王志兵 +1 位作者 徐永苗 邱芳萍 《长春工业大学学报》 CAS 2008年第5期578-582,共5页

采用二次通用旋转组合设计对碱液提取中的4个关键因素进行优化,采用正交实验对酶解过程中4个关键因素进行优化。在此优化条件下,硫酸软骨素的产率达到33.6%,含量达到13.53%。此工艺可以有效提高产品的产率和含量,达到优化目的。

关键词 硫酸软骨素 提取 酶解 优化

下载PDF 职称材料

不同途径联合移植骨髓间充质干细胞-硫酸软骨素酶治疗家兔脊髓损伤的疗效比较 被引量：6

11

作者 王晶 蔡颖谦 +7 位作者 周晓忠 王业杨 李超 徐汪洋 孙鸿涛 李高祥 姜晓丹 李贵涛 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期217-223,共7页

目的比较不同途径联合移植骨髓间充质干细胞一硫酸软骨素酶修复家兔脊髓损伤（sci）的疗效差异。方法24只SCI家兔按照随机数字表法分为损伤对照（IC）ffi、椎管内移植（IS）组、静脉移植（Ⅳ）组和动脉移植（认）组，每组6只。后3组分别... 目的比较不同途径联合移植骨髓间充质干细胞一硫酸软骨素酶修复家兔脊髓损伤（sci）的疗效差异。方法24只SCI家兔按照随机数字表法分为损伤对照（IC）ffi、椎管内移植（IS）组、静脉移植（Ⅳ）组和动脉移植（认）组，每组6只。后3组分别于SCI后1周经相应途径联合移植骨髓间充质干细胞一硫酸软骨素酶，IC组仅制作损伤模型，不行其他处理。SCI前及SCI后1、2、3、4周通过动物行为学评估、神经电生理检测、荧光示踪技术及免疫组化等方法，比较4组家兔疗效差异。结果（1）改良Tarlov评分：SCI后3周，IA组Tarlov评分与IC组比较明显升高，差异有统计学意义（P〈0．05）；术后4周，各移植组Tarlov评分明显优于IC组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（2）HE染色：各组损伤处均有大量空泡形成，相对于IC组，各移植组损伤处空泡较小，并可见部分神经纤维束通过。（3）免疫组化：各移植组神经丝蛋白表达量均明显强于IC组；IS组及IA组表达量明显高于Ⅳ组，差异均有统计学意义（P〈0．05）。胶质纤维酸性蛋白阳性表达面积方面，各移植组均低于IC组；而与IS和队组相比Ⅳ组表达面积进一步减少，差异均有统计学意义（P〈0．05）。（4）荧光双染比较：SCI后4周，各移植组镜下均可见较多的PKH．DAPI阳性细胞。其中IS和认组定植率（28．50％、27．75％）相比Ⅳ组（21．75％）明显增高，差异有统计学意义（P〈0．05）；（5）皮层感觉诱发电位潜伏期及波幅比较：SCI后第3、4周，各移植组潜伏期及波幅均优于IC组。差异有统计学意义（P〈0．05）；其中SCI后4周，IS组及认组潜伏期及波幅更优于Ⅳ组，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论3种途径移植治疗对于SCI均有明显疗效，其中肋间动脉移植途径及椎管内移植疗效更为明显。 展开更多

关键词 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 硫酸软骨素酶 移植途径

原文传递

响应面法优化猪硫酸软骨素的提取工艺 被引量：5

12

作者 陈召国 杨文革 +1 位作者 胡永红 雷子瑜 《食品科技》 CAS 北大核心 2011年第7期187-192,196,共7页

以猪软骨为原料,采用复合酶法提取硫酸软骨素,为了优化硫酸软骨素的提取工艺,采Plackett-Burma设计和响应面分析法,研究不同的提取条件对猪硫酸软骨素提取率的影响,并建立了提取条件与提取率之间的数学模型,确定适宜的硫酸软骨素提取条... 以猪软骨为原料,采用复合酶法提取硫酸软骨素,为了优化硫酸软骨素的提取工艺,采Plackett-Burma设计和响应面分析法,研究不同的提取条件对猪硫酸软骨素提取率的影响,并建立了提取条件与提取率之间的数学模型,确定适宜的硫酸软骨素提取条件,并初步分析了其结构。结果表明:(1)根据Plackett-Burman设计,温度对硫酸软骨素的提取率影响最为显著,其次为酶加量、pH;(2)通过响应面交互作用分析与优化,确定猪硫酸软骨素酶解的适宜条件为温度57.00℃,酶加量为1.00%,pH为8.50,此时硫酸软骨素的提取率提高至58.12%,纯度为92.32%。 展开更多

关键词 猪软骨 硫酸软骨素 复合酶法提取 PLACKETT-BURMAN设计 响应面法

原文传递

超声辅助-碱-酶法提取鲟鱼硫酸软骨素工艺及其结构分析

13

作者 刘良禹 汪静汶 +3 位作者 朱思洁 冉光耀 母砚城 刘旭东 《食品科技》 CAS 北大核心 2023年第10期108-116,共9页

为探究超声辅助-碱-酶法提取鲟鱼硫酸软骨素(Chondroitin sulfate,CS)的最佳工艺条件,以鲟鱼软骨为原料,通过单因素试验和响应面设计进行工艺优化;测定鲟鱼CS体外自由基清除能力,并通过傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared s... 为探究超声辅助-碱-酶法提取鲟鱼硫酸软骨素(Chondroitin sulfate,CS)的最佳工艺条件,以鲟鱼软骨为原料,通过单因素试验和响应面设计进行工艺优化;测定鲟鱼CS体外自由基清除能力,并通过傅里叶变换红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy, FTIR)、高效凝胶渗透色谱、高效液相色谱对其结构进行分析。优化得到鲟鱼CS的最佳提取工艺条件为:以碱性蛋白酶为提取用酶、料液比1:30(g/m L)、提取时间122 min、p H值为9.9、温度为45℃。在此条件下,鲟鱼CS的得率为17.06%,纯度90.16%,响应面模型拟合良好;所得鲟鱼CS对DPPH自由基有较高的清除率,IC_(50)为15.04 mg/mL;鲟鱼CS FTIR的特征吸收峰符合CS主要特征,分子质量为37ku,单糖组成以氨基葡萄糖、葡萄糖醛酸、氨基半乳糖、葡萄糖、半乳糖等为主,且同标准品单糖组成基本一致。结果表明:所获得的鲟鱼CS提取方法具有较高的得率和纯度,且能够很好地保持鲟鱼CS完整的天然结构。 展开更多

关键词 鲟鱼 硫酸软骨素 超声辅助-碱-酶法 响应面法 结构分析

原文传递

碱液对牦牛软骨提取硫酸软骨素工艺的影响 被引量：4

14

作者 武中会 《畜禽业》 2008年第6期28-31,共4页

以牦牛软骨为原料,采用先高温蒸煮,后加稀碱与酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。影响提取效果的因素主要有碱液浓度、碱提温度、碱提时间等,试验采用三因素三水平正交试验设计,对硫酸软骨素提取过程中碱液的影响进行研究,试验结果表明:... 以牦牛软骨为原料,采用先高温蒸煮,后加稀碱与酶解相结合的方法提取硫酸软骨素。影响提取效果的因素主要有碱液浓度、碱提温度、碱提时间等,试验采用三因素三水平正交试验设计,对硫酸软骨素提取过程中碱液的影响进行研究,试验结果表明:碱液浓度5%,碱提取温度40℃,碱提取时间6h为牦牛硫酸软骨素提取的最佳碱液提取工艺参数,出品率可达10.03%,有效成分含量达91.67%。 展开更多

关键词 硫酸软骨素 牦牛软骨 碱液 碱-酶法 提取工艺

下载PDF 职称材料

硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ的高效融合表达及其酶学性质研究

15

作者 李晔 周朝 袁其朋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第5期88-97,共10页

目的:本研究旨在实现硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ(chondroitinase ABCⅡ,ChSase ABCⅡ)的高效可溶性表达并研究其酶学性质,为ChSase ABCⅡ在药品和保健食品生产中的应用奠定基础。方法:在优化ChSase ABCⅡ基因原始序列的基础上,构建重组质粒p... 目的:本研究旨在实现硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ(chondroitinase ABCⅡ,ChSase ABCⅡ)的高效可溶性表达并研究其酶学性质,为ChSase ABCⅡ在药品和保健食品生产中的应用奠定基础。方法:在优化ChSase ABCⅡ基因原始序列的基础上,构建重组质粒pET-28a-His-ChSase ABCⅡ并优化其表达条件;利用亲和层析得到带有多聚组氨酸标签(polyhistidine-tag,His-tag)的ChSase ABCⅡ融合蛋白后,研究了His-ChSase ABCⅡ的部分酶学性质。结果:构建的His-ChSase ABCⅡ融合蛋白表达系统能在大肠杆菌中实现可溶性表达;在表达宿主为E.coli BL21(DE3)和诱导剂(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)浓度为125μmol/L的优化条件下,发酵液酶活力可达到7206.83±184.27 IU/L;纯化后的His-ChSase ABCⅡ酶比活力为22.02±0.39 IU/mg蛋白,最适pH和温度分别为7.5和40℃,其在30~40℃条件下较为稳定,且半衰期在2 h以上。His-ChSase ABCⅡ能特异性有效分解硫酸软骨素,其K_(m)值为10.4±0.8μmol/L,Kcat值为9.4±0.2 s^(-1)。结论:本论文通过基因优化和融合表达等策略实现了His-ChSase ABCⅡ的高效表达和纯化。此外,His-ChSase ABCⅡ的酶学性质可基本满足其在医药和营养产品工业生产中的应用需求。 展开更多

关键词 硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ 低分子量硫酸软骨素(LMWCSs) 酶学性质 融合表达 多聚组氨酸标签

下载PDF 职称材料

硫酸软骨素酶ABC对脑损伤后胶质瘢痕影响的实验研究 被引量：3

16

作者 洪怡瑜 李业海 +2 位作者 寇盛斌 杜谋选 姜晓丹 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期609-613,共5页

目的探讨硫酸软骨素酶ABC（chABC）对脑损伤后胶质瘢痕组织的影响。方法38只Wistar大鼠按随机数字表法分成5组：正常对照组（n=2）、模型组（n=9）、1．0U／mLchABC治疗组m=9）、2．5U／mLchABC治疗组（n=9）、5．0U／mLchABC治疗组（n=... 目的探讨硫酸软骨素酶ABC（chABC）对脑损伤后胶质瘢痕组织的影响。方法38只Wistar大鼠按随机数字表法分成5组：正常对照组（n=2）、模型组（n=9）、1．0U／mLchABC治疗组m=9）、2．5U／mLchABC治疗组（n=9）、5．0U／mLchABC治疗组（n=9），后4组采用自由落体撞击法制作大鼠脑损伤模型，造模后即刻在后3组大鼠局部脑皮层下1mm处注射不同浓度chABC2μL，正常对照组不做任何处理。造模后1、2、4周取脑组织标本行HE染色．分别应用免疫组化染色和Western blotting检测硫酸软骨素多聚蛋白糖（CSPGs）的表达。结果HE染色显示损伤后2周模型组大鼠脑皮层大量星形胶质细胞聚集．不同浓度chABC治疗组损伤部位的星形胶质细胞聚集较模型组减少，以5．0U／mL chABC治疗组明显。免疫组化染色显示模型组，1．0、2．5、5．0U／mLchABC治疗组损伤后2周大鼠脑组织CSPGs分泌均较正常对照组增加，差异有统计学意义（职0．05）；与模型组比较，5．0U／mLchABC治疗组大鼠脑组织CSPGs分泌减少．差异有统计学意义（P〈0．05）。Westem blotting检测显示造模后1、2、4周不同浓度chABC治疗组CSPGs表达均较模型组低．差异有统计学意义（p〈0．05）；模型组和2．5、5．0U／mLchABC治疗组大鼠脑组织中CSPGs的表达在造模后1、2、4周逐渐降低，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论chABC能降解胶质瘢痕中主要抑制分子CSPGs，改善脑损伤后局部轴突再生的抑制性微环境．且高浓度（5．0U／mL）chABC表现最明显。 展开更多

关键词 硫酸软骨素酶ABC 颅脑损伤 神经再生

原文传递

定量测定硫酸软骨素的双抗体夹心ELISA的建立 被引量：2

17

作者 玉崧成 王威 +2 位作者 李艳平 吴拥军 吴逸明 《检验医学》 CAS 北大核心 2011年第3期143-146,共4页

目的建立定量测定硫酸软骨素(CS)的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并对其应用价值进行初步评价。方法以CS为抗原分别免疫Balb/c小鼠和日本大耳白兔,制备2种动物的多克隆抗体。用鼠抗体包被微孔板,兔抗体为第2抗体,辣根过氧化物酶(H... 目的建立定量测定硫酸软骨素(CS)的双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA),并对其应用价值进行初步评价。方法以CS为抗原分别免疫Balb/c小鼠和日本大耳白兔,制备2种动物的多克隆抗体。用鼠抗体包被微孔板,兔抗体为第2抗体,辣根过氧化物酶(HRP)标记的羊抗兔抗体为标记抗体,建立双抗体夹心ELISA,并对线性范围、精密度、回收率和方法学比较进行了评价。结果本研究建立的ELISA线性范围为2～500 mg/L,批内和批间精密度分别为4.48%和5.97%,回收率在99.52%～101.77%之间,与间苯三酚分光光度法测定结果具有良好的相关性(r=0.999 0,P<0.05)。结论建立的定量测定CS的双抗体夹心ELISA具有敏感性高、重现性好等优点,适合检测应用。 展开更多

关键词 硫酸软骨素 酶联免疫吸附试验 双抗体夹心法 多克隆抗体

下载PDF 职称材料

硫酸软骨素钠含量检测方法的对比研究 被引量：1

18

作者 刘浩 于芳 《黑龙江医药》 CAS 2017年第5期966-969,共4页

目的:采用两种方法测定硫酸软骨素钠含量,并对两种分析方法进行比较。方法:滴定法用0.1%氯化十六烷基吡啶水溶液滴定,以溶液浊度逐渐增加,滴定至出现明显沉淀为滴定终点。酶解液相色谱法用强阴离子交换硅胶为填充剂(Hypersil SAX柱,250m... 目的:采用两种方法测定硫酸软骨素钠含量,并对两种分析方法进行比较。方法:滴定法用0.1%氯化十六烷基吡啶水溶液滴定,以溶液浊度逐渐增加,滴定至出现明显沉淀为滴定终点。酶解液相色谱法用强阴离子交换硅胶为填充剂(Hypersil SAX柱,250mm×4.6mm,5ul)以水(用稀盐酸调节pH值至3.5)为流动相A;以2mol/L氯化钠溶液(用稀盐酸调节pH值至3.5)为流动相B;流速为每分钟1.0ml;检测波长为232nm。梯度洗脱的HPLC法。结果:两种方法对硫酸软骨素钠的含量差别并不大。结论:酶解液相色谱法更为准确、灵敏度高,重现性好等优点。 展开更多

关键词 硫酸软骨素钠 滴定法 酶解液相色谱法

下载PDF 职称材料