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BMP4促进人骨膜来源细胞体外成软骨细胞分化 被引量：10
1
作者 贝抗胜 吴礼杨 +3 位作者 孙庆文 熊英辉 杜志坡 刘延晓 《中华显微外科杂志》 CSCD 北大核心 2013年第5期469-474,共6页
目的探讨细胞因子BMP4在骨膜来源细胞体外培养中的定向成软骨分化作用。方法采用人胫骨骨膜为材料，体外组织块法分离骨膜来源细胞，置于DMEM／F12完全培养基培养，倒置显微镜观察细胞形态，台盼蓝染色细胞计数法检测第3、9代骨膜来源... 目的探讨细胞因子BMP4在骨膜来源细胞体外培养中的定向成软骨分化作用。方法采用人胫骨骨膜为材料，体外组织块法分离骨膜来源细胞，置于DMEM／F12完全培养基培养，倒置显微镜观察细胞形态，台盼蓝染色细胞计数法检测第3、9代骨膜来源细胞和BMP4诱导后细胞的增殖活性，绘制细胞生长曲线图。随机分为对照组、软骨诱导组和实验组，分别加入完全培养基、软骨诱导液和BMP4加软骨诱导液，第14和21天分别采用甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色检测细胞的蛋白多糖和Ⅱ型胶原；定量PCR检测软骨基因Aggrecan、Ⅱ型胶原和SOX9mRNA表达。结果（1）骨膜来源细胞在体外贴壁生长，经成软骨诱导1周后可见类圆形细胞形成，2周后细胞呈多角形，甲苯胺蓝染色呈阳性；细胞生长曲线证实诱导分化后细胞与第3代至第9代细胞增殖能力相似。（2）第14和21天软骨细胞标志物阳性率（％）实验组蛋白多糖（分别为40．29±4．29、56．74±5．12）和Ⅱ型胶原（分别为19．27±3．71、38．31±4．25）较软骨诱导组（第14和21天蛋白多糖分别为28．12±3．25、41．23±4．18，11型胶原分别为10．24±1．21、15．28±2．23）明显升高（P〈0．05）。（3）定量PCR：实验组Aggrecan（25．76-t-0．57）、Ⅱ型胶原（6．48±0．48）、SOX9（2．91±0．18）mRNA表达均明显高于软骨诱导组（11．12±0．38、2．24±0．41、1．54±0．35）和对照组（2．37±0．24、1．12±0．31、1．07±0．22）（P〈0．05）。结论骨膜来源细胞体外增殖能力强，经诱导可定向成软骨分化，BMP4在体外具有明显促进骨膜来源细胞分化为软骨细胞的作用。 展开更多
关键词 骨膜来源细胞 成软骨分化 骨形态蛋白4 细胞培养 人
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中药血清对大鼠bMSCs体外成软骨分化中Col2a1和Acan表达的影响 被引量：10
2
作者 钱晓伟 潘丹岷 +2 位作者 谭湘陵 张爱国 蔡建平 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期340-343,共4页
目的观察中药雪莲花、丹参、仙灵脾、黄芪和复方右归饮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Ⅱ型胶原α1(Col2a1)和软骨聚糖蛋白(Acan)表达的影响。方法 2月龄SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1... 目的观察中药雪莲花、丹参、仙灵脾、黄芪和复方右归饮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞(bMSCs)成软骨分化中Ⅱ型胶原α1(Col2a1)和软骨聚糖蛋白(Acan)表达的影响。方法 2月龄SD大鼠分离骨髓间充质干细胞,置含15%胎牛血清的DMEM/F12(1∶1)培养基中培养。传至第3代后,将培养细胞分为未诱导组、TGF诱导组、中药血清诱导组和TGF-中药血清联合诱导组。中药血清的使用浓度为5%,由上述中药连续大鼠灌胃3 d后,分离外周血获得。各组细胞诱导至7 d和14 d时,分别提取总RNA,逆转录成cDNA,荧光定量PCR法检测Col2a1和Acan的表达,同时应用细胞免疫化学法检测诱导14 d的Ⅱ型胶原的表达。结果 bMSCs在TGF-β1的诱导下可以分化为软骨样细胞,在诱导后7 d和14 d,TGF诱导组Col2a1的表达量显著高于未诱导组,分别为14.272倍和35.833倍,中药血清组Col2a1的表达量变化不显著,TGF-中药血清联合诱导组Col2a1的表达量虽高于未诱导组,但显著低于TGF诱导组。Acan基因的表达量在各组中均显著低于未诱导组。结论骨髓间充质干细胞在体外可以分化为软骨样细胞,中药对细胞成软骨分化没有明显的促进作用,并对TGF诱导效应具有一定的抑制作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成软骨分化 Ⅱ型胶原α1 软骨聚糖蛋白 中药
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BMP2诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化的分子机制研究 被引量：6
3
作者 谢在春 郭卫真 +3 位作者 卢东荣 刘妮 庞志宇 于永春 《广州医学院学报》 2012年第2期11-15,共5页
目的:探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)诱导鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2向成软骨分化的可能分子机制。方法:20μg/mL BMP2诱导C3H10T1/2细胞0,4 h,1,3,6,10,13,15 d后,RT-PCR检测BMP信号通路中关键分子BMPRⅠ,BMPRⅡ,Smad1/5/8的表达,Western... 目的:探讨骨形态发生蛋白2(BMP2)诱导鼠胚胎间充质干细胞C3H10T1/2向成软骨分化的可能分子机制。方法:20μg/mL BMP2诱导C3H10T1/2细胞0,4 h,1,3,6,10,13,15 d后,RT-PCR检测BMP信号通路中关键分子BMPRⅠ,BMPRⅡ,Smad1/5/8的表达,Western blot检测smad蛋白及MAPK信号通路中p38磷酸化水平变化,QRT-PCR检测成软骨标志基因aggrecan,Col2a1以及成软骨相关转录因子FGFR3,Sox9表达水平,同时用Alcine Blue染色,观测C3H10T1/2细胞成软骨分化情况。结果:经BMP2诱导后,C3H10T1/2细胞表现出成软骨分化,smad蛋白及p38磷酸化水平有所上升,同时成软骨标志基因Col2a1以及成软骨相关转录因子FGFR3,Sox9表达水平都有增加。与未诱导组相比,Col2a1,FGFR3,Sox9在3 d的表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05),FGFR3,Sox9在6 d的表达与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。结论:在一定培养条件下,BMP2具有诱导C3H10T1/2细胞成软骨分化能力。 展开更多
关键词 骨形态发生蛋白2 C3H10T1 2细胞 成软骨分化
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中药诱导骨髓间充质干细胞成软骨及成骨分化的研究进展 被引量：4
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作者 潘慧欣 崔元璐 《天津中医药》 CAS 2018年第10期794-797,共4页
骨髓间充质干细胞(BMSCs)不仅具有强大的自我更新能力、多向分化潜能,还兼具低免疫原性及归巢能力,是骨及软骨组织工程中理想的种子细胞。目前,诱导BMSCs分化的细胞因子由于价格昂贵和安全性问题而无法广泛应用于临床实践中。研究表明... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)不仅具有强大的自我更新能力、多向分化潜能,还兼具低免疫原性及归巢能力,是骨及软骨组织工程中理想的种子细胞。目前,诱导BMSCs分化的细胞因子由于价格昂贵和安全性问题而无法广泛应用于临床实践中。研究表明中药及其有效成分可诱导BMSCs分化,具有与细胞因子类似的生理活性。文章旨在对中药诱导BMSCs成软骨及成骨分化的研究进展进行综述,以期为骨科疾病的防治研究提供参考。 展开更多
关键词 中药 骨髓间充质干细胞 成软骨分化 成骨分化
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