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依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响
被引量:
1
1
作者
梁磊
庹勤慧
+4 位作者
朱炳阳
匡双玉
罗迪贤
许灿新
廖端芳
《国际病理科学与临床杂志》
CAS
2006年第2期93-98,F0003,共7页
目的:建立一种新的诱导巨噬细胞泡沫化的模型,并用这个模型探讨依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响.方法:用不同浓度(0,5,10,15,25,35,45和55μg/mL)的Chol:MβCD孵育巨噬细胞株RAW264.7细胞72 h;并选用45μg/mLChol:MβCD孵育...
目的:建立一种新的诱导巨噬细胞泡沫化的模型,并用这个模型探讨依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响.方法:用不同浓度(0,5,10,15,25,35,45和55μg/mL)的Chol:MβCD孵育巨噬细胞株RAW264.7细胞72 h;并选用45μg/mLChol:MβCD孵育RAW264.7细胞0,12,24,48,60,72 h.进一步在加入Chol:MβCD的同时加入ezetimibe和阳性对照药物lovastatin孵育.用HPLC检测细胞内游离胆固醇和总胆固醇含量,油红O染色观察细胞荷脂情况,用Western印迹法检测SREBP-1和caveolin-1蛋白的表达.结果:细胞内游离胆固醇、总胆固醇含量随Chol:MβCD浓度的增加,孵育时间的延长,呈浓度和时间依赖性地升高,分别在45μg/mL和72 h时达到峰值.Chol:MβCD 45μg/mL处理RAW264.7细胞72 h和用经典方法50μg/mL ox-LDL处理48 h,比较二种方法细胞内游离胆固醇、总胆固醇含量以及油红O染色显示的细胞内荷脂的情况均无明显差别.在加入45μg/mL的Chol:MβCD处理RAW264.7细胞的同时加入不同浓度依泽替米贝(3,10,30μmol/L)以及阳性对照药lovastatin,结果显示依泽替米贝和lovastatin均能显著降低细胞内胆固醇水平,且依泽替米贝的这一作用有剂量依赖性.Western印迹结果显示,Chol:MβCD诱导的模型组SREBP-1和caveolin-1的表达增加,而依泽替米贝和lovastatin能够逆转这种效应,且依泽替米贝的这一作用呈剂量依赖性.结论:Chol:MβCD能诱导RAW264.7细胞转化成为泡沫细胞.依泽替米贝能抑制Chol:MβCD诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞,其机制可能与通过下调SREBP-1表达进而下调caveolin-1的表达,抑制胆固醇的摄取有关.
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关键词
依泽替米贝
chol
:M
β
cd
巨噬细胞
泡沫细胞
CAVEOLIN-1
SREBP-1
下载PDF
职称材料
Daxx对Chol:MβCD诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用与机制
被引量:
1
2
作者
庹勤慧
刘锦红
+1 位作者
李天平
廖端芳
《中国动脉硬化杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期I0029-I0029,共1页
目的探讨Daxx对Chol:MβCD诱导的平滑肌细胞凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养大鼠源性血管平滑肌细胞,然后分别将人源性pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)-Daxx质粒瞬时转染进入血管平滑肌细胞中,并通过RT.PCR和Westernblot...
目的探讨Daxx对Chol:MβCD诱导的平滑肌细胞凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养大鼠源性血管平滑肌细胞,然后分别将人源性pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)-Daxx质粒瞬时转染进入血管平滑肌细胞中,并通过RT.PCR和Westernblot两种方法检测平滑肌细胞内Daxx的表达;瞬时转染成功的血管平滑肌细胞用10mg/LChol:MβCD孵育48h,建立泡沫细胞模型.然后用油红O染色检测细胞内脂滴情况。再分别采用CCK-8法检测血管平滑肌细胞的细胞活性,流式细胞术检测血管平滑肌细胞的凋亡情况。
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关键词
DAXX
chol
M
β
cd
平滑肌细胞
细胞凋亡
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职称材料
题名
依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响
被引量:
1
1
作者
梁磊
庹勤慧
朱炳阳
匡双玉
罗迪贤
许灿新
廖端芳
机构
南华大学药物药理研究所
南华大学机能中心
出处
《国际病理科学与临床杂志》
CAS
2006年第2期93-98,F0003,共7页
基金
国家自然科学基金(30470719)
文摘
目的:建立一种新的诱导巨噬细胞泡沫化的模型,并用这个模型探讨依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响.方法:用不同浓度(0,5,10,15,25,35,45和55μg/mL)的Chol:MβCD孵育巨噬细胞株RAW264.7细胞72 h;并选用45μg/mLChol:MβCD孵育RAW264.7细胞0,12,24,48,60,72 h.进一步在加入Chol:MβCD的同时加入ezetimibe和阳性对照药物lovastatin孵育.用HPLC检测细胞内游离胆固醇和总胆固醇含量,油红O染色观察细胞荷脂情况,用Western印迹法检测SREBP-1和caveolin-1蛋白的表达.结果:细胞内游离胆固醇、总胆固醇含量随Chol:MβCD浓度的增加,孵育时间的延长,呈浓度和时间依赖性地升高,分别在45μg/mL和72 h时达到峰值.Chol:MβCD 45μg/mL处理RAW264.7细胞72 h和用经典方法50μg/mL ox-LDL处理48 h,比较二种方法细胞内游离胆固醇、总胆固醇含量以及油红O染色显示的细胞内荷脂的情况均无明显差别.在加入45μg/mL的Chol:MβCD处理RAW264.7细胞的同时加入不同浓度依泽替米贝(3,10,30μmol/L)以及阳性对照药lovastatin,结果显示依泽替米贝和lovastatin均能显著降低细胞内胆固醇水平,且依泽替米贝的这一作用有剂量依赖性.Western印迹结果显示,Chol:MβCD诱导的模型组SREBP-1和caveolin-1的表达增加,而依泽替米贝和lovastatin能够逆转这种效应,且依泽替米贝的这一作用呈剂量依赖性.结论:Chol:MβCD能诱导RAW264.7细胞转化成为泡沫细胞.依泽替米贝能抑制Chol:MβCD诱导RAW264.7细胞形成泡沫细胞,其机制可能与通过下调SREBP-1表达进而下调caveolin-1的表达,抑制胆固醇的摄取有关.
关键词
依泽替米贝
chol
:M
β
cd
巨噬细胞
泡沫细胞
CAVEOLIN-1
SREBP-1
Keywords
ezetimibe
chol
:
M
β
cd
macrophages
foam
cells
caveolin
-1
SREBP-1
分类号
R541.4 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
Daxx对Chol:MβCD诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用与机制
被引量:
1
2
作者
庹勤慧
刘锦红
李天平
廖端芳
机构
湖南中医药大学药学院药理教研室
南华大学药物药理研究所
出处
《中国动脉硬化杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第9期I0029-I0029,共1页
基金
国家自然科学基金项目(30971267、30770868)
湖南省高校创新平台开放基金项目(12K096)
文摘
目的探讨Daxx对Chol:MβCD诱导的平滑肌细胞凋亡的影响以及可能的机制。方法体外培养大鼠源性血管平滑肌细胞,然后分别将人源性pcDNA3.1(+)、pcDNA3.1(+)-Daxx质粒瞬时转染进入血管平滑肌细胞中,并通过RT.PCR和Westernblot两种方法检测平滑肌细胞内Daxx的表达;瞬时转染成功的血管平滑肌细胞用10mg/LChol:MβCD孵育48h,建立泡沫细胞模型.然后用油红O染色检测细胞内脂滴情况。再分别采用CCK-8法检测血管平滑肌细胞的细胞活性,流式细胞术检测血管平滑肌细胞的凋亡情况。
关键词
DAXX
chol
M
β
cd
平滑肌细胞
细胞凋亡
分类号
R285.5 [医药卫生—中药学]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
依泽替米贝对泡沫细胞胆固醇转运的影响
梁磊
庹勤慧
朱炳阳
匡双玉
罗迪贤
许灿新
廖端芳
《国际病理科学与临床杂志》
CAS
2006
1
下载PDF
职称材料
2
Daxx对Chol:MβCD诱导血管平滑肌细胞凋亡的作用与机制
庹勤慧
刘锦红
李天平
廖端芳
《中国动脉硬化杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2013
1
下载PDF
职称材料
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