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免疫抑制鸡群鸡传染性贫血病毒和网状内皮增生症病毒共感染检测 被引量：30
1
作者 吉荣 刘岳龙 +7 位作者 秦爱建 丁家波 金文杰 赵文明 崔治中 段素华 高海萍 韩方伟 《中国兽药杂志》 2001年第4期1-3,共3页
分别用 digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒 (CAV)和禽网状内皮增生症病毒 (REV)核酸探针以及 PCR技术对某种鸡场进行检测。检测结果表明 ,在 2 0个样品中 ,CAV和 REV感染的阳性率分别为 1 0 %和 5%。这一结果显示 ,CAV和 REV感染是导... 分别用 digoxigenin标记的鸡传染性贫血病毒 (CAV)和禽网状内皮增生症病毒 (REV)核酸探针以及 PCR技术对某种鸡场进行检测。检测结果表明 ,在 2 0个样品中 ,CAV和 REV感染的阳性率分别为 1 0 %和 5%。这一结果显示 ,CAV和 REV感染是导致该鸡场发生免疫抑制的主要病因之一。 展开更多
关键词 鸡 传染性贫血病毒 禽网状风皮增生症病毒 共感染检测 免疫抑制
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中国部分地区鸡传染性贫血流行病学调查及病原分离鉴定 被引量：17
2
作者 李岳 闫娜娜 +13 位作者 刘爱晶 兰兴鸽 杨搏 刘长军 高玉龙 高宏雷 祁小乐 崔红玉 高立 李凯 潘青 王永强 张艳萍 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第8期760-765,共6页
为了调查近年来鸡传染性贫血病(CIA)在我国发病鸡群中的流行特点、分布及其危害,本研究于2016年1月~2019年9月,从黑龙江、北京、山东等13个省市的381个疑似CIA发病鸡群中采集肝脏样品1677份,PCR检出鸡传染性贫血病毒(CAV)阳性样品共242... 为了调查近年来鸡传染性贫血病(CIA)在我国发病鸡群中的流行特点、分布及其危害,本研究于2016年1月~2019年9月,从黑龙江、北京、山东等13个省市的381个疑似CIA发病鸡群中采集肝脏样品1677份,PCR检出鸡传染性贫血病毒(CAV)阳性样品共242份,分布于85个鸡群,阳性样品检出率为14.43%(242/1677),阳性鸡群率为22.31%(85/381)。CAV与鸡马立克氏病病毒、鸡白血病病毒等免疫抑制病病毒混合感染在检测鸡群中普遍存在,占CAV感染总量的52.94%(45/85)。将来自山东临沂某CAV阳性鸡场的病鸡肝脏样品处理后接种MDCC-MSB 1细胞,连续传代6次,经PCR及间接免疫荧光鉴定,确定分离到一株CAV细胞适应病毒株,命名为CAV-SD19/4604。对分离株VP1基因测序并与GenBank中19株CAV参考株VP1基因序列比对,显示同源性为95.00%~98.80%,遗传进化树表明CAV-SD19/4604与多数亚洲病毒株位于同一分支。本研究为CAV感染的研究和疾病防控提供了数据支持。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病 鸡传染性贫血病毒 流行病学调查 分离鉴定 序列分析
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鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用 被引量：14
3
作者 任志浩 房立春 +5 位作者 栾怀彪 李阳 王一新 崔治中 常爽 赵鹏 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期1459-1464,共6页
为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·... 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒(CIAV)的污染,根据CIAV基因组保守序列设计合成了引物及TaqMan探针,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的实时荧光定量PCR检测方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达10拷贝·μL^(-1),比常规PCR灵敏度高100倍。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克病病毒等病毒基因均无交叉反应,具有很好的特异性;批内重复和批间重复显示变异系数均小于2%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,该方法能够检测到1 000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的39种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性。上述结果表明,本研究建立的荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,可用于检测疫苗中CIAV低剂量的污染。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 实时荧光定量PCR 弱毒疫苗 污染
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雏鸡感染CIAV后细胞因子与免疫功能变化 被引量：7
4
作者 刘忠贵 徐彦波 +3 位作者 郑世民 周志勇 王秀荣 杨丽萍 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期233-238,共6页
本实验研究了１日龄雏鸡感染ＣＩＡＶ后免疫器官Ｔ细胞的ＩＬ－２、ＩＦＮ、ＣＳＦ诱生活性、Ｔ细胞与Ｂ细胞增殖反应的动态变化。结果表明，雏鸡感染ＣＩＡＶ后：（１）胸腺和脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性分别于７～２１ｄ不１７～１４... 本实验研究了１日龄雏鸡感染ＣＩＡＶ后免疫器官Ｔ细胞的ＩＬ－２、ＩＦＮ、ＣＳＦ诱生活性、Ｔ细胞与Ｂ细胞增殖反应的动态变化。结果表明，雏鸡感染ＣＩＡＶ后：（１）胸腺和脾脏Ｔ细胞ＩＬ－２诱生活性分别于７～２１ｄ不１７～１４ｄ明显降低；（２）脾脏淋巴细胞ＩＦＮ诱生活性于７～１４ｄ显著减弱；（３）胸腺淋巴细胞ＣＳＦ诱生活性于１４ｄ未见异常，２１ｄ明显升高；（４）胸腺和脾脏Ｔ细胞增殖反应分别于１４ｄ和７～２１ｄ明显减弱：（５）法氏囊和脾脏Ｂ细胞增殖反应分别于７～２１ｄ和２１ｄ显著减弱；（６）胸腺重量与体重比值、法氏囊重量与体重比值、体重均明显降低；（７）外周血液ＰＣＶ、ＲＢＣ、Ｈｂ、ＷＢＣ、血栓细胞（血小板）数值均明显降低。 展开更多
关键词 感染 雏鸡 细胞因子 免疫功能 传染性贫血病毒
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鸡传染性贫血病毒荧光定量PCR检测方法的建立 被引量：8
5
作者 童桂香 谢芝勋 +4 位作者 刘加波 庞耀珊 邓显文 谢志勤 谢丽基 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期696-699,共4页
根据鸡传染性贫血病毒基因组保守区域设计1对扩增片段为164 bp的特异性引物,应用SYBR GreenⅠ染料建立了鸡传染性贫血病毒(CIAV)荧光定量PCR检测方法。以本室构建的阳性重组质粒作为模板,制定标准曲线,对CIAV阳性样品进行了敏感性、特... 根据鸡传染性贫血病毒基因组保守区域设计1对扩增片段为164 bp的特异性引物,应用SYBR GreenⅠ染料建立了鸡传染性贫血病毒(CIAV)荧光定量PCR检测方法。以本室构建的阳性重组质粒作为模板,制定标准曲线,对CIAV阳性样品进行了敏感性、特异性和重复性、稳定性试验,并应用于临床检测。结果表明引物最佳终浓度为0.2μmol/L,制作的标准曲线定量浓度范围宽,最低可检测到每个反应相当于10个拷贝的标准品DNA;与IBDV、ARV、MG都不反应;重复性、稳定性试验的变异系数都较小。对保存的25份疑似CIAV样品进行荧光定量PCR检测,结果检出9份阳性。本研究建立的荧光定量PCR具有特异、敏感、快速、定量、重复性好等优点,可用于临床上鸡感染CIAV的检测。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR
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鸡传染性贫血病病毒与三种致家禽肿瘤病毒混合感染的流行病学研究 被引量：6
6
作者 王仙 闫彩虹 +1 位作者 羊扬 金文杰 《中国家禽》 北大核心 2017年第13期21-25,共5页
根据鸡传染性贫血病病毒(CIAV)、马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮组织增生症病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)基因保守序列各设计1对特异性引物,采集102份发病家禽的肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊等病料,通过RT-PCR和PCR方法进行检测。结果显示:... 根据鸡传染性贫血病病毒(CIAV)、马立克氏病病毒(MDV)、网状内皮组织增生症病毒(REV)、禽白血病病毒(ALV)基因保守序列各设计1对特异性引物,采集102份发病家禽的肝脏、脾脏、胸腺和法氏囊等病料,通过RT-PCR和PCR方法进行检测。结果显示:CIAV、MDV、REV、ALV单一感染检出率分别为23.5%(24/102)、4.9%(5/102)、1.0%(1/102)、8.8%(9/102);CIAV和MDV、CIAV和REV、CIAV和ALV、MDV和REV、MDV和ALV、REV和ALV二重感染率分别为2.0%(2/102)、4.9%(5/102)、10.8%(11/102)、2.0%(2/102)、2.0%(2/102)、1.0%(1/102);三重感染中CIAV、MDV和REV为0(0/102),CIAV、MDV和ALV为3.9%(4/102),CIAV、REV和ALV为7.9%(8/102),MDV、REV和ALV为1.0%(1/102);四重感染率为1.0%(1/102)。26份样品中四种病毒均未检出。CIAV阳性病料与阴性病料相对应的REV共感染率具有极显著差异(P<0.01),CIAV阳性病料与阴性病料相对应的ALV共感染率具有显著差异(0.01<P<0.05)。研究结果进一步丰富了四种病毒的流行病学数据。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病病毒 马立克氏病病毒 网状内皮组织增生症病毒 禽白血病病毒 混合感染 PCR
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鸡传染性贫血病毒广西株全基因组的克隆与序列分析 被引量：7
7
作者 邓显文 谢芝勋 +3 位作者 谢丽基 刘加波 谢志勤 庞耀珊 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2011年第4期19-22,共4页
为了解鸡传染性贫血病毒（CIAV）广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株（GXC060821）的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框（ORF）... 为了解鸡传染性贫血病毒（CIAV）广西分离株全基因变异情况,设计3对特异性引物,对CIAV广西分离株（GXC060821）的全基因进行PCR扩增、克隆和序列分析。结果显示,广西分离株的全基因为2 292个核苷酸,含有3个互相重叠的开放阅读框（ORF）。序列分析表明,本CIAV分离株与国内外其他31个CIAV毒株比较核苷酸的同源性在96.1%~98.5%之间,推导氨基酸的同源性在89.8%~94.2%之间。全基因系统发育进化树分析显示,广西分离株和中国的TJBD40株、LF4株都处于一个分支,它们的亲缘关系较近,而与美国的98D06073分离株及中国的HA4分离株的亲缘关系较远。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 全基因组 克隆 序列分析
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鸡群中鸡传染性贫血病原与抗体检测及分离株VP1基因序列分析 被引量：2
8
作者 冯笑艳 胡明雪 +10 位作者 林雨萌 刘长军 李凯 祁小乐 崔红玉 高立 王素艳 陈运通 王笑梅 张艳萍 高玉龙 《中国家禽》 北大核心 2024年第2期52-58,共7页
为了解鸡群中鸡传染性贫血病毒(CAV)感染及抗体产生情况,从黑龙江省两个无临床症状鸡群(B群和S群)中,分别采集血清通过ELISA方法进行抗体检测,采集抗凝血并分离淋巴细胞,针对基因组保守序列设计引物,通过PCR方法进行病原检测,并对从B群... 为了解鸡群中鸡传染性贫血病毒(CAV)感染及抗体产生情况,从黑龙江省两个无临床症状鸡群(B群和S群)中,分别采集血清通过ELISA方法进行抗体检测,采集抗凝血并分离淋巴细胞,针对基因组保守序列设计引物,通过PCR方法进行病原检测,并对从B群病原阳性鸡分离到的分离株进行VP1基因序列分析。结果显示,B群和S群CAV抗体阳性率分别为62.7%(79/126)和68.2%(88/129),病原阳性率分别为43.0%(49/114)和62.3%(48/77),其中,B群和S群中抗体和病原双阴性的鸡分别为23.7%(27/114)和15.6%(12/77),而抗体和病原双阳性的鸡分别高达28.1%(32/114)和46.8%(36/77);在双阳性鸡中,B群和S群分别有62.5%(20/32)和58.3%(21/36)抗体滴度在1.0×10^(4)及以上,从B群病原阳性鸡全血中分离到一株CAV(HLJ/2022株),分离株HLJ/2022第394位氨基酸为谷氨酰胺,具有强毒的分子特征;两个鸡群的环境拭子CAV阳性率为10.0%(3/30),存在于消毒前的鸡蛋表面、更衣处和鞋底。研究表明,检测鸡群的CAV抗体阳性率在62.7%以上,病原阳性率在43.0%以上,抗体滴度在1.0×104及以上CAV仍可存在,CAV流行株(HLJ/2022)具有强毒分子特征,鸡群环境中存在CAV污染,结果为CIA防控提供重要的参考意见。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 血清学检测 病原学检测 病毒分离鉴定 VP1基因序列分析
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一株鸡传染性贫血病毒的分离鉴定及其致病性研究 被引量：6
9
作者 陈玲 宋亚芬 +1 位作者 张兵 蒋桃珍 《中国兽药杂志》 2020年第4期17-23,共7页
从北京某鸡场发生疑似鸡传染性贫血病毒(CAV)感染的鸡只病料中分离到了一株CAV,通过PCR和全基因组测序等方法对其进行了鉴定,命名为AV1550。将其全基因组序列与NCBI上的参考毒株序列进行同源性比对和进化分析,结果显示AV1550株与CAV参... 从北京某鸡场发生疑似鸡传染性贫血病毒(CAV)感染的鸡只病料中分离到了一株CAV,通过PCR和全基因组测序等方法对其进行了鉴定,命名为AV1550。将其全基因组序列与NCBI上的参考毒株序列进行同源性比对和进化分析,结果显示AV1550株与CAV参考毒株的同源性在91.7%~99.7%,与中国分离株LN15170的亲缘关系最近。VP1序列分析表明AV1550在75、89、125、141和394位氨基酸均为强毒株特征。1日龄SPF鸡经胸部肌肉途径接种含10000 EID50的AV1550病毒液后,接种鸡只出现明显的贫血症状,增长迟缓,死亡率高达50%,表明AV1550是一株具有较强致病性的CAV野毒株。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 致病性 序列分析
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我国部分地区黄羽肉鸡群鸡传染性贫血病病毒的流行病学调查及致病性分析 被引量：6
10
作者 金松 孟宪臣 +6 位作者 薛亚梅 康玉玺 潘思丞 张曼莉 丁平云 高延利 张海涛 《中国家禽》 北大核心 2022年第2期29-35,共7页
为调查鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在我国黄羽肉鸡群中的流行情况及毒株致病性情况,于2021年1—8月对山东、江苏、广东、安徽等10个省市417个黄羽肉鸡群CIAV感染情况进行了调查,每个鸡群采集5只病弱鸡肝脏样品,混合后进行PCR检测;同时对一... 为调查鸡传染性贫血病病毒(CIAV)在我国黄羽肉鸡群中的流行情况及毒株致病性情况,于2021年1—8月对山东、江苏、广东、安徽等10个省市417个黄羽肉鸡群CIAV感染情况进行了调查,每个鸡群采集5只病弱鸡肝脏样品,混合后进行PCR检测;同时对一CIAV阳性种鸡群进行了解剖和病理学诊断,并进行了CIAV分离、测序和致病性分析。结果显示:417个鸡群中CIAV阳性群181个,阳性群占比为43.41%;疑似发病种鸡表现冠、面部皮肤苍白,血液吉姆萨染色可见幼稚型红细胞,剖检和病理学诊断均可见骨髓脂肪化;全基因组测序显示分离株具有高致病性毒株的分子特征,与NCBI已发表的其他毒株进行遗传进化分析,结果显示与亚洲CIAV遗传关系相近;1日龄SPF鸡经肌肉注射途径接种分离病毒,接种鸡出现明显的胸部皮炎、骨髓脂肪化等发病症状,死亡率达87.5%,表明分离的CIAV野毒株具有较强致病性。研究结果为当前CIAV研究和疾病的防控提供了参考数据。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病病毒 流行病学调查 致病性 全基因组序列分析
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鸡传染性贫血病毒分离株凋亡素基因的克隆及序列测定 被引量：1
11
作者 韦莉 杨兵 +3 位作者 周文平 韩苏平 沈冰 刘爵 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2001年第11期3-5,共3页
使用 PCR技术扩增出鸡传染性贫血病毒分离株 SR43 的凋亡素基因 ,大小为 40 0 bp左右 ,将该片断克隆到 p Bluescript- ks载体中 ,获得含分离株 SR43 凋亡素基因的重组质粒。序列分析表明 ,该分离株凋亡素基因全长36 3bp,编码 12 1个氨基... 使用 PCR技术扩增出鸡传染性贫血病毒分离株 SR43 的凋亡素基因 ,大小为 40 0 bp左右 ,将该片断克隆到 p Bluescript- ks载体中 ,获得含分离株 SR43 凋亡素基因的重组质粒。序列分析表明 ,该分离株凋亡素基因全长36 3bp,编码 12 1个氨基酸 ,与德国标准株 Cux- 1具有高度的同源性 ,仅有 1个氨基酸的差异 ,发生在 116位 ,该分离株为 R(精氨酸 ) ,而 Cux- 1为 k(赖氨酸 ) ,认为 展开更多
关键词 鸡 传染性血病毒 凋亡素基因 克隆 序列测定
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弱毒疫苗中鸡传染性贫血病毒低剂量污染对SPF鸡体重和疫苗免疫抗体的影响 被引量：5
12
作者 房立春 李晓晗 +5 位作者 任志浩 李阳 王一新 崔治中 常爽 赵鹏 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期190-194,共5页
为了观察使用污染有低剂量鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)弱毒疫苗后对鸡免疫和体重的影响,本研究通过人工模拟试验观察了CIAV低剂量污染对SPF鸡体重以及对NDV疫苗抗体产生的影响。结果显示使用每羽份污染10个... 为了观察使用污染有低剂量鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)弱毒疫苗后对鸡免疫和体重的影响,本研究通过人工模拟试验观察了CIAV低剂量污染对SPF鸡体重以及对NDV疫苗抗体产生的影响。结果显示使用每羽份污染10个EID50CIAV和5个EID50CIAV两种剂量的NDV疫苗后均造成了SPF鸡体重的下降,与使用未污染疫苗组相比差异显著;并且使用污染两种剂量CIAV的疫苗后NDV抗体水平与使用无污染组相比也降低了,差异显著。使用污染两种剂量CIAV的NDV疫苗后第2周开始均检测到一定比例的CIAV抗体阳性,而通过核酸检测在使用污染疫苗后第1周就检测到很高比例的CIAV核酸阳性。研究结果不仅展示了弱毒疫苗中CIAV污染对SPF鸡生产性能和免疫机能的影响,也提示我们在通过SPF鸡检查法检测外源病毒污染时增加对病毒核酸检测有助于节省检测时间和提高检出率。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 弱毒疫苗 污染
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CIAV VP1 C端基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达 被引量：5
13
作者 王英 王笑梅 +4 位作者 高宏雷 付朝阳 张厚双 宋素泉 郭艳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期432-435,共4页
将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区... 将从组织病料中提取到的鸡传染性贫血病毒核酸经PCR扩增得到vp1基因,用DNAStar分析软件分析预测VP1的抗原表位,它们主要位于VP1氨基酸序列的第1～95、134～303、327～435位,分别命名为Ⅰ区、Ⅱ区、Ⅲ区。欲表达C端基因片段,含部分Ⅱ区和完整的Ⅲ区。把vp1基因克隆到表达载体pGEX＿6p＿1上,用BamHI消化重组表达质粒pGEX＿vp1,回收含C端基因的大片段,自连转化大肠杆菌感受态细胞,得到重组质粒pGEX＿vp1(C)。重组菌经IPTG诱导,SDS＿PAGE分析,结果VP1C端基因片段在大肠杆菌中成功表达,表达的融合蛋白以包涵体形式存在,分子量约为49kDa。蛋白纯化后作ELISA检测,可与阳性血清反应。本研究为研制应用重组抗原制备ELISA诊断试剂盒奠定了基础。 展开更多
关键词 VP1 表达 基因片段 大肠杆菌 克隆 重组抗原 抗原表位 VP1基因 病料 阳性血清
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表达鸡传染性贫血病毒VP1蛋白的新型重组血清4型禽腺病毒的构建 被引量：1
14
作者 徐贞琦 蒋蕙如 +8 位作者 郭艺文 谢泉 殷楠 李拓凡 万志敏 邵红霞 秦爱建 张俊 叶建强 《中国家禽》 北大核心 2024年第4期47-53,共7页
为研制新型鸡传染性贫血(CIA)高效疫苗以解决国内商品鸡群中普遍存在的鸡传染性贫血病毒(CIAV)感染问题,试验利用CRISPR-Cas9技术和Cre-LoxP系统,以血清4型禽腺病毒(FAdV-4)为载体,构建表达CIAV VP1蛋白的重组FAdV-4。通过间接免疫荧光... 为研制新型鸡传染性贫血(CIA)高效疫苗以解决国内商品鸡群中普遍存在的鸡传染性贫血病毒(CIAV)感染问题,试验利用CRISPR-Cas9技术和Cre-LoxP系统,以血清4型禽腺病毒(FAdV-4)为载体,构建表达CIAV VP1蛋白的重组FAdV-4。通过间接免疫荧光试验和蛋白免疫印迹试验对重组病毒进行验证,通过体外病毒生长曲线来研究其复制效率。结果显示:该重组病毒构建成功,能有效表达CIAV VP1蛋白,命名为rFAdV-4-CIAV-VP1,且发现rFAdV-4-CIAV-VP1在LMH细胞中的复制效率远低于野生型FAdV-4。研究表明构建的重组病毒rFAdV-4-CIAV-VP1为CIAV和FAdV-4的联防联控提供了二联候选疫苗株。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 VP1蛋白 CRISPR-Cas9 重组血清4型禽腺病毒 表达
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鸡传染性贫血病毒SYBR Green Ⅰ法荧光定量PCR检测方法的建立及其在疫苗污染检测中的应用 被引量：5
15
作者 付佳媛 李丹 +5 位作者 常臻 李阳 房立春 崔治中 常爽 赵鹏 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第3期34-39,共6页
为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中可能存在的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)污染,根据CIAV基因组保守区域VP2部分基因设计和合成了1对特异性引物,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的SYBR GreenⅠ荧光定... 为了更快速而灵敏地检测禽弱毒疫苗中可能存在的鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)污染,根据CIAV基因组保守区域VP2部分基因设计和合成了1对特异性引物,通过优化反应条件建立了快速检测CIAV的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法。结果显示,建立的检测方法灵敏度可达6.36 copies/μL,是常规PCR灵敏度的1000倍。该方法与禽网状内皮组织增生病病毒(Reticuloendotheliosis virus,REV)、禽白血病病毒(Avian leukemia virus,ALV)、鸡马立克氏病病毒(Mareks disease virus,MDV)等均无交叉反应,特异性良好;批内和批间重复试验显示变异系数均小于2.5%,呈现良好的可重复性。在模拟试验中,建立的SYBR Green I荧光定量PCR能够检测到1000羽份弱毒疫苗中1个EID50的低剂量污染,应用该方法从送检的14种(批)商品化禽用弱毒疫苗中检测到2份为CIAV阳性,阳性样品按照经典的SPF鸡检查法进行检测也为CIAV阳性。因此,本研究建立的SYBR GreenⅠ荧光定量PCR检测方法灵敏度高,特异性强,重复性好,适合用于疫苗中CIAV污染的检验。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 弱毒疫苗 污染 荧光定量PCR SYBR Green Ⅰ
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应用PCR方法检测鸡传染性贫血病毒 被引量：4
16
作者 杨兵 徐福洲 +2 位作者 王金洛 陈小玲 孟彦妮 《华北农学报》 CSCD 北大核心 2003年第3期90-92,共3页
根据鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计一对引物扩增基因组上nt358-nt1042之间684 bp DNA片段。在CIAV感染MDCC-MSB1细胞系中提取核酸为模板可扩增出相应DNA片段,且以感染细胞核酸为模板反应敏感性可达1 fg,而以其他病原核酸为模... 根据鸡传染性贫血病毒(CIAV)基因组序列,设计一对引物扩增基因组上nt358-nt1042之间684 bp DNA片段。在CIAV感染MDCC-MSB1细胞系中提取核酸为模板可扩增出相应DNA片段,且以感染细胞核酸为模板反应敏感性可达1 fg,而以其他病原核酸为模板扩增结果均为阴性。应用该PCR方法对实验感染鸡肝脏、脾脏、胸腺、肾脏、法氏囊、骨髓、白细胞、泄殖腔棉拭子等不同样品进行检测,均可扩增出相应DNA片段。证明我们建立的PCR方法敏感性特异性强,可用于临床感染不同组织CIAV的检测。 展开更多
关键词 应用 PCR方法 检测技术 鸡 传染性贫血病毒 基因组序列 反应敏感性 临床感染
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鸡传染性贫血病毒对SPF鸡的致病特性及其排毒规律研究
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作者 冯笑艳 胡明雪 +7 位作者 林雨萌 高宏雷 于海波 刘长军 祁小乐 张伟 张艳萍 高玉龙 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期5684-5691,共8页
旨在了解鸡传染性贫血病毒(CAV)对SPF鸡的致病性、排毒规律及水平传播能力。本研究将CAV JL17/1204株经腹腔接种和同居接触感染1日龄及28日龄SPF鸡,在感染后3 d(dpi)、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi、14 dpi、21 dpi、28 dpi、42 dpi、56... 旨在了解鸡传染性贫血病毒(CAV)对SPF鸡的致病性、排毒规律及水平传播能力。本研究将CAV JL17/1204株经腹腔接种和同居接触感染1日龄及28日龄SPF鸡,在感染后3 d(dpi)、5 dpi、7 dpi、9 dpi、11 dpi、14 dpi、21 dpi、28 dpi、42 dpi、56 dpi、84 dpi和112 dpi,感染组和同居组分别采集3只鸡的抗凝血并剖检,以检测其贫血、胸腺萎缩情况;每个时间点另采集每组20只鸡的咽拭子和肛拭子通过PCR方法进行排毒检测。临床观察结果显示,1日龄感染组和同居组鸡的死亡率分别为50.0%和10.0%,死亡时间为12~15 dpi;28日龄感染组和同居组鸡感染后无死亡。剖检结果显示,各组发病鸡出现胸腺萎缩和/或贫血症状,1日龄感染组和同居组发病率分别为100.0%和20.0%;28日龄感染组和同居组发病率分别为10.0%和8.0%。排毒检测结果显示,1日龄感染组鸡呼吸道和消化道分别从3 dpi、5 dpi开始排毒,1日龄同居组呼吸道和消化道排毒期分别为同居后5~84 d和7~42 d;28日龄感染组呼吸道和消化道排毒期分别为感染后3~9 dpi和5~14 dpi;28日龄同居组呼吸道和消化道排毒期分别为同居后5~9 d和5~42 d。结果提示CAV对1日龄SPF鸡致病性强,感染后可诱导鸡死亡、胸腺萎缩和/或贫血等致病特征,对28日龄SPF鸡致病性明显减弱;接种和同居感染后均经呼吸道和消化道排毒,可诱导同居接触感染鸡发病甚至死亡,表明CAV具有较强的水平传播能力。本研究结果系统阐明了CAV感染致病特征和排毒规律,为鸡群科学开展CAV的净化提供了理论指导和科学依据。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 SPF鸡 致病特性 排毒规律 水平传播
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鸡传染性贫血病毒诱导细胞凋亡的研究进展 被引量：1
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作者 郗洪生 王滨坤 郑世民 《动物医学进展》 CSCD 2005年第10期46-49,共4页
鸡传染性贫血病毒是鸡传染性贫血病的病原体,能引起雏鸡贫血、淋巴组织萎缩、出血及免疫抑制,是导致许多疫苗免疫失败及雏鸡死亡的主要原因之一。该病毒在世界范围内广泛存在,是养鸡业潜在的巨大威胁。近年来的研究表明,鸡传染性贫血病... 鸡传染性贫血病毒是鸡传染性贫血病的病原体,能引起雏鸡贫血、淋巴组织萎缩、出血及免疫抑制,是导致许多疫苗免疫失败及雏鸡死亡的主要原因之一。该病毒在世界范围内广泛存在,是养鸡业潜在的巨大威胁。近年来的研究表明,鸡传染性贫血病毒主要是通过其编码的凋亡素诱导雏鸡胸腺和骨髓中的造血祖细胞凋亡而致病的,而凋亡素诱导细胞凋亡的能力与其在细胞中的核定位及半胱氨酸蛋白酶(caspase)等因素密切有关。文章就鸡传染性贫血病毒生物学特征、诱导细胞凋亡的现象及机制的研究进行了综述。 展开更多
关键词 鸡传染性贫血病毒 免疫抑制 细胞凋亡 凋亡素
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鸡传染性贫血病毒套式PCR检测方法的建立 被引量：4
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作者 王景儒 杨晓静 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2013年第4期55-58,共4页
本试验根据GenBank中登录的禽传染性贫血病毒(CAV)基因序列,设计合成2对引物,外引物的扩增片段大小为485bp,内引物的扩增片段大小为297bp,建立了适合CAV快速检测的套式PCR方法(nested PCR),并采用该方法对CAV阳性毒株及临床病料进行了... 本试验根据GenBank中登录的禽传染性贫血病毒(CAV)基因序列,设计合成2对引物,外引物的扩增片段大小为485bp,内引物的扩增片段大小为297bp,建立了适合CAV快速检测的套式PCR方法(nested PCR),并采用该方法对CAV阳性毒株及临床病料进行了检测。结果显示,该方法能扩增到297bp的条带,禽流感病毒(H9亚型)、新城疫病毒、传染性法氏囊病病毒、禽网状内皮增生病病毒、减蛋综合征病毒、禽呼肠孤病毒、马立克氏病病毒的扩增结果均为阴性。该方法第1步扩增的敏感性是100pg,第2步PCR扩增的敏感性是1fg,敏感性提高了105倍。本研究建立的CAV套式PCR方法具有敏感性高、重复性好、特异性强等优点,可用于CAV的临床诊断和分子流行病学调查等。 展开更多
关键词 禽传染性贫血病病毒 套式PCR 检测
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鸡传染性贫血病毒的分子生物学及其核酸检测技术 被引量：4
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作者 蒋玲艳 韦平 李义杰 《动物医学进展》 CSCD 2003年第5期10-13,共4页
鸡传染性贫血 (CIA)是鸡的重要的免疫抑制性疾病之一 ,以引起雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征。鸡传染性贫血病毒 (CIAV)主要引起鸡骨髓成红细胞和胸腺皮质的成淋巴细胞溶细胞感染 ,继而导致贫血和免疫抑制。该病毒在... 鸡传染性贫血 (CIA)是鸡的重要的免疫抑制性疾病之一 ,以引起雏鸡再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征。鸡传染性贫血病毒 (CIAV)主要引起鸡骨髓成红细胞和胸腺皮质的成淋巴细胞溶细胞感染 ,继而导致贫血和免疫抑制。该病毒在世界范围内广泛存在 ,是养鸡业潜藏的巨大威胁。文章从 CIA的危害、基本控制方法、病原的基因组及其所编码的蛋白质的功能、疾病的诊断等方面的最新进展进行了综述 ,重点介绍了病原的分子生物学研究进展及其核酸检测技术 ,并对 展开更多
关键词 鸡 传染性贫血病毒 分子生物学 核酸检测 CIA 免疫抑制性疾病 基因组 蛋白质
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