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华蟾素诱导人肝癌细胞株HepG_2凋亡及其作用机制 被引量：38
1
作者 齐芳华 李安源 +3 位作者 赵林 张莉 杜冠华 唐伟 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期318-323,共6页
为了观察华蟾素体外抑制肝癌细胞株HepG2增殖、诱导细胞凋亡作用及其机制,将不同浓度华蟾素作用于HepG2细胞。采用MTT法观察华蟾素对HepG2细胞的增殖抑制作用;用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态学改变;以流式细胞术观察细胞的凋... 为了观察华蟾素体外抑制肝癌细胞株HepG2增殖、诱导细胞凋亡作用及其机制,将不同浓度华蟾素作用于HepG2细胞。采用MTT法观察华蟾素对HepG2细胞的增殖抑制作用;用Hoechst33258染色法观察细胞凋亡的形态学改变;以流式细胞术观察细胞的凋亡率和细胞周期的变化;以实时荧光定量PCR技术(realtime-PCR)和蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2、Bax及p53mRNA水平和蛋白水平的表达情况。结果表明,华蟾素对体外培养的肝癌HepG2细胞有抑制增殖作用,且具有剂量、时间相关性;华蟾素可致HepG2细胞阻滞于G2/M期,细胞凋亡率随药物浓度增加亦呈增长趋势;细胞凋亡相关因子Bax及p53mRNA和蛋白表达上调,Bcl-2的mRNA和蛋白表达下调。因此,华蟾素可抑制肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导肝癌HepG2细胞凋亡,其机制可能与调节凋亡相关因子Bcl-2、Bax及p53的表达有关。 展开更多
关键词 华蟾素 人肝癌细胞株hepg2 增殖 细胞凋亡
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裙带菜多糖抗肿瘤作用的研究 被引量：29
2
作者 王雪 邹向阳 +3 位作者 郭莲英 邢嵘 毕向东 侯林 《大连医科大学学报》 CAS 2006年第2期98-100,共3页
[目的]观察裙带菜多糖的体内、外抗肿瘤作用,并对其机制进行讨论。[方法]采用MTT法观察裙带菜多糖体外对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用;通过对615荷瘤小鼠瘤重及免疫器官脾脏的研究,观察了裙带菜多糖的体内抗肿瘤作用。[结果]与阴性对照... [目的]观察裙带菜多糖的体内、外抗肿瘤作用,并对其机制进行讨论。[方法]采用MTT法观察裙带菜多糖体外对人肝癌细胞HepG-2的抑制作用;通过对615荷瘤小鼠瘤重及免疫器官脾脏的研究,观察了裙带菜多糖的体内抗肿瘤作用。[结果]与阴性对照组相比裙带菜多糖各浓度组体外对人肝癌细胞HepG-2均有很强的抑制作用(P<0.01),其中15、10 mg/mL组的抑制率分别为57.20%、51.79%,略低于5-FU组;在荷瘤小鼠实验中,与空白对照组相比裙带菜多糖各浓度组均有很强的肿瘤抑制作用,其中400、200 mg/kg组抑瘤率分别为69.13%、42.11%,与5-FU组相近。[结论]裙带菜多糖对人肝癌细胞HepG-2抑制效果显著,小鼠体内实验也证实了裙带菜多糖较强的抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 裙带菜多糖 hepg-2人肝癌细胞株 抗肿瘤活性
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阿帕替尼对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响研究 被引量：27
3
作者 姜增凯 叶晓歌 陈琴华 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期1422-1424,共3页
目的研究阿帕替尼对人肝癌Hep G2细胞增殖和迁移能力的影响。方法将人肝癌Hep G2细胞对数生长期的细胞分成对照组和实验组。对照组不予任何处理,实验组分别给予0.01,0.05,0.1,0.5,1.0,5.0,10.0,20.0μmol·L^(^(-1))的阿帕替尼处理... 目的研究阿帕替尼对人肝癌Hep G2细胞增殖和迁移能力的影响。方法将人肝癌Hep G2细胞对数生长期的细胞分成对照组和实验组。对照组不予任何处理,实验组分别给予0.01,0.05,0.1,0.5,1.0,5.0,10.0,20.0μmol·L^(^(-1))的阿帕替尼处理,并测定细胞生长抑制率、移行愈合率,测定细胞内P53、caspase-3和caspase-8的表达情况。结果实验组细胞生长抑制率分别为(17.11±0.83)%,(27.54±1.02)%,(33.84±0.92)%,(37.43±1.13)%,(41.29±1.87)%,(46.68±1.36)%,(53.42±2.03)%,(70.44±2.58)%,随着药物浓度增加而增强。0.05,0.1μmol·L^(-1)的阿帕替尼移行愈合率分别为(45.50±4.30)%和(37.50±3.43)%,与对照组的(84.60±6.88)%比较,差异有统计学意义(P<0.01)。2.1μmol·L^(-1)阿帕替尼组P53为(112.31±6.53)%,caspase-3为(137.93±10.01)%,caspase-8为(104.63±3.89)%,4.2μmol·L^(-1)阿帕替尼组P53为(147.69±9.67)%,caspase-3为(306.89±20.15)%,caspase-8(139.09±8.82)%(P<0.01)。结论阿帕替尼可以抑制人Hep G2肝癌细胞后肿瘤细胞的生长和迁移愈合,其机制可能是上调了P53、caspase-3和caspase-8的表达。 展开更多
关键词 肝癌细胞系Hep G2 阿帕替尼 抑制作用
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三氧化二砷与阿霉素对人肝癌细胞株HepG2中survivin表达的影响 被引量：11
4
作者 李志红 王志明 穆拉德 《中国普通外科杂志》 CAS CSCD 2005年第6期441-447,共7页
目的探讨三氧化二砷与阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的可能机制。方法用不同浓度的As2O3或/和ADM干预人肝癌细胞株HepG2不同时间,以免疫细胞化学和RTPCR方法检测HepG2细胞中survivin表达的改变。结果(1)未加药物干预之前,HepG2细胞中可见survi... 目的探讨三氧化二砷与阿霉素诱导肝癌细胞凋亡的可能机制。方法用不同浓度的As2O3或/和ADM干预人肝癌细胞株HepG2不同时间,以免疫细胞化学和RTPCR方法检测HepG2细胞中survivin表达的改变。结果(1)未加药物干预之前,HepG2细胞中可见survivin强烈表达;(2)不同浓度的As2O3或ADM均可降低HepG2细胞survivin表达程度,并且随药物浓度的增加或作用时相的延长,降低程度更明显;浓度与时相之间存在交互作用;(3)ADM降低HepG2细胞survivin表达的作用比As2O3更明显,两者联用后,作用进一步增强。结论(1)单用As2O3或ADM均可降低HepG2细胞中survivin表达,并呈浓度和时间依赖性;(2)相同浓度下,ADM对HepG2细胞中survivin表达的减弱作用较As2O3更强,但两者的联用较单用者能更显著降低survivin表达;(3)As2O3和ADM可能通过下调survivin表达而参与诱导癌细胞凋亡,从而发挥其抗癌作用;两者联用有叠加抗癌作用,从而可降低各自的临床使用剂量。 展开更多
关键词 肝肿瘤/药物疗法 三氧化二砷 治疗应用 阿霉素 细胞株hepg2 SURVIVIN蛋白 细胞凋亡
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康莱特抑制肝癌细胞HepG2增殖的实验研究 被引量：15
5
作者 梁铁军 秦成勇 +2 位作者 谭艳蓉 蒋莹 赵小茜 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第13期743-746,共4页
目的:探讨康莱特注射液(KLT)抑制肝癌细胞HepG2增殖的作用机制。方法:以低、中、高剂量(分别为5μl/ml、10μl/ml、15μl/ml)的KLT处理肝癌细胞HepG2,用免疫组化法检测周期素D1(cyclinD1)、周期素E(cyclinE)蛋白在肝癌细胞HepG2中的表达... 目的:探讨康莱特注射液(KLT)抑制肝癌细胞HepG2增殖的作用机制。方法:以低、中、高剂量(分别为5μl/ml、10μl/ml、15μl/ml)的KLT处理肝癌细胞HepG2,用免疫组化法检测周期素D1(cyclinD1)、周期素E(cyclinE)蛋白在肝癌细胞HepG2中的表达,用MTT比色法观察KLT对肝癌细胞HepG2生长的抑制作用,用流式细胞仪检测细胞周期分布;另设盐水对照组。结果:1)KLT对肝癌细胞HepG2有明显的抑制效应,且具有时间、剂量依赖关系。2)低、中、高剂量组KLT使G1期细胞分别上升至66.5%、70.1%、75.8%,明显高于对照组(P<0.05);中、高剂量组KLT使S期细胞分别下降至13.2%、20.0%,明显低于对照组(P<0.05)。3)低、中、高剂量组KLT使肝癌细胞cyclinD1蛋白水平分别减少26.3%、35.1%、45.6%,与对照组比较P均<0.05;使cyclinE蛋白水平分别减少18.8%、27.1%、33.3%,与对照组比较P均<0.05。结论:KLT对肝癌细胞HepG2有明显的抑制效应,其抑制效应具有时间、剂量依赖关系,其机理是通过抑制下游cyclinD1、cyclinE表达阻止细胞进入S期。 展开更多
关键词 康莱特 肝癌细胞hepg2 周期素DI 周期素E
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油茶的粕、果皮和叶的抗肿瘤活性研究 被引量：15
6
作者 马丽媛 李林 +4 位作者 唐玲 陈跃龙 冯宝民 史丽颖 王永奇 《华西药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期8-12,共5页
目的比较油茶粕、果皮和叶提取物对多种肿瘤细胞增殖抑制的作用。方法常规传代培养5种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞活性。结果 30～90μg.mL-1油茶粕总皂苷、31.25～500μg.mL-1油茶果皮乙酸乙酯提取物30%乙... 目的比较油茶粕、果皮和叶提取物对多种肿瘤细胞增殖抑制的作用。方法常规传代培养5种肿瘤细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶(LDH)法测定细胞活性。结果 30～90μg.mL-1油茶粕总皂苷、31.25～500μg.mL-1油茶果皮乙酸乙酯提取物30%乙醇洗脱物、62.5～500μg.mL-1油茶叶95%乙醇提取物乙酸乙酯萃取物呈剂量依赖性地抑制多种肿瘤细胞增殖。体外增殖抑制作用强弱为油茶粕总皂苷>油茶果皮乙酸乙酯捏取物30%乙醇洗脱物>油茶叶95%乙醇提取物乙酸乙酯萃取物。进一步确定了油茶粕总皂苷对人乳腺癌细胞(MCF-7)产生的明显抑制作用是通过破坏细胞膜而发挥作用的。结论分析比较后,分别确定了油茶粕、果皮和叶抗肿瘤的有效部位,填补了油茶粕总皂苷在肿瘤治疗领域的空白。 展开更多
关键词 油茶 抗肿瘤 人肺癌细胞株(A549) 人乳腺癌细胞株(MCF-7) 人肝癌细胞株(hepg2) 结肠癌细胞株(HCT116) 白血病细胞株(U937)
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猫爪草总皂苷对人肝癌HepG2细胞活性的影响 被引量：15
7
作者 陈璇 童晔玲 +3 位作者 杨锋 戴关海 任泽明 王波波 《中国现代医生》 2013年第10期3-5,共3页
目的观察猫爪草总皂苷体外对人肝癌HepG2细胞活性的影响。方法采用系统溶剂法提取猫爪草总皂苷,3H-TdR掺入法和集落形成实验观察猫爪草总皂苷对HepG2细胞增殖的影响。结果猫爪草总皂苷对HepG2细胞增殖和集落形成均有显著性的抑制作用,... 目的观察猫爪草总皂苷体外对人肝癌HepG2细胞活性的影响。方法采用系统溶剂法提取猫爪草总皂苷,3H-TdR掺入法和集落形成实验观察猫爪草总皂苷对HepG2细胞增殖的影响。结果猫爪草总皂苷对HepG2细胞增殖和集落形成均有显著性的抑制作用,呈现较好的量效关系。结论猫爪草总皂苷能较好地抑制HepG2细胞增殖。 展开更多
关键词 猫爪草总皂苷 人肝癌hepg2细胞 细胞增殖
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黄芪多糖对人肝癌细胞HepG2凋亡相关基因表达的影响 被引量：15
8
作者 陈瑾歆 何军 +2 位作者 张娟娟 蒲宇 王含彦 《中国老年学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期124-126,共3页
目的研究黄芪多糖(APS)联合斑蝥酸钠(SCA)对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及Bcl-2基因表达的影响。方法实验分为对照组、SCA处理组、APS处理组、APS联合SCA处理组,采用免疫组化染色法(IH)观察APS联合斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,采用W... 目的研究黄芪多糖(APS)联合斑蝥酸钠(SCA)对人肝癌细胞HepG2细胞凋亡及Bcl-2基因表达的影响。方法实验分为对照组、SCA处理组、APS处理组、APS联合SCA处理组,采用免疫组化染色法(IH)观察APS联合斑蝥酸钠对HepG2细胞增殖的抑制作用,采用Western印迹法检测各组细胞Bcl-2基因表达的变化。结果与对照组相比,各处理组HepG2细胞中Bcl-2基因表达均明显减少,APS联合SCA处理组减少最为明显。结论 APS联合SCA可明显抑制HepG2细胞Bcl-2基因的表达。 展开更多
关键词 黄芪多糖 人肝癌细胞hepg2 凋亡
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乳糖脂修饰苦参碱脂质体的肝靶向性和体外抑瘤作用研究 被引量：13
9
作者 张方宇 何松 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期747-751,共5页
目的:制备乳糖酰磷脂酰乙醇胺修饰的苦参碱脂质体(Lactosaminated matrine liposomes,LML),考察其在小鼠体内的肝靶向性,并研究其对人肝癌细胞系HepG2细胞的体外抑制作用。方法:采用逆向蒸发-短时超声法制备苦参碱脂质体Matrine liposom... 目的:制备乳糖酰磷脂酰乙醇胺修饰的苦参碱脂质体(Lactosaminated matrine liposomes,LML),考察其在小鼠体内的肝靶向性,并研究其对人肝癌细胞系HepG2细胞的体外抑制作用。方法:采用逆向蒸发-短时超声法制备苦参碱脂质体Matrine liposomes,ML),合成乳糖酰磷脂酰乙醇胺并用其修饰苦参碱脂质体得到乳糖脂苦参碱脂质体。考察其包封率及粒径,应用反相高效液相色谱法测定小鼠体内各组织中的苦参碱含量,通过MTT法检测LML对人肝癌细胞系HepG2的体外抑制作用。结果:LML形态均匀,粒径分布范围为80～150nm,包封率为48.1%。与苦参碱溶液(Matrine solution,M-sol)相比,普通苦参碱脂质体及乳糖脂苦参碱脂质体的体内循环时间明显延长,且乳糖脂苦参碱脂质体的肝脏药—时曲线下面积(Area under curve,AUC)值相对于苦参碱脂质体和苦参碱溶液具有显著性差异(P<0.05)。LML组中的肝脏相对于其它脏器的靶向效率(Targetingeffi-ciency,Te)值均大于1,是脾脏的2.7倍,是肺脏的3倍,是肾脏的6.6倍,是心脏的8.5倍,具有显著性差异(P<0.01)。MTT法分析发现,当浓度为0.5mg/ml时,LML、ML及M-sol对人肝癌HepG2细胞的杀伤率分别为51.97%、31.89%和28.34%,前一组与后两组之间有显著差异(P<0.05)。结论:本研究制备的乳糖脂苦参碱脂质体具有较好的体内肝靶向性和体外抑瘤作用,有望成为一种新型靶向抗肝癌药物。 展开更多
关键词 乳糖酰磷脂酰乙醇胺 苦参碱 脂质体 肝靶向性 肝癌细胞系hepg2
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油茶皂苷通过内质网应激途径诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的研究 被引量：13
10
作者 马丽媛 李林 +4 位作者 江玉 史丽颖 冯宝民 王永奇 唐玲 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第11期1523-1527,共5页
目的探讨油茶皂苷诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其作用机制。方法采用MTT法考察了油茶皂苷对肿瘤细胞增殖的影响;用Western blot方法分析油茶皂苷对caspase-3、PARP、Bip、ATF6、IRE1、Perk、eIF2a和eEF2蛋白质表达的影响。结果油茶... 目的探讨油茶皂苷诱导人肝癌细胞HepG2凋亡的作用及其作用机制。方法采用MTT法考察了油茶皂苷对肿瘤细胞增殖的影响;用Western blot方法分析油茶皂苷对caspase-3、PARP、Bip、ATF6、IRE1、Perk、eIF2a和eEF2蛋白质表达的影响。结果油茶皂苷(10～30 mg.L-1)明显抑制HepG2细胞的增殖。同时可激活Caspase信号通路,诱发PARP底物的断裂;进一步上调IRE1表达量及活化Perk、eIF2a和eEF2蛋白。结论油茶皂苷通过内质网应激途径诱导人肝癌细胞HepG2发生凋亡。 展开更多
关键词 油茶皂苷 抗肿瘤 人肝癌细胞株(hepg2) 内质网应激 人免疫球蛋白重链结合蛋白(Bip) RNA激活蛋白激酶的内质网类似激酶(Perk)
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复方斑蝥注射液联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞增殖与凋亡的影响 被引量：12
11
作者 李丽娜 南克俊 张茜 《现代肿瘤医学》 CAS 2011年第3期438-440,共3页
目的:探讨复方斑蝥注射液(CCI)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物... 目的:探讨复方斑蝥注射液(CCI)、奥沙利铂(L-OHP)单药及联合作用对人肝癌HepG2细胞株的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:MTT法观察不同浓度复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合应用对HepG2细胞生长的抑制作用;采用流式细胞仪检测上述药物单独或联合应用对HepG2细胞的凋亡率的影响。结果:复方斑蝥注射液、奥沙利铂单药及联合作用对HepG2细胞的抑制作用均呈明显的剂量依赖关系。均可诱导细胞凋亡,联用时有协同作用。结论:复方斑蝥注射液、奥沙利铂能够抑制人肝癌HepG2细胞增殖并诱导凋亡。两药联合有协同作用。 展开更多
关键词 复方斑蝥注射液 奥沙利铂 hepg2细胞 细胞凋亡
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5-脱氧杂氮胞苷抑制肝癌细胞株生物学行为的机制 被引量：9
12
作者 刘丽华 肖文华 杨金亮 《世界华人消化杂志》 CAS 2000年第4期420-423,共4页
目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研... 目的 DNA甲基化模式的改变伴随着永生性细胞系的确立,生长调控基因CpG岛的重新甲基化可能导致了其转录的不活跃,在体外培养的情况下,使得肿瘤细胞选择了有利于生长的条件,我们用DNA甲基转移酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷处理两株肝癌细胞,研究其对肝癌细胞的影响,探讨DNA甲基化异常与肝细胞癌间的相关性及5-脱氧杂氮胞苷对肝癌细胞株恶性生物学行为的影响及其机制。 方法 用5-脱氧杂氮胞苷处理肝癌细胞株SMMC-7721和HePG2,然后采用相差显微镜观察药物处理前后细胞的形态变化,采用MTT法观察细胞的生长速度变化,采用流式细胞仪检测细胞周期、细胞凋亡率、P16蛋白表达的变化,采用RT-PCR法比较p16和甲基转移酶mRNA表达量的变化,比较裸鼠致瘤性的大小。 结果 5-脱氧杂氮胞苷处理后细胞形态趋于规则,生长速度减慢,SMMC-7721细胞,G1期细胞增加了8.5％,而S期和C_2/M朗细胞分别减少了47.8％和10.4％,HePG2细胞,G_1期细胞增加了3.5％,S期减少了46.2％,G_2/M期增加了23.7％,两细胞凋亡率分别增加了91.6％和133.3％,P16蛋白表达分别增加了23.4％和20.9％,p16 mRNA表达增高,而DNA甲基转移酶mRNA表达明显降低,裸鼠皮下移植瘤生长减慢。 结论 肝细胞癌的发生与DNA甲基化异常有关,甲基化酶抑制剂5-脱氧杂氮胞苷可能通过抑制甲? 展开更多
关键词 肝肿瘤细胞株 5-脱氧杂氮胞苷 甲基转移酶
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两种方法建立的人肝癌细胞多药耐药模型的比较 被引量：4
13
作者 邵泽勇 沈鼎明 +2 位作者 伍烽 翟宝进 王智彪 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期51-54,共4页
目的　比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性。方法　分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2 /ADMs和HepG2 /ADMi。MTT法检测两种细... 目的　比较药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立的人肝癌多药耐药模型的生物学特性。方法　分别采用药物大剂量冲击法和浓度梯度递增法建立人肝癌阿霉素(adriamycin,ADM)多药耐药细胞亚系HepG2 /ADMs和HepG2 /ADMi。MTT法检测两种细胞对多种化疗药的敏感性,细胞计数法绘制生长曲线并用公式法计算倍增时间,流式细胞术检测细胞周期以及细胞对药物的摄入和外排。并将细胞接种于裸鼠,观察成瘤率及瘤体大小。结果　以含1μg/mLADM的培养液进行筛选,3个月共筛选4次,所得细胞亚系命名为HepG2 /ADMs,其对ADM的耐药指数为30.5。浓度梯度递增法诱导3个月后,细胞可以在含0.4μg/mLADM的培养液中正常生长增殖,对ADM的耐药指数为51,将该细胞亚系命名为HepG2 /ADMi; MTT法检测显示,两种细胞系不仅对ADM耐药,而且对其它化疗药也有抗性,呈现多药耐药特性,但HepG2 /ADMs对药物的敏感性普遍高于HepG2 /ADMi。与HepG2 /ADMi相比,HepG2 /ADMs的倍增时间相对较短,G0 /G1期细胞相对较少,G2 /M期细胞相对较多,细胞对ADM的摄入较多,外排较少,表现为药物的滞留率较高。动物实验发现HepG2 /ADMs的成瘤率明显高于HepG2 /ADMi(90% vs3.33% ),且肿瘤生长速度较快,体积较大。 展开更多
关键词 细胞系hepg2 多药耐药 阿霉素
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5-氮杂-2’-脱氧胞苷对HepG2细胞RUNX3基因表达及细胞增殖的影响 被引量：10
14
作者 张雪妍 张煦 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2007年第3期314-318,共5页
目的探讨人肝癌细胞系HepG2经5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2-’deoxycytid ine,5-Aza-CdR)处理后诱导高甲基化失活的RUNX3基因重新表达的可能性及对细胞生长的影响,寻找抗癌治疗的新靶点。方法RT-PCR检测抑癌基因RUNX3 mRNA的表达;MTT、... 目的探讨人肝癌细胞系HepG2经5-氮杂-2’-脱氧胞苷(5-Aza-2-’deoxycytid ine,5-Aza-CdR)处理后诱导高甲基化失活的RUNX3基因重新表达的可能性及对细胞生长的影响,寻找抗癌治疗的新靶点。方法RT-PCR检测抑癌基因RUNX3 mRNA的表达;MTT、集落形成实验观察细胞的生长活性;流式细胞术和透射电镜分析细胞周期及细胞凋亡的变化。结果肝癌细胞经不同浓度之5-Aza-CdR处理后,原无RUNX3 mRNA表达的细胞均检出基因重新表达,细胞生长速度出现不同程度减慢及细胞克隆形成率显著降低(P<0.01)。用药后肝癌细胞发生明显的S期阻滞,电镜显示肝癌细胞形态学改变。结论去甲基化制剂5-Aza-CdR能有效地激活肝癌细胞系HepG2因高甲基化所致RUNX3基因沉默的再转录,诱导该基因的表达,从而抑制肿瘤细胞生长。 展开更多
关键词 人肝癌细胞系hepg2 RUNX3基因 去甲基化制剂
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红花注射液对HepG-2细胞Bcl-2和Survivin表达的影响 被引量：9
15
作者 李福娟 石学魁 +9 位作者 李玉婷 董艳 王亚贤 陶冀 梁颖 张晓莉 桂金秋 刘亚威 宋宝辉 张红军 《中国实验方剂学杂志》 CAS 北大核心 2013年第21期218-222,共5页
目的:研究红花注射液在体外对HepG-2细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Survivin基因转录和蛋白表达的影响,探讨红花注射液诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用不同剂量的红花注射液(0,50,100,150,200,250 g·L-1)体外作用于... 目的:研究红花注射液在体外对HepG-2细胞B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、Survivin基因转录和蛋白表达的影响,探讨红花注射液诱导人肝癌HepG-2细胞凋亡的机制。方法:采用不同剂量的红花注射液(0,50,100,150,200,250 g·L-1)体外作用于HepG-2细胞,利用MTT法观察红花注射液对HepG-2细胞增殖的抑制作用;以流式细胞术观察细胞凋亡率的变化;通过实时荧光定量PCR技术(real time-PCR)以及蛋白免疫印迹(Western blotting)法检测细胞凋亡相关因子Bcl-2和Survivin mRNA和蛋白的表达情况。结果:红花注射液对体外培养的人肝癌HepG-2细胞的增殖具有抑制作用(P<0.01),且具有剂量、时间相关性;细胞凋亡率随着红花注射液浓度的增加而逐步增高,细胞凋亡相关因子Bcl-2,Survivin的mRNA和蛋白表达均下调。结论:红花注射液能够抑制HepG-2人肝癌细胞增殖,诱导HepG-2细胞凋亡,可在翻译和转录水平下调Bcl-2,Survivin的表达,这可能是红花注射液诱导HepG-2细胞凋亡的主要机制之一。 展开更多
关键词 红花注射液 人肝癌细胞株hepg-2 细胞增殖 细胞凋亡 SURVIVIN BCL-2
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苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬作用机制研究 被引量：10
16
作者 郭浩 周淑妮 冉瑞智 《中国药业》 CAS 2019年第6期14-17,共4页
目的探讨苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬的作用机制。方法体外培养肝癌细胞HepG2,用苦参碱染毒48 h后收获细胞,分为苦参碱高、中、低剂量组和对照组(苦参碱质量浓度分别为2. 0,1. 0,0. 5,0 g/L),以单丹磺酞戊二胺(MDC)染色观察肝癌细胞He... 目的探讨苦参碱调控肝癌细胞HepG2自噬的作用机制。方法体外培养肝癌细胞HepG2,用苦参碱染毒48 h后收获细胞,分为苦参碱高、中、低剂量组和对照组(苦参碱质量浓度分别为2. 0,1. 0,0. 5,0 g/L),以单丹磺酞戊二胺(MDC)染色观察肝癌细胞HepG2自噬现象;以逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测蛋白激酶B(Akt)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)和自噬相关蛋白LC3B mRNA的表达水平; Western Blot法检测Akt,p-Akt,mTOR,LC3B蛋白水平。结果与对照组比较,苦参碱高、中、低剂量组肝癌细胞HepG2荧光强度明显增强,mTOR mRNA和蛋白及p-Akt蛋白表达水平明显降低,LC3B mRNA和蛋白表达水平明显升高,Akt mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P> 0. 05)。结论苦参碱可促进肝癌细胞HepG2的自噬作用,其机制与抑制PI3K/Akt/mTOR通路有关。 展开更多
关键词 苦参碱 PI3K/Akt/mTOR通路 肝癌细胞hepg2 自噬作用 作用机制
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翻白草油对肝癌HepG2细胞CDK4蛋白的影响 被引量：10
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作者 李忠秀 王淑秋 +1 位作者 刘蕾 王淑湘 《黑龙江医药科学》 2011年第2期25-26,共2页
目的:检测翻白草油对肝癌HepG2细胞CDK4蛋白表达的影响,探讨翻白草油抗肝癌的机制。方法:翻白草油作用肝癌HepG2细胞后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞增殖活性和IC50;western blot法检测CDK4蛋白的表达。结果:翻白草油能抑制HepG2... 目的:检测翻白草油对肝癌HepG2细胞CDK4蛋白表达的影响,探讨翻白草油抗肝癌的机制。方法:翻白草油作用肝癌HepG2细胞后,用噻唑蓝(MTT)比色法检测HepG2细胞增殖活性和IC50;western blot法检测CDK4蛋白的表达。结果:翻白草油能抑制HepG2细胞增殖,且呈剂量依赖性,IC50值为2.03mg/mL,;翻白草油处理组CDK4蛋白水平低于溶剂对照组(P<0.01)。结论:翻白草油可抑制人肝癌细胞HepG2的增殖,可能与降低CDK4蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 翻白草油 肝癌hepg2细胞 CDK4
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人肝癌原发性耐药细胞亚系的建立及耐药机制的初步探讨 被引量：7
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作者 邵泽勇 沈鼎明 +1 位作者 伍烽 翟宝进 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期455-458,共4页
目的 从人肝癌细胞系HepG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制。方法 采用阿霉素(adriamycin.ADM)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性... 目的 从人肝癌细胞系HepG2中筛选出原发性耐药株,建立相应的细胞亚系并探讨其耐药机制。方法 采用阿霉素(adriamycin.ADM)大剂量冲击法筛选原发性耐药细胞株,倒置显微镜下观察其形态学变化,细胞计数法绘制生长曲线,MTT法检测药物敏感性,流式细胞术分析细胞周期和检测耐药蛋白的表达。结果 随冲击次数的增加,筛选出细胞的耐药指数(resistance index,RI)逐渐升高,筛选3次后对ADM的RI可达30.5;其形态学特点、生长特性及细胞周期分布与亲本细胞有明显差异,同时发现耐药蛋白P-gp、MRP和LRP表达增强。结论 肝癌细胞系HepG2是个非均质的群体,其中存在着原发性耐药细胞株。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞系hepg2 多药耐药 阿霉素 P-糖蛋白
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薯蓣皂苷下调ABCC1表达对人肝癌细胞HepG2/ADM耐药的影响 被引量：9
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作者 宋正伟 张奇能 《中国药师》 CAS 2020年第1期34-39,共6页
目的:探究薯蓣皂苷对人肝癌细胞HepG2/多柔比星(ADM)耐药性的影响及其可能的作用机制。方法:采用含0,10,20,30,40,50μmol·L^-1薯蓣皂苷的培养液培养HepG2、HepG2/ADM细胞,CCK法检测细胞增殖抑制率;MTT检测薯蓣皂苷对HepG2/ADM细胞... 目的:探究薯蓣皂苷对人肝癌细胞HepG2/多柔比星(ADM)耐药性的影响及其可能的作用机制。方法:采用含0,10,20,30,40,50μmol·L^-1薯蓣皂苷的培养液培养HepG2、HepG2/ADM细胞,CCK法检测细胞增殖抑制率;MTT检测薯蓣皂苷对HepG2/ADM细胞、HepG2细胞半抑制浓度(IC50)值的影响;流式细胞术检测HepG2、HepG2/ADM细胞摄取ADM的能力。薯蓣皂苷联合ABCC1抑制剂处理HepG2/ADM细胞,MTT检测细胞IC50值变化;流式细胞术检测细胞摄取ADM的能力、细胞凋亡情况,免疫印迹法检测细胞人多药耐药相关蛋白1(ABCC1)、半胱天冬酶(caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)蛋白表达情况。结果:HepG2/ADM细胞中ABCC1蛋白表达显著高于HepG2细胞(P<0.05)。薯蓣皂苷0~30μmol·L^-1对HepG2/ADM细胞、HepG2细胞毒性小。随着薯蓣皂苷处理浓度的升高,HepG2/ADM细胞IC50值均降低,摄取ADM量明显升高,具有剂量依赖性(P<0.05)。薯蓣皂苷联合ABCC1抑制剂处理HepG2/ADM细胞后能够进一步降低细胞IC50,提高细胞ADM摄取量,加速细胞凋亡,上调caspase-3、Bax蛋白表达,下调ABCC1、bcl-2蛋白表达(P<0.05)。结论:薯蓣皂苷能够逆转HepG2/ADM细胞耐药性,逆转效果与作用剂量相关,其机制可能与下调ABCC1表达,诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 薯蓣皂苷 肝癌细胞hepg2/多柔比星 耐药性 多药耐药相关蛋白1
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杨梅素抗肝肿瘤细胞HepG2作用及其机制的研究 被引量：8
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作者 卞杰 顾明 +1 位作者 侯胜燕 贾强 《中国医药导报》 CAS 2012年第36期7-9,共3页
目的探讨杨梅素对肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡作用及其作用机制。方法应用甲基噻唑蓝(MTT)比色法,测定杨梅素对HepG2细胞株活性的影响,检测其抑制HepG2细胞株的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、HE染色和Annexin V-PI流式检测... 目的探讨杨梅素对肝癌细胞HepG2的生长抑制和诱导凋亡作用及其作用机制。方法应用甲基噻唑蓝(MTT)比色法,测定杨梅素对HepG2细胞株活性的影响,检测其抑制HepG2细胞株的时间效应和剂量效应;应用形态学观察、HE染色和Annexin V-PI流式检测,测定杨梅素对HepG2细胞的凋亡作用,并进行细胞周期的分析,最后对杨梅素对细胞凋亡相关的蛋白p34cdc-2、Cyclin B1、Bcl-2和PARP的影响进行了研究。结果杨梅素对HepG2细胞具有生长抑制及诱导凋亡作用,且呈时间依赖和剂量依赖性,表现为:细胞G2/M期阻滞,出现明显的凋亡峰;Bliss法测定杨梅素对HepG2细胞的IC50值为(32.18±2.31)μmol/L,30、50μmol/L杨梅素对G2/M期细胞比率分别为(41.32±0.90)%和(80.07±0.90)%,差异有统计学意义(P<0.05);p34cdc-2蛋白的表达量未见变化,而CyclinB1蛋白的表达量明显上升,Bcl-2蛋白的表达量锐减,并诱导半胱氨酸蛋白酶Caspase-3的底物PARP蛋白(113 kD)水解为89 kD的特异性水解产物。结论杨梅素通过激活Caspase家族蛋白实现对肝癌细胞HepG2细胞株的增殖抑制及诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 杨梅素 肝肿瘤细胞 hepg2 凋亡
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