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N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响 被引量:7
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作者 姚梦醒 桂淑玉 +4 位作者 何苇 李庆 周青 陈飞虎 汪渊 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2008年第6期674-678,共5页
目的研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物[N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺]对人肺腺癌A549细胞株体外增殖及凋亡的影响。方法3种浓度的ATRA衍生物和ATRA(1、5、10mg/L)分别处理A549细胞1、2、3、7d,应用MTT法和流式细胞技术分别观察该ATR... 目的研究新合成的全反式维甲酸(ATRA)衍生物[N-(3-三氟甲基苯基)维甲酰胺]对人肺腺癌A549细胞株体外增殖及凋亡的影响。方法3种浓度的ATRA衍生物和ATRA(1、5、10mg/L)分别处理A549细胞1、2、3、7d,应用MTT法和流式细胞技术分别观察该ATRA衍生物对A549细胞增殖、凋亡和细胞周期的影响;Western blot分析凋亡相关蛋白表达的变化。结果ATRA衍生物处理组A549细胞增殖抑制率随药物浓度的增加而提高,分别为9.1%、17.8%、47.0%;抑制率亦随药物作用时间的延长而提高,分别为18.1%、20.6%、40.4%、83.4%。10mg/LATRA衍生物可明显诱导A549细胞凋亡,凋亡率达到40.9%,G0~G1期细胞比例明显下降,细胞凋亡峰较对照组明显提前,凋亡过程伴随Bcl-2表达下降,而Bax、Bak、酶原形式的Caspase-3、p53、NF-κB的表达无明显变化。结论ATRA衍生物对A549细胞的增殖抑制作用呈浓度和时间依赖性;并诱导细胞凋亡,可能与Bcl-2蛋白的表达下调有关。 展开更多
关键词 肺肿瘤 腺癌 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用 流式细胞术 细胞系
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胰岛素样生长因子-1对甲状腺相关眼病眼眶成纤维细胞的促生长作用 被引量:9
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作者 代佳灵 何为民 罗梦绮 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第9期805-810,共6页
背景甲状腺相关眼病(TAO)是一种自身免疫性疾病,目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1(IGF.1)功能的发挥需要IGF-1受体(IGF-1R)的参与,IGF-1在促甲状腺激素受体(TSHR)的信号传导通路中也起着重... 背景甲状腺相关眼病(TAO)是一种自身免疫性疾病,目前对其发病机制的研究主要集中在共同抗原上。胰岛素样生长因子-1(IGF.1)功能的发挥需要IGF-1受体(IGF-1R)的参与,IGF-1在促甲状腺激素受体(TSHR)的信号传导通路中也起着重要作用。目的探讨IGF-1对TAO患者眼眶成纤维细胞(OFs)增生及IGF-1R、TSHR表达的影响,探讨IGF-1在TAO发病机制中的作用。方法收集2016年3-6月于四川大学华西医院行TAO眼眶脂肪切除术取得的眶组织标本17例17份及正常人美容手术取得的眼眶组织4人4份,采用含体积分数5%胎牛血清的DMEM/F12培养液培养OFs。分别于培养液中加入不同质量浓度(O、50、100、125μg/L)的IGF-1,采用MTS比色法绘制OFs生长曲线,评估IGF-1对TAO和正常来源OFs增生的影响;采用流式细胞术测定不同质量浓度IGF-1对TAO和正常来源OFs中IGF-1R、TSHR表达水平的影响。结果TAO患者与正常人来源的OFs均生长良好,呈梭形,细胞质丰富,TAO患者与正常人来源的OFs形态学特点一致。培养的OFs波形蛋白呈阳性反应,结蛋白、S-100、肌红蛋白和角蛋白均呈阴性反应。不同质量浓度IGF-1作用后TAO组和正常组OFs增生均呈逐渐上升趋势,总体比较差异有统计学意义(F分组=219.639,P〈0.001;F质量浓度=17.752,P〈0.001),以100μg/LIGF-1的促进作用最强。0、50、100、125μg/LIGF-1作用后TAO组OFs中IGF-1R表达量分别为(0.0091±0.0087)%、(0.0953±0.0233)%、(0.0837±0.0227)%和(0.0709±0.0241)%,正常组OFs中IGF-1R表达量分别为(0.0023±0.0006)%、(0.0093±0.0012)%、(0.0073±0.0015)%和(0.0083±0.0012)%,其中50、100和125μg/LIGF-1作用后各组OFs中IGF-1R表达量均高于无添加IGF-1者,TAO组OFs细胞中IGF-1R的表达量均明显高于正常组,差异均有统计学意义(均P〈0. 展开更多
关键词 甲状腺相关眼病 眼眶成纤维细胞/代谢 胰岛素样生长因子-1/代谢 胰岛素样生长因子-1受体/代谢 促甲状腺激素受体/代谢 细胞增生/药物作用 细胞培养
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双歧杆菌粘附素对脂多糖和H_2O_2调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响 被引量:5
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作者 钟世顺 张振书 +2 位作者 王继德 赖卓胜 潘令嘉 《第一军医大学学报》 CSCD 北大核心 2004年第3期264-268,共5页
目的研究双歧杆菌分泌型粘附素对脂多糖(LPS)和H2O2体外调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法用3H-TdR掺入法、流式细胞仪和荧光染色等方法观察肠上皮细胞增殖和凋亡的情况。结果100 μg/L LPS对细胞增殖和凋亡均有促进作用,200 μmol/... 目的研究双歧杆菌分泌型粘附素对脂多糖(LPS)和H2O2体外调节肠上皮细胞增殖和凋亡的影响。方法用3H-TdR掺入法、流式细胞仪和荧光染色等方法观察肠上皮细胞增殖和凋亡的情况。结果100 μg/L LPS对细胞增殖和凋亡均有促进作用,200 μmol/L H2O2可抑制肠上皮细胞增殖,促进凋亡。丫啶橙荧光染色见细胞核染色质致密浓染或裂解成碎片。预先经双歧杆菌分泌型粘附素处理后,LPS组细胞增殖和凋亡率均显著下降,H2O2组细胞凋亡明显减少。结论在体外,双歧杆菌分泌型粘附素能抑制LPS和H2O2对肠上皮细胞的损害作用,维持肠上皮细胞增殖与凋亡的平衡。 展开更多
关键词 双歧杆菌粘附素 脂多糖 H2O2 调节 肠上皮细胞增殖 细胞凋亡
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白细胞介素-6对糖尿病小鼠角膜缘干细胞活化的促进作用和角膜上皮愈合的加速作用 被引量:7
4
作者 董亚慧 陈鹏 +2 位作者 张真真 冯璐 周庆军 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期423-431,共9页
背景白细胞介素(IL)-6既介导炎症反应过程又在损伤修复中发挥重要作用,但其具体机制及其在糖尿病角膜组织损伤修复中的作用值得探讨。目的探讨IL-6在正常和糖尿病小鼠角膜缘干细胞活化和角膜上皮修复过程中的作用及其机制。方法正常6... 背景白细胞介素(IL)-6既介导炎症反应过程又在损伤修复中发挥重要作用,但其具体机制及其在糖尿病角膜组织损伤修复中的作用值得探讨。目的探讨IL-6在正常和糖尿病小鼠角膜缘干细胞活化和角膜上皮修复过程中的作用及其机制。方法正常6~8周龄C57BL/6小鼠52只,采用随机数字表法随机分为正常对照鼠32只和糖尿病模型鼠20只,采用50 mg/kg链脲佐菌素连续腹腔内注射5 d的方法诱导建立小鼠糖尿病模型。正常对照小鼠和糖尿病模型小鼠均行角膜上皮刮除术,然后分别于刮除后即刻和48 h结膜下注射IL-6或等容量PBS,采用荧光素染色法评价随时间延长的角膜上皮的愈合情况。体外培养小鼠角膜上皮干/祖细胞(TKE2细胞系),采用结晶紫染色法评估不同质量浓度IL-6处理后细胞克隆率(CFE),并与空白对照组进行比较;采用免疫荧光检测法和Western blot法检测细胞和小鼠再生上皮中干细胞标志物ΔNP63、Ki67的表达以及关键转录因子STAT3磷酸化水平;采用实时荧光定量PCR法和ELISA法检测小鼠角膜再生上皮中IL-6的mRNA及蛋白水平。结果角膜荧光素染色检查显示,正常对照小鼠和糖尿病模型小鼠PBS注射组与IL-6注射组注射后24、48和72 h残留角膜上皮缺损面积占原始缺损面积的百分比随角膜上皮损伤后时间延长均明显缩小,同时间点IL-6注射组角膜上皮缺损面积均明显小于PBS注射组,组间总体差异均有统计学意义(正常对照组:F分组=19.982,P〈0.01;F时间=589.350,P〈0.01;糖尿病组:F分组=25.411,P〈0.01;F时间=334.807,P〈0.01)。空白对照组及10、20、50、100 ng/ml IL-6处理组CFE分别为(13.23±1.12)%、(15.87±1.30)%、(21.69±1.62)%、(25.33±1.28)%和(18.67±1.54)%,随着IL-6质量浓度的增加CFE逐渐增加,总体比较差异有统计学意义(F=35.547,P〈0.01)。50 ng/ml I 展开更多
关键词 白细胞介素-6 角膜损伤 细胞增生/药物作用 STAT3转录因子/代谢 损伤修复/药物作用 糖尿病 角膜上皮干细胞 近交系C57BL小鼠
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GPR30在子宫平滑肌瘤细胞增殖中的作用研究 被引量:7
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作者 徐学麟 林俊 +3 位作者 江秀秀 杨艳峰 詹宏 李敏 《实用肿瘤杂志》 CAS 2014年第3期234-238,共5页
目的探讨跨膜G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor30,GPR30)在子宫平滑肌瘤细胞中的表达及其对肌瘤中平滑肌细胞的增殖作用。方法培养子宫平滑肌瘤原代细胞,应用免疫组织化学、免疫荧光及蛋白质印迹法检测GPR30的表达。应用蛋... 目的探讨跨膜G蛋白偶联受体30(G protein-coupled receptor30,GPR30)在子宫平滑肌瘤细胞中的表达及其对肌瘤中平滑肌细胞的增殖作用。方法培养子宫平滑肌瘤原代细胞,应用免疫组织化学、免疫荧光及蛋白质印迹法检测GPR30的表达。应用蛋白印迹检测GPR30干扰后,其下游信号通路的变化。应用MTT检测在雌激素刺激下,正常子宫平滑肌细胞及平滑肌瘤细胞的生长活性。结果子宫平滑肌瘤细胞中有GPR30蛋白的高表达,其主要位于细胞质中,在细胞核上无明显表达。在未处理组平滑肌细胞中,雌激素刺激雌激素信号通路中的ERK1/2表达增强。在GPR30干扰后的平滑肌细胞中,雌激素刺激后ERK1/2表达无显著改变。MTT结果表明在雌激素作用下,未处理组细胞存活和生长率显著增加;干扰组细胞的存活和生长率显著下降。结论 GPR30在子宫肌瘤平滑肌细胞的细胞质中高表达,可能参与子宫平滑肌细胞的增殖。 展开更多
关键词 平滑肌瘤 病理学 受体 G-蛋白偶联 雌激素受体 药理学 子宫 ERK-1 2 细胞增殖 药物作用 氮蓝四唑 药代动力学 比色法
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苦参素对人食管癌Eca-109体外细胞增殖活性影响研究 被引量:6
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作者 朱艳琴 周慧茹 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第8期1769-1771,共3页
目的:探讨苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖活性的影响。方法:运用MTT和流式细胞术分别检测细胞增殖率和细胞周期变化。结果:苦参素对Eca-109细胞持续作用48 h后,细胞增殖率由100%降为9.64%(P<0.001);细胞周期结果显示,G0/G1期细胞... 目的:探讨苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖活性的影响。方法:运用MTT和流式细胞术分别检测细胞增殖率和细胞周期变化。结果:苦参素对Eca-109细胞持续作用48 h后,细胞增殖率由100%降为9.64%(P<0.001);细胞周期结果显示,G0/G1期细胞明显增多,S期细胞明显减少,与阴性对照组和阳性对照组比较,差异具有显著性(P<0.05)。结论:苦参素对人食管癌Eca-109细胞增殖活性具有抑制作用,其作用机制与细胞周期阻滞于G0/G1期有关。 展开更多
关键词 苦参碱/药理学 食管肿瘤/病理生理学 细胞增殖/药物作用 人类
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姜黄素对人胃癌BGC-823细胞增殖及MMP-9、COX-2mRNA表达的影响 被引量:6
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作者 张谦 罗苏明 +5 位作者 韩振魁 斯坎德尔·努尔买买提 刘江伟 刘妍芳 李鹏 郑建忠 《中国医师杂志》 CAS 2013年第2期170-173,共4页
目的研究姜黄素在体外对人胃癌细胞BGC-823生长增殖的影响及其抗肿瘤的相关分子机制。方法体外培养人胃癌BGC-823,MTr法检测姜黄素在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算Ic蚰值;RT-PCR法检测其对COX-2、MMP-9mRNA表... 目的研究姜黄素在体外对人胃癌细胞BGC-823生长增殖的影响及其抗肿瘤的相关分子机制。方法体外培养人胃癌BGC-823,MTr法检测姜黄素在相同浓度下,不同时间对于胃癌细胞增殖的影响,并计算Ic蚰值;RT-PCR法检测其对COX-2、MMP-9mRNA表达的影响。结果MTlr结果显示:相同干预浓度姜黄素抑制人胃癌细胞增殖,其24、48、72h的IC50分别为:(62.192±7.802)μmol/L、(46.365±8.991)μmol/L和(45.503±9.126)μmol/L;Rt—PCR结果显示:正常对照组及姜黄素干预组的人胃癌细胞BGC-823MMP-9mRNA灰度值分别为:0.704±0.045,0.147±0.052(P〈0.05);COX-2mRNA灰度值分别为:0.721±0.060,0.190±0.027(P〈0.05)。结论姜黄素抗肿瘤机制可能通过抑制COX-2及MMP-9mRNA的表达来抑制胃癌细胞增殖。 展开更多
关键词 姜黄素 药理学 胃肿瘤 病理学 肿瘤细胞 培养的 药物作用 细胞增殖 药物作用 基质金属蛋白酶9 生物合成 基质金属蛋白酶9 遗传学 前列腺素内过氧化物合酶类 遗传学 莆百IfH自軎rh上f盎f 0腩r厶蔺箭桨 冉t ‰厶d}
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3-溴丙酮酸对人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞迁移和侵袭能力的影响 被引量:4
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作者 于敬坤 陈俊卯 +3 位作者 孙雅涵 何玛莉 张琪 王长友 《实用肿瘤杂志》 CAS 2020年第3期210-216,共7页
目的观察3-溴丙酮酸对体外人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法分别用含0、20、40、60、80、100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h后,MTT检测细胞增殖... 目的观察3-溴丙酮酸对体外人乳头瘤状甲状腺癌TPC-1细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及其相关机制。方法分别用含0、20、40、60、80、100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h后,MTT检测细胞增殖活性。含0、100和200μmol/L 3-溴丙酮酸的细胞培养液培养TPC-1细胞24 h或48 h后,划痕实验及transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力,Western blot检测基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase 2,MMP-2)、MMP-9、人源葡萄糖转运蛋白1(glucose transporter 1,Glut1)和Ⅰ型膜型基质金属蛋白酶(membrane-type 1 matrix metalloproteinase,MT1-MMP)的表达水平。结果100、120、140、160、180和200μmol/L 3-溴丙酮酸均抑制TPC-1细胞的增殖活性,呈剂量依赖性(均P<0.01)。3-溴丙酮酸作用于TPC-1细胞24和48 h,随着药物浓度的增高,TPC-1细胞迁移越慢,侵袭细胞越少(均P<0.05)。3-溴丙酮酸作用于TPC-1细胞24和48 h,TPC-1细胞内Glut1、MT1-MMP、MMP-2和MMP-9表达水平均随药物浓度增高而减弱(均P<0.05)。结论3-溴丙酮酸可抑制TPC-1细胞的增殖、迁移及侵袭能力,并可能与下调Glut1、MT1-MMP、MMP-2和MMP-9蛋白表达有关。 展开更多
关键词 甲状腺肿瘤/病理学 腺癌 乳头状/病理学 丙酮酸/药理学 细胞增殖/药物作用 细胞运动/药物作用 肿瘤侵润/药物作用 葡萄糖转运蛋白质类 易化性 基质金属蛋白酶-9 信号传导 肿瘤细胞 培养的
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纳米银对人肺癌A549细胞增殖的影响及其作用机制 被引量:4
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作者 潘晓芳 尹红英 《实用肿瘤杂志》 CAS 2014年第2期148-152,共5页
目的探讨纳米银对人肺癌A549细胞毒性的影响及其作用机制。方法通过显微镜观察纳米银对A549细胞形态的变化。MTT法检测不同浓度纳米银对A549细胞增殖的影响。流式细胞仪检测纳米银对A549细胞周期阻滞的影响。Western blot和免疫组织化... 目的探讨纳米银对人肺癌A549细胞毒性的影响及其作用机制。方法通过显微镜观察纳米银对A549细胞形态的变化。MTT法检测不同浓度纳米银对A549细胞增殖的影响。流式细胞仪检测纳米银对A549细胞周期阻滞的影响。Western blot和免疫组织化学法检测纳米银对A549细胞凋亡蛋白表达的影响。结果与对照组比较,随着纳米银药物浓度的增加,A549细胞抑制率显著增加,其半数抑制率为(74.23±4.17)mg/L。纳米银作用于A549细胞G2/M期,纳米银中、高浓度明显上调细胞周期调控p21、p53基因的表达;纳米银可抑制Bcl-2蛋白的表达,对caspase-3有活化作用。结论体外细胞实验证实,纳米银通过抑制A549细胞G2/M期,使p21、p53基因表达紊乱,诱导凋亡因子表达,通过多靶点作用抑制细胞生长。 展开更多
关键词 细胞系 肿瘤 病理学 纳米结构 治疗应用 治疗应用 细胞增殖 药物作用 细胞凋亡 G2期
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褪黑素联合全反式维甲酸对NB4细胞株的影响 被引量:2
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作者 刘沁华 夏瑞祥 李嘉嘉 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第4期484-487,共4页
目的观察褪黑素(MLT)联合全反式维甲酸(AT-RA)对人早幼粒细胞白血病细胞株NB4的增殖、凋亡、分化及细胞周期的影响。方法 1mmol/L的MLT与1μmol/LATRA联合作用于NB4细胞,1mmol/L的MLT和1μmol/LATRA作为对照组,药物作用24、48、72h后进... 目的观察褪黑素(MLT)联合全反式维甲酸(AT-RA)对人早幼粒细胞白血病细胞株NB4的增殖、凋亡、分化及细胞周期的影响。方法 1mmol/L的MLT与1μmol/LATRA联合作用于NB4细胞,1mmol/L的MLT和1μmol/LATRA作为对照组,药物作用24、48、72h后进行试验。流式细胞术检测细胞凋亡率、细胞膜表面抗原CD11b的表达阳性率,观察细胞周期的变化情况。结果 MLT联合ATRA作用于NB4细胞24、48、72h后,促进细胞的凋亡率为16·23%±0·38%、31·03%±0·51%和55·65%±2·68%,细胞表面CD11b的阳性率为22·66%±0·36%、57·31%±3·12%和81·74%±0·47%,对细胞周期的影响则表现为G1期细胞增多(68·1%±0·3%、73·3%±0·4%和83·2%±0·2%),S期细胞减少(23·1%±0·1%、23·2%±0·5%和8·2%±0·1%),均优于单用MLT组或ATRA组(P<0·05)。结论 MLT和ATRA联合用药的作用优于单用药。 展开更多
关键词 褪黑激素/药理学 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用 细胞分化/药物作用 细胞周期/药物作用
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MicroRNA-21靶向PDCD4对胃癌细胞增殖及凋亡的影响 被引量:4
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作者 许庆文 周才进 +2 位作者 鲁珏 刘春安 徐飞鹏 《实用肿瘤杂志》 CAS 2013年第6期592-596,共5页
目的探讨MicroRNA-21对胃癌细胞中PDCD4表达、细胞增殖与凋亡的影响。方法将MGC-803人胃癌细胞分为5组,分别为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染不相关siRNA)、mir 21组(转染miRNA-21质粒)、mir 21 Inhibitor组(转染miRNA-21抑制物)... 目的探讨MicroRNA-21对胃癌细胞中PDCD4表达、细胞增殖与凋亡的影响。方法将MGC-803人胃癌细胞分为5组,分别为空白对照组(不转染)、阴性对照组(转染不相关siRNA)、mir 21组(转染miRNA-21质粒)、mir 21 Inhibitor组(转染miRNA-21抑制物)、PDCD4 siRNA组(转染PDCD4 siRNA)。分别于转染后36、48、72小时收集细胞,采用实时定量PCR及细胞爬片免疫组织化学检测细胞中PDCD4基因及蛋白水平,运用MTS法检测细胞增殖情况,流式细胞仪检测细胞凋亡。结果与空白、阴性对照组比较,mir 21组PDCD4表达量下降,细胞增殖能力增强(均P<0.05);mir 21 Inhibitor组PDCD4表达量增多(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.01),细胞总凋亡比例增高(P<0.05);PDCD4 siRNA组PDCD4表达几乎完全被抑制,细胞增殖能力增强(均P<0.01),36小时时细胞总凋亡比例减少(P<0.05)。而阴性和空白对照组比较,细胞PDCD4表达量、细胞增殖与凋亡都无明显差异(P>0.05)。结论 MicroRNA-21能靶向调控PDCD4,抑制胃癌细胞MicroRNA-21的表达后可上调PDCD4表达,发挥抑制细胞增殖并诱导细胞凋亡的作用。 展开更多
关键词 胃肿瘤 病理学 微RNAS 药理学 细胞增殖 药物作用 细胞凋亡 免疫组织化学 基因表达
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阿比特龙联合恩度对人激素敏感性前列腺癌细胞增殖及VEGF-A和PSA水平的影响 被引量:3
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作者 于鹏途 蒋葵 《实用肿瘤杂志》 CAS 2019年第5期417-423,共7页
目的探讨阿比特龙联合恩度对前列腺癌LNCaP细胞增殖及培养液上清中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)及前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)水平的影响。方法将体外培养的LNCaP细胞分为无... 目的探讨阿比特龙联合恩度对前列腺癌LNCaP细胞增殖及培养液上清中血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)及前列腺特异性抗原(prostate specific antigen,PSA)水平的影响。方法将体外培养的LNCaP细胞分为无药物干预的对照组及不同浓度阿比特龙(0.1、1、10和100μmol/L)、恩度(0.1、1、10及100μL/mL)单药和10μmol/L阿比特龙联合10μL/mL恩度组。应用噻唑蓝比色法检测药物对LNCaP细胞的增殖抑制情况,酶联免疫吸附(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)检测阿比特龙、恩度单药及联合组LNCaP细胞培养液上清中VEGF-A及PSA的水平。结果与对照组比较,作用48 h后10、100μmol/L阿比特龙与10、100μL/mL恩度单药对LNCaP细胞的增殖均具有抑制作用(均P<0.05),呈浓度依赖性;10μmol/L阿比特龙联合10μL/mL恩度组较10μmol/L阿比特龙组及10μL/mL恩度组对LNCaP细胞的增殖抑制作用更强(均P<0.05);与对照组比较,作用48 h后10、100μmol/L阿比特龙与10、100μL/mL恩度单药干预LNCaP细胞后,培养液上清中VEGF-A水平均降低(均P<0.05);与对照组比较,作用48 h后1、10、100μmol/L阿比特龙与10、100μL/mL恩度单药干预LNCaP细胞后,培养液上清中PSA水平均降低(均P<0.05),其抑制效应均呈浓度依赖性。结论阿比特龙及恩度对LNCaP细胞增殖具有抑制作用,呈浓度依赖性,且两药联合对细胞增殖抑制作用更强。阿比特龙及恩度对LNCaP细胞分泌VEGF-A及PSA均具有抑制作用,呈浓度依赖性。 展开更多
关键词 前列腺肿瘤/病理学 前列腺肿瘤/药物疗法 细胞增殖/药物作用 内皮抑素类/投药和剂量 血管生成诱导剂 血管抑制素类/投药和剂量 血管内皮生长因子A/代谢 前列腺特异抗原/代谢 肿瘤细胞 培养的/药物作用
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奈达铂联合顺铂对人食管癌细胞株(Eca-109)抑制作用机制的研究 被引量:3
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作者 苏翔宇 李苏宜 刘琳 《实用肿瘤杂志》 CAS 北大核心 2010年第2期150-155,共6页
目的研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的... 目的研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法采用MTT法检测NDP联合DDP对Eca-109细胞的增殖抑制率,中效原理法判断联合用药的相互作用;采用RT-PCR和蛋白印迹法分析Ki-67及Bax表达的变化。结果NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50(NDP)+1/2IC50(DDP)对Eca-109细胞的抑制率分别为(41.9±4.1)%、(47.4±2.9)%和(52.5±0.9)%;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67基因(蛋白)表达显著降低,而Bax基因(蛋白)表达显著增高。结论1/2IC50浓度NDP和DDP联合应用与两药IC50浓度单独应用相比,对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。 展开更多
关键词 食管肿瘤/药物疗法 顺铂/投药和剂量 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用 有机铂化合物/治疗应用 抗肿瘤联合化疗方案/治疗应用
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二烯丙基二硫对人胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响 被引量:3
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作者 汪雪菁 向姝霖 +1 位作者 唐海林 苏琦 《实用肿瘤杂志》 CAS 2014年第2期126-132,共7页
目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人恶性胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用MTT法、流式细胞术等方法检测DADS对U251细胞的增殖抑制及细胞周期的影响。免疫细胞化学、qRT-PCR与Western blot检测cyclin B1与c-... 目的研究二烯丙基二硫(diallyl disulfide,DADS)对人恶性胶质瘤U251细胞增殖及细胞周期的影响。方法采用MTT法、流式细胞术等方法检测DADS对U251细胞的增殖抑制及细胞周期的影响。免疫细胞化学、qRT-PCR与Western blot检测cyclin B1与c-Myc表达。结果 MTT法显示,15、30、45、60 mg/L DADS处理U251细胞48小时后,生长抑制率分别为22.0%、38.8%、49.2%、55.3%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。流式细胞术结果显示,15、30、45、60 mg/L DADS作用U251细胞48小时后,G2/M期细胞分别为(14.1±1.2)%、(25.0±0.6)%、(41.2±1.4)%、(53.5±3.3)%,较对照组(9.6±0.9)%差异具有统计学意义(P<0.05)。免疫细胞化学显示,45 mg/L DADS处理U251细胞48小时后,cyclin B1与c-Myc蛋白平均光密度值分别从0.52±0.09、0.56±0.08显著下降至0.23±0.02、0.39±0.04(P<0.05)。qRT-PCR结果显示,cyclin B1与c-Myc mRNA表达分别下调42.0%与63.0%(P<0.05)。Western blot结果显示,cyclin B1、c-Myc蛋白与β-actin的平均灰度值比分别为1.12±0.14与1.20±0.15,明显低于对照组1.74±0.15与2.23±0.19(P<0.05)。结论 DADS可明显抑制恶性胶质瘤U251细胞增殖与阻滞G2/M期,机制与下调cyclin B1、c-Myc有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 病理学 二硫化物类 药理学 烯丙化合物 药理学 细胞周期 药物作用 G2期 流式细胞术
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Evn-50对人乳腺癌MCF-7耐三苯氧胺细胞株生长和凋亡的影响 被引量:3
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作者 胡会永 周俊 +5 位作者 万芳 董力枫 张峰 王一刻 陈芳芳 陈益定 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期498-505,共8页
目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制。方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μm... 目的:通过研究黄荆子的乙酸乙酯提取物Evn-50在体外对人乳腺癌MCF-7和耐三苯氧胺细胞株(MCF-7/TAM-R)的生长和凋亡的影响,探索Evn-50在逆转乳腺癌耐药中的作用及其可能机制。方法:构建MCF-7/TAM-R细胞系,分别用DMSO、5μmol/L TAM、5μmol/L TAM+50μg/ml Evn-50和50μg/ml Evn-50处理细胞。然后,采用MTT法测定细胞存活率,PI单染流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞周期分布情况,免疫蛋白印记法观察Evn-50和TAM单独或联合作用时的机制。结果:Evn-50单药或与TAM联合均可以降低人乳腺癌MCF-7和三苯氧胺耐药细胞株MCF-7/TAM-R的存活率,两药联合作用更为明显,同单用TAM组相比差异有统计学意义(P<0.01)。Evn-50单药或与TAM联合应用对两株细胞的凋亡均有明显影响,且随着作用时间的延长细胞凋亡逐渐增多,其中以72 h时细胞凋亡率和G2期细胞比例最为明显(P<0.01)。TAM和Evn-50联合处理无论是对MCF-7细胞还是对三苯氧胺耐药细胞MCF-7/TAM-R,均能明显下调p-AKT(Ser473)和p-MAPK44/42(Thr202/Tyr204)蛋白水平。结论:Evn-50能够抑制MCF-7和MCF-7/TAM-R细胞株的生长并诱导细胞凋亡,尤其在Evn-50与TAM联合处理时更为明显。其作用机制可能与AKT和MAPK信号通路的下调相关,但需要进一步研究证实。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理学 乳腺肿瘤/中药疗法 Evn-50/药理学 牡荆属 植物提取物/药理学 细胞增殖/药物作用 细胞凋亡/药物作用 肿瘤细胞 培养的
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姜黄素对兔视网膜色素上皮细胞增生的抑制作用 被引量:3
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作者 安建斌 马景学 +4 位作者 高彦军 刘丹岩 盛梦怡 王红霞 刘丽娅 《中华眼底病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期38-42,共5页
目的探讨姜黄素对兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增生的抑制作用及其作用机制。方法选取第4代RPE细胞进行实验,分为姜黄素组和空白对照组,姜黄素组设10、15、20μg/ml 3个质量浓度。噻唑蓝比色(MTT)法检测姜黄素10、15、20μg/ml分... 目的探讨姜黄素对兔视网膜色素上皮(RPE)细胞增生的抑制作用及其作用机制。方法选取第4代RPE细胞进行实验,分为姜黄素组和空白对照组,姜黄素组设10、15、20μg/ml 3个质量浓度。噻唑蓝比色(MTT)法检测姜黄素10、15、20μg/ml分别在24、48、72、96h对体外培养的RPE细胞增生的抑制率。线性回归分析计算各时间段的半数抑制率(IC50)剂量。流式细胞仪(FMC)检测姜黄素15μg/ml作用72h后对RPE细胞周期的影响,并且检测姜黄素15μg/ml作用24、48、72h后RPE细胞增生细胞核抗原(PCNA)的表达量和凋亡率。透射电子显微镜进行RPE细胞形态学检测。结果姜黄素24、48、72、96h的IC50分别是29.31、17.50、13.24、10.99μg/ml。姜黄素使RPE细胞阻滞在G0/G1期。姜黄素15μg/ml作用24、48、72h后,RPE细胞的PCNA表达量分别为(565.04±23.60),(473.61±36.88),(396.15±32.45),凋亡率分别为(12.83±0.13)%,(32.27±4.51)%,(56.81±8.67)%,各浓度组与对照组相比,差异均有统计学意义(P〈0.05)。透射电子显微镜显示RPE细胞出现凋亡特征。结论姜黄素可以影响RPE细胞的PCNA合成,诱导其凋亡,从而有效抑制RPE细胞增生。姜黄素有望成为一种有效的防治PVR的天然药物。 展开更多
关键词 姜黄素/投药和剂量 色素上皮 细胞增殖/药物作用 玻璃体视网膜病 增生性/药物疗法 动物实验
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半枝莲不同极性提取物对人胚肾细胞体外活性的影响 被引量:3
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作者 汪维佳 李照 +4 位作者 华育晖 王向军 吴梦瑶 高飞 侯桂兰 《实用肿瘤杂志》 CAS 2016年第3期228-231,共4页
目的观察抗肿瘤中药半枝莲不同极性提取物对人胚胎肾脏细胞体外活性的影响。方法分别提取半枝莲的水、乙醇、甲醇、乙酸乙酯和正丁醇等5种提取物,用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测不同极性提取物的成... 目的观察抗肿瘤中药半枝莲不同极性提取物对人胚胎肾脏细胞体外活性的影响。方法分别提取半枝莲的水、乙醇、甲醇、乙酸乙酯和正丁醇等5种提取物,用高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)检测不同极性提取物的成分差异,用MTT法测定半枝莲不同极性提取物对人胚胎肾脏细胞HEK293增殖的影响。结果半枝莲不同极性提取物组成呈现明显差异,乙醇提取物与甲醇提取物的组成较为相似,而正丁醇提取物与乙酸乙酯提取物较为相似,水提取物则与其他提取物均存在较大差异。细胞活性试验表明,水、乙酸乙酯和正丁醇提取物(0.01、0.1、1、20 g/L)培养48小时后对HEK293的体外增殖无明显影响,而用浓度为0.01、0.1、1、20g/L的甲醇提取物和0.1、1、20 g/L的乙醇提取物培养48小时后对细胞增殖则呈现一定程度的抑制(均P<0.05)。结论本研究提示,抗肿瘤中药半枝莲的水、乙酸乙酯和正丁醇提取物对肾细胞活性无影响,而甲醇和乙醇提取物存在细胞活性抑制现象。 展开更多
关键词 肿瘤 半枝莲/药理学 中草药/治疗应用 高效液相色谱 细胞增殖/药物作用 肾/细胞学 细胞系
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多西环素对小细胞肺癌H446细胞增殖及HIF表达的影响 被引量:2
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作者 喻雄杰 李艳丽 +3 位作者 雷金华 俞远东 狄全书 曹凤军 《实用肿瘤杂志》 CAS 2016年第3期237-242,共6页
目的探讨多西环素对小细胞肺癌H446细胞增殖及HIF-1α和HIF-2α表达的影响。方法采用MTT法检测多西环素对H446细胞增殖抑制作用。采用倒置相差光学显微镜观察多西环素对细胞凋亡形态的影响。通过流式细胞仪合并Cell Fit软件对细胞周期... 目的探讨多西环素对小细胞肺癌H446细胞增殖及HIF-1α和HIF-2α表达的影响。方法采用MTT法检测多西环素对H446细胞增殖抑制作用。采用倒置相差光学显微镜观察多西环素对细胞凋亡形态的影响。通过流式细胞仪合并Cell Fit软件对细胞周期分布进行分析,采用Annexin V-FITC荧光染色检测细胞凋亡率。采用细胞健康分析软件检测细胞内线粒体膜电位。实时荧光定量PCR检测HIF-1α和HIF-2α表达。Western blot法检测凋亡相关蛋白表达。结果多西环素(2.5、5、10、20、40、80 mg/L作用24或48小时)呈剂量-时间依赖性抑制H446细胞增殖。经光学显微镜可明显观察到多西环素能导致H446细胞凋亡,呈时间-剂量依赖性。流式细胞仪结果显示,10、20、40 mg/L多西环素作用48小时能阻滞H446细胞周期S期,并且随着细胞凋亡率增加,呈剂量依赖性。浓度为10、20、40 mg/L多西环素作用48小时的细胞线粒体膜电位低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);经10、20、40 mg/L多西环素作用48小时的细胞HIF-1α、HIF-2αmRNA表达均低于对照组(均P<0.05),HIF-1α、HIF-2α蛋白表达量低于对照组,且HIF-1α和HIF-2α变化趋势均相同,随着多西环素浓度增加、表达量降低(P<0.05)。结论多西环素对小细胞肺癌H446细胞具有增殖抑制作用,且呈剂量-时间依赖性,可阻滞细胞于S期,降低线粒体膜电位,下调HIF-1α、和HIF-2α蛋白表达,且伴随有H446细胞凋亡的现象。 展开更多
关键词 肺肿瘤/药物疗法 细胞系 肿瘤 多西环素/药理学 细胞增殖/药物作用 缺氧诱导因子1 α亚基/药物作用 细胞凋亡 基因表达
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BDNF AS对肝癌细胞增殖和迁移能力的影响 被引量:2
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作者 郭大伟 周品一 +3 位作者 赵旭鹏 初晨 江宏伟 周勇 《实用肿瘤杂志》 CAS 2018年第2期116-121,共6页
目的探讨脑源性神经营养因子反义长链非编码RNA(brain-derived neurotrophic factor antisense long noncoding RNA,BDNF AS)对人肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用BDNF AS过表达质粒及空载体瞬时转染肝癌细胞株HepG2和MHCC 97-H... 目的探讨脑源性神经营养因子反义长链非编码RNA(brain-derived neurotrophic factor antisense long noncoding RNA,BDNF AS)对人肝癌细胞增殖和迁移能力的影响。方法采用BDNF AS过表达质粒及空载体瞬时转染肝癌细胞株HepG2和MHCC 97-H,采用实时PCR方法检测BDNF AS在肝癌细胞中的表达水平,采用3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium(MTS)方法检测细胞增殖情况,采用碘化丙啶(propidium iodide,PI)染色流式细胞术检测细胞周期变化,采用划痕实验和transwell小室评价细胞迁移能力的变化。结果 HepG2和MHCC 97-H细胞转染BDNF AS过表达质粒后BDNF AS和mRNA表达均上调(均P<0.01)。转染第4天,细胞增殖均受到抑制(均P<0.05)。转染48 h后,HepG2和MHCC 97-H细胞均出现S期阻滞(均P<0.01),细胞的迁移能力均下降(均P<0.01)。结论 BDNF AS过表达抑制肝癌细胞的增殖和迁移,可能对肝癌细胞的生长运动具有重要的负性调控作用。 展开更多
关键词 肝细胞/病理学 肝肿瘤/病理学 脑源性神经营养因子/药理学 细胞增殖/药物作用 细胞运动/药物作用 肿瘤侵润 RNA 信使/生物合成 RNA 信使/遗传学 细胞系 肿瘤
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谷氨酸对视神经脑膜上皮细胞的兴奋性毒性作用及其氧化应激机制 被引量:3
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作者 辛晓蓉 巩天祥 +1 位作者 洪缨 党鸿 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期432-437,共6页
背景作为脑脊液-视神经屏障的主要细胞成分,视神经脑膜上皮细胞(MECs)直接与脑脊液相接触,脑脊液中的组分改变可影响MECs的功能,进而对视神经的功能产生不利影响。 目的探讨脑脊液中兴奋性神经递质谷氨酸对MECs功能的影响,为视... 背景作为脑脊液-视神经屏障的主要细胞成分,视神经脑膜上皮细胞(MECs)直接与脑脊液相接触,脑脊液中的组分改变可影响MECs的功能,进而对视神经的功能产生不利影响。 目的探讨脑脊液中兴奋性神经递质谷氨酸对MECs功能的影响,为视神经疾病发病机制的研究提供新的线索。方法将培养的人MECs株制备成悬液并接种于96孔培养板中,密度为1×104/孔,分别在培养液中用添加100、200、400、600、800和1 000 μmol/L谷氨酸孵育12、24、36、48和72 h,未添加谷氨酸者作为正常对照组,采用MTS法测定各组MECs的增生率(吸光度A490)值。采用600 μmol/L谷氨酸分别孵育MECs 24 h和48 h,未添加谷氨酸者作为正常对照组,采用实时定量PCR法检测细胞中超氧化物歧化酶(SOD)mRNA和热休克蛋白90(HSP90)mRNA的相对表达量;采用ELISA法检测细胞的总抗氧化能力(T-AOC),并通过荧光探针DCFH-DA观察细胞活性氧(ROS)的荧光强度。结果培养MECs生长良好,培养后72 h约80%细胞达到融合。不同浓度谷氨酸培养组随着谷氨酸浓度的增加及作用时间的延长细胞增生率逐渐下降,总体比较差异均有统计学意义(F浓度=52.501,P〈0.001;F时间=8.505,P〈0.001)。实验后24 h和48 h谷氨酸处理组细胞中SOD mRNA相对表达量均明显低于同时间点正常对照组,差异均有统计学意义(t=20.278、t=16.724,均P〈0.001);谷氨酸作用MECs后24 h细胞中HSP90 mRNA相对表达量明显高于正常对照组,差异有统计学意义(t=5.065,P=0.002)。实验后24 h谷氨酸处理组细胞中T-AOC活性为(30.835±2.094)nmol/(min·L),低于正常对照组的(32.873±2.317)nmol/(min·L),但差异无统计学意义(t=1.599,P=1.414);实验后48 h谷氨酸处理组细胞中T-AOC活性为(29.561±1.831)nmol/(min·L),低于正常对照组的(33.680±2.039)nmol/(min·L 展开更多
关键词 谷氨酸 脑膜上皮细胞 视神经 氧化应激反应 兴奋性氨基酸/毒性作用 细胞增生/药物作用 培养细胞
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