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psiRNA—hHDEK的构建及其对CasKi细胞生物学特性影响的研究
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作者 刘岿然 杨雨 +1 位作者 赵敏 张淑兰 《中国医师杂志》 CAS 2011年第1期19-22,共4页
目的观察DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡、衰老的影响，为探索防治人类宫颈癌的新方法提供依据。方法根据siRNA设计原则和Genebank中DEK核苷酸序列，利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA，克隆至siRNA真核... 目的观察DEK基因沉默对宫颈癌CaSki细胞增殖、细胞周期及凋亡、衰老的影响，为探索防治人类宫颈癌的新方法提供依据。方法根据siRNA设计原则和Genebank中DEK核苷酸序列，利用软件设计出针对DEK位点的特异性小干扰RNA，克隆至siRNA真核表达载体psiRNA-hHlneo中，应用脂质体介导重组质粒转染宫颈癌CaSki细胞株，用RT-PCR和Western blot检测转染后DEKmRNA和蛋白表达，转染后48hMTr法检测细胞增殖、流式细胞仪检测细胞凋亡和细胞周期改变、SA-β-半乳糖苷酶细胞化学染色鉴定细胞衰老。结果转染质粒psiRNA—hHDEK组DEKm RNA及蛋白的表达明显减少（0．28±0．02），DEK基因沉默后CaSki细胞增殖能力下降，细胞周期阻抑，细胞凋亡率增加，衰老细胞增多。结论成功构建表达DEK siRNA的真核表达质粒psiRNA-hHDEK，并能够有效沉默CaSki细胞中DEK基因表达。DEK基因沉默后能够诱导CaSki细胞凋亡和细胞衰老。DEK基因在宫颈癌发生和演变中发挥重要作用，其既是衰老抑制基因，又是凋亡抑制基因。 展开更多
关键词 癌基因 基因沉默 RNA干扰 宫颈肿瘤/病理学 细胞增殖 细胞凋亡 细胞周期
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