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肿瘤细胞恶性增殖和细胞周期调控改变的分子机制 被引量:17
1
作者 马晓方 杜晓光 +1 位作者 辛现良 耿美玉 《现代生物医学进展》 CAS 2009年第5期950-953,共4页
真核细胞通过复杂的细胞周期调控系统控制细胞的分裂,从而维持有机体的正常代谢和增殖。细胞周期的调控是由一系列重要的信号分子和周期蛋白家族来完成的,这些调节因子发生突变或者表达水平发生改变,将导致细胞周期调控的改变,使细胞增... 真核细胞通过复杂的细胞周期调控系统控制细胞的分裂,从而维持有机体的正常代谢和增殖。细胞周期的调控是由一系列重要的信号分子和周期蛋白家族来完成的,这些调节因子发生突变或者表达水平发生改变,将导致细胞周期调控的改变,使细胞增殖能力增强、分化减弱,丧失细胞原有的功能,最终发展成肿瘤细胞。因此细胞周期及其相关调控蛋白和信号机制成为抗肿瘤研究的热点。 展开更多
关键词 肿瘤 细胞周期 信号转导 周期调节蛋白
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支气管哮喘患者T淋巴细胞的细胞周期分布及周期调节蛋白表达的意义 被引量:6
2
作者 张宏美 邱晨 李富荣 《中华结核和呼吸杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第9期601-603,共3页
目的 通过检测T淋巴细胞的细胞周期分布及其细胞周期调节蛋白 (CCRP)的表达 ,探讨发作期支气管哮喘 (简称哮喘 )患者T淋巴细胞过度活化、增殖的调控机制。方法 采用碘化丙啶DNA染色法应用流式细胞仪分析 30例发作期哮喘患者 (哮喘组 )... 目的 通过检测T淋巴细胞的细胞周期分布及其细胞周期调节蛋白 (CCRP)的表达 ,探讨发作期支气管哮喘 (简称哮喘 )患者T淋巴细胞过度活化、增殖的调控机制。方法 采用碘化丙啶DNA染色法应用流式细胞仪分析 30例发作期哮喘患者 (哮喘组 )及 2 0名正常人 (正常组 )外周血T淋巴细胞的细胞周期分布 ;采用间接免疫荧光法 ,应用流式细胞仪同步测定相应T淋巴细胞内CCRP、依赖激酶抑制蛋白 (P2 7kipl)、细胞周期蛋白E(cyclinE)、cyclinA、cyclinB的表达水平。比较哮喘患者和正常人上述指标的差异。结果 哮喘组S期、S +G2 /M期的T淋巴细胞百分率分别为 (18± 9) %和(2 5± 10 ) % ,对照组分别为 (5± 4 ) %、(11± 6 ) % ,两组比较差异有显著性 (P均 <0 0 1) ;哮喘组G0 /G1期的T淋巴细胞百分率为 (76± 10 ) % ,对照组为 (90± 6 ) % ,两组比较差异有显著性 (P <0 0 1)。哮喘组T淋巴细胞内P2 7kipl的表达水平为 (4 0± 2 4 ) % ,对照组为 (6 7± 4 8) % ,两组比较差异有显著性(P <0 0 5 ) ;哮喘组cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达水平分别为 (2 5± 2 4 ) %、(9± 7) %、(6 4± 5 9) % ,对照组分别为 (6± 5 ) %、(4± 4 ) %、(3 4± 1 6 ) % ,两组比较差异均有显著性 (P均 <0 0 1)。结论 T淋巴细胞? 展开更多
关键词 T淋巴细胞 哮喘患者 对照组 细胞周期分布 发作期 支气管哮喘 表达水平 步测 显著性 差异
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软肝冲剂对肝硬化大鼠p^(21)及细胞周期调控的影响 被引量:9
3
作者 周小舟 程井军 +5 位作者 周大桥 贺劲松 漆艳平 吴娈灵 高辉 饶伟良 《中西医结合肝病杂志》 CAS 2003年第1期25-28,共4页
目的:研究软肝冲剂对CCl_4肝硬化大鼠p^(21)mRNA表达及细胞周期各时相DNA含量的影响,从mRNA、DNA水平探讨软肝冲剂阻止肝硬化的作用机理。方法:采用RT-PCR及流式细胞计数仪分别检测CCl_4肝硬化大鼠P^(21)mRNA表达、DNA含量。结果:软肝... 目的:研究软肝冲剂对CCl_4肝硬化大鼠p^(21)mRNA表达及细胞周期各时相DNA含量的影响,从mRNA、DNA水平探讨软肝冲剂阻止肝硬化的作用机理。方法:采用RT-PCR及流式细胞计数仪分别检测CCl_4肝硬化大鼠P^(21)mRNA表达、DNA含量。结果:软肝冲剂能降低CCl_4肝硬化大鼠p^(21)mRNA表达,与模型组比较差异有显著性意义(P<0.01),大剂量组的疗效与小剂量组比较无明显差异(P>0.05)。正常肝组织p^(21)mRNA呈相当低水平表达,其表达相对值为(0.17±0.06)U。定量DNA图像分析发现模型组中处于G1期的细胞数要明显多于其他各组(P<0.01),软肝冲剂大剂量组中处于G1期的细胞数要明显少于软肝冲剂小剂量组(P<0.01)。结论:软肝冲剂能调节p^(21)基因表达,调节细胞周期,促进肝细胞再生,抑制肝纤维化、肝硬化的形成。 展开更多
关键词 肝硬化 软肝冲剂 药效学 细胞周期 细胞周期调控蛋白质类 在医药疗法
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槲皮素对糖尿病肾病大鼠的肾小球周期素激酶抑制剂P27水平的影响 被引量:5
4
作者 梅小斌 崔若兰 +3 位作者 袁伟杰 叶志斌 湛冯兰 高从容 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期1208-1210,共3页
目的:探讨槲皮素对糖尿病肾病的影响及该影响与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型,分别以生理盐水或槲皮素(100 mg·kg1·d-1)灌胃8周。蛋白印迹(Western杂交)法测定肾小球裂解液P2... 目的:探讨槲皮素对糖尿病肾病的影响及该影响与肾小球周期素激酶抑制剂P27的关系。方法:腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病(DM)模型,分别以生理盐水或槲皮素(100 mg·kg1·d-1)灌胃8周。蛋白印迹(Western杂交)法测定肾小球裂解液P27蛋白水平,ELISA法测定肾小球裂解液细胞外基质(ECM)蛋白(Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白)和尿白蛋白。结果:DM 8周大鼠肾小球P27水平增高,ECM蛋白水平增加,尿白蛋白排泄增多,肾质量/体质量比值增高。槲皮素灌胃8周显著降低DM大鼠。肾小球P27水平(10.6±3.1 vs 18.5±4.3,P<0.01)和ECM蛋白水平,减少尿白蛋白排泄[(17.62±3.02)vs(39.62±3.68)μg/24 h,P<0.01],降低DM大鼠肾质量/体质量比值(11.35±1.76 vs 14.87±2.02,P<0.01)。槲皮素不改变DM大鼠血糖水平。结论:槲皮素可能通过降低肾小球P27水平改善糖尿病肾病症状。 展开更多
关键词 槲皮素 细胞周期蛋白类 周期素激酶抑制剂 糖尿病肾病
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Qufeng Tongluo Prescription(祛风通络方)Inhibits Mesangial Cell Proliferation and Promotes Apoptosis through Regulating Cell Cycle Progression 被引量:1
5
作者 吴喜利 安鹏 +5 位作者 叶冰玉 石兴民 孙万森 付荣国 王竹 乔成林 《Chinese Journal of Integrative Medicine》 SCIE CAS 2013年第12期927-934,共8页
Objective: To study the effects and possible underlying mechanism of Qufeng Tongluo Prescription (祛风通络方, QFTL) on the regulation of mesangial cells (MCs) proliferation and apoptosis. Methods: The MCs used i... Objective: To study the effects and possible underlying mechanism of Qufeng Tongluo Prescription (祛风通络方, QFTL) on the regulation of mesangial cells (MCs) proliferation and apoptosis. Methods: The MCs used in this experiment have undergone five passages induced by lipopolysaccharide (LPS). Changes in the proliferation, apoptosis, cell cycle regulatory proteins and mRNA expression levels of the MCs after administration of Benazepril or QFTL were measured by methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) reduction assay, flow cytometry, Western blot and quantitative real-time polymerase chain reaction (qRT-PCR), respectively. Results: The addition of Benazepril or QFTL serum inhibited LPS-induced MC proliferation after treatment for 24, 48 and 72 h, respectively (P〈0.05 or P〈0.01). Moreover, the inhibitory effect is more significant in the QFTL group at 48 h (P〈0.05). Compared with the control group, LPS-induced cell proliferation decreased the number of cells in G1 phase versus cells in S and G2/M phases, while the addition of QFTL and Benazepril serum increased the ratio of cells at G1 phase (P〈0.05 or P〈0.01) to cells at S phase (P〈0.01), implicating the cell cycle inhibition effect exerted by QFTL. LPS decreased the level of MC apoptosis, compared with the control group (P〈0.05), while QFTL and Benazepril serum increased the level of MC apoptosis (P〈0.01). Moreover, the difference between the QFTL group and the Benazepril group was statistically significant (P〈0.01). Compared with the control group, the protein and mRNA expression levels of cylinD1, cyclin dependent kinase 2 (CDK2) and p21 were significantly increased (P〈0.05 or P〈0.01), p27 was decreased but with no statistical significance (P〉0.05); After being treated with QFTL and Benazepril serum, the protein and mRNA expression levels of cylinD1, CDK2, p21 were decreased and p27 increased significantly (P〈0.05 or P〈0.01); Compared with the Benazepril group, QFTL 展开更多
关键词 Qufeng Tongluo Prescription mesangial cells cell proliferation cell apoptosis cell cycle cell cycle regulatory proteins
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肺表面活性物质对哮喘T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响 被引量:4
6
作者 张宏美 招强光 盛艳 《国际呼吸杂志》 2011年第3期165-168,共4页
目的观察肺表面活性物质(PS)对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4-、CD8-T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义。方法利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经P... 目的观察肺表面活性物质(PS)对发作期哮喘患者T细胞亚群细胞周期及其调节蛋白的影响,揭示PS对CD4-、CD8-T细胞增殖周期的具体作用机制及其在哮喘治疗中的意义。方法利用细胞培养技术,通过体外PS干预,流式细胞仪测定经PS干预和未经PS干预的CD4+、CD8+T细胞的细胞周期分布和CD4+、CD8+T细胞内细胞周期调节蛋白p27 kip1、cyclin E、cyclin A、cyclin B的表达水平。结果哮喘患者CD4+、CD8-T细胞分别与PS体外共同培养后,加PS组的S期、G2/M期的CD4+T比例显著低于对照组(P〈0.01);G0/G1期的CD4+T细胞比例显著高于对照组(P〈0.01)。加PS组的S期CD8+T比例显著低于对照组(P〈0.01);G2期的CD8+T细胞比例略低于对照组,但差异无统计学意义(P〉0.05);G0/G1期的CD8+T细胞比例高于对照组(P〈0.05)。CD4-T细胞内p27 kip1的表达水平高于对照组(P〈0.05);CD4+T细胞内cyclinE表达水平显著低于对照组(P〈0.01);CD4-T细胞内cyclinA、cyclinB的表达水平低于对照组(P〈0.05)。CD8+T细胞内p27 kip1的表达水平高于对照组(P〈0.05);CD8+T细胞内cyclinE、cyclinA表达水平低于对照组(P〈0.01);CD8+ T细胞内cyclinB的表达水平与对照组差异无统计学意义(P〉0.05)。结论PS通过抑制CD4+T细胞的正性细胞周期调节蛋白cyclinE、cyclinA、cyclinB的表达和上调其负性细胞周期调节蛋白p27 kip1的表达,抑制CD4+T细胞的DNA合成和细胞分裂,进而抑制CD4+T细胞增殖;通过下调CD8+T细胞内cyclinE、cyclinA的表达,上调p27kip1的表达,抑制CD8T细胞DNA合成。 展开更多
关键词 哮喘 肺表面活性物质 T细胞亚群 细胞周期 细胞周期调节蛋白
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庆大霉素诱导肾小管上皮细胞凋亡及细胞周期调节蛋白表达 被引量:3
7
作者 傅鹏 袁伟杰 +2 位作者 崔若兰 许静 于光 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1312-1315,共4页
目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cy-clin E、CDK_2和p27^(Kipl)蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系。方法:0.2~3.2 mg/ml的庆大霉素作... 目的:观察庆大霉素对体外培养的肾小管上皮细胞凋亡的诱导作用;研究在细胞凋亡过程中细胞周期调节蛋白cy-clin E、CDK_2和p27^(Kipl)蛋白表达的改变,并探讨细胞凋亡与细胞周期调节蛋白表达之间的关系。方法:0.2~3.2 mg/ml的庆大霉素作用于体外培养的猪肾近端小管上皮细胞株(LLC-PK1细胞)24~96 h,MTT法测定庆大霉素对细胞增殖的抑制率,琼脂糖凝胶电泳法观察凋亡细胞DNA条带,流式细胞术测定细胞凋亡率(AI)和细胞增殖动力学,Western印迹分析检测培养96 h时细胞内cyclin E、CDK_2和p27^(Kipl)的蛋白表达。结果:庆大霉素对LLC-PK1细胞增殖有抑制作用,庆大霉素具诱导细胞凋亡的作用,AI呈药物浓度和作用时间依赖性;庆大霉素致细胞周期停滞于G_1期。随着庆大霉素浓度的增加,细胞内cy-clin E和 CDK_2蛋白表达逐渐下调,而p27^(Kipl)蛋白表达则逐渐上调。结论:庆大霉素诱导的LLC-PK1细胞凋亡与细胞周期调节蛋白cyclin E和 CDK_2表达下调以及p27^(Kipl)表达上调有关。 展开更多
关键词 庆大霉素 肾小管上皮细胞 细胞周期调节蛋白 细胞凋亡 测定 肾毒性
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祛风通络方对肾小球系膜细胞周期蛋白表达的影响 被引量:3
8
作者 吴喜利 孙万森 +5 位作者 叶冰玉 安鹏 石兴民 傅荣国 王竹 乔成林 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1699-1703,共5页
目的通过不同检测方法观察祛风通络方对肾小球系膜细胞周期调节蛋白表达的影响,进一步探讨祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用机制。方法以体外培养肾小球系膜细胞为研究对象,应用血清药理学方法,分别采用激光扫描共聚焦显微镜及... 目的通过不同检测方法观察祛风通络方对肾小球系膜细胞周期调节蛋白表达的影响,进一步探讨祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用机制。方法以体外培养肾小球系膜细胞为研究对象,应用血清药理学方法,分别采用激光扫描共聚焦显微镜及免疫组化法检测各组大鼠肾小球系膜细胞周期蛋白的表达变化。结果与正常组比较,LPS组肾小球系膜细胞周期蛋白CyclinD1、CDK2、P21表达明显增强(P<0.01),P27蛋白表达明显减弱(P<0.01);经过药物干预治疗,肾小球系膜细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK2、P21的表达均有不同程度减弱(P<0.05或P<0.01),而P27蛋白表达明显增强(P<0.01),且祛风通络方对Cyclin D1、P21和P27蛋白表达的调节明显优于贝那普利(P<0.05或P<0.01)。结论祛风通络方抑制肾小球系膜细胞增殖的作用机制可能与其下调细胞周期蛋白Cyclin D1、CDK2、P21和上调P27蛋白的表达有密切关系。 展开更多
关键词 祛风通络方 系膜细胞 细胞周期调节蛋白 激光扫描共聚焦显微镜 免疫组化法
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蛋氨酸缺乏对雏鸡肝细胞周期的影响 被引量:2
9
作者 李灵珺 经鸿宇 +1 位作者 彭西 吴邦元 《西华师范大学学报(自然科学版)》 2020年第1期17-22,共6页
为了研究日粮蛋氨酸缺乏对雏鸡肝脏的细胞周期、细胞周期调控蛋白及基因的影响,本研究选用1日龄雌性雏鸡72只,随机分为对照组和蛋氨酸缺乏组,实验期为42 d。利用流式细胞术检测肝细胞周期变化、酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞周期调控蛋... 为了研究日粮蛋氨酸缺乏对雏鸡肝脏的细胞周期、细胞周期调控蛋白及基因的影响,本研究选用1日龄雌性雏鸡72只,随机分为对照组和蛋氨酸缺乏组,实验期为42 d。利用流式细胞术检测肝细胞周期变化、酶联免疫吸附法(ELISA)测定细胞周期调控蛋白(p53、p21、CyclinB、PCNA)的含量以及荧光定量聚合酶链式反应法(RTFQ-PCR)分析其基因表达变化。结果显示,相较于对照组,蛋氨酸缺乏组肝细胞G0G1期和S期百分比显著下降,而G2M期显著或极显著上升;p53和p21蛋白量显著或极显著上升趋势,CyclinB蛋白和PCNA蛋白量却显著或极显著下降;周期相关基因表达结果与蛋白一致。由此得出结论:蛋氨酸缺乏会导致肝细胞G2M期阻滞,使其增殖受抑制。 展开更多
关键词 蛋氨酸缺乏 肝脏 细胞周期 雏鸡 细胞周期调控蛋白
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p53在苯并[a]芘诱导所致p21和细胞周期蛋白改变中的作用 被引量:2
10
作者 张夏男 李跃纲 +2 位作者 贾效伟 刘秉慈 叶萌 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期193-197,共5页
目的探讨在苯并[a]芘(B[a]P)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中p53蛋白对p21、cyclin D1和CDK4蛋白间相互作用的影响。方法向转染p53小干扰RNA(p53siRNA)质粒的HELF细胞即p53-H细胞组、载体CMV的HELF细胞即HELF/CMV细胞组中分别加入2μmol... 目的探讨在苯并[a]芘(B[a]P)诱导的人胚肺成纤维细胞(HELF)中p53蛋白对p21、cyclin D1和CDK4蛋白间相互作用的影响。方法向转染p53小干扰RNA(p53siRNA)质粒的HELF细胞即p53-H细胞组、载体CMV的HELF细胞即HELF/CMV细胞组中分别加入2μmol/L B[a]P作用24 h,向p53化学抑制剂Pifithrin-α(PFT-α)组即HELF/CMV+PFT-α细胞组中同时加入2μmol/L B[a]P和20μmol/L PFT-α作用24 h,各组同时设立不做任何处理的对照组。用免疫印迹(Western blot)法检测细胞中p53、p53-ser20以及p21、cyclin D1和CDK4蛋白水平的变化,同时利用免疫沉淀方法分析p53蛋白对p21、cyclin D1以及CDK4蛋白间相互作用的影响。结果利用PFT-α或p53 siRNA技术抑制p53蛋白后,B[a]P诱导的p53蛋白20位丝氨酸磷酸化水平和p21蛋白水平的增高受抑制,B[a]P诱导的cyclin D1水平的增加不受影响,CDK4的水平不受B[a]P的影响;免疫沉淀实验结果表明,B[a]P引起的p21和CDK4结合的增加受到抑制,B[a]P引起的p21与cyclin D1结合的增加不受影响,cyclin D1和CDK4的结合不受B[a]P的影响。结论B[a]P通过p53-ser20影响人胚肺成纤维细胞p21和CDK4的结合。 展开更多
关键词 苯并[A]芘 P53 细胞周期调控蛋白 免疫沉淀
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洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏肥大及肾小球周期素激酶抑制剂P27的影响
11
作者 梅小斌 高从容 +6 位作者 邹大进 湛冯兰 叶志斌 许静 李保春 袁伟杰 崔若兰 《中国糖尿病杂志》 CAS CSCD 2003年第5期341-343,共3页
目的 探讨洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂P2 7水平的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型并分别给予生理盐水、洛沙坦1mg·kg-1·d-1或 2mg·kg-1·d-1灌胃 8周。We... 目的 探讨洛沙坦对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂P2 7水平的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型并分别给予生理盐水、洛沙坦1mg·kg-1·d-1或 2mg·kg-1·d-1灌胃 8周。Western杂交方法测定肾小球裂解液P2 7蛋白水平 ,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,采用图象分析系统测定肾小球面积。 结果 DM 8周大鼠肾重 /体重比例增高 ,肾小球面积增大 ,肾小球ECM蛋白水平增加 ,2 4h尿白蛋白排泄增多 ,同时肾小球P2 7水平增高。洛沙坦降低DM大鼠肾重 /体重比例、肾小球面积及肾小球ECM蛋白水平 ,减少 2 4h尿白蛋白排泄 ,降低肾小球P2 7水平。洛沙坦的上述作用随剂量的增加而增强。洛沙坦不改变DM大鼠血糖水平。 结论 洛沙坦可减轻DM大鼠肾小球肥大程度 ,此作用可能与洛沙坦降低DM大鼠肾小球P2 展开更多
关键词 洛沙坦 糖尿病 大鼠 肾脏肥大 肾小球 周期素激酶抑制剂 P27 细胞外基质 Western杂交法
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细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达及其与自然流产发生的相关性研究
12
作者 钟菊晴 李海霞 《临床与病理杂志》 2016年第8期1167-1170,共4页
目的:探讨细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达情况并研究其与自然流产发生的相关性。方法:选取符合研究要求的人工流产女性与自然流产女性各35例,分为人工流产组与自然流产组。利用Western blotting与免疫组... 目的:探讨细胞周期调节蛋白在早期自然流产患者绒毛和蜕膜组织中的表达情况并研究其与自然流产发生的相关性。方法:选取符合研究要求的人工流产女性与自然流产女性各35例,分为人工流产组与自然流产组。利用Western blotting与免疫组织化学法分别检测两组患者绒毛与蜕膜组织中细胞周期调节蛋白的表达情况。结果:人工流产组绒毛与蜕膜组织的细胞周期调节蛋白的表达量为75%~85%,自然流产组的表达量为45%~55%。人工流产组与自然流产组比较有统计学意义(P〈0.05)。结论:早期自然流产可能与细胞周期调节蛋白在绒毛与蜕膜组织中的含量相关。 展开更多
关键词 细胞周期调节蛋白 自然流产 蜕膜组织
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大鼠系膜细胞增殖时S期激酶相关蛋白2表达的变化及机制 被引量:1
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作者 刘书馨 常明 +2 位作者 刘焱 王志宏 付瑶 《中国中西医结合肾病杂志》 2009年第7期595-598,共4页
目的:探讨系膜细胞增殖时细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27kip1的降解限速蛋白——S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的变化及其机制。方法:原代培养的大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20%胎牛血清(FCS)刺激组。MTT法检测细胞增殖;实时定... 目的:探讨系膜细胞增殖时细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27kip1的降解限速蛋白——S期激酶相关蛋白2(Skp2)表达的变化及其机制。方法:原代培养的大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20%胎牛血清(FCS)刺激组。MTT法检测细胞增殖;实时定量PCR和Western Blot检测p27kip1和Skp2的mRNA、蛋白表达。结果:p27kip1在静止期系膜细胞高丰度表达,20%FCS刺激诱导细胞增殖后p27kip1蛋白表达显著下调;实时定量PCR研究结果显示p27kip1的mRNA表达水平差异无统计学差异,p27kip1蛋白和mRNA表达不一致。蛋白酶体抑制剂MG-132可显著改善系膜细胞增殖时p27kip1蛋白水平的下降。Skp2表达在静止期系膜细胞几乎检测不出,20%FCS刺激诱导细胞增殖后Skp2表达量显著上调。结论:系膜细胞Skp2表达显著上调导致p27kip1降解增加,可能是p27kip1蛋白水平下降、系膜细胞增殖的重要原因,为进一步阐明疾病状态下系膜细胞增殖的机制提供了新的研究靶点。 展开更多
关键词 系膜细胞 细胞周期调节蛋白 S期激酶相关蛋白2
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槲皮素降低肾小球周期素激酶抑制剂p27水平改善糖尿病肾病 被引量:11
14
作者 梅小斌 高从容 +5 位作者 崔若兰 袁伟杰 叶志斌 付鹏 李保春 于光 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期246-248,共3页
目的 探讨槲皮素改善糖尿病肾病与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分为DM +Qu组 ( 6只 )及DM组 ( 6只 ) ,分别给予槲皮素 10 0mg·kg-1·d-1及同体积的生理盐水灌胃 8周 ... 目的 探讨槲皮素改善糖尿病肾病与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分为DM +Qu组 ( 6只 )及DM组 ( 6只 ) ,分别给予槲皮素 10 0mg·kg-1·d-1及同体积的生理盐水灌胃 8周 ;对照组 (正常大鼠 6只 )予等体积生理盐水灌胃 8周。采用蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液 p2 7蛋白水平 ,采用ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白。结果 DM组大鼠肾小球 p2 7水平为 18.5± 4.3 ,尿白蛋白排泄为 ( 3 9.62± 3 .68) μg/ 2 4h ,肾重 /体重比例为 ( 14.87± 2 .0 2 )× 10 -3,均较其他 2组明显增加 ,ECM蛋白水平也较其他 2组明显增加。与DM组相比 ,DM +Qu组肾小球 p2 7水平 ( 10 .6± 3 .1)、ECM蛋白水平、尿白蛋白排泄 [( 17.62± 3 .0 2 ) μg/ 2 4h]及大鼠肾重 /体重比例 [( 11.3 5± 1.76)× 10 -3]均明显降低 (P <0 .0 1) ;DM +Qu组的血糖水平无明显改变。结论 槲皮素可能通过降低肾小球 p2 展开更多
关键词 槲皮素 肾小球 周期素激酶抑制剂 P27 糖尿病肾病
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咪唑立宾对大鼠肾小球系膜细胞增殖的抑制作用 被引量:9
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作者 刘书馨 谢院生 +4 位作者 陈香美 吕杨 傅博 尹忠 洪权 《中华肾脏病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期438-441,共4页
目的探讨咪唑立宾(MZ)对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其对细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27^kip1表达的影响。方法大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20%FCS刺激组、20%FCS+MZ组。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞数。BrdU... 目的探讨咪唑立宾(MZ)对肾小球系膜细胞增殖的抑制作用及其对细胞周期蛋白依赖性蛋白激酶抑制物p27^kip1表达的影响。方法大鼠系膜细胞同步后分为无血清组、20%FCS刺激组、20%FCS+MZ组。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞数。BrdU标记法检测S期细胞。流式细胞仪检测细胞周期。Western印迹检测p27^kip1蛋白的表达。结果MZ可抑制20%FCS刺激所致的系膜细胞增殖,呈剂量依赖性。与20%FCS刺激组比较,20%FCS+MZ组S期细胞的百分比显著降低[(10.28±1.26)%比(21.04±5.38)%,P〈0.05]。MZ可改善由20%FCS刺激诱导的GO/G1期细胞减少[(83.53±2.50)%比(71.15±1.25)%]和S期细胞增加[(12.22±1.22)%比(23.19±0.38)%,P〈0.051。20%FCS刺激后p27^kip1蛋白表达显著下降,MZ上调p27^kip1蛋白表达。结论MZ能够有效抑制系膜细胞增殖,作用时相在G1/S期转化,其抑制系膜细胞增殖的作用部分是通过上调p27^kip1蛋白表达实现的。 展开更多
关键词 细胞周期 细胞周期调节蛋白 咪唑立宾 系膜细胞
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复方莪术散对卵巢子宫内膜异位囊肿患者异位、在位内膜组织中p21表达的影响 被引量:8
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作者 刘筠 曹保利 魏明 《山东医药》 CAS 2013年第48期4-6,I0002,共4页
目的 观察复方莪术散对卵巢子宫内膜异位囊肿(简称巧克力囊肿)患者异位和在位内膜组织中细胞周期调节蛋白p21表达的影响.方法 选择因巧克力囊肿行手术治疗者69例,其中35例(用药组)于术前3个月开始规律服用复方莪术散直至手术当日停... 目的 观察复方莪术散对卵巢子宫内膜异位囊肿(简称巧克力囊肿)患者异位和在位内膜组织中细胞周期调节蛋白p21表达的影响.方法 选择因巧克力囊肿行手术治疗者69例,其中35例(用药组)于术前3个月开始规律服用复方莪术散直至手术当日停药,34例(手术组)术前未经过任何治疗直接手术;选择同期因子宫肌瘤行手术治疗者30例作为对照组.采用免疫组化方法检测用药组和手术组异位、在位内膜及对照组子宫内膜组织中的p21.结果 p21在对照组子宫内膜阳性表达率为56.7%,在手术组异位、在位内膜组织中分别为17.7%、26.5%,在用药组异位、在位内膜组织中分别为40.0%、48.6%;对照组和用药组异位、在位内膜p21表达率均高于手术组异位、在位内膜,P均<0.05.异位内膜p21阳性表达率在用药组Ⅱ期患者中为50.0%、Ⅲ~Ⅳ期为37.0%,手术组分别为40.0%、13.7%;在位内膜p21阳性表达率在用药组Ⅱ期患者中为75.0%、Ⅲ~Ⅳ期为32.4%,手术组分别为60.0%、24.1%;用药组Ⅱ期患者异位和在位内膜p21阳性表达率均高于手术组,P均<0.05.结论 巧克力囊肿患者子宫内膜组织中p21表达明显减少,复方莪术散能明显上调p21在Ⅱ期患者子宫内膜组织中的表达. 展开更多
关键词 卵巢子宫内膜异位囊肿 细胞周期调节蛋白 p21 复方莪术散
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牛磺酸对心肌成纤维细胞细胞周期的影响及其机制的研究 被引量:6
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作者 王艳春 李红 杨世杰 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1471-1475,共5页
目的研究牛磺酸(taurine,Tau)对血管紧张素Ⅱ(an-giotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiacfibroblast,CFb)增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法用AngⅡ诱导新生大鼠CFb增殖,建立心肌纤维化模型,采用四甲基偶氮唑... 目的研究牛磺酸(taurine,Tau)对血管紧张素Ⅱ(an-giotensinⅡ,AngⅡ)诱导的新生大鼠心肌成纤维细胞(cardiacfibroblast,CFb)增殖的抑制作用,并初步探讨其作用机制。方法用AngⅡ诱导新生大鼠CFb增殖,建立心肌纤维化模型,采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测细胞增殖;羟脯氨酸测定检测胶原含量;流式细胞仪检测细胞周期及细胞周期蛋白依赖性激酶抑制物p27的变化;免疫细胞化学法测定细胞周期调控蛋白D(cyclin D)及p27蛋白的含量。结果Tau(40、80、160mmol.L-1)可明显抑制AngⅡ诱导的CFb增殖与胶原合成,同AngⅡ组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01),且呈现剂量依赖性。流式细胞仪检测表明Tau在80、160mmol.L-1可促进p27的蛋白表达;细胞G0/G1期百分率随Tau浓度增加而增加,S期细胞百分率随Tau浓度增加而减少,与AngⅡ组相比差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。免疫细胞化学染色结合图像分析系统的分析结果也表明Tau可增加p27的蛋白表达,与AngⅡ组相比差异具有统计学意义(P<0.01)。结论牛磺酸通过促进p27的表达,使细胞周期阻滞于G0/G1期,而抑制CFb增殖和胶原含量的增加。 展开更多
关键词 牛磺酸 心肌成纤维细胞 细胞周期调节蛋白 P^27
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小儿视网膜母细胞瘤VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达及与组织病理特征的关系 被引量:5
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作者 汪岭 马雪莲 王启明 《分子诊断与治疗杂志》 2020年第11期1452-1456,共5页
目的探究小儿视网膜母细胞瘤(RB)组织中的血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期调节蛋白(Cyclin D1)及上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)表达及与组织病理特征的关系。方法选取本院2017年1月至2019年1月收集的55例小儿RB组织样本及正常视网膜组织样... 目的探究小儿视网膜母细胞瘤(RB)组织中的血管内皮生长因子(VEGF)、细胞周期调节蛋白(Cyclin D1)及上皮钙黏蛋白(E-Cadherin)表达及与组织病理特征的关系。方法选取本院2017年1月至2019年1月收集的55例小儿RB组织样本及正常视网膜组织样本,免疫组化SP法检测并对比VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达情况,分析VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达相关性及三指标与患儿组织病理特征的关系。结果免疫组化染色结果显示,RB组织中VEGF、Cyclin D1表达阳性率均显著高于正常视网膜组织,E-Cadherin表达显著低于正常视网膜组织,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达存在正相关性(P<0.05)。RB患儿不同性别、年龄、眼别VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05);不同分化情况、临床分期、视神经侵犯程度、病理分期RB患儿VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达阳性率比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Cox多因素分析结果显示,临床分期越高、神经侵犯程度越高、VEGF、Cyclin D1高表达及E-Cadherin低表达为影响患者生存的不良因素(P<0.05)。结论 VEGF、Cyclin D1阳性表达越高、E-Cadherin阳性表达越低,小儿RB肿瘤恶性程度越高、预后越差,检测VEGF、Cyclin D1及E-Cadherin表达有助于RB患儿病情评估。 展开更多
关键词 小儿 视网膜母细胞瘤 血管内皮生长因子 细胞周期调节蛋白 上皮钙黏蛋白
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α-酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂p27的关系 被引量:1
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作者 梅小斌 袁伟杰 +5 位作者 张小瑛 郭志勇 许静 崔若兰 李保春 于建平 《上海医学》 CAS CSCD 北大核心 2002年第11期683-686,共4页
目的 探讨α 酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分别予正常蛋白 (蛋白占饲料重量的 10 % ,NPD组 )、低蛋白 (蛋白占饲料重量的... 目的 探讨α 酮酸配伍低蛋白饮食对糖尿病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 p2 7的关系。 方法 腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM )模型 ,分别予正常蛋白 (蛋白占饲料重量的 10 % ,NPD组 )、低蛋白 (蛋白占饲料重量的 5 % ,LPD组 )、α 酮酸 +低蛋白 (蛋白占饲料重量的 5 % ,其中α 酮酸提供1%的蛋白 ,LPD +α KA组 )饮食治疗 8周。蛋白印迹 (Western杂交 )方法测定肾小球裂解液p2 7蛋白水平 ,ELISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM )蛋白 (Ⅳ型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,采用图像分析系统测定肾小球面积。结果 各组DM大鼠肾小球 p2 7水平及ECM蛋白水平均增高 ,尿白蛋白排泄增多 ,肾重 /体重比例增高 ,肾小球面积增大 ,但LPD组及LPD +α KA组大鼠的变化较NPD组轻。LPD +α KA组肾小球p2 7水平 (8.6± 2 .3)较LPD组 (11.1± 3.6 )显著降低 (P <0 .0 1) ,ECM蛋白水平进一步下降 ,尿白蛋白排泄减少更明显 (P <0 .0 1) ,DM大鼠肾重 /体重比例下降更显著 (P <0 .0 5 ) ,肾小球面积进一步减少 (P <0 .0 5 )。DM大鼠肾小球 p2 7水平与肾重 /体重比例呈直线相关。LPD组、LPD +α KA组和NPD组间的血糖水平及血白蛋白水平差异无显著性。结论 α 酮酸配伍低蛋白饮食可能通过降低肾? 展开更多
关键词 低蛋白饮食 Α-酮酸 细胞周期调节蛋白 周期素激酶抑制剂 糖尿病肾病 动物模型
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低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其机制探讨 被引量:1
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作者 梅小斌 袁伟杰 +5 位作者 高从容 陈艳峰 陆军 李保春 于建平 崔若兰 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第8期884-886,共3页
目的 :探讨低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM)模型 ,分别予正常蛋白 (NPD组 ,n=6 )、低蛋白 (L PD组 ,n=6 )饮食 8周 ,同时对正常大鼠(正常... 目的 :探讨低蛋白饮食对糖尿病肾病大鼠肾脏肥大的影响及其与肾小球周期素激酶抑制剂 P2 7的关系。方法 :腹腔注射链脲佐菌素建立糖尿病 (DM)模型 ,分别予正常蛋白 (NPD组 ,n=6 )、低蛋白 (L PD组 ,n=6 )饮食 8周 ,同时对正常大鼠(正常对照组 ,n=6 )予正常蛋白饮食 8周。蛋白印迹方法测定肾小球裂解液 P2 7蛋白水平 ,EL ISA方法测定肾小球裂解液细胞外基质 (ECM)蛋白 ( 型胶原及纤维连接蛋白 )和尿白蛋白 ,氧化酶法测定血糖 ,溴甲酚绿法测定血白蛋白 ,采用图像分析系统测定肾小球面积。 结果 :与正常对照组相比 ,NPD组和 L PD组大鼠肾小球 P2 7水平及 ECM蛋白水平均增高 ,尿白蛋白排泄增多 ,肾质量 /体质量比例增高 ,肾小球面积增大。同 NPD组相比 ,L PD组大鼠肾小球 P2 7水平降低 [(11.1± 3.6 ) vs(19.6± 5 .1) ,P<0 .0 1],纤维连接蛋白水平 [(9.8± 2 .9) vs (17.1± 3.9) pg/m g,P<0 .0 1]及 型胶原水平 [(99.6± 2 3.5 ) vs(15 0 .6± 4 7.1) pg/mg,P<0 .0 1]下降 ,尿白蛋白排泄减少 [(18.13± 3.2 3) vs (4 0 .18± 3.79)μg/2 4 h,P<0 .0 1],大鼠肾质量 /体质量比例下降 [(12 .0 3± 1.85 ) vs (15 .6 2± 2 .13) ,P<0 .0 1],肾小球面积减少 [(72 1± 75 ) vs (815± 97)μm2 ,P<0 .0 1]。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 大鼠 肾脏肥大 低蛋白饮食 影响 周期素激酶抑制剂 P27
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