过量氟对肾细胞内游离钙及钙泵的影响 被引量：11

1

作者 徐辉 井玲 李广生 《中国地方病学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期379-381,共3页

目的探讨过量氟对肾细胞内游离钙([Ca2+]i)及钙泵(Ca2+-ATPase)的影响及[Ca2+]i在肾损害发生机制中的作用。方法应用饮水投氟方式喂养Wistar大鼠20周和原代培养肾小管上皮细胞染氟,采用生物化学方法检测血清内离子钙和总钙水平及肾细胞C... 目的探讨过量氟对肾细胞内游离钙([Ca2+]i)及钙泵(Ca2+-ATPase)的影响及[Ca2+]i在肾损害发生机制中的作用。方法应用饮水投氟方式喂养Wistar大鼠20周和原代培养肾小管上皮细胞染氟,采用生物化学方法检测血清内离子钙和总钙水平及肾细胞Ca2+-ATPase活性变化;使用Ca2+指示剂Fura-2测定肾细胞[Ca2+]i。结果肾细胞[Ca2+]i水平在常食投氟组和偏食投氟组较相应对照组明显增多;暴露于低钙高氟环境中的大鼠血清总钙降低,离子钙降低达到显著程度,该组肾细胞的钙泵(Ca2+-ATPase)活性比富钙投氟组明显低;低氟(1.0-5.0mg/L)处理肾小管上皮细胞钙泵活力明显增高,但随着氟水平的提高(>7．5mg／L),Ca2+-ATPase活力明显下降。结论高氟直接抑制钙泵活性很可能造成肾细胞内[Ca2+]i潴留,而[Ca2+]i升高很可能是过量氟导致肾损害的一种重要机制。 展开更多

关键词 氟化物 肾 钙 离子 ^ca^2+转运ATP酶

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心肌肌浆网Ca^2＋-ATP酶基因转导改善慢性心力衰竭犬心功能的研究 被引量：5

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作者 付治卿 李小鹰 +3 位作者 刘涛 米亚非 周声安 叶卫华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期1047-1050,共4页

目的:探讨以重组腺相关病毒(rAAV)为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬心功能的影响。方法:选取成年比格犬17只,随机分为对照组4只和心力衰竭组11只。快速右心室起搏建立慢性心力衰竭犬模型并随机分为心力... 目的:探讨以重组腺相关病毒(rAAV)为载体的心肌肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)基因转导对慢性心力衰竭犬心功能的影响。方法:选取成年比格犬17只,随机分为对照组4只和心力衰竭组11只。快速右心室起搏建立慢性心力衰竭犬模型并随机分为心力衰竭组4只、心力衰竭+绿色荧光蛋白(EGFP)组4只、心力衰竭+SERCA2a组5只(其中1只在开胸后死亡)。接受基因导入的心力衰竭犬行开胸术,分别向心肌内注射携带EGFP和SERCA2a基因的rAAV载体。于基因转导30d时停止起搏后进行超声心动图和血流动力学检查。结果:基因转导30d时,心力衰竭+SERCA2a组犬的症状及超声心动图指标与心力衰竭+EGFP组相比有显著好转(P<0.05);与对照组相比无显著差别。血流动力学监测发现,转导SERCA2a的犬LVSP、+dp/dtmax和-dp/dtmax明显升高,平均值较EGFP组分别增加54.12%[(214.72±31.74)mmHgvs(139.32±36.79)mmHg]、146.81%[(6779.43±217.58)mmHg/svs(2746.85±931.23)mmHg/s]和71.52%[(-4341.42±322.02)mmHg/svs(-2531.14±616.15mmHg/s)],LVEDP则降低了63.43%[(21.86±6.95)mmHgvs(59.78±6.92)mmHg],所有参数与对照组相比无显著差异。心力衰竭+EGFP组犬心肌冰冻切片在激光共聚焦显微镜下可见弥漫绿色荧光。结论:以rAAV为载体介导SERCA2a基因转导能够改善慢性心力衰竭犬心脏的收缩和舒张功能,是1种有前景的治疗慢性心力衰竭的方法。 展开更多

关键词 心力衰竭 充血性 肌浆网 ^ca^2+ 转运ATP酶 基因转移

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RNA干扰治疗慢性心力衰竭大鼠的实验研究 被引量：3

3

作者 杨广 李小鹰 鲁晓春 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2006年第7期485-487,共3页

目的利用RNA干扰(RNAi)技术抑制心力衰竭(心衰)大鼠受磷蛋白(PLN)mRNA的表达,改善心脏功能。方法选用SD大鼠40只,对照组7只;其余33只造心衰模型,存活21只,随机分为心衰组、rAAV2-phRi1组,rAAV2-phRi2组,每组7只;rAAV2-phRi导入后30天测... 目的利用RNA干扰(RNAi)技术抑制心力衰竭(心衰)大鼠受磷蛋白(PLN)mRNA的表达,改善心脏功能。方法选用SD大鼠40只,对照组7只;其余33只造心衰模型,存活21只,随机分为心衰组、rAAV2-phRi1组,rAAV2-phRi2组,每组7只;rAAV2-phRi导入后30天测定血流动力学,逆转录聚合酶链反应检测心肌PLN mRNA,定磷法测定肌浆网Ca2+-ATP酶(SERCA2a)活性。结果rAAV2-phRi导入30天时,与心衰组比较,rAAV2-phRi1及rAAV2-phRi2对PLN mRNA的抑制效率为85.32%和67.65%,SERCA2a活性增加了104%和74%,血流动力学显著改善(P<0.05),达到对照组水平(P>0.05);rAAV2-phRi1的抑制效率、对心功能的改善显著优于rAAV2-phRi2。结论体内水平上,RNAi能够抑制心衰大鼠PLN mRNA表达,改善心脏功能。 展开更多

关键词 心力衰竭 充血性 RNA干扰 ^ca^2+转运ATP酶 大鼠

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性激素对老龄大鼠颏舌肌细胞肌浆网Ca^(2+)-ATP酶活性及其基因表达的影响 被引量：2

4

作者 齐娟 刘月华 《北京大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期60-63,共4页

目的:观察雌、雄激素对老龄大鼠颏舌肌细胞肌浆网(SR)Ca2+-ATP酶活性及其基因表达的影响,探索性激素影响上气道稳定性的机制。方法:将24只老龄雄性大鼠随机分为3组:老龄对照组、老龄雌激素组(肌注苯甲酸雌二醇,每次0.1mg/kg,每周2次,共4... 目的:观察雌、雄激素对老龄大鼠颏舌肌细胞肌浆网(SR)Ca2+-ATP酶活性及其基因表达的影响,探索性激素影响上气道稳定性的机制。方法:将24只老龄雄性大鼠随机分为3组:老龄对照组、老龄雌激素组(肌注苯甲酸雌二醇,每次0.1mg/kg,每周2次,共4周)和老龄雄激素组(肌注丙酸睾酮,每次2.5mg/kg,每周2次,共4周)。采用定磷法检测颏舌肌SRCa2+-ATP酶活性,荧光定量RT-PCR测定SRCa2+-ATP酶mRNA表达的变化。结果:与对照组相比,老龄雌激素组颏舌肌SRCa2+-ATP酶活性[前者34.24±6.14μmolPi/(mgprotein·hour),后者38.39±8.49μmolPi/(mgprotein·hour)]及其mRNA表达水平(前者0.0297±0.0140,后者0.0314±0.0174)差异无统计学意义(P>0.05);老龄雄激素组SRCa2+-ATP酶活性[22.91±4.56μmolPi/(mgprotein·hour)]下降到对照组的67%(P<0.01),其mRNA表达水平(0.0172±0.0086)亦明显下降(P<0.05)。结论:雄激素可能通过降低颏舌肌SRCa2+-ATP酶活性、抑制其mRNA的表达而影响老龄大鼠颏舌肌的功能;而雌激素没有此项作用。 展开更多

关键词 雌激素类 雄激素类 呼吸肌 肌浆网 ^ca^2+转运ATP酶

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大蒜新素对脑缺血再灌注大鼠海马的保护作用 被引量：1

5

作者 郭莉华 李清君 +2 位作者 李文斌 胡玉燕 张敏 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第3期197-201,共5页

目的探讨大蒜新素对脑缺血再灌注海马组织的保护作用与钙转运的关系。方法采用4血管闭塞法制备大鼠全脑缺血再灌注模型,大蒜新素10,20和30mg.kg-1分2次于缺血前30min和再灌注后10min经尾静脉注入,每次注射总量的1/2。再灌注后24h取大鼠... 目的探讨大蒜新素对脑缺血再灌注海马组织的保护作用与钙转运的关系。方法采用4血管闭塞法制备大鼠全脑缺血再灌注模型,大蒜新素10,20和30mg.kg-1分2次于缺血前30min和再灌注后10min经尾静脉注入,每次注射总量的1/2。再灌注后24h取大鼠海马,甲苯胺蓝染色显微镜下观察海马组织学改变及存活神经元密度;定磷比色法测定Ca2+-转运ATP酶活性;原子吸收法测定钙含量。结果全脑缺血10min再灌注24h时,海马CA1区形态学改变明显,神经元密度明显降低;海马组织Ca2+-转运ATP酶活性降低;组织钙含量显著增加。静脉给予大蒜新素可使缺血再灌注海马组织形态学改变程度明显减轻,存活神经元密度增加,Ca2+-转运ATP酶活性增加,组织钙含量降低。结论大蒜新素对全脑缺血再灌注后海马组织具有明显的保护作用;增加Ca2+-转运ATP酶活性、减少组织钙含量可能是其保护作用的机制之一。 展开更多

关键词 大蒜新素 脑缺血 再灌注损伤 海马 钙 含量 ^ca^2+-转运 ATP酶

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细胞膜钙ATP酶在心肌缺血/再灌注和腺苷诱导预适应中的作用(英文)

6

作者 奚群英 祝宝华 +1 位作者 刘晨 张能锋 《东南大学学报（医学版）》 CAS 2008年第4期238-243,共6页

目的:探讨在心肌缺血/再灌注和腺苷诱导预适应过程中细胞膜钙泵(PMCA)的可能作用。方法:将培养的乳鼠心肌细胞分为3组:缺血/再灌注组、腺苷预处理组和对照组。各组乳酸脱氢酶(LDH)漏出量以生化法检测(n=5);半定量RT-PCR检测各组PMCA基... 目的:探讨在心肌缺血/再灌注和腺苷诱导预适应过程中细胞膜钙泵(PMCA)的可能作用。方法:将培养的乳鼠心肌细胞分为3组:缺血/再灌注组、腺苷预处理组和对照组。各组乳酸脱氢酶(LDH)漏出量以生化法检测(n=5);半定量RT-PCR检测各组PMCA基因转录水平(n=3);PMCA活性以定磷比色法测定(n=5)。结果:(1)缺血/再灌注组LDH漏出量明显增高(P<0.001),腺苷预处理组LDH漏出量显著降低(P<0.001);(2)各组间PMCA mRNA转录水平无显著性差异(P>0.05);(3)各组间PMCA蛋白活性无显著性差异(P>0.05)。结论:在乳鼠心肌细胞缺血/再灌注过程中PMCA无代偿功能;PMCA不直接参与腺苷诱导预适应的心肌保护作用。 展开更多

关键词 钙ATP酶 钙 再灌注损伤 药物预处理 大鼠 Sprague—Dawley

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复合离子盐对老年人细胞内Na^+、K^+、Ca^(2+)的影响及其机制 被引量：1

7

作者 刘军翔 宋冬林 +3 位作者 石蕊 张方宁 朱勇 李玉明 《天津医药》 CAS 北大核心 2006年第7期439-441,共3页

目的:观察复合离子盐对老年人细胞内Na+、K+、Ca2+及红细胞膜钠泵和钙泵活性的影响。方法:在天津市河东区社区中抽取226例老年人作为研究对象,其中高血压者112例,正常血压者114例。两者再随机分为离子盐组和普通加碘盐组,分别给予复合... 目的:观察复合离子盐对老年人细胞内Na+、K+、Ca2+及红细胞膜钠泵和钙泵活性的影响。方法:在天津市河东区社区中抽取226例老年人作为研究对象,其中高血压者112例,正常血压者114例。两者再随机分为离子盐组和普通加碘盐组,分别给予复合离子盐和普通加碘盐摄入,6个月后观察研究对象细胞内Na+、K+、Ca2+及钠泵、钙泵活性的变化。结果:6个月时高血压患者中离子盐组细胞内钠、钙离子浓度低于基线水平(P<0.05),但钾离子无明显变化。离子盐组钠泵、钙泵活性均明显高于基线水平(P<0.05),但在正常血压者中,2组与基线水平比较差异无统计学意义。结论:复合离子盐可增强钠泵、钙泵活性,使细胞内的钠、钙含量减少。 展开更多

关键词 盐类 膳食 低钠 ^Na^+K^+交换ATP酶 ^ca^2+转运ATP酶 老年人

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肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶干扰慢病毒表达载体构建及稳定转染PC 12细胞株的建立

8

作者 王可 龚雪媛 +3 位作者 龚恒佩 周炳文 钟晓明 黄真 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期951-955,共5页

目的构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系。方法人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与p Gag/Pol、pRev、p VSV-G共转染... 目的构建肌浆网-内质网钙离子转运ATP酶(SERCA)基因的干扰慢病毒表达载体,建立稳定转染的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC 12)细胞系。方法人工设计、合成针对SERCA基因干扰序列,退火后连接到PGLV3干扰载体上,与p Gag/Pol、pRev、p VSV-G共转染293T细胞,包装产生慢病毒颗粒并测定病毒滴度,感染PC 12细胞,建立稳定细胞株;应用RT-PCR和Western blot技术检测PC 12稳定细胞中SERCA基因和蛋白表达情况,并与对照组进行比较。结果成功构建了针对SERCA基因的RNAi慢病毒表达载体,病毒滴度为3×108U·m L-1;建立稳定转染的PC 12细胞株。有效干扰验证显示,sh SERCA能明显降低SERCA的mRNA及蛋白水平(P<0.01)。结论成功构建SERCA基因的sh SERCA慢病毒表达载体,建立稳定干扰SERCA表达的PC 12细胞株。 展开更多

关键词 肌浆网-内质网钙离子转运三磷酸腺苷酶基因 核糖核酸干扰 大鼠肾上腺嗜铬细胞 钙离子转运ATP酶 慢病毒

原文传递

急性心肌梗死大鼠钙调蛋白的改变及卡维地洛的干预作用 被引量：4

9

作者 孙益兰 胡申江 +1 位作者 王利宏 周建英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期1085-1089,共5页

目的:研究急性心肌梗死(AMI)后心力衰竭大鼠心肌钙调蛋白肌质网Ca2+-ATP酶(SERCA)和受磷蛋白(PLB)的变化及卡维地洛对其干预作用。方法:选取AMI术后成活的雄性SD大鼠随机分为AMI组、卡维地洛组两组。给药6周后观察血流动力学参数、心室... 目的:研究急性心肌梗死(AMI)后心力衰竭大鼠心肌钙调蛋白肌质网Ca2+-ATP酶(SERCA)和受磷蛋白(PLB)的变化及卡维地洛对其干预作用。方法:选取AMI术后成活的雄性SD大鼠随机分为AMI组、卡维地洛组两组。给药6周后观察血流动力学参数、心室重构指标及钙调蛋白SERCA、PLB的蛋白和mRNA表达。另设正常对照组及假手术组。结果:AMI组左室舒张末压(LVEDP)、各心室重量均显著大于假手术组,左室内压最大收缩和舒张速率(±dp/dt)显著低于假手术组;SERCA蛋白和mRNA表达显著低于假手术组(P<0.01),PLB蛋白和mRNA表达高于假手术组(P<0.01)。卡维地洛组的LVEDP、心室重量均显著低于AMI组,±dp/dt显著高于AMI组;卡维地洛治疗使SERCA蛋白和mRNA表达明显升高(P<0.05),但未能改变PLB蛋白和mRNA水平(P>0.05)。结论:急性心肌梗死后心力衰竭中钙调蛋白SERCA和PLB的变化可能是心肌收缩功能失调的重要机制;卡维地洛能有效地抑制大鼠AMI后心室重构并改善血流动力学,其分子机制可能与钙调蛋白SERCA含量正常化有关。 展开更多

关键词 心力衰竭 充血性 卡维地洛 肌浆网 ^ca^2+转运ATP酶 受磷蛋白

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20cm与8cmSDS—PAGE检测钙ATP酶同工异构体分子量比较

10

作者 杨晖 曾骏文 易长贤 《中华生物医学工程杂志》 CAS 2007年第6期375-379,共5页

目的比较在蛋白质组学中使用的20cmSDS—PAGE和传统的8cmSDS—PAGE在细胞膜钙ATP酶（PMCA）同工异构体表观相对分子质量测量的差异。方法人品状体上皮细胞（HLEB-3细胞）经培养至90％融合后，收集其膜蛋白。部分样品行20cmSDS—PAGE，... 目的比较在蛋白质组学中使用的20cmSDS—PAGE和传统的8cmSDS—PAGE在细胞膜钙ATP酶（PMCA）同工异构体表观相对分子质量测量的差异。方法人品状体上皮细胞（HLEB-3细胞）经培养至90％融合后，收集其膜蛋白。部分样品行20cmSDS—PAGE，条件为16mA／gel，然后改为24mA／gel，共4～5h。另一部分样品行8cmSDS—PAGE，条件为200V45min。在同一胶上同时电泳已知相对分子质量的蛋白质标记物。分离厚的蛋白转移到PVDF膜上，用针对细胞膜钙ATP酶（PMCA）同工异构体PMCA1、PMCA2和PMCA4的特异性抗体进行Western印迹检测。通过电泳移行距离与对数相对分子质量的线性关系计算各个同工异构体的表观相对分子质量。结果从电泳条带的形态上看，8cm胶中蛋白条带较细而浓集，而20cm胶中较宽而扩散。在8cm胶208000和126000条带之间的距离为6．1mm，而在20cm胶此距离为32．8mm。在8cm胶126000和97000条带之间的距离为5．2mm，而在20cm胶为20．2mm。20cm胶中各蛋白条带的移行距离较8cm胶增加。但是存8cm胶中蛋白质条带的浓集性较好。在8cm胶中PMCA1、2、4的表观相对分子质量分别为153800、153500和152900；在20cm胶中，则分别为153100、125500和147400。结论首次证实20μm和8cmSDS—PAGE均能成功检测HLEB-3细胞中PMCA1、2、4的存在，但是检测出的表观相对分子质量有所不同。PMCA1、2、4的相对分子质量在8cm胶中分别为153800，153500和152900，而在20cm胶中分别为153100，125500和147400。PMCA2很可能在20cm胶长时间的电泳过程中发生了蛋白水解现象。 展开更多

关键词 电泳 聚丙烯酰氨凝胶 ^ca^2+转运ATP酶 白内障

原文传递

心肌细胞核Ca^(2+)-ATP酶活性特征的研究 被引量：7

11

作者 王培勇 汤健 +2 位作者 庞永政 苏静怡 唐朝枢 《北京医科大学学报》 CSCD 1997年第4期329-332,共4页

目的：观察心肌细胞核钙泵活性特征及核蛋白磷酸化对其活性的影响。方法：在密度梯度离心纯化的离体家兔心肌细胞核上进行实验，采用酶学方法测定Ca2+ATP酶活性。结果：心肌细胞核上存在Ca2+－ATPase，其活性具有〔Ca2+〕和〔ATP〕依赖... 目的：观察心肌细胞核钙泵活性特征及核蛋白磷酸化对其活性的影响。方法：在密度梯度离心纯化的离体家兔心肌细胞核上进行实验，采用酶学方法测定Ca2+ATP酶活性。结果：心肌细胞核上存在Ca2+－ATPase，其活性具有〔Ca2+〕和〔ATP〕依赖性。蛋白激酶A（PKA）和蛋白激酶M（PKM）依赖的核蛋白磷酸化能显著抑制心肌细胞核Ca2+－ATPase活性，Vmax分别降低46％和44％，而Km分别降低47％和78％（P＜0.01）。结论：家兔心肌细胞核上存在高亲和力的钙泵，其活性受蛋白磷酸化调节，其生理和病理意义有待进一步探讨。 展开更多

关键词 心肌 ATP酶 细胞核 钙

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大麦根细胞质膜Ca^(2+)转运系统对盐胁迫的反应 被引量：12

12

作者 郝鲁宁 余叔文 《植物生理学报（0257-4829)》 CSCD 1993年第3期275-284,共10页

大麦幼苗经短时间盐处理,尚未发生伤害时,虽然质膜上需Mg^(2+)和不需Mg^(2+)的两个Ca^(2+)转运系统的转运能力均基本未变,但两者的动力学特征却有所不同。在盐处理3h内,不需Mg^(2+)的Ca^(2+)转运过程对Ca^(2+)的亲和力便明显降低,而需Mg... 大麦幼苗经短时间盐处理,尚未发生伤害时,虽然质膜上需Mg^(2+)和不需Mg^(2+)的两个Ca^(2+)转运系统的转运能力均基本未变,但两者的动力学特征却有所不同。在盐处理3h内,不需Mg^(2+)的Ca^(2+)转运过程对Ca^(2+)的亲和力便明显降低,而需Mg^(2+)的Ca^(2+)转运过程对Ca^(2+)的亲和力变化不大。较长时间盐处理,两个Ca^(2+)转运系统的转运能力和ATP亲和力均有不同程度的减小。这种减小与幼苗的伤害相伴出现,随处理时间加长而加剧。不同时间的盐处理下,质膜Ca^(2+)—ATP酶活性与不需Mg^(2+)的Ca^(2+)转运过程变化规律一致。Ca^(2+)—ATP酶受钙调素激活的特性在盐处理3h内即有所减小,至处理24h基本丧失。由动力学分析结果推测,短时间盐胁迫下质膜上两个Ca^(2+)转运系统的不同变化是植物的一种调节反应,它们在钙信使系统传递胁迫信号的过程中起不同作用。Ca^(2+)—ATP酶驱动的初级Ca^(2+)转运系统可能与胁迫信号的传递有关,而次级Ca^(2+)转运系统即可能起着信息传递之后将剩余 Ca^(2+)运出胞外的功能。较长时间盐胁迫下两系统Ca^(2+)转运能力的降低则是一种伤害反应。 展开更多

关键词 盐胁迫 大麦 根 细胞质膜 钙离子

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