为获得对烟草赤星病有效的生防菌,通过平板对峙培养法和双层平板打孔法从贵州省瓮安县植烟土壤中筛选对烟草赤星病菌有较强拮抗作用的细菌;通过菌株形态、生理生化特征,结合16S r DNA及gyrA联合基因序列分析对筛选出的菌株进行鉴定;采...为获得对烟草赤星病有效的生防菌,通过平板对峙培养法和双层平板打孔法从贵州省瓮安县植烟土壤中筛选对烟草赤星病菌有较强拮抗作用的细菌;通过菌株形态、生理生化特征,结合16S r DNA及gyrA联合基因序列分析对筛选出的菌株进行鉴定;采用单因素试验对生防菌株的生长条件进行初步研究。结果表明,筛选出对赤星病菌有较强拮抗作用的生防菌株F11,其无菌发酵上清液对病原菌生长的抑菌带可达23. 5 mm,根据菌株形态、生理生化特性、16S r DNA及gyrA联合基因序列分析,将生防菌F11鉴定为甲基营养型芽孢杆菌(Bacillus methylotrophicus)。该菌株在10～45℃、pH值3. 5～10. 0条件下均能生长,对碳源、氮源利用较广泛,最适生长条件为:培养时间18 h,温度35℃,pH值6. 0,葡萄糖作为碳源,蛋白胨作为氮源。菌株F11对烟草赤星病菌抑菌作用较强,具有应用于该病害生物防治的潜力。展开更多
近年来,一种严重危害重庆万州红桔的真菌性病害大规模流行,已成为生产上亟待解决的难题.该试验取田间病果、病叶及病枝样本进行发病组织培养和菌株分离纯化,根据病原菌的形态特征和致病性进行种类鉴定,并选用19种杀菌剂分别对致病病原...近年来,一种严重危害重庆万州红桔的真菌性病害大规模流行,已成为生产上亟待解决的难题.该试验取田间病果、病叶及病枝样本进行发病组织培养和菌株分离纯化,根据病原菌的形态特征和致病性进行种类鉴定,并选用19种杀菌剂分别对致病病原菌进行抑菌活性测定.结果表明:重庆万州红桔上发生的病害为以褐斑类病原菌危害为主的复合型病害,致病病原菌为交链格孢菌Alternaria Nees ex Wallr.和炭疽病菌Colletoirichum gloeospori-oides Penz..不同药剂对两种致病病原菌菌丝生长的抑制作用的差异具有统计学意义.其中25%腐霉.福美双600倍、25%咪鲜胺750倍、60%甲硫.异菌脲500倍、拿敌稳(肟菌脂25%.50%戊唑醇)3 000倍等杀菌剂对两种病原菌的抑菌率达100%,凯润(吡唑醚菌酯250g/L)2 000倍对两种病原菌的抑菌率也达90%以上.根据室内抑菌药剂筛选结果、防治用药成本和抗药性等综合因素考虑,推荐25%咪鲜胺可湿性粉剂750倍为生产上化学防治首选药剂,混用、轮用药剂可选择上述其他药剂及药剂组合.展开更多
【目的】鉴定江西省鄱阳县美国红枫褐斑病的病原,为该病害的防治和进一步研究奠定基础。【方法】实地调查该病害的发生时期和为害程度,对病害症状进行观察记载。随机采集30份不同发病阶段的病叶样品,采用PDA培养基按照常规组织分离法对...【目的】鉴定江西省鄱阳县美国红枫褐斑病的病原,为该病害的防治和进一步研究奠定基础。【方法】实地调查该病害的发生时期和为害程度,对病害症状进行观察记载。随机采集30份不同发病阶段的病叶样品,采用PDA培养基按照常规组织分离法对其进行病菌分离和菌种纯化。选择代表性菌株PM-1和Pm^-2作为供试菌株,用浓度为1×10^6个·m L^-1的孢子悬浮液对美国红枫健康叶片进行刺伤接种,并对接种发病后病斑进行病菌再分离,以完成柯赫氏法则验证。将各分离菌株接种于PDA平板中央,于25℃黑暗条件下培养,逐日观察测量菌落大小、颜色、形状、质地及产孢情况等性状。对自然发病寄主上着生的病菌和人工培养的病菌分别制作切片,在显微镜下观察载孢体及分生孢子形态,并测量其大小。根据培养菌落形态特征和病菌形态大小,参考相关文献,对病原菌进行种类归属鉴定。提取病菌基因组DNA,采用真核生物核糖体基因转录间隔区（ITS）通用引物ITS1（5＇-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3＇）和ITS4（5＇-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3＇）对病菌ITS-5.8S r DNA区段进行PCR扩增和序列测定。使用BLAST工具软件,在Gen Bank中进行序列同源性搜索,并利用Meg A 5.2软件中的邻位加入法构建系统发育树,以对病菌进行分子鉴定。【结果】美国红枫褐斑病只为害叶片,5月中旬始发,6月中下旬进入盛发期,重病株发病率达60%以上。病斑常呈圆形、椭圆形或不规则形,中央黄褐色,边缘黑褐色,周围有黄色晕圈,后期病斑常联合成大斑,造成叶片大面积枯死而脱落。在潮湿条件下,在病斑上常形成黑色小点,为病菌的分生孢子盘和分生孢子。共分离获得25个培养性状一致的真菌菌株,菌落正面白色,绒状,平铺,背面淡黄色。分离菌株具有致病性,人工接种发病症状与自然发病症状相同。病菌载孢体为分生孢子盘,直径108-205μm;�展开更多
文摘近年来,一种严重危害重庆万州红桔的真菌性病害大规模流行,已成为生产上亟待解决的难题.该试验取田间病果、病叶及病枝样本进行发病组织培养和菌株分离纯化,根据病原菌的形态特征和致病性进行种类鉴定,并选用19种杀菌剂分别对致病病原菌进行抑菌活性测定.结果表明:重庆万州红桔上发生的病害为以褐斑类病原菌危害为主的复合型病害,致病病原菌为交链格孢菌Alternaria Nees ex Wallr.和炭疽病菌Colletoirichum gloeospori-oides Penz..不同药剂对两种致病病原菌菌丝生长的抑制作用的差异具有统计学意义.其中25%腐霉.福美双600倍、25%咪鲜胺750倍、60%甲硫.异菌脲500倍、拿敌稳(肟菌脂25%.50%戊唑醇)3 000倍等杀菌剂对两种病原菌的抑菌率达100%,凯润(吡唑醚菌酯250g/L)2 000倍对两种病原菌的抑菌率也达90%以上.根据室内抑菌药剂筛选结果、防治用药成本和抗药性等综合因素考虑,推荐25%咪鲜胺可湿性粉剂750倍为生产上化学防治首选药剂,混用、轮用药剂可选择上述其他药剂及药剂组合.
文摘【目的】鉴定江西省鄱阳县美国红枫褐斑病的病原,为该病害的防治和进一步研究奠定基础。【方法】实地调查该病害的发生时期和为害程度,对病害症状进行观察记载。随机采集30份不同发病阶段的病叶样品,采用PDA培养基按照常规组织分离法对其进行病菌分离和菌种纯化。选择代表性菌株PM-1和Pm^-2作为供试菌株,用浓度为1×10^6个·m L^-1的孢子悬浮液对美国红枫健康叶片进行刺伤接种,并对接种发病后病斑进行病菌再分离,以完成柯赫氏法则验证。将各分离菌株接种于PDA平板中央,于25℃黑暗条件下培养,逐日观察测量菌落大小、颜色、形状、质地及产孢情况等性状。对自然发病寄主上着生的病菌和人工培养的病菌分别制作切片,在显微镜下观察载孢体及分生孢子形态,并测量其大小。根据培养菌落形态特征和病菌形态大小,参考相关文献,对病原菌进行种类归属鉴定。提取病菌基因组DNA,采用真核生物核糖体基因转录间隔区（ITS）通用引物ITS1（5＇-TCCGTAGGTGAACCTGCGG-3＇）和ITS4（5＇-TCCTCCGCTTATTGATATGC-3＇）对病菌ITS-5.8S r DNA区段进行PCR扩增和序列测定。使用BLAST工具软件,在Gen Bank中进行序列同源性搜索,并利用Meg A 5.2软件中的邻位加入法构建系统发育树,以对病菌进行分子鉴定。【结果】美国红枫褐斑病只为害叶片,5月中旬始发,6月中下旬进入盛发期,重病株发病率达60%以上。病斑常呈圆形、椭圆形或不规则形,中央黄褐色,边缘黑褐色,周围有黄色晕圈,后期病斑常联合成大斑,造成叶片大面积枯死而脱落。在潮湿条件下,在病斑上常形成黑色小点,为病菌的分生孢子盘和分生孢子。共分离获得25个培养性状一致的真菌菌株,菌落正面白色,绒状,平铺,背面淡黄色。分离菌株具有致病性,人工接种发病症状与自然发病症状相同。病菌载孢体为分生孢子盘,直径108-205μm;�
