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低频电磁场促进骨髓间充质干细胞移植修复大鼠脊髓损伤的实验研究 被引量：11
1
作者 冯玉 白文芳 +5 位作者 许伟成 李新平 白利明 梁玲 王鑫 张鸣生 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第32期5819-5826,共8页
背景:骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤被视为一种有前途的治疗方法,如何更有效地促进骨髓间充质干细胞在脊髓损伤区存活,加速脊髓损伤肢体运动功能的恢复是目前研究的重点。前期研究发现,低频电磁场能够促进骨髓间充质干细胞的增殖分... 背景:骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤被视为一种有前途的治疗方法,如何更有效地促进骨髓间充质干细胞在脊髓损伤区存活,加速脊髓损伤肢体运动功能的恢复是目前研究的重点。前期研究发现,低频电磁场能够促进骨髓间充质干细胞的增殖分化,低频电磁场是否可应用于骨髓间充质干细胞移植治疗脊髓损伤还需进一步研究。目的:探讨低频电磁场对移植骨髓间充质干细胞脊髓损伤大鼠后肢运动功能恢复的影响。方法:采用脊髓压迫法制备64只T10不完全性脊髓损伤大鼠模型,随机等分为对照组、骨髓间充质干细胞组、电磁场组和电磁场+骨髓间充质干细胞组。造模成功后,骨髓间充质干细胞组和电磁场+骨髓间充质干细胞组大鼠脊髓损伤原部位注射大鼠全贴壁法分离培养BrdU标记的骨髓间充质干细胞,对照组和电磁场组注射a-MEM培养液。造模术后24h,电磁场组和电磁场+骨髓间充质干细胞组予60min/d的低频电磁场刺激(频率50Hz、强度5mT)。结果与结论:骨髓间充质干细胞移植后第21天,电磁场+骨髓间充质干细胞组BBB评分与其他组相比,差异有显著性意义(P<0.05),与其他各组比较,电磁场+骨髓间充质干细胞组移植细胞后,大鼠BrdU阳性细胞在脊髓损伤区域生长并与脊髓组织融合,存活细胞数量较其他组多;空洞面积小;损伤区胶质纤维酸性蛋白表达更少,而基质金属蛋白2表达更多;脊髓损伤大鼠下肢运动功能恢复最快(P<0.05)。提示低频电磁场促进了移植骨髓间充质干细胞脊髓损伤大鼠后肢运动功能的恢复,可能与低频电磁场有利于损伤区移植骨髓间充质干细胞的存活,上调基质金属蛋白2的表达并减少胶质瘢痕的形成有关。 展开更多
关键词 干细胞 干细胞移植 低频电磁场 脊髓损伤 骨髓间充质干细胞 细胞移植 省级基金 干细胞图片文章
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骨髓间质干细胞移植对香猪急性心肌梗死后心肌结构和心功能的影响 被引量：11
2
作者 朱洪生 黄日太 +2 位作者 连锋 陶如琦 郑家豪 《中国胸心血管外科临床杂志》 CAS 2004年第2期112-115,共4页
目的　移植自体骨髓间质干细胞 ( BMSCs)到香猪急性心肌梗死区内 ,研究移植 BMSCs对心肌结构和心功能的影响。　方法　将 2 4只贵州香猪采用计算器随机法分为实验组 ( n=12 )和对照组 ( n=12 ) ,抽取香猪自体骨髓 ,经体外分离出 BMSCs... 目的　移植自体骨髓间质干细胞 ( BMSCs)到香猪急性心肌梗死区内 ,研究移植 BMSCs对心肌结构和心功能的影响。　方法　将 2 4只贵州香猪采用计算器随机法分为实验组 ( n=12 )和对照组 ( n=12 ) ,抽取香猪自体骨髓 ,经体外分离出 BMSCs并培养和经 5 -氮胞苷 ( 5 - azacytidine)转化 ,利用结扎左前降支 ( L AD)的方法建立急性心肌梗死动物模型 ,经 L AD和梗死区多点注射的方法将实验组香猪注射 BMSCs(细胞总数 2× 10 6 个 ) ,对照组注射等量的细胞培养液。 3周和 6周后 ,用超声心动图 ( UCG)观察两组移植后心肌结构和心功能改变的情况。　结果　实验组左心室射血分数、左心室短轴缩短率和室壁增厚率明显高于对照组 ;左心室室壁、室间隔厚度和心室腔的大小在两组之间也存在明显差别 ,实验组室壁和室间隔厚度明显大于对照组 ,而心室腔小于对照组。　结论　 BMSCs梗死区心肌移植后可减轻心室重构的进程 ,减轻心肌的变薄程度 ,使心室腔未明显扩大。 BMSCs移植还可增加心肌的收缩力 。 展开更多
关键词 骨髓间质干细胞 细胞移植 香猪 急性心肌梗死 心肌结构 心功能 超声心动图 BMSCS
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骨髓间充质干细胞移植对急性脊髓损伤脱髓鞘病变的保护作用 被引量：12
3
作者 苟杨 刘丹彦 +1 位作者 刘金凤 孙鸿然 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期761-776,共16页
骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛应用于治疗脊髓损伤,但目前对其治疗机制了解甚少。BMSCs被移植至脊髓钳夹损伤模型大鼠,以研究其保护作用。通过LFB(Luxol fast blue)染色、锇酸染色、TUNEL(Td T-m... 骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)已被广泛应用于治疗脊髓损伤,但目前对其治疗机制了解甚少。BMSCs被移植至脊髓钳夹损伤模型大鼠,以研究其保护作用。通过LFB(Luxol fast blue)染色、锇酸染色、TUNEL(Td T-mediated d UTP nick-end labeling)染色和透射电镜对白质有髓神经纤维进行观察。免疫印迹检测BMSCs移植对脑源性神经营养因子(Brain derived neurotrophic factor,BDNF)和caspase 3蛋白表达的影响。通过脊髓损伤后1、7、14 d三个时间点移植BMSCs并进行后肢运动评分(Basso,beattie and bresnahan;BBB评分)和CNPase(2′,3′-cyclic-nucleotide 3′-phosphodiesterase)、髓鞘碱性蛋白(Myelin basic protein,MBP)、caspase 3蛋白水平的检测。免疫荧光观察BMSCs移植到受损脊髓后分化情况及CNPase-caspase 3^+共表达情况。骨髓间充质干细胞移植7 d后,部分移植的BMSCs可表达神经元和少突胶质细胞标记物,大鼠后肢运动能力和髓鞘超微结构特征均明显改善。骨髓间充质干细胞移植后BDNF蛋白表达水平增加,caspase 3蛋白表达水平则降低。相对于脊髓损伤后1 d和14 d,7 d移植BMSCs后MBP和CNPase蛋白表达水平最高;caspase 3蛋白表达水平则最低。骨髓间充质干细胞移植后CNPase-caspase 3^+细胞散在分布于脊髓白质。结果表明,急性脊髓损伤后,BMSCs移植到受损脊髓有分化为神经元和少突胶质细胞的倾向,并促进BDNF的分泌介导抗少突胶质细胞凋亡而对神经脱髓鞘病变有保护作用,且最佳移植时间为脊髓损伤后7 d。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 脊髓损伤 细胞凋亡 细胞移植
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兔骨髓间充质干细胞及人羊膜上皮细胞移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的研究 被引量：7
4
作者 卢建民 吕秀丽 马翔 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期786-792,共7页
背景角膜缘干细胞缺乏可引起致盲性眼病，但传统的治疗方法疗效欠佳。最近的研究表明，骨髓间充质干细胞（BMSCs）和人羊膜上皮细胞（AECs）有分化成多种细胞的能力，但其对角膜缘于细胞缺乏的疗效仍有待研究和评价。目的观察和对比兔BM... 背景角膜缘干细胞缺乏可引起致盲性眼病，但传统的治疗方法疗效欠佳。最近的研究表明，骨髓间充质干细胞（BMSCs）和人羊膜上皮细胞（AECs）有分化成多种细胞的能力，但其对角膜缘于细胞缺乏的疗效仍有待研究和评价。目的观察和对比兔BMSCs和人AECs移植治疗兔角膜缘干细胞缺损的治疗效果。方法将18只新西兰白兔采用随机数字表法分为羊膜基质（AS）移植组、兔BMSCs移植组和人AECs移植组，每组6只。将浸有NaOH溶液的滤纸贴附于角膜表面建立碱烧伤角膜缘干细胞缺损的动物模型。抽取兔髂窝处骨髓并收集人胎盘组织分别分离、制备兔BMSCs和人AECs，通过密度梯度离心加贴壁培养法及胰蛋白酶多次分步消化法获取兔BMSCs和人AECs，采用逆转录聚合酶链反应（RT—PCR）法对培养细胞进行鉴定，再接种于人去上皮AS上，按照动物的分组分别将上述材料缝合至动物模型的角膜表面。术后28d，对各组动物的角膜新生血管（CNV）评分以及角膜混浊度评分进行对比，对角膜组织行组织病理学检查并针对角膜上皮细胞特异性标记物细胞角蛋白3（CK3）行免疫组织化学染色。结果第3代兔BMSCs接种于AS载体上12h后贴附生长，第1代人AECs接种于AS载体上48h后呈单层膜状生长，传代细胞经RT—PCR鉴定符合目标细胞的特征。兔BMSCs移植组术后28d，免疫组织化学染色结果显示，兔BMSCs移植组和人AECs移植组的角膜表面细胞CK3均呈阳性表达，而AS组CK3表达阴性。与AS移植组比较，兔BMSCs移植组和人AECs移植组CNV评分以及角膜混浊度评分明显降低，差异均有统计学意义（BMSCs：Z=-2．983，P=0．003；Z=-2．844，P=0．004；AECs：Z=-2．817，P=0．005；Z=-2．041，P=0．041）。组织病理学检查显示，AS组兔角膜组织有较多的炎性细胞生长，胶原纤维排列紊乱。兔BMSCs组术后角膜表层形成了角膜上� 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 羊膜上皮细胞 角膜缘干细胞 角膜新生血管 干细胞移植
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丹酚酸B预处理EPCs对AMI大鼠移植骨髓间充质干细胞后心肌微环境的影响 被引量：7
5
作者 华声瑜 赵桂峰 +1 位作者 李庆雯 范英昌 《天津中医药》 CAS 2012年第2期117-120,共4页
[目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)后心肌微环境的影响。[方法]56只AM I模型大鼠随机分为假手术组、模型组、BM SCs组、EPCs+BM SCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓... [目的]探讨中药丹酚酸B预处理的内皮祖细胞(EPCs)对急性心肌梗死(AMI)大鼠移植骨髓间充质干细胞(BMSCs)后心肌微环境的影响。[方法]56只AM I模型大鼠随机分为假手术组、模型组、BM SCs组、EPCs+BM SCs组,其中治疗组用丹酚酸B最佳药物浓度处理的EPCs与BM SCs混合,在大鼠AM I区周边分5点注射。免疫荧光和免疫组化方法检测AM I大鼠梗死区心肌收缩蛋白α型肌球蛋白重链(α-M H C)和I型胶原蛋白的表达。[结果]细胞移植4周后,各细胞联合移植组中,2∶14、∶1和8∶1组在Brdu集中表达区域均有不同强弱程度的α-MHC阳性表达,除假手术组较少外,所有接受冠状动脉结扎的大鼠心肌梗死区I型胶原表达均升高。[结论]BMSCs在丹酚酸B预处理的EPCs干预的心肌微环境下可向心肌细胞分化,可预防或改善心室重塑的发生。 展开更多
关键词 丹酚酸B 急性心肌梗死 内皮祖细胞 骨髓间充质干细胞 细胞移植
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骨髓间充质干细胞联合Janus激酶信号转导及转录激活因子通路抑制剂治疗大鼠脑缺血再灌注损伤 被引量：4
6
作者 魏增华 郝怀勇 +2 位作者 贺敏敏 李永涛 李立新 《中华实验外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第7期1481-1483,共3页
目的观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和Janus激酶信号转导及转录激活因子（JAK—STAT）信号通路抑制剂AG490联合移植对大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。按照随机数字表达分为... 目的观察大鼠骨髓间充质干细胞（BMSCs）和Janus激酶信号转导及转录激活因子（JAK—STAT）信号通路抑制剂AG490联合移植对大鼠局灶性脑缺血／再灌注损伤的神经保护作用。方法制备大鼠大脑中动脉栓塞（MCAO）模型。按照随机数字表达分为5组，分别设为sham组、1％二甲基亚砜（DMSO）组、AG490组、BMSCs＋1％DMSO移植组、BMSCs＋AG490移植组。移植治疗后24h，Westernblot检测脑缺血再灌后磷酸化STAT3、肿瘤坏死因子（TNF）-α蛋白表达变化，原位末端转移酶标记（TUNEL）法检测大鼠脑缺血区细胞凋亡水平。移植治疗后分别于3、7、14d对每组大鼠进行神经缺陷症状评分，14d后处死大鼠，氯化三苯四唑（Trc）法染色后计算脑梗死体积，干湿重法称量脑含水量。结果ACA90可以明显抑制脑缺血再灌注后STAT3的磷酸化水平，并且降低脑梗死相关炎性分子TNF．仅的表达。BMSCs＋AG490移植组中大鼠脑缺血区细胞凋亡、脑梗死体积[（12．31±6．24）％]及脑含水量[（77．55±0．53）％]较其他各组明显降低（P〈0．05），移植14d后BMSCs＋AG490移植治疗组中大鼠Bederson神经缺陷症状评分为（1．63±n35）分，较其他各组改善明显（P〈0．05）。结论BMSCs联合ACA90移植疗法对脑缺血再灌注损伤有明显协同神经保护作用。 展开更多
关键词 脑缺血 再灌注损伤 Janus激酶信号转导及转录激活因子3信号通路 骨髓间充质干细胞移植
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骨髓间充质干细胞移植在急性肝损伤大鼠肝脏内定植能力的实验研究 被引量：2
7
作者 陈念 俞悦 +3 位作者 李军 章莉莉 刘源 韩亚萍 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第7期684-688,I0001,共6页
目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在急性肝损伤大鼠肝脏内移植情况。方法:首先行大鼠骨髓间充质干细胞提取、分离和培养,传代扩增后用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,用D-氨基半乳糖(1.5g/Kg)腹腔注射制备大鼠急性肝损伤模型,试验... 目的:观察大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)在急性肝损伤大鼠肝脏内移植情况。方法:首先行大鼠骨髓间充质干细胞提取、分离和培养,传代扩增后用5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)标记,用D-氨基半乳糖(1.5g/Kg)腹腔注射制备大鼠急性肝损伤模型,试验分三组(A、B、C组),经阴囊上静脉向肝损伤组(A组)及肝脏正常(C组)的大鼠移植标记BrdU的BMSCs 1～1.5×106,同时向肝损伤组(B组)的大鼠移植等量的生理盐水。2周后观察大鼠的存活率及肝功能恢复情况,并通过免疫组织化学方法检测大鼠肝脏中BrdU+细胞数量及分布。结果:移植2周A组、B组动物存活率、肝功能恢复情况无明显差异,肝损伤组(A组)及肝脏正常组(C组)大鼠肝脏均可检测到BrdU+细胞分布,A组与C组相比,A组BrdU+细胞数较多,分布更广,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨髓间充质干细胞可以在受损的肝脏及正常肝脏定植,定植的数量可能和肝脏是否受损伤相关。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU) 急性肝损伤 细胞移植
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丹酚酸B预处理内皮祖细胞在大鼠骨髓间充质干细胞分化过程中对心肌早期基因表达的影响 被引量：3
8
作者 谭俊珍 李庆雯 +1 位作者 南亚昀 范英昌 《中国中西医结合杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期529-532,共4页
目的探讨丹酚酸B预处理内皮祖细胞(EPCs)联合大鼠骨髓间充质干细胞(BMSc)移植于梗死心肌对BMSc分化过程中早期基因Nkx2.5、GATA-4 mRNA表达的影响,从而找出能够使两种细胞达到最佳协同作用的移植方法。方法分离培养大鼠BMSc、EPCs,将Wis... 目的探讨丹酚酸B预处理内皮祖细胞(EPCs)联合大鼠骨髓间充质干细胞(BMSc)移植于梗死心肌对BMSc分化过程中早期基因Nkx2.5、GATA-4 mRNA表达的影响,从而找出能够使两种细胞达到最佳协同作用的移植方法。方法分离培养大鼠BMSc、EPCs,将Wistar大鼠冠状动脉左前降支结扎制成急性心肌梗死模型后,在梗死心肌处植入BMSc和丹酚酸B预处理的不同浓度EPCs或DMEM培养液。移植后4周,实时荧光定量PCR检测丹酚酸B预处理的EPCs在BMSc分化过程中对心肌早期基因Nkx2.5和GATA-4 mRNA表达的影响。结果与模型组比较,各细胞移植组Nkx2.5及GATA-4 mRNA表达均明显增加(P<0.01,P<0.05);各细胞移植组之间,EPCs含量高(EPCs∶BMSc为8∶1组)的移植组Nkx2.5(2.654±0.606)、GATA-4 mRNA(1.573±0.372)表达增加更明显。结论BMSc在心肌微环境可向心肌样细胞分化,其分化情况与其内环境改善程度有关。 展开更多
关键词 急性心肌梗死 内皮租细胞 骨髓间充质干细胞 丹酚酸B 细胞移植
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胰岛素样生长因子-1对心脏的作用及在骨髓间充质细胞移植治疗心血管疾病中的角色 被引量：1
9
作者 黄裕立 麦炜颐 《国际内科学杂志》 CAS 2008年第4期201-204,222,共5页
骨髓间充质细胞(BMSCs)移植治疗心血管疾病已经在大量基础研究中证实了其有效性,近年来也在不少临床试验中得到证实,但其改善心功能机制仍然有较多争议,移植细胞的旁分泌作用可能对移植后心功能的改善起着重要作用。业已证明胰岛素样生... 骨髓间充质细胞(BMSCs)移植治疗心血管疾病已经在大量基础研究中证实了其有效性,近年来也在不少临床试验中得到证实,但其改善心功能机制仍然有较多争议,移植细胞的旁分泌作用可能对移植后心功能的改善起着重要作用。业已证明胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对心脏的发育、心肌细胞肥大、再生、抑制心肌细胞凋亡等具有重要作用,不少资料表明BMSCs移植后伴随着IGF-1等细胞因子的表达增加,推测IGF-1在BMSCs移植后的分子机制中具有重要的作用。本文将在简单讨论IGF-1在心脏病理生理状态下的作用后,进一步重点就IGF-1在BMSCs移植治疗心血管疾病中的研究进展及分子机制作一阐述。 展开更多
关键词 骨髓间充质细胞 心脏再生医学 胰岛素样生长因子-1 细胞移植 旁分泌
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骨髓间充质干细胞移植对舍格伦综合征大鼠模型的治疗作用 被引量：3
10
作者 杨兆安 夏碧清 +3 位作者 吕汉孝 甄恩明 崔丽娟 张林 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2011年第2期152-158,共7页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对舍格伦综合征(Sjǒgren’s syndrome)大鼠模型的治疗作用及其在下颌下腺(submandibular gland,SMG)内存活、迁徙及分化情况。方法:建立大鼠舍格伦综合征动物模型;... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对舍格伦综合征(Sjǒgren’s syndrome)大鼠模型的治疗作用及其在下颌下腺(submandibular gland,SMG)内存活、迁徙及分化情况。方法:建立大鼠舍格伦综合征动物模型;分离、培养大鼠BMSCs并对其进行鉴定和标记;下颌下腺局部注射移植经绿色荧光蛋白标记的BMSCs;测定大鼠静态唾液总流率,记录正常组、模型组、模型治疗组及模型治疗对照组大鼠每日饮水量;荧光显微镜下观察移植干细胞在模型治疗组和模型治疗对照组下颌下腺内的存活、迁徙及分化情况。所得实验数据采用SPSS12.0软件包进行t检验。结果:模型治疗组静态唾液总流率和每天饮水量与模型治疗对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。经标记的骨髓间充质干细胞移植后第1周,BMSCs主要分布于针道附近,第2周主要分布于腺泡之间的间质中,第4周开始在下颌下腺其他区域出现。术后第1周,免疫组化染色移植干细胞未见淀粉酶表达,第8周可见在少量移植细胞的胞质内有淀粉酶表达,具备了类似腺泡细胞的分泌功能。模型治疗对照组未发现以上现象。结论:BMSCs移植对舍格伦综合征大鼠有一定治疗作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 舍格伦综合征 细胞移植
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同种异体骨髓间充质干细胞转染连接蛋白43基因后移植对心肌梗死大鼠心功能的影响 被引量：3
11
作者 卢仁荣 陈良龙 +3 位作者 钟玲 林岚 江琼 郭进建 《中国循环杂志》 CSCD 北大核心 2008年第6期467-470,共4页
目的:研究转染真核表达质粒pbudCE4.1_Cx43后的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响,明确同种异体干细胞及连接蛋白43(Connexin43,Cx43)基因转染干细胞移植治疗急性心肌梗死的可行性... 目的:研究转染真核表达质粒pbudCE4.1_Cx43后的骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)移植对心肌梗死大鼠左心功能的影响,明确同种异体干细胞及连接蛋白43(Connexin43,Cx43)基因转染干细胞移植治疗急性心肌梗死的可行性及效果。方法:清洁级SD大鼠60只,随机选出11只作为假手术组,其余大鼠制成心肌梗死模型,再随机分为四组:对照组(n=11);细胞移植组(n=12);基因移植组(n=13);空载体移植组(n=13)。另取清洁雄性SD大鼠5只,作为BMSCs供体。心肌梗死各组大鼠结扎前降支后1～3小时心肌内移植入相应的细胞或培养基,移植后6周检测心功能并取心脏检测各种相关指标。结果:同种异体大鼠BMSCs可在梗死心肌组织定居、生存;与对照组比较,假手术组、细胞移植组、基因移植组和空载体移植组左心功能均明显改善(P<0.05),基因移植组优于细胞移植组和空载体移植组(P<0.05)。结论:BMSCs转染Cx43基因后移植治疗急性心肌梗死可行、有效。 展开更多
关键词 心肌梗塞 骨髓间充质干细胞 连接蛋白43 心功能 细胞移植
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经颈内动脉移植骨髓间充质干细胞的安全性研究 被引量：1
12
作者 杨飞 姜建威 +5 位作者 王鹏 王玲 冯晓星 王钧干 黄秋菊 余海晶 《中华神经医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第10期1002-1005,共4页
目的 探讨骨髓间充质干细胞是否可以安全的通过颈内动脉移植。方法 密度梯度离心法常规体外培养骨髓间充质干细胞。应用脑血管造影技术，将导管超选择插入健康新西兰大白兔颈内动脉近端，通过导管经颈内动脉注入约1×10^6个间充质... 目的 探讨骨髓间充质干细胞是否可以安全的通过颈内动脉移植。方法 密度梯度离心法常规体外培养骨髓间充质干细胞。应用脑血管造影技术，将导管超选择插入健康新西兰大白兔颈内动脉近端，通过导管经颈内动脉注入约1×10^6个间充质干细胞。术后24h行CT灌注成像检查及HE染色判断脑组织微循环的变化及有无微梗死灶发生。结果 成功经新西兰大白兔颈内动脉完成骨髓间充质干细胞移植术。术后24hCT灌注成像显示移植侧脑组织微循环灌注参数（脑血流量、脑血容量、平均通过时间、达峰值时间1变化与对照侧比较差异无统计学意义（P〉0．05），其中脑血流量较对照侧略有下降；HE染色显示脑组织无微梗死灶发生。结论 骨髓间充质干细胞可安全的经颈内动脉移植。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 细胞移植 颈内动脉 X线计算机成像 脑梗死
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骨髓间充质干细胞移植对急性肝衰竭大鼠Caspase1和IL-18表达的影响 被引量：2
13
作者 袁淑芳 姜涛 +3 位作者 胡兰英 孙丽华 郑嵘炅 张跃新 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第6期759-765,共7页
目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠的疗效、移植途径.方法:用D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠ALF... 目的:探讨骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗急性肝衰竭(acute liver failure,ALF)大鼠的疗效、移植途径.方法:用D-氨基半乳糖(D-galactosamine,D-GalN)/脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导大鼠ALF模型.72只大鼠随机分为ALF对照组、尾静脉移植组、门静脉移植组.于BMSCs移植后24、72、120、168 h取血清和肝组织,分别检测血清丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST);采用TUNEL法检测肝细胞凋亡;采用免疫组织化学、Western blot方法检测肝组织中半胱氨酸蛋白酶1(cysteinecontaining aspartate-specific proteases 1,Caspase1)和白介素18(interleukin-18,IL-18)蛋白的表达情况.结果:ALF对照组大鼠血清ALT、AST水平随病程逐渐升高.在移植后120、168 h,BMSCs移植组的血清ALT、AST与对照组相比差别有统计学意义(P<0.05);尾静脉、门静脉移植组细胞凋亡指数分别为28.17%±17.08%、20.67%±12.68%、19.67%±11.82%、13.00%±6.84%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01).BMSCs移植组Caspase1、IL-18蛋白表达水平逐渐降低,在移植后120、168 h与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);且二者的表达有明显的相关性(P<0.01).尾静脉、门静脉移植途径对ALF大鼠均有治疗作用,但二种途径相比差异无统计学意义(P>0.05).结论:BMSCs能够改善ALF肝衰竭大鼠的肝功能,抑制肝细胞凋亡、降低Caspase1、IL-18蛋白水平.Caspase1和IL-18在肝衰竭的发病过程中起重要作用;Caspase1和IL-18可望成为急性肝衰竭的预测因子和未来的治疗靶点. 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 急性肝衰竭 细胞移植 半胱氨酸蛋白酶1 白介素-18 大鼠模型
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经颈动脉、尾静脉骨髓间充质干细胞移植治疗慢性肾脏病大鼠效果对比观察 被引量：1
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作者 万珊杉 马逸群 +5 位作者 吴思颖 简远熙 杨帆 张文卿 王丽娟 王家平 《山东医药》 CAS 2020年第32期9-12,共4页
目的对比观察经颈动脉、尾静脉骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗慢性肾脏病大鼠的效果。方法选取90只大鼠建立慢性肾脏病模型,分为颈动脉组、尾静脉组、生理盐水组各30只,另选30只健康大鼠作为正常组。颈动脉组、尾静脉组分别采用颈动脉... 目的对比观察经颈动脉、尾静脉骨髓间充质干细胞(BMSC)移植治疗慢性肾脏病大鼠的效果。方法选取90只大鼠建立慢性肾脏病模型,分为颈动脉组、尾静脉组、生理盐水组各30只,另选30只健康大鼠作为正常组。颈动脉组、尾静脉组分别采用颈动脉插管输注、尾静脉注射的方法进行BMSC移植;生理盐水组经颈动脉插管输注生理盐水;正常组不做特殊处理。术后观察大鼠的生命体征、活动状态及毛发颜色。分别于术后1、7、14 d检测血肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)、血清白蛋白、24 h尿蛋白。术后15 d处死各组大鼠并取肾组织标本,观察肾组织病理变化。结果各组大鼠均存活。颈动脉组与尾静脉组食欲较生理盐水组旺盛,体质量增长较快,毛发较光滑;生理盐水组明显食欲不佳,毛发毛糙,体质量增长较慢。颈动脉组、尾静脉组术后14 d血BUN、Cr、24 h尿蛋白量低于生理盐水组,血清白蛋白水平高于生理盐水组;颈动脉组术后14 d血BUN、Cr、24 h尿蛋白量低于尾静脉组,血清白蛋白水平高于尾静脉组(P均<0.05)。颈动脉组和尾静脉组肾组织病理变化较生理盐水组减轻,其中颈动脉组肾小球、肾小管病变较生理盐水组明显改善,尾静脉组较生理盐水组肾小球无明显黏连,肾小球毛细血管襻扩张。结论经颈动脉、尾静脉BMSC移植治疗慢性肾脏病大鼠均有积极效果,且经颈动脉BMSC移植肾功能改善情况更好。 展开更多
关键词 慢性肾脏病 骨髓间充质干细胞 干细胞移植 颈动脉 尾静脉 肾功能
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骨髓间充质干细胞关节腔注射治疗兔软骨缺损的最适浓度
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作者 陈钢泓 曾超明 +3 位作者 陈梓铭 廖俊星 马元琛 郑秋坚 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2020年第7期996-1001,共6页
背景:骨髓间充质干细胞现已广泛用于动物实验及临床研究中,各研究所用的细胞浓度、治疗次数及研究结果存在明显差异,缺乏最适细胞浓度的标准。目的:探讨骨髓间充质干细胞关节腔内注射治疗兔软骨缺损的最适细胞浓度。方法:取6月龄雄性新... 背景:骨髓间充质干细胞现已广泛用于动物实验及临床研究中,各研究所用的细胞浓度、治疗次数及研究结果存在明显差异,缺乏最适细胞浓度的标准。目的:探讨骨髓间充质干细胞关节腔内注射治疗兔软骨缺损的最适细胞浓度。方法:取6月龄雄性新西兰大白兔30只,按骨髓间充质干细胞关节腔注射浓度随机分为对照组、1×10^8 L^-1,1×10^9 L^-1,1×10^10 L^-1,1×10^11 L^-1组。在大白兔双侧股骨滑车建立直径3.0 mm、深度2.0 mm的软骨缺损模型。建模成功1周后,对照组双侧膝关节腔内注射1 mL生理盐水,其他4组分别注射1 mL细胞浓度为1×10^8 L^-1,1×10^9 L^-1,1×10^10 L^-1,1×10^11 L^-1的骨髓间充质干细胞悬液。注射后6周及12周,大体观察股骨滑车标本,行苏木精-伊红染色、番红-O-固绿染色、Ⅰ型及Ⅱ型胶原免疫组化染色,评估软骨组织修复效果。结果与结论:对照组术后缺损区域明显,软骨组织无明显再生;1×10^8 L^-1,1×10^9 L^-1,1×10^10 L^-1组软骨缺损区域可见软骨组织再生,且修复效果随注射间充质干细胞浓度增加而增强。1×10^11 L^-1组软骨修复效果与1×10^10 L^-1组相似(P>0.05)。结果表明,1×10^10 L^-1是骨髓间充质干细胞关节腔内注射治疗软骨缺损的最佳细胞浓度,浓度过高时并不能增强其修复效果。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 软骨缺损 细胞浓度 细胞移植 关节注射
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转染血管内皮细胞生长因子基因的同种异体骨髓间充质干细胞移植大鼠缺血心肌的实验研究
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作者 关思虞 曾秋棠 +1 位作者 陈波 郎明健 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期305-309,共5页
目的腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因(AdVEGF165)转染同种异体大鼠骨髓间充质干细胞(BM-SCs),移植到大鼠缺血心肌后,观察其对心功能的影响。方法体外培养同种异体大鼠BMSCs,用AdVEGF165转染同种异体大鼠BMSCs,采用ELISA法检测血管... 目的腺病毒介导血管内皮细胞生长因子基因(AdVEGF165)转染同种异体大鼠骨髓间充质干细胞(BM-SCs),移植到大鼠缺血心肌后,观察其对心功能的影响。方法体外培养同种异体大鼠BMSCs,用AdVEGF165转染同种异体大鼠BMSCs,采用ELISA法检测血管内皮细胞生长因子(VEGF)的表达和分泌。结扎Wistar大鼠冠状动脉前降支,4周后随机将其分为4组,组Ⅰ:移植转染后的BMSCs;组Ⅱ:移植单纯BMSCs;组Ⅲ:心肌内注射AdVEGF165(基因治疗);组Ⅳ:心肌内注射DMEM(对照组)。4周后通过超声检查观察心脏射血分数(EF)变化,评价其对心功能的影响;免疫组织化学观察移植的BMSCs在局部存活、分化情况。结果ELISA检测提示:转染后BMSCs的培养上清液中有大量VEGF表达,较未转染组差异有极显著性意义(P<0.01)。超声检查结果提示:组ⅠEF改善幅度较组Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ明显(均P<0.01)。免疫组织化学检测提示:组Ⅰ、Ⅱ中大部分移植细胞能够在移植处存活并转化为心肌细胞。结论转染AdVEGF165的同种异体BMSCs能有效修复大鼠心肌,并能改善其心功能。 展开更多
关键词 腺病毒载体 血管内皮生长因子 基因表达 骨髓间充质干细胞 细胞移植
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骨髓间充质干细胞移植在心脏再生医学中的分子机制
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作者 黄裕立 麦炜颐 《国际内科学杂志》 CAS 2008年第9期531-535,共5页
骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗心血管疾病已经在不少基础研究和临床试验中证实了其有效性。但是,其改善心功能的机制仍有较多争议,该作用除与BMSCs向心肌样细胞分化有关外,还可能与其促血管生成、抑制心肌细胞凋亡、改善心脏重构、... 骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植治疗心血管疾病已经在不少基础研究和临床试验中证实了其有效性。但是,其改善心功能的机制仍有较多争议,该作用除与BMSCs向心肌样细胞分化有关外,还可能与其促血管生成、抑制心肌细胞凋亡、改善心脏重构、分泌大量有益细胞因子有关。本综述将重点总结目前关于BMSCs在心脏再生医学中应用的相关分子机制的假说,并探讨对各种假说的挑战。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 心脏再生医学 细胞移植 分子机制
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多能成体祖细胞培养条件促进人脂肪干细胞的视网膜神经保护功能
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作者 娄慧 徐国旭 《中华细胞与干细胞杂志（电子版）》 2014年第1期21-28,共8页
目的检测多能成体祖细胞(MAPC)的培养条件对猴骨髓间充质细胞(BMMSCs)和人脂肪干细胞(hADSCs)生长的影响,旨在获得更适合治疗视网膜变性疾病的供体细胞。方法通过细胞形态观察、MTT实验、克隆形成率、PCR检测、以及成脂、成骨、成软骨... 目的检测多能成体祖细胞(MAPC)的培养条件对猴骨髓间充质细胞(BMMSCs)和人脂肪干细胞(hADSCs)生长的影响,旨在获得更适合治疗视网膜变性疾病的供体细胞。方法通过细胞形态观察、MTT实验、克隆形成率、PCR检测、以及成脂、成骨、成软骨分化潜能检测等,研究MAPC培养条件下猴BMMSCs和hADSCs的特征,并用DMEM/LG和MAPC培养条件培养的hADSCs进行RCS大鼠视网膜下腔移植,通过视网膜电图(ERG)和TUNEL检测,判断细胞移植治疗对视功能及视网膜细胞凋亡的影响。结果与常规培养基相比,MAPC培养条件能促进猴BMMSCs增殖,细胞变小,但传2代后,细胞变得宽大扁平,出现衰老征象;然而,MAPC培养条件下的hADSCs细胞增殖能力及克隆形成率均增强,形成的克隆较大可稳定传10代以上,且具有成脂、成骨、成软骨的多向分化潜能,细胞表面标记物及细胞因子出现差异表达:CD140b、CD90、CD47、HGF和PEDF显著上调,CD73、CD105和IL-6显著下调。与对照组相比,移植DMEM/LG和MAPC培养条件培养的hADSCs(P4)3周后,RCS大鼠的B波波幅明显升高,外核层细胞凋亡明显减少。结论 MAPC培养条件培养的hADSCs显示出更好的视网膜神经保护作用,适合用于治疗视网膜退行性疾病。 展开更多
关键词 全能干细胞 骨髓间充质干细胞 视网膜变性 细胞移植
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骨髓间充质干细胞对缺氧缺血性脑损伤新生大鼠学习记忆功能的重建作用 被引量：17
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作者 刘洋 张萱 +5 位作者 代英 舒畅 瞿平 刘友学 杨莉 李廷玉 《中华儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期648-653,共6页
目的研究经不同处理的大鼠骨髓间充质干细胞（rMSCs）对新生鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后学习记忆功能重建的作用，探讨rMSCs移植优化方案与MSCs的作用机制。方法全骨髓贴壁筛选法体外扩增rMSCs，Rice法构建新生Wistar大鼠HIBD模型，... 目的研究经不同处理的大鼠骨髓间充质干细胞（rMSCs）对新生鼠缺氧缺血性脑损伤（HIBD）后学习记忆功能重建的作用，探讨rMSCs移植优化方案与MSCs的作用机制。方法全骨髓贴壁筛选法体外扩增rMSCs，Rice法构建新生Wistar大鼠HIBD模型，造模后5d经侧脑室植入不同处理条件的rMSCs（1～2×10^3／只），将HIBD新生鼠分为3组：①PBS对照组，②rMSCs组，③视黄酸（retinoicacid，RA）预诱导组。移植后14、42d取脑组织行免疫组化检测植入的rMSCs的存活、迁移、分化及表达神经细胞标志蛋白的情况，鼠龄7周做穿梭箱实验检测各组模型鼠学习记忆能力。移植后14d，采用神经营养素与受体基因芯片检测各组损伤侧脑组织差异基因表达，用Real—time PCR对差异显著的部分基因进行验证。结果（1）在rMSCs移植后14、42d，RA预诱导组分别检测到少量植入细胞表达神经元中间丝蛋白重链（NF—H）和神经胶质纤维酸性蛋白（GFAP）；（2）穿梭箱实验结果显示rMSCs组（74．60±29．21）次与PBS对照组（94．10±38．18）次比较学习记忆功能有较好恢复，但差异无统计学意义，而RA预诱导组（47．90±21．13）次与PBS对照组和rMSCs组比较学习记忆功能明显恢复（P〈0．05）；（3）基因芯片结果显示，与正常对照组比较，PBS对照组IL-6（高达11．4倍）、肿瘤坏死因子超家族成员之一Fas、脑源性神经营养因子（BDNF）表达明显上调；与PBS对照组比较，rMSCs组三种因子的表达同时降到较低水平，而RA预诱导组的IL-6和Fas下调后水平均高于rMSCs组，BDNF仍保持在PBS对照组水平。Real—time PCR结果显示，IL-6和Fas变化与基因芯片结果基本一致，而RA预诱导组BDNF水平有明显下调，但下调后水平仍略高于rMSCs组。结论在促进HIBD新生鼠学习记忆功能重建中，rMSCs植入有一定作用，RA预诱导的rMSCs植入有明显作用，它们� 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 缺氧缺血 脑 细胞移植 基因芯片
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大鼠骨髓间充质干细胞视网膜下移植观察 被引量：11
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作者 张杰 单清 +4 位作者 马萍 姜严明 陈鹏 钱焕文 裴雪涛 《眼科新进展》 CAS 2003年第2期82-85,共4页
目的　鉴定骨髓间充质干细胞 ( mesenchymal stem cells,MSCs)在体外不诱导的条件下视网膜下移植后的定位。方法　体外培养雄性大鼠 MSCs,直接作为细胞供体视网膜下移植于成年雌性大鼠视网膜下 ,4周后将动物处死 ,取眼球做石蜡切片 ,用 ... 目的　鉴定骨髓间充质干细胞 ( mesenchymal stem cells,MSCs)在体外不诱导的条件下视网膜下移植后的定位。方法　体外培养雄性大鼠 MSCs,直接作为细胞供体视网膜下移植于成年雌性大鼠视网膜下 ,4周后将动物处死 ,取眼球做石蜡切片 ,用 Y染色体鉴定 ;为做进一步验证 ,将 MSCs用重组腺相关病毒 AAV- gfp感染后移植 ,分别于 4、8周取动物眼球作冰冻切片 ,于荧光显微镜下做绿色荧光蛋白 ( green fluorescence protein,GFP)表达观察。结果　培养的 MSCs集落生长迅速 ,均一性好 ;Y染色体原位杂交鉴定表明来源于 MSCs的阳性细胞融合入了原来的视网膜结构 ,在光学显微镜下可分布于视锥、视杆细胞层、双极细胞层及节细胞层 ;在荧光显微镜下可见 GFP标记的阳性细胞存在 ,分布于视网膜色素上皮层、视锥、视杆细胞层、双极细胞层及节细胞层 ,细胞形态与结构同周围的视网膜相似 ;2种标记方法检测到的视网膜结构完整 ,未见到玫瑰花结样结构。结论　MSCs可在视网膜下移植后 4周与原视网膜结构相融合 ,2种方法检测到的阳性细胞分布于视网膜色素上皮层、视细胞层、双极细胞层及节细胞层。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 视网膜 Y染色体 绿色荧光蛋白 细胞移植
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